化合物中色谱柱性能差异检测方案(液相色谱柱)

前言随着表面多孔填料颗粒的开发，使从较大的 5 µm 全多孔填料颗粒色谱柱和亚 2 µm 全多孔填料颗粒色谱柱向表面多孔填料颗粒色谱柱的方法转移成为可能。从采用较大填料颗粒色谱柱向采用表面多孔颗粒色谱柱进行方法转移带来的好处之一是显著缩短了分析时间，这是由于表面多孔填料颗粒色谱柱柱长短得多并能以较高流速运行，达到与大填料粒径长色谱柱相似的分辨率。表面多孔颗粒传质距离短、粒径分布较窄，与亚 2 µm 全 多孔填料色谱柱具有类似的高柱效。从全多孔亚 2 µm 填料颗粒色谱柱向表面多孔填料颗 粒色谱柱进行方法转移也是可行的。许多研发实验室选择使用亚 2 µm 填料颗粒色谱柱。然而，在有些情况下，亚 2 µm 填料颗粒色谱柱分析方法因需较高工作压力，可能无法转移到所有 HPLC 系统上运行。而大多数情况下，亚 2 µm 填料颗粒色谱柱分析方法能直接转移到表面多孔颗粒色谱柱上，不需对方法进行调整。对于有相似化学键合相和相同保留机制的 Agilent Poroshell 120 EC-C18 和 Agilent ZORBAX Eclipse Plus C18 等色谱柱而言，方法转移更为简单可行。此外，表面多孔颗粒色谱柱可运行与亚 2 µm 颗粒色谱柱的相同分析，但反压较低。它允许分析人员通过增加流速获得更高的分析通量，或在不超过系统压力上限的情况下增加柱长提高分辨率。 Agilent ZORBAX 系列色谱柱的优势之一是不同填料粒径色谱柱间可进行比例缩放。这就允许将研发方法快速、可靠地转移至实验室制备及高通量分析阶段。结论本研究表明，Agilent ZORBAX Eclipse Plus C18 色谱柱和Agilent Poroshell 120 EC-C18 色谱柱在广泛的pH 值和流动相条件下，具有同等的选择性。两种色谱柱采用类似的材料，并以性质相似的化学键合相进行制备。两种色谱柱在低pH 值、不影响其他化合物分离效果的前提下，能够提供分离碱性化合物的极佳峰形。使用Agilent Poroshell 120 EC-C18 色谱柱的优势是可在较低反压条件下获得高效分离。本研究表明，如有需要，基于 Agilent ZORBAX Eclipse Plus C18 色谱柱的方法能可靠地转移至Agilent Poroshell 120 EC-C18 色谱柱上，且方法的反向转移风险低。