乳粉中双氰胺检测方案(液相色谱仪)

事件背景 结构性质 Agilent 针对乳粉及乳原料中双氰胺(Dicyandiamide)的解决方案 李建中，吴翠玲，陆予菲 2013.01 2013年1月，享誉全球的新西兰牛奶及奶制品被检测出含有低含量的有毒物质二氰二氨，新西兰政府已经下令禁售含有二氰二氨的奶类产品； 新西兰农民普遍会在牧场使用二氰二氨，目的是防止硝酸盐等对人体有害的肥料副产品流入河流或湖泊。新西兰两大肥料公司已经停止出售并召回二氰二氨产品，直至政府查出残留二氰二氨的来源； 美国食品和药物管理局将双氰胺添加到安全性待检测物质名单，虽然国际标准未对食品中的双氰胺限量，但高剂量的双氰胺对人体是有毒的. 搜狐新闻>|>国际要闻>时事快报 新西兰奶粉中被检出双氰胺 正文 我来说两句(77人参与) 2013年01月25日14：55来源：新华网 原标题[新西兰奶粉中被检出双氰胺] 新华网惠灵顿1月25日电(记者刘洁秋黄兴伟)新西兰第一产业部官员25日证实， 首页 新闻 维达尔说，新西兰两家主要化肥生产商已经主动停止生产含有双氰胺的化肥，此举|在内的新西兰乳制品出口市场继续对其产品质量保持信心。 简介 管制信息：本品不受管制 中文名称：氰基、双氰胺：[1] 英文别名： Dicyandiamide， Cyanoguanidine 简称： DICY 化学式： C2H4N4 CAS： 461-58-5 HS Code： 2926200000 Einecs： 207-312-8 相对分子质量：84.08 性状：白色结晶性粉末。水中溶解度在13℃时为2.26%，在热水中溶解度较大。当水溶液在80℃时逐渐分解产生气。无水乙醇、乙醚中溶解度在13℃时，分别为1.26%和0.01%。溶于液氨、热水、乙醇、丙酮水合物、二甲基甲酰胺，难溶于乙醚，不溶于苤和于仿。相对密度(d254)1.40。熔点209.5℃。干燥时性质稳定。不燃烧。低毒，半数致死量(小鼠，经口)>4000mg/kg。空气中最高容许浓度5mg/m³，。 用途 ( 编 辑本段 ) 检定钴、镍、铜和钯。有机合成。硝化纤维稳定剂。硬化剂。去垢剂。硫化促进剂。树脂合成。 用作环氧树脂胶黏剂潜伏型固化剂，配制单组分环氧胶黏剂，只有当二氰二胺的粒度s5pm(2500目)时，才能在环氧树脂中形成悬浮体，不会产生沉淀。参考用量4~12份，100g环氧树脂组成物适用期6~12个月。二氰二胺用量17份时储存期不足2个月，用量8份时储存期可达半年之久。固化条件170℃/lh或180℃/20min，热变形温度125℃。也用作单组分水性环氧胶黏剂的固化剂。参考用量7份。二氰二胺(5~6份)与酰肼(3~4份)复配体系，可120C/45min固化环氧树脂。 口目前缺乏针对双氰胺在乳原料及乳制品中的检测技术方法和国 家标准； 针对乳品样品中污染的双氰胺含量低，基质干扰大，急需有效的 前处理方法和高灵敏度的检测技术； 安捷伦科技能为客户提供从前处理到仪器分析完整的解决方案 c 新西兰 U心 奶制品中双氰胺QuEChERs快速萃取净化过程 称取2g奶粉样品，一定量标准品，混合均匀 加入提取液(水：乙腈， V/=1：4) 20mL， 震摇均匀后，涡旋1min，超声提取10min 4℃以下低温@10000rpm离心10min 取8mL上清液加入Bond Elut QuEChERs基质分散固相萃取15mL净化管 (P/N.5982-5158)或者取1mL上清液加入到2mL净化管(P/N.5982-5122)中，涡旋1min 取上清液加入1.5mL离心管中，13000rpm高速离心5min， 将上清液转入样品瓶 LC-MS/MS检测 Injection volume： 2 uL Autosampler temp： 4°C Column Temp： 35°℃ Needle Wash： Flushport (50%acetonitrile+20%isopropyl alcohol+30%water)， 6 s Column： Agilent Zobax-Rx-Sil (3.0x100 mm， 1.8 um)， PN.828975-301， Pump Flow： 0.4 mL/min Mobile Phase： A=Water (with 10mM ammonium acetate)B =Acetonitrile Gradient： Time %B 0.00 2.00 4.00 5.00 5.50 9.00 Stop time： 9minPost time： 4min MS Condition： Agilent 6460 QQQ QQQ MS conditions lon Mode： ESI/JetStream ESI， Positive ESI conditions Drying Gas Temperature： 325 °C Drying Gas Flow： 8 L/min Nebulizer Pressure： 40 psi Sheath Gas Temperature： 350 °C Sheath Gas Flow： 11 L/min Capillary voltage (+)： 4000 V Nozzle voltage (+)： 0V MRM Condition： Timesegment： △EMV=400V Compound Name(6410，6420，6430，6460system) Precursor lon Product lon Resolution(Q1；Q2) Fragmentor volts Cell Accelerator volts Collision Energy (CE) volts Dicyandiamide (DCD) 85 68 Wide； Unit 80 3 20 43 20 Melamine 85 Uint； Unit 100 15 127 68 3 30 Counts vs. Acquisition Time (min) Dicyandiamide-6 Levels， 6 Levels Used， 16 Points， 16 Points Used， 0 QCsx105 y=7787.220744*x+1134.339609c4-R^2=0.99980622oa3.755-Type：Linear， Origin：Ignore， Weight：None3.5 3.25- 3- 2.75- 2.5- 2.25 2- 双氰胺 1.75- 1.5- 1.25 1- 0.75- 0.5- 0.25- 0- -0.25- -2 0 2 4 6 8 10 12 14 16 18 20 22 24 26 28 30 32 34 36 38 40 42 44 46 48 505254 Concentration (ng/ml) Conc. 0.5ppb 1ppb 5ppb 10ppb 20ppb 50ppb AreaRSD 5.85 3.38 5.07 5.13 3.93 1.98 Melamine-6 Levels， 6 Levels Used， 18 Points， 18 Points Used， 0 QCs x1051y=3071.869610*x+31317.712489 R^2=0.99941600 48 50 5254 Concentration (ng/ml) Conc. 0.5ppb 1ppb 5ppb 10ppb 20ppb 50ppb ArealRSD 4.31 0.81 0.48 1.68 1.42 1.06 空白乳粉添加1ppb (10ug/kg)样品的MRM谱图 Counts vs. Acquisition Time (min) Spike level recovery average recovery RSD% 5ng/g(n=3) 90.1 88.7 2.49 86.1 89.8 10ng/g(n=3) 94.8 91.2 89.9 50ng/g(n=3) 92.3 97.0 88.7 采用Agilent 1290+6460 QQQ在正离子模式下Zobax Rx-SIL，可以同时分析测定乳品中双氰胺和三聚氰胺； 采用QuEChERs方法可以对双氰胺实现快速高效的争化处理，净化后的样品基质效应较小，添加回收率可达到88%以上(无同位素内标校正)； 采用6460QQQ分析结果表明在0.5ppb浓度下，双氰胺的信噪比(S/N)=55；三聚氰胺的信噪比(S/N)=390； 在0.5ppb~50ppb浓度范围内，线性关系和稳定性优异，相关系数R>0.999，峰面积RSD<6%. Thank you 1for your attention! http：//www.chem.agilent.com/zh-CN/ 服务热线：：8008203278 安捷伦食品安全整体解决方案 Agilent Technologies Agilent Technologies February ，gilent TechnologiesPage