饮料中维生素检测方案(分子荧光光谱)

HITACHIlnspire the Next HITACHIInspire the NextFL No.160001 荧光分光光度计 分析采用三维荧光指纹技术，以获取该成分特有的三三荧光光谱(荧光指纹)，并对有特征的多个荧光强度进行多变量分析，未来将这一分析技术应用到食品、医药等领域的“产品分类”、“优良品和不良品分类”中。现在为大家介绍，采用PARAFAC1)法对市售营养饮料进行分析，通过成分推测和主成分分析结果进行分类的应用示例。实验中，F-7100型荧光分光光度计搭配可一次检测多个样品的微孔板附件以及可过滤散射光中的高次光的自动滤光器附件使用。 F-7100 型荧光分光光度计 1) PARAFA：使用平行因子分析，SolooR8.1.1(Eigenvector Research，Inc.，USA) 利用PARAFA分析推测营养饮料成分 √1L样品中添加100pg的硫酸奎宁(QS：Quinone Sulphate)，样品的荧光强度即可达标(FL No.150002)。 √营养饮料主要包括药物、保健品、能量饮料(清凉饮料)。在此我们对保健品、能量饮料的每个样品均进行了三维荧光光谱测量(图1)。随后，通过PARAFA分析进行三维光谱谱峰分离，依据以往报告推测样品成分。 营养饮料的三维荧光光谱及PARAFA分析结果 I测量条件 仪器：F-7100型荧光分光光度计激发侧狭缝：5nm发射侧狭缝：5nm扫描速度30，000nm/min响应：自动光电倍增管电压：500V光谱校正：ON 图1营养饮料的三维荧光光谱示例 PARAFA 分析 营养饮料成分的主成分分析 (依据上述PARAFA分析结果，对市售营养饮料(11种)分别进行3次三维荧光光谱测量，由此推测出样品组成成分。对于推测出的①核黄素(维生素B2)、②烟酸(维生素B3)进行主成分分析(根据主要多变量分析法2))及判别分析。分析时，使用多变量分析软件JMPR。 √仅对属于能量饮料(分类1)的营养饮料(A、B)以及将A、B按1：1比例混合的样品(C)进行分析。此外，还对属于保健品(分类2)的营养饮料(D、E)以及将D、E按1：1比例混合的样品(F)进行分析。 2)JMPR12.2(SAS Institute Inc.，Cary，NC，USA) 3)主成分分析：将多变量数据转换为低维度数据的方法。 判别分析：利用已知的分类标准，对未知样品进行分类的方法。 主成分分析 图3-1主成分分布图 图3-2因子负荷量分布图 √可根据主成分分析结果，确认各样品的所属类别。因子负荷量分布图(图3-2)矢量显示成分1和成分2比例，由此可知，图3-1矢量方向上的成分浓度较高。 待测样品A、B、C被划分为分类1，D、E、F被划分为分类2，以此确定待测样品分别为能量饮料和保健品。 FLNo.160001 荧光分光光度计 根据营养饮料成分的判别分析进行分类 主成分分析完成后，进行判别分析。判别分析和主成分分析相同，均使用多变量分析软件JMPR。 √和主成分分析时使用的样品相同，样品为属于能量饮料(分类1)的营养饮料(A、B)以及将A、B按1：1比例混合的样品(C)，和属于保健品(分类2)的营养饮料(D、E)以及将D、E按1：1比例混合的样品(F)。 ■判别分析 √依据判别分析结果可知，市售营养饮料以横轴正准1为分界线划分能量饮料(分类1)和保健品(分类2)。经确认，营养饮料A、B、C被划分为能量饮料(分类1)，D、E、F被划分为保健品(分类2)。 注意1：本资料中刊登的数据仅为测试示例，不保证性能。 ( 注意2：依据日本《药机法》和所含成分类别，营养饮料可分为一般药物和保健品两种。 ) 本方法旨在用于研究开发或工程管理等，与日本《药机法》中规定的分类标准有所不同。 【KEY WORDS】 生物·医学·食品·制药、食品、荧光光度计、F-7000、F-7100、F-2700、硫酸奎宁、荧光强度标准化、PARAFAC、多变量分析、荧光指纹、Food、Quinine Sulfate Dihydrate，FL Intensity Standardization Page. Page. 本文向您介绍如何使用日立荧光分光光度计F-7100对市售的营养饮料进行成分分析与判别。对市售的营养饮料和保健品饮料进行检测，获得三维立体的激发-发射光谱。采用PARAFAC法对其进行分析，以此进行产品等级分类。F-7100拥有全球最快扫描、驱动速度和最高的灵敏度，三维光谱分析更加方便、快捷，提供追踪监控化学反应过程。超高信噪比的优异功能，可以检测出低至1*10-12mol/L的荧光素，同时，更有利于痕量样品的测量。本实验中，F-7100搭配可一次检测多个样品的微孔板附件和可过滤高次光的自动滤光器附件使用，大幅提高了实验的效率。