鸡蛋和鸡肉中氟苯尼考检测方案(液相色谱柱)

DiKMAA reliable partner for your lab 鸡肉和鸡蛋中甲硝唑和氯霉素类药物残留的检测解决方案SPE-UPLC-MS/MS法 氯霉素是一种抑菌性广谱抗生素，常被用于畜禽动物及水产品的疾病治疗和预防；甲硝唑为硝基咪唑类药物，常被加入动物饲料中以驱除动物体内的寄生虫，因而造成动物源性食品中的药物残留。我国农业部第235号公告中已将甲硝唑和氯霉素列为不得检出药物，并规定了其他药物的残留限量。 目前检测甲硝唑、氯霉素类药物方法很多，但由于甲硝唑、氟苯尼考胺和氯霉素的性质差异比较大，同时检测的方法很少。迪马科技在参考各种标准和文献基础上，建立了 SPE-UPLC-MS/MS 法测定鸡肉和鸡蛋中甲硝唑和氯霉素类兽药残留，采用90%乙腈水提取， ProElutDPC-2固相萃取专用柱净化样品，收集流出液， Leapsil C18色谱柱分离检测。方法特点如下： 1)前处理步骤少，提取液直接通过净化柱接收流出液即可； 2)有机溶剂消耗量小，前处理过程中也无需使用酸碱试剂； 3)使用ProElut DPC-2净化柱能够有效的除掉杂质，净化效果优异； 4)分析条件简单，可以一个流动相正负离子同时检测，大大提高工作效率，减少实验成本；5)方法定量限是0.5 ug/kg. 以下为详细解决方案，，1敬请参考! 鸡肉和鸡蛋中甲硝唑和氯霉素类药物残留的检测SPE-UPLC-MS/MS法 1、适用范围 本方案适用于鸡肉和鸡蛋中甲硝唑、氯霉素、甲砜霉素、氟苯尼考和氟苯尼考胺的检测。 2、标准品配制 (1)单标储备液1.0 pg/mL：准确称取适量各标准品，用甲醇配制成 1.0 pg/mL 的单标储备液； (2)混标储备液200 pg/L：分别吸取各单标储备液，用乙腈配制成200 ug/L 混标储备液； (3) 混标中间液 20 pg/L：准确吸取适量混标储备液 200 ug/L， 用乙腈配制成 20 ug/L的混标中间液。 北京：400-608-7719上海：021-61263966天津：400-633-6606广州：020-85593520成都：028-86612625沈阳：024-22943513济南：0531-83681355石家庄：0311-66686220重庆：023-62568657青岛：131.5685.9195西安：158.0293.5126哈尔滨：180.4537.3042 3、提取 (1)取5.0g样品，加加20 mL 90%乙乙水溶液，振荡5 min，超声5 min， 6000 rpm离心2 min，取出上清液； (2)向上清液中加入10 mL 乙腈饱和正己烷溶液，振荡2 min， 6000 rpm 离心2min， 取下层清液约10mL，待净化。(鸡蛋样品加入正己烷后离心后可能会有果冻层，可以先将澄清的正己烷层吸去，然后混匀再离心) 4、净化—— ProElut DPC-2 12 mL (Cat#： 65940) 小柱不需要活化，取 10 mL 待净化液加入柱中，接收8mL流出液；将接收的充出液在40℃水浴条件下氮吹至1mL以下即可，用水定容至1mL， 过微孔滤膜(Nylon)上机分析。 注：同方法制备基质匹配标准溶液。 5、分析条件 UPLC 条件 色谱柱： Leapsil C18， 100x2.1 mm， 2.7 pm (Cat#：86005) 流 速：0.3mL/min 进样量：10pL 柱温：40℃ 流动相： A： 10 mmol/L乙酸铵 B：乙腈 梯度设置 时间/Min. 0 2 6 7 7.5 13 A(%) 90 90 25 10 90 90 B(%) 10 10 75 90 10 10 质谱条件 扫描方式：正/负离子扫描 电离模式： ESI检测方式：多反应监测电喷雾电压：5500V/-4500V雾化气压力：50 psi辅助气压力：50 psi气帘气压力：20 psi离子源温度：500℃ 北京：400-608-7719上海：021-61263966天津：400-633-6606广州：020-85593520成都：028-86612625沈阳：024-22943513济南：0531-83681355石家庄：0311-66686220重庆：023-62568657青岛：131.5685.9195西安：158.0293.5126哈尔滨：180.4537.3042 定性离子对、定量离子对、碰撞气能量及去簇电压见下表 药物名称 定性离子对(m/z)(母离子/子离子) 定量离子对 (m/z) (母离子/子离子) 碰撞气能量/eV 去簇电压/V 甲硝唑 172.0/127.8 172.0/127.8 20 50 172.0/81.9 32 氟苯尼考胺 247.9/230.0 247.9/230.0 15 72 247.9/130.1 28 氯霉素 321.0/151.8 321.0/151.8 -24 -80 321.0/256.9 -15 甲砜霉素 354.0/184.8 354.0/184.8 -26 -80 354.0/289.8 -16 氟苯尼考 355.8/335.9 355.8/335.9 -13 -70 6、添加回收结果 鸡蛋中甲硝唑和氯霉素类检测的添加回收结果(%) 添加 水目 平 标物 添加水平0.5 pg/kg 添加水平 5.0 pg/kg 加标量：中间液混标 20 pg/L， 加125pL 加标量：中间液混标200 pg/L，加125uL 基质标校准 溶剂标校准 基质标校准 溶剂标校准 甲硝唑 107.0 47.0 87.8 76.6 氟苯尼考胺 99.4 132.0 100.0 91.7 氯霉素 82.1 94.0 125.0 92.4 甲砜霉素 109.0 100.0 90.2 88.7 氟苯尼考 95.2 130.0 119.0 105.0 鸡肉中甲硝唑和氯霉素类检测的添加回收结果(%) 添加 目 水平 标物 添加水平0.5 ug/kg 添加水平 5.0 pg/kg 加标量：中间液混标20ug/L， 加125L 加标示：中间液混标200 ug/L， 加 125 uL 基质标校准 溶剂标校准 基质标校准 溶剂标校准 甲硝唑 87.2 63.0 92.7 76.6 氟苯尼考胺 101.0 71.0 79.4 91.7 氯霉素 102.0 116.0 105.0 92.4 甲砜霉素 100.0 120.0 90.7 88.7 氟苯尼考 100.0 148.0 96.1 105.0 鸡蛋中甲硝唑和氯霉素类5种兽药检测基质匹配标准品 1.0 ug/L 的 XIC图(从左到右，从上到下依次是：甲硝唑、氟苯尼考胺、氯霉素、甲砜霉素和氟苯尼考) 添加水平为 0.5 ug/kg 鸡蛋中甲硝唑和氯霉素类5种兽药检测的 XIC 图 (从左到右，从上到下依次是：日甲硝唑、氟苯尼考胺、氯霉素、甲砜霉素和氟苯尼考) 北京：400-608-7719 上海：021-61263966 天津：400-633-6606 广州：020-85593520 成都：028-86612625沈阳：024-22943513济南：0531-83681355石家庄：0311-66686220重庆：023-62568657青岛：131.5685.9195西安：158.0293.5126哈尔滨：180.4537.3042 鸡蛋中甲硝唑和氯霉素类5种兽药检测基质匹配标准品10.0 pg/L 的XIC图(从左到右，从上到下依次是：甲硝唑、氟苯尼考胺、氯霉素、甲砜霉素和氟苯尼考) Sample Name："2.q-1" Sarple ID." File："20190606-fangfa10.wiff" Sample Name："2.q-1"SampleID："File： "20190606-fangfa10.wiff" Sample Name："2.q-1” Sample ID. " File："20190606-fangfa10.wiff" 添加水平为 5.0 ug/kg 鸡蛋中甲硝唑和氯霉素类5种兽药检测的 XIC 图 (从左到右，从上到下依次是：甲硝唑、氟苯尼考胺、氯霉素、甲砜霉素和氟苯尼考) 北京：400-608-7719 上海：021-61263966 天津：400-633-6606 广州：020-85593520 成都：028-86612625沈阳：024-22943513济南：0531-83681355石家庄：0311-66686220重庆：023-62568657 青岛：131.5685.9195 西安：158.0293.5126 哈尔滨：180.4537.3042 路 栏 1.0 20 30 4.0 1.0 20 30 40 506.0 7.0 809.0 10.011.0 120 ime mn Time min 鸡肉中甲硝唑和氯霉素类5种兽药检测基质匹配标准品 1.0 pg/L 的XIC 图(从左到右，从上到下依次是：甲硝唑、氟苯尼考胺、氯霉素、甲砜霉素和氟苯尼考) 添加水平为 0.5 ug/kg 鸡肉中甲硝唑和氯霉素类5种兽药检测的 XIC 图 (从左到右，从上到下依次是：：甲硝唑、氟苯尼考胺、氯霉素、甲砜霉素和氟苯尼考) 北京：400-608-7719 上海：021-61263966 天津：400-633-6606 广州：020-85593520 成都：028-86612625沈阳：024-22943513济南：0531-83681355石家庄：0311-66686220重庆：023-62568657青岛：131.5685.9195西安：158.0293.5126哈尔滨：180.4537.3042 鸡肉中甲硝唑和氯霉素类5种兽药检测基质匹配标准品 10.0 pg/L的XIC图(从左到右，从上到下依次是：甲硝唑、氟苯尼考胺、氯霉素、甲砜霉素和氟苯尼考) 添加水平为 5.0 pg/kg 鸡肉中甲硝唑和氯霉素类5种兽药检测的XIC图 (从左到右，从上到下依次是：甲硝唑、氟苯尼考胺、氯霉素、甲砜霉素和氟苯尼考) 北京：400-608-7719上海：021-61263966天津：400-633-6606广州：020-85593520成都：028-86612625沈阳：024-22943513济南：0531-83681355石家庄：0311-66686220重庆：023-62568657青岛：131.5685.9195西安：158.0293.5126哈尔滨：180.4537.3042 鸡肉和鸡蛋中甲硝唑和氯霉素类药物残留的检测相关产品信息： 货号 名称 规格 样品前处理 65940 食品中兽药检测专用柱 ProElut DPC-2 12 mL， 20/pk 244358 12管防交叉污染染空 SPE 萃取装置 12 位 4806 考克(控制流量) 15/pk 99011 真空/正压两用泵，无油 1/pk 99013 抽滤瓶套装 (包括硅橡胶管2米，2L抽滤瓶及橡胶塞) 1/pk 37177 ProMax 针头式过滤器 Nylon 13 mm， 0.22 um 100/pk 标准品 50P-C15201000 甲硝唑[443-48-1] 250 mg 50D-OP079-10 氟苯尼考胺[76639-93-5] 10 mg 50P-C11120000 氯霉素[56-75-7] 250 mg 50D-223121 氟苯尼考[76639-94-6] 250 mg， 98.5% 50P-C17457000 甲砜霉素[15318-45-3] 100 mg 色谱柱及保护柱 86005 UHPLC/HPLC 兼容色谱柱 Leapsil C18 100x2.1 mm， 2.7 um HPLC溶剂•缓冲盐•离子对试剂 50101 乙腈 HPLC级 4L 50102 甲醇 HPLC级 4L 50115 正己烷 HPLC级 4L 50138 乙酸铵 HPLC级 100 g 通用色谱产品 52401B 瓶架/蓝色(现货) 50 孔 52401A 瓶架/白色(现货) 50 孔 5321 螺纹口进样瓶，透明带刻度和书写 2 mL， 100/pk 5324 样品瓶盖/含垫(白色PTFE/红色橡胶隔垫) 100/pk H80465 HPLC 进样针 25 uL         氯霉素是一种抑菌性广谱抗生素，常被用于畜禽动物及水产品的疾病治疗和预防；甲硝唑为硝基咪唑类药物，常被加入动物饲料中以驱除动物体内的寄生虫，因而造成动物源性食品中的药物残留。我国农业部第235号公告中已将甲硝唑和氯霉素列为不得检出药物，并规定了其他药物的残留限量。       目前检测甲硝唑、氯霉素类药物方法很多，但由于甲硝唑、氟苯尼考胺和氯霉素的性质差异比较大，同时检测的方法很少。迪马科技在参考各种标准和文献基础上，建立了SPE-UPLC -MS/MS法测定鸡肉和鸡蛋中甲硝唑和氯霉素类兽药残留，采用90% 乙腈水提取，ProElut DPC-2固相萃取专用柱净化样品，收集流出液，Leapsil C18色谱柱分离检测。方法特点如下：1）前处理步骤少，提取液直接通过净化柱接收流出液即可；2）有机溶剂消耗量小，前处理过程中也无需使用酸碱试剂；3）使用ProElut DPC-2净化柱能够有效的除掉杂质，净化效果优异；4）分析条件简单，可以一个流动相正负离子同时检测，大大提高工作效率，减少实验成本；5）方法定量限是0.5 μg/kg。以下为详细解决方案，敬请参考！鸡肉和鸡蛋中甲硝唑和氯霉素类药物残留的检测SPE-UPLC-MS/MS法1、适用范围本方案适用于鸡肉和鸡蛋中甲硝唑、氯霉素、甲砜霉素、氟苯尼考和氟苯尼考胺的检测。2、标准品配制(1) 单标储备液1.0 μg/mL：准确称取适量各标准品，用甲醇配制成1.0 μg/mL的单标储备液；(2) 混标储备液200 μg/L：分别吸取各单标储备液，用乙腈配制成200 μg/L混标储备液；(3) 混标中间液20 μg/L：准确吸取适量混标储备液200 μg/L，用乙腈配制成20 μg/L的混标中间液。3、提取(1) 取5.0 g样品，加入20 mL 90% 乙腈水溶液，振荡5 min，超声5 min，6000 rpm离心2 min，取出上清液；(2) 向上清液中加入10 mL乙腈饱和正己烷溶液，振荡2 min，6000 rpm离心2 min，取下层清液约10 mL，待净化。(鸡蛋样品加入正己烷后离心后可能会有果冻层，可以先将澄清的正己烷层吸去，然后混匀再离心)4、净化—— ProElut DPC-2 12 mL (Cat#: 65940)小柱不需要活化，取10 mL待净化液加入柱中，接收8 mL流出液；将接收的流出液在40 ℃水浴条件下氮吹至1 mL以下即可，用水定容至1 mL，过微孔滤膜(Nylon)上机分析。注：同方法制备基质匹配标准溶液。5、分析条件UPLC 条件色谱柱：Leapsil C18, 100 x 2.1 mm, 2.7 μm (Cat#：86005)流  速：0.3 mL/min   进样量：10 μL  柱  温：40 ℃流动相：A: 10 mmol/L乙酸铵       B: 乙腈梯度设置时间/Min.02677.513A (%)909025109090B (%)101075901010质谱条件电离模式：ESI                                    扫描方式：正/负离子扫描检测方式：                                         多反应监测 电喷雾电压：5500 V/-4500 V雾化气压力：50 psi                            辅助气压力：50 psi气帘气压力：20 psi                            离子源温度：500 ℃定性离子对、定量离子对、碰撞气能量及去簇电压见下表药物名称定性离子对(m/z)(母离子/子离子)定量离子对(m/z)(母离子/子离子)碰撞气能量/eV去簇电压/V甲硝唑172.0/127.8172.0/127.82050172.0/81.932氟苯尼考胺247.9/230.0247.9/230.01572247.9/130.128氯霉素321.0/151.8321.0/151.8-24-80321.0/256.9-15甲砜霉素354.0/184.8354.0/184.8-26-80354.0/289.8-16氟苯尼考355.8/335.9355.8/335.9-13-706、添加回收结果鸡蛋中甲硝唑和氯霉素类检测的添加回收结果（%）鸡肉中甲硝唑和氯霉素类检测的添加回收结果（%）鸡蛋中甲硝唑和氯霉素类5 种兽药检测基质匹配标准品1.0 μg/L 的XIC 图（从左到右，从上到下依次是：甲硝唑、氟苯尼考胺、氯霉素、甲砜霉素和氟苯尼考）添加水平为0.5 μg/kg鸡蛋中甲硝唑和氯霉素类5种兽药检测的XIC图（从左到右，从上到下依次是：甲硝唑、氟苯尼考胺、氯霉素、甲砜霉素和氟苯尼考）鸡蛋中甲硝唑和氯霉素类5种兽药检测基质匹配标准品10.0 μg/L的XIC图（从左到右，从上到下依次是：甲硝唑、氟苯尼考胺、氯霉素、甲砜霉素和氟苯尼考）添加水平为5.0 μg/kg鸡蛋中甲硝唑和氯霉素类5种兽药检测的XIC图（从左到右，从上到下依次是：甲硝唑、氟苯尼考胺、氯霉素、甲砜霉素和氟苯尼考）鸡肉中甲硝唑和氯霉素类5种兽药检测基质匹配标准品1.0 μg/L的XIC图（从左到右，从上到下依次是：甲硝唑、氟苯尼考胺、氯霉素、甲砜霉素和氟苯尼考）添加水平为0.5 μg/kg鸡肉中甲硝唑和氯霉素类5种兽药检测的XIC图（从左到右，从上到下依次是：甲硝唑、氟苯尼考胺、氯霉素、甲砜霉素和氟苯尼考）鸡肉中甲硝唑和氯霉素类5种兽药检测基质匹配标准品10.0 μg/L的XIC图（从左到右，从上到下依次是：甲硝唑、氟苯尼考胺、氯霉素、甲砜霉素和氟苯尼考）添加水平为5.0 μg/kg鸡肉中甲硝唑和氯霉素类5种兽药检测的XIC图（从左到右，从上到下依次是：甲硝唑、氟苯尼考胺、氯霉素、甲砜霉素和氟苯尼考）鸡肉和鸡蛋中甲硝唑和氯霉素类药物残留的检测相关产品信息：货号名称规格样品前处理65940食品中兽药检测专用柱 ProElut DPC-212 mL, 20/pk24435812管防交叉污染真空SPE萃取装置12位4806考克(控制流量)15/pk99011真空/正压两用泵，无油1/pk99013抽滤瓶套装(包括硅橡胶管2米, 2 L抽滤瓶及橡胶塞)1/pk37177ProMax针头式过滤器Nylon13 mm, 0.22 μm 100/pk标准品50P-C15201000甲硝唑[443-48-1]250 mg50D-OP079-10氟苯尼考胺[76639-93-5]10 mg50P-C11120000氯霉素[56-75-7]250 mg50D-223121氟苯尼考[76639-94-6]250 mg, 98.5%50P-C17457000甲砜霉素[15318-45-3]100 mg色谱柱及保护柱86005UHPLC/HPLC兼容色谱柱 Leapsil C18100 x 2.1 mm, 2.7 μmHPLC溶剂Ÿ缓冲盐Ÿ离子对试剂50101乙腈 HPLC级4 L50102甲醇 HPLC级4 L50115正己烷  HPLC级4 L50138乙酸铵 HPLC级100 g通用色谱产品52401B瓶架/蓝色（现货）50孔52401A瓶架/白色（现货）50孔5321螺纹口进样瓶, 透明带刻度和书写2 mL, 100/pk5324样品瓶盖/含垫 (白色PTFE/红色橡胶隔垫)100/pkH80465HPLC 进样针25 μL