辣椒油中罗丹明B检测方案(GPC)

POL.YTECH普立泰科 凝胶净化色谱-液质联用法检测辣椒油中罗丹明B 介绍 罗丹明B，又称玫瑰红B，或碱性玫瑰精，俗称花粉红，中文别名为9-(2-羧基苯基)-3，6-双(二乙氨基)占吨翁氯化物，是一种具有鲜桃红色的人工合成的染料。结构如下图： 罗丹明B具有价格低廉、色泽红艳、稳定性强等特点，部分不良商贩将其作为苏丹红替代品为花椒、辣椒等食品染色，取得好的卖相，并用于火锅店和麻辣烫等餐饮服务单位的火锅底料、火锅调味料、辣椒粉、辣椒油中。经研究发现，罗丹明B会引致皮下组织生肉瘤，具有致癌、致突变性和心脏毒性。2008年， 中国将其列入第一批《食品中可能违法添加的非食用物质和易滥用的食品添加剂名单》中，明确规定不允许用作食品添加剂及食品染色。 本文参考2010年中华人民共和国出入境检疫检验发布的标准《进出口食品中罗丹明B的标准检测方法》，采用 J2 Scientific 凝胶净化-液相色谱质谱法分析检测辣椒油中罗丹明B的含量。 实验部分 2.1提取 称取2.0g辣椒油样品(精确至 0.01g)于25mL 容量瓶中，加入20mL 环己烷乙酸乙酯溶液，超声提取 15min后，用溶剂定容。取10mL溶液过 0.22um微孔过滤膜后待净化。 2.2净化 净化分离条件分别如下： 凝胶净化设备 J2 Scientific 凝胶净化系统 GPC色谱柱 CO785(300*20mm) 流动相 环己烷/乙酸乙酯=1：1+5%甲醇 进样量 2mL 流速 4ml/min 丢弃时间 7.5min 收集时间 12min 浓缩方式 旋转蒸发 定容试剂 甲醇和水(4：6) 定容体积 1mL 2.3液相色谱质谱条件 2.3.1液相条件 色谱柱 ZORBAX Eclipse Plus C18(2.1x100mm， 3.5um) 地址：北京市海淀区温泉镇高里掌路中关村翠湖翠技园15号楼1单元1层邮编：100095电话：8610-82735800 传真：：8610-82735809 网址： www.pltk.com.cn 流动相 A， 0.2%甲酸水 B， 甲醇 进样量 1uL 流动相梯度条件 时间 min 流动相比例(B：A) 0.1 30：70 1.0 90：10 8.0 90：10 8.1 30：70 2.3.2质谱条件 离子源 ESI源，正离子模式 离子源温度 550℃ 电喷雾电压 5500V 雾化气压力 50psi 气帘压力 25psi 辅助气压力 50psi 碰撞气流速 8mL/min 实验结果 样品经过提取净化后，使用基质加标来计算回收率，回收率范围在80~90%之间，满足客户对回收率的要求。回收率结果如下表所示： 加标浓度 测试结果 回收率% 1 8ppb 6.98 87.3 2 8ppb 6.63 82.9 3 8ppb 6.97 87.1 4 8ppb 6.37 79.6 讨论 经过空白实验和样品加标实验发现， CO785是快速柱，在收集罗丹明B的时候，会有少许油样也会被收集，因此在本实验中，为了提高分离度，将流速减小至4mL/min，流动相中加入了5%的甲醇，通过 J2 Scientific凝胶净化系统进行分离净化，回收率范围在80~90%之间，满足客户对回收率的要求。 J2 Scientific 凝胶净化系统 地址：北京市海淀区温泉镇高里掌路中关村翠湖科技湖15号楼1单元1层邮编：100095电话：8610-82735800 传真：8610-82735809 网址： www.pltk.com.cn 罗丹明B具有价格低廉、色泽红艳、稳定性强等特点，部分不良商贩将其作为苏丹红替代品为花椒、辣椒等食品染色，取得好的卖相，并用于火锅店和麻辣烫等餐饮服务单位的火锅底料、火锅调味料、辣椒粉、辣椒油中。经研究发现，罗丹明B会引致皮下组织生肉瘤，具有致癌、致突变性和心脏毒性。2008年，中国将其列入第一批《食品中可能违法添加的非食用物质和易滥用的食品添加剂名单》中，明确规定不允许用作食品添加剂及食品染色。本文参考2010年中华人民共和国出入境检疫检验发布的标准《进出口食品中罗丹明B的标准检测方法》，采用J2 Scientific凝胶净化-液相色谱质谱法分析检测辣椒油中罗丹明B的含量。