小麦麸皮中膳食纤维检测方案(氮吹仪)

来亨科学仪器Laiheng Lab-Equipment 膳食纤维的标准测定方法 一、实验原理 膳食纤维又称为植物细胞壁，它包括纤维素、半纤维素、木质素、果胶、角质和二氧化硅等。本实验用中性洗涤纤维测定法测定，该法所测的膳食纤维为不被人消化系统中的酶所消化，也不被中性洗涤剂溶解的组分。其原理是样品经热的中性洗涤剂浸煮后，残渣用热的蒸馏水充分洗涤，除去样品中游离淀粉、蛋白质、矿物质，然后加入a淀粉酶溶液以水解结合态的淀粉，再用蒸馏水，丙酮依次洗涤，以除去去存的脂肪、色素等，残渣经烘干，即为不溶性膳食纤维。 二、实验用品 (一)器材 (1)电热恒温干燥箱。 (2)恒温箱。 (3)可调温的电炉或可控温的电热板。 (4)抽滤装置(包括抽滤瓶及水泵或真空泵)。 (5)干燥器(用无水氯化钙或变色硅胶为干燥剂)。 (6)高型烧杯(容量600ml)。 (7)甘埚式耐热玻璃滤器(容量为60ml， 孔径40~60um；相当于250目~400目)。 (8)耐热玻璃棉。 北京来亨科贸有限责任公司 (二)试剂 (1)石油醚(沸点范围35~60℃)。 (2)中性洗涤剂溶液 ①18.61g乙二胺四乙酸二钠和6.81g四硼酸钠 (Na2B4O710H20) 用250ml蒸馏水加热溶解； ②30g十二烷基硫酸钠和10ml 乙二醇独乙醚 (2-ethoxy-ethanol) 溶于200ml热蒸馏水中； ③4.56g Na2HPO4溶于 150ml蒸馏水，将①②和③3种溶液合并。然后用磷酸调节混合液 pH至6.9~7.1，最后加蒸馏水至1000ml，即为中性洗涤溶液。此溶液使用期间如有沉淀生成，需在使用前加热到60℃，使沉淀溶解。 (3)十氢萘。 (4)a淀粉酶溶液：取0.1mol/LNa2HPO4溶液610ml和 0.1mol/L Na2HPO4溶液 390ml 混匀，配成 pH7.0的磷酸盐缓冲液。用此缓冲溶液配2.5%酶溶液，离心或过滤，取清液备用。 (5)丙酮。 (6)无水亚硫酸钠。 (三)材料 小麦麸皮。 三、实验程序 1、样品处理 将烘干样品磨细过20~30筛。准确称取0.500~1.000g 置于高型烧杯中。 2.加试剂 依次加入以下试剂于高型烧杯中： ①中性洗涤剂溶液100ml(室温) ②十氢萘2ml(样品煮沸时如产生的泡沫不多，则可不加此试剂)。 ③无水亚硫酸钠0.5g。 3.热处理 将上述烧杯置于电炉上加热，使杯内溶液在 5~10min 内煮沸，自沸腾计时，维持微沸60min。 4.洗涤 将烧杯内的内容物移入已称重之耐热玻璃滤器(内铺有耐热玻璃棉，并已于110℃烤箱烘至恒重)内，抽滤至干，再加入热蒸馏水(100℃)约100ml洗残渣，重复洗3次(用热蒸馏水量约为300~500ml)。 5.酶处理 加酶溶液约 50ml于滤器中(滤器底部须加塞子，使之不漏溶液)，使酶液浸没残渣，并加数滴甲苯以防腐，然后于恒温箱37℃放置 18h 或过夜。 6.洗涤 取出滤器，除去底部的塞子，抽滤，并用热水约500ml分次洗去酶液。用碘液检查是否有淀粉残留，如淀粉已除尽，则可抽干滤液，然后加丙酮洗残渣，抽干，再以丙酮洗一次。若有淀粉残留，需重复“酶处理”步骤。 7.将残渣及滤器于烘箱中110℃烘至恒重，每次称重时应先移入干燥器中，冷至室温后称量。 8.结果处理 按下式计算样品中膳食纤维含量： (滤器+残渣)的重量-滤器重量膳食纤维(含灰分)= ：×100%样品重量 北京来亨科贸有限责任公司 销售技术中心：北京市通州区马驹桥景盛街 北京来亨科贸有限责任公司销售技术中心：北京市通州区马驹桥景盛街  一、实验原理  膳食纤维又称为植物细胞壁，它包括纤维素、半纤维素、木质素、果胶、角质和二氧化硅等。本实验用中性洗涤纤维测定法测定，该法所测的膳食纤维为不被人消化系统中的酶所消化，也不被中性洗涤剂溶解的组分。其原理是样品经热的中性洗涤剂浸煮后，残渣用热的蒸馏水充分洗涤，除去样品中游离淀粉、蛋白质、矿物质，然后加入α淀粉酶溶液以水解结合态的淀粉，再用蒸馏水，丙酮依次洗涤，以除去残存的脂肪、色素等，残渣经烘干，即为不溶性膳食纤维。二、实验用品（一）器材 （1）电热恒温干燥箱。 （2）恒温箱。 （3）可调温的电炉或可控温的电热板。 （4）抽滤装置（包括抽滤瓶及水泵或真空泵）。 （5）干燥器（用无水氯化钙或变色硅胶为干燥剂）。 （6）高型烧杯（容量600ml）。 （7）坩埚式耐热玻璃滤器（容量为60ml，孔径40~60µm；相当于250目~400目）。 （8）耐热玻璃棉。（二）试剂 （1）石油醚（沸点范围35~60℃）。 （2）中性洗涤剂溶液    18.61g乙二胺四乙酸二钠和6.81g四硼酸钠（Na2B4O7.10H2O）用250ml蒸馏水加热溶解；    ‚30g十二烷基硫酸钠和10ml乙二醇独乙醚（2-ethoxy-ethanol）溶于200ml热蒸馏水中；    ƒ4.56g Na2HPO4溶于150ml蒸馏水，将‚和ƒ3种溶液合并。然后用磷酸调节混合液pH至      6.9~7.1，最后加蒸馏水至1000ml，即为中性洗涤溶液。此溶液使用期间如有沉淀生成，需在      使用前加热到60℃，使沉淀溶解。 （3）十氢萘。 （4）α淀粉酶溶液：取0.1mol/LNa2HPO4溶液610ml和0.1mol/L Na2HPO4溶液390ml混匀，配       成pH7.0的磷酸盐缓冲液。用此缓冲溶液配2.5%酶溶液，离心或过滤，取清液备用。（5）丙酮。（6）无水亚硫酸钠。（三）材料     小麦麸皮。三、实验程序   1、样品处理      将烘干样品磨细过20~30筛。准确称取0.500~1.000g置于高型烧杯中。   2. 加试剂     依次加入以下试剂于高型烧杯中：     中性洗涤剂溶液100ml（室温）     ‚十氢萘2ml(样品煮沸时如产生的泡沫不多，则可不加此试剂)。     ƒ无水亚硫酸钠0.5g。3.热处理 将上述烧杯置于电炉上加热，使杯内溶液在5~10min内煮沸，自沸腾计时，维持微沸60min。4.洗涤      将烧杯内的内容物移入已称重之耐热玻璃滤器（内铺有耐热玻璃棉，并已于110℃烤箱烘至恒重）      内，抽滤至干，再加入热蒸馏水（100℃）约100ml洗残渣，重复洗3次（用热蒸馏水量约为      300~500ml）。5. 酶处理       加酶溶液约50ml于滤器中（滤器底部须加塞子，使之不漏溶液），使酶液浸没残渣，并加数滴甲       苯以防腐，然后于恒温箱37℃放置18h或过夜。6.洗涤      取出滤器，除去底部的塞子，抽滤，并用热水约500ml分次洗去酶液。用碘液检查是否有淀粉残      留，如淀粉已除尽，则可抽干滤液，然后加丙酮洗残渣，抽干，再以丙酮洗一次。若有淀粉残留，      需重复“酶处理”步骤。7. 将残渣及滤器于烘箱中110℃烘至恒重，每次称重时应先移入干燥器中，冷至室温后称量。8.结果处理      按下式计算样品中膳食纤维含量：膳食纤维（含灰分）=（滤器+残渣）的重量-滤器重量×100%样品重量