大豆中蛋白质溶解比率检测方案(定氮仪)

SInEO新仪K-354-201903 海能仪器：凯氏定氮仪测定大豆中蛋白质溶解比率 1前言 蛋白质溶解比率，即大豆水溶性蛋白质含量占大豆粗蛋白质含量的百分率。水溶性蛋白质，指的是可溶于水的蛋白质。《GB/T31785-2015大豆储存品质判定规则》中指出蛋白质溶解比率是大豆储存品质关键指标之一。本实验根据国标给出的方法对大豆的蛋白质溶解比率进行测定。 2仪器与试剂 2.1仪器 K1160全自动凯氏定氮仪， SH420F石墨消解仪，离心机，分析天平。 2.2试剂 硫酸(分析纯)， 20g/L硼酸溶液，溴甲酚绿-甲基红混合指示剂，40%氢氧化钠，混合催化剂(3gK2SO4、0.2gCuSO4)， 0.1mol/L 硫酸标准滴定液。 3实验方法 3.1粗蛋白测定 3.1.1试样制备 将大豆粉碎使90%以上通过60目筛。 3.1.2取样 称取混合均匀的样品0.2g(精确至0.1mg)左右，加入消化管。加入混合催化剂：3g硫酸钾，0.2g硫酸铜，沿消化管壁加入浓硫酸10mL。 3.1.3消解 表1消解参数设置 阶段 温度/℃ 保持/min 1 230 15 2 350 15 3 420 90 3.1.4测试 表2定氮仪参数设置 硼酸 稀释水 碱液 蒸馏量 蛋白系数 蒸汽流量 滴定酸浓度 25mL 30mL 40mL 5min 6.25 100% 0.1045mol/L 3.2可溶性蛋白测定 3.2.1试样制备 将大豆粉碎使90%以上通过 60目筛。 3.2.2提取可溶性蛋白质 称取粉碎碎样5g(精确至0.01g，本次取 5.00g)于磨口带塞锥形瓶中，加水200mL，摇匀使均匀分散，然后在25C~30℃温度下震荡2h，取出后将混合液转移至250mL容量瓶中，用水稀释至刻度，混匀后静置1min~2min ， 将上层清液倒入离心管中，在转速为1500r/min 的离心机中离心 10min， 再将离心液用快速滤纸或玻璃纤维过滤，收集清晰滤液于锥形瓶中，即为样品水溶性蛋白质测定液. 3.2.3消解 吸取测定液 10mL于消化管中，加入混合催化剂：3g硫酸钾，0.2g硫酸铜，沿消化管壁加入浓硫酸10mL。 表3消解参数设置 阶段 温度/℃ 保持/min 1 230 40 2 350 15 3 420 90 3.2.4测试 表4定氮仪参数设置 硼酸 稀释水 碱液 蒸馏量 蛋白系数 蒸汽流量 滴定酸浓度 25mL 30mL 40mL 5min 6.25 100% 0.1045mol/L 4结果与讨论 4.1实验结果 表5大豆中蛋白质溶解比率测试结果 测试项目 取样量 氮含量% 蛋白质含量% 平均值% 粗蛋白 0.2078g 5.9399 37.124 36.885 0.2004 g 5.8892 36.808 0.2086g 5.8759 36.724 可溶性蛋白 10 mL 0.0959 0.599 0.603 10mL 0.0966 0.604 10mL 0.0970 0.606 蛋白质溶解比率=0.603×50×100=81.74%36.885 式中50为样品定容稀释倍数 4.2结论 测试结果显示本次测试的大豆的蛋白质溶解比率为81.74%，大于《GB/T 31785-2015 大豆储存品质判定规则》中规定的75%，属宜存大豆。 ( 参考文献 ) ( [1]GB/T 31785-2015 大豆储存品质判定规则 ) ( [2]GB 5009.5-2016食品安全国家标准食品中蛋白质的测定[S]. ) -- -- 1 前言1 前言蛋白质溶解比率，即大豆水溶性蛋白质含量占大豆粗蛋白质含量的百分率。水溶性蛋白质，指的是可溶于水的蛋白质。《GB/T 31785-2015 大豆储存品质判定规则》中指出蛋白质溶解比率是大豆储存品质关键指标之一。本实验根据国标给出的方法对大豆的蛋白质溶解比率进行测定。2 仪器与试剂2.1仪器K1160全自动凯氏定氮仪，SH420F石墨消解仪，离心机，分析天平 。           2.2试剂硫酸（分析纯），20g/L硼酸溶液，溴甲酚绿-甲基红混合指示剂，40%氢氧化钠，混合催化剂（3gK2SO4、0.2gCuSO4），0.1mol/L硫酸标准滴定液。