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【干货分享】昊诺斯第九期“组织研磨和样品处理分享、讨论”这一期我们为大家提供的案例是“石榴皮研磨提取RNA”：实验：石榴皮研磨提取RNA实验地点：武汉某生物公司试验样品：石榴皮样品 1、将石榴皮剪成小碎块冻存，实验时取出放入圆底离心管，单管放入体积不超过离心管体积的1/3；2、在离心管中加入硬质不锈钢研磨珠，盖好管盖，与适配器一起放入液氮然后取出；3、将取出后的适配器安装在TL2010S中通量组织研磨仪上，参数设置为一定转速，研磨一定时间。在昊诺斯销售工程师对以上案例简单讲解之后，用户们在“昊诺斯鼎昊源组织研磨分享”群内进行了热烈的分享、讨论： 用户：石榴皮含有果胶吧？ 昊诺斯：应该含有少量果胶，其实石榴皮也算是植物样品中的一类。用户：果胶纤维素的存在对检测过程有影响吗？ 昊诺斯：研磨的方法与研磨叶片相同。用户：我看看。 昊诺斯：应该不会有影响，现在的RNA提取试剂还是挺成熟的。用户：时间不一样吧。 昊诺斯：您是说研磨时间？用户：嗯，知道了，还有提取试剂存在。 昊诺斯：石榴皮冻过液氮以后还是很好研磨的。用户：前面的负八十有必要吗？后面直接液氮了？ 昊诺斯：前面的-80是保存样品。用户：前面的负八十有必要吗？后面直接液氮了？我也有同样的疑问。用户：负八十是为了降低空气体积吧，免得液氮时爆开。 昊诺斯：这个使用的客户也是服务公司，样品都是别的客户提供的。 昊诺斯：也有这方面的原因。用户：液氮的温度是多少度？用户：我想问管和钢珠需要depc水处理吗？ 昊诺斯：负一百九十多。用户：这个是必须的吧，196。 昊诺斯：如果提取的是RNA，是必须处理的。用户：那我想问问有没有替代离心管的适配器？我一用就裂管。用户：换管子材料吧，能禁得起冷冻的。用户：你们用哪一种牌子的？ 昊诺斯：我们的经验是选用圆底2ml离心管，减少液氮冷冻时间，缩短组织研磨仪研磨时间，或者换个牌子的离心管。用户：我都试过了，就在组织研磨仪研磨后发现裂了，所以想问问你们用什么牌子。 昊诺斯：哪位老师用的管效果还可以，可以介绍一下。用户：我们用的一直都不错，也出现过裂管。 昊诺斯：据用户说这款的不错。昊诺斯：还有eppendorf的。用户：进口的？无须灭酶了？用户：然后就调低组织研磨仪转速1000吧，延长打样时间。 昊诺斯：进口的，第一个是Thermo的。用户：其实我个人觉得RNA也没有想象的那么恐怖。用户：哦哦，谢啦。用户：三无的管子。用户：裂管是因为温差变化太大么？用户：就是不清楚。用户：有个疑问啊，DNA和RNA能实现分离吗？用户：钢珠用酒精泡泡，提的RNA就OK。用户：组织研磨仪能否控温？ 昊诺斯：现在好像有种提取液可以实现。用户：管子裂是因为液氮下塑料变得脆了，然后高速钢珠一冲撞就裂了。用户：为什么要分离呢？样品很珍贵？用户：您的意思是先提取DNA，然后继续利用提取完的原材料来提取RNA？用户：塑料材质达不到低温保护。用户：提完分别用对应的酶处理这样技能保证量也能保证质。用户：不是，我的意思是两者有没有分离干扰？用户：用trizol说明书上说是可以DNA和RNA分离。 昊诺斯：应该是没有，之前我问过一个客户，用组织研磨仪研磨一次，用特定的提取液，可以同时提取DNA和RNA。用户：同一样品可以同时提取。用户：提 RNA不如DNa省事。用户：我们打样裂过后采取的措施第一减低组织研磨仪转速，打样后然后再冻再打，延长打样时间；二把样品分装两管打样后加上TRIZON再合并。用户：嗯，看来提取剂的选择性已经非常高了。 昊诺斯：您可以先降低下组织研磨仪研磨速度，比如1900转或者1800转，试下。用户：我用的是1700。用户：速度关系不大，是温度导致的。用户：那如何是好？用户：只能换管子材料。 昊诺斯：嗯嗯，就像吕老师说的，可以研磨比如30s，取出后再冻液氮，然后再磨，少量多次。用户：国外进口的不知道现在怎样，之前也碎过好几个，把老板心疼坏了。 昊诺斯：进口的应该效果会好一点，毕竟国内的良莠不齐。用户：当时还不是研磨，只是离心。用户：有个疑问：离心管有金属材料的么？用户：感觉应该有，但没见过。 昊诺斯：我们有5ml不锈钢的研磨管。用户：容积大的我们也有，但是1.5的没见过。用户：304材质的可以，耐低温和高温。用户：不锈钢的成本太高吧，会不会引进交叉污染？用户：但是不锈钢的可以重复使用呀，灭菌即可。 昊诺斯：清洗消毒干净，应该不会交叉污染。用户：304的很耐操的。昊诺斯：304很耐腐蚀。 昊诺斯：盖是什么材质的？用户：标配是聚乙烯，可选配硅橡胶。用户：应该挺成熟了。用户：现在可以适配上这个机器吗？ 昊诺斯：看介绍和2ml离心管的尺寸一样，应该可以。 访问http://www.herosbio.com/pro.asp?thebigclassid=14&bpro_id=93可以了解先关产品信息！扫码关注昊诺斯微信公众号

各项目承担单位、项目首席科学家：　　根据《国家重点基础研究发展计划专项经费管理办法》(财教[2006]159号)以及《关于调整国家科技计划和公益性行业科研专项经费管理办法若干规定的通知》(财教[2011]434号，以下简称《通知》)的相关规定，为进一步规范和加强国家科技计划项目课题预算管理，现将本次973计划预算书编报相关工作安排如下：　　一、编报范围　　科技部、财政部已批复预算的2011年项目及2012年第一批启动项目(项目清单见附件) 其中，已签订预算书的2011年项目需根据《通知》要求，按照修订后的“十二五”立项项目的预算科目设置对原预算科目及金额进行调整，并登陆申报系统的预算安排备案，提交预算安排备案表。　　二、编报要求　　1.各单位高度重视，精心组织。项目首席科学家应协助项目承担单位，结合项目总体任务安排，组织课题承担单位开展课题预算书的编报工作，并负责课题预算书的审核工作和课题启动后的管理与监督。课题负责人应会同本单位财务部门，在学习掌握专项经费管理相关内容的基础上，认真填报课题预算书，确保填报内容详实、准确。　　2.课题承担单位严格按照核批的预算内容进行填报，其中课题专项经费按预算核批数填报，课题自筹经费原则上按照课题预算申报时的资金承诺填报。各课题的间接费用不应超过《通知》要求的上限。　　3.课题承担单位需对课题预算安排中的支出内容及支出用途进行详细说明。　　4.课题预算书中列示的合作研究单位应与课题预算申报保持一致，并对合作研究相对应部分的任务分工及经费分解内容做出详细说明。　　三、编报程序　　按照“自下而上，逐层汇审”原则组织课题预算书编报。　　进入国家科技经费预算申报管理中心，使用填报项目申请书的账号登录，并选择973计划相应模块(预算书或预算安排备案)进行填报。　　课题填报完成后，通过填报系统提请项目承担单位和项目首席科学家审核、汇总(预审阶段) 　　2.项目承担单位和项目首席科学家负责课题任务分解、课题合作研究单位分工、课题预算支出内容、间接费用的分配及自筹经费安排情况的审核汇总工作，审核汇总完成后，通过填报系统提请科技部审核(二审阶段) 　　3.项目承担单位及课题承担单位可通过填报系统及时了解科技部审核情况 　　4.科技部二审通过以后，课题承担单位打印相关纸质预算书(一式五份)，签字盖章完备后报送项目承担单位。项目承担单位对课题纸质材料进行审核，并汇总打印项目材料(一式五份)，按项目课题顺序装订，签字盖章完备后报送科技部 预算安排备案表每项目(含课题)提交2份。　　5.科技部对预算书进行审核并签章，返还项目承担单位项目(课题)预算书一式三份(含课题承担单位一份) 预算安排备案表留作后期验收使用。　　四、时间安排　　1.预算书填报：2012年2月10日前，项目承担单位完成课题预算书网上审核，并网上提请科技部审核(不需要报送纸质材料)。　　2012年2月17日前，科技部完成网上审核，通过填报系统反馈二审结果。　　2012年2月20日前，项目承担单位完成预算书的打印、装订、签章及报送工作。　　2.预算安排备案表：2012年2月7日后登陆申报系统进行填报，2012年2月20日前，项目承担单位完成预算安排备案表的打印、装订、签章及报送工作。　　五、其他事项　　此项工作具体委托科技部科技评估中心管理　　联系电话：010-88231317　　地址：北京市海淀区皂君庙乙7号　　科技部科技评估中心973预算组 100081　　软件技术咨询：科技部信息中心 010-88659000　　附：　　1.973计划编报预算书的项目清单　　2.973计划编报预算安排备案表的项目清单　　科学技术部　　二〇一二年一月十三日

【干货分享】昊诺斯第八期“组织研磨和样品处理分享、讨论”这一期我们为大家提供的案例是“幼猪耳朵样品研磨”：实验：软骨组织研磨实验地点：某科研单位 1.幼猪耳朵放入研磨管中； 2.将研磨管中加入钢珠，盖好盖子； 3.将装好样品及钢珠的研磨管，在适配器上摆好； 4.将适配器安置到组织研磨仪上； 5.适当转速条件下，研磨数分钟，可得到糊状的软骨组织，用于提核酸或蛋白。 此类实验推广对象分析：1.以软骨组织为研究材料； 2.需要高通量提取核酸、进行遗传或是生理生化指标分析研究的应用； 3.可向畜牧兽医研究所等推广。在昊诺斯销售工程师对以上案例简单讲解之后，用户们在“昊诺斯鼎昊源组织研磨分享”群内进行了热烈的分享、讨论：最后，让我们共同期待第九期“组织研磨和样品处理分享、讨论”活动吧！下周三，我们不见不散！ 温馨提示我们的“组织研磨和样品处理分享、讨论”活动是在【昊诺斯鼎昊源组织研磨分享】微信群内开展的！如果您也想参与我们的活动，那么就找昊诺斯销售工程师拉您进群，或者回复昊诺斯微信公众号申请进群（申请时要注明所在单位名称+微信号）。扫码关注昊诺斯微信公众号