急性呼吸窘迫综合征（ARDS）中外泌体检测方案(单细胞分析仪)

ExoView' R100 全自动外泌体荧光检测分析系统 美国 NanoView 产品的主要特征 全方位的粒径分析 检测细胞外泌体内容物 Exoview 使用灵敏度更高的 SP-IRIS 技术测量外泌体的粒径，能够对粒径>50nm 的外泌体进行高分辨测量，其测量粒径与电镜粒径基本一致。可一次性输出单个外泌体粒径以及外泌体特定亚群的粒径分布。 WT 细胞在未破膜的条件下几乎观测不到 Syntenin 的信号。进行破膜处理后可以观测到 Syntenin 信号，而KO 之后外泌体该表达信号消失。 已发表文献： Annexin A1 - dependent tethering promotes extracellular vesicle aggregation revealed with single-extracellularvesicle analysis， Rogers MA， Buffolo F， et al， Cell Biology 2020 Targeting tumor-derived exosomes using a lectin affinity hemofiltration device， Marleau AM， Jacobs MT， et al，Cancer Research 2020 Extracellular Vesicle and Particle Biomarkers DefineMultiple Human Cancers. Hoshino A， Kim HS， Bojmar L， et al，Cell 2020 2020年3月24日，急性呼吸窘迫综合征（ARDS）奠基人约翰·默里（John E Murry），因罹患新冠肺炎于巴黎逝世。而夺走约翰·默里生命的正是新冠引发的ARDS，这个消息令人悲痛。ARDS是由肺内原因和/或肺外原因引起的，以顽固性低氧血症为显著特征的临床综合征，病死率可达70%以上，且随着病情严重程度而增加。因此评估ARDS的病情进展对于预防和治疗尤其重要。近期有研究表明，外泌体的促炎作用与ARDS的发病相关。肺部受大肠杆菌侵染后分泌的外泌体能够诱发肺部产生炎症反应；而在小鼠肺部损伤建模实验中，含有miRNA内容物（如miR-466）的外泌体能够促进肺泡巨噬细胞分泌炎性因子。还有研究表明，肺泡灌洗液中CD14+的外泌体可能作为慢阻肺COPD的病情活动指标。在本研究中，作者发现，肺泡灌洗液（BAL）中的CD14+外泌体或可作为急性呼吸窘迫综合征（ARDS）病情严重的判断新指标。 首先，针对ARDS患者的BAL中所含外泌体的表型进行了研究。研究人员使用Exoview对ARDS患者、未患ARDS的患者和术后对照组患者的肺泡灌洗液BAL中外泌体的表型鉴定。包括了单个外泌体的粒径，浓度及蛋白表达（图1A-E）。进一步对外泌体的亚群分析，结果显示，ARDS患者的CD14+/CD81+外泌体数量明显高于未患ARDS的患者（图2A），且30天内死亡的患者的此项数据高于存活患者（图3A）。同时，作者也检测了其他亚群外泌体与ARDS的相关性，如CD66、CD31、CD41、CD206和EpCaM。CD14+外泌体来源于浸润的单核细胞。有研究表明ARDS患者的单核细胞水平与呼吸衰竭的严重程度相关，且单核细胞来源的外泌体能够导致肺血管上皮细胞的死亡。因此，CD14+外泌体可导致ARDS病情加重，可作为ARDS病情严重程度的指标。 在此研究中，作者使用Exoview系统对肺泡灌洗液（BAL）中的外泌体进行了表征分析，并且对不同来源的外泌体进行了统计，结果发现CD14+外泌体或可作为急性呼吸窘迫综合征（ARDS）病情严重的判断新指标，为临床上预防或治疗ARDS提供了新的线索。