罗丹明B中固体样品支架荧光强度检测方案(分子荧光光谱)

HITACHI1nspire the NextHitachi High-Tech 日立荧光分光光度计固体样品支架 当测定固体样品或高浓度溶液样品的荧光时，需要使用固体样品支架，测定样品表面的荧光。日立荧光分光光度计配备有独特设计的固体样品支架，在入射角为30的同时，还将样品表面倾斜10°这可以大大减少镜面反射光和杂散光，从而获得精确的荧光测量。 固体样品支架和光学示意图 图1样品表面光学示意图 如图1所示，激发光打在样品表面，除了产生荧光之外，还有来自激发光的镜面反射光和杂散光，这两种光会增加荧光背景干扰，，因此，需要一种检测不到这些干扰的光学系统。 图2固体样品支架 图2所示为日立荧光分光光度计的固体样品支架附件，激发光以一定角度照射样品，产生荧光到达检测器。 图3固体样品支架中的具体光路示意图(左边：俯视图右边：侧面图) 图3为固体样品支架不同角度的光路示意图，从图中可以看出，激发光入射角为30°时，样品表面倾斜10°后，光路系统中镜面反射光和杂散光对荧光的干扰大大减少，从而获得有效的荧光强度。对于其他厂家的固体样品支架，激发光入射角为45°，有的入射角为30°，但未设定样品表面倾斜10°。因此日立荧光分光光度计的固体样品支架具有优异的设计，确保获得的精准的结果。 下面我们利用实验探究光线入射角和样品表面夹角对荧光测量的影响。固体样品支架测定高浓度溶液罗丹明B 图4不同入射角下罗丹明B(10um)的荧光光谱 从图4看出，随着激发光入射角的增加，荧光强度也在增加。但当入射角过大时，会出现杂散光，从而增加背景干扰，从图中发现，最佳的入射角应该在20°30之间。 Hitachi High-ech 图5样品上表面倾斜的效果 图5为样品表面倾斜和没有表面倾斜的条件下测定的结果。从图中可以发现，设定有样品表面倾斜的样品荧光强度曲线(红色)，散射光强度减少了50%，荧光强度增加了5%。 图6入射角与散射光，荧光强度之间的关系 从图6可以发现随着入射角的增大，荧光强度逐渐增大，散射光强度在入射角小于30°时，变化平稳，30°后开始增大，在设置样品表面倾斜后，发现荧光强度与散射光强度的比例大幅度提升。 结论 实验通过高浓度溶液样品罗丹明B对光线入射角和样品表面夹角进行了研究。实验结果进一步证实了样品表面倾斜角的重要性，通过倾斜样品表面，可以消除镜面反射光，从而散射光强度也会减弱，获得最高的荧光比例。 总结 日立荧光分光光度计固体样品支架在入射角为30°时，样品表面倾斜角会保持10°，而其他厂家大部分的入射角为45°，即使入射角为30°，但无法设置样品表面倾斜角。可见，日立固体样品支架的独特设计能够获得更精确的荧光强度。 日立高新技术公司电话： 邮箱： contact.us@hitachi-hightech.com       当测定固体样品或高浓度溶液样品的荧光时，需要使用固体样品支架，测定样品表面的荧光。日立荧光分光光度计配备有独特设计的固体样品支架，在入射角为30°的同时，还将样品表面倾斜10°，这可以大大减少镜面反射光和杂散光，从而获得精确的荧光测量。