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临床研究中红细胞脂肪酸谱的测定
2018/08/22 16:14
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方案摘要：
产品配置单：
Agilent GC 7890B 气相色谱仪
型号： 7890B
产地： 美国
品牌： 安捷伦
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方案详情：
摘要
细胞脂肪酸 (FA) 谱被公认为各种人类疾病的生物标记物，通常采用气相色谱质谱联用系统 (GC/MS) 对其进行分析，而这种方法非常费时费力。因此临床研究中需要一种高通量的分析方法。在本研究中，从红细胞 (RBC) 中提取 FA 后进行衍生化，以生成脂肪酸甲酯 (FAME)。采用氨气诱导化学电离 (CI) 的气相色谱串联质谱 (GC/MS/MS) FA 谱分析法专为人 RBC 的分析而开发。有 703 个 RBC 样品采用 GC/MS/MS 进行了FA 谱分析。将该分析方法与采用电子轰击电离 (EI) 的单杆 GC/MS 传统方法进行比较。氨气诱导 CI 分析能够生成足够数量的分子离子，以对 FAME 进行进一步研究。该分析确定了 45 个 FA 谱的特定碎片，用于实现可靠的定量分析和碎裂。使用传统 GC/MS 的典型分析时间长达 60 分钟，但该 GC/MS/MS 分析方法的运行时间仅为 9 分钟。分析的所有 FA 批间与批内变异小于 10%。将氨气诱导 CI 与 GC/MS/MS 分析相结合，可帮助临床研究实验室实现稳定、可靠的高通量 FA 谱分析。
前言
为了测定临床研究实验室中的脂肪酸 (FA) 谱，需要灵敏的特异分析方法。过去分离 FA 谱采用的是气相色谱 (GC) 结合火焰离子化检测器 (FID)，这个组合使研究人员能够分析不同基质中的单个 FA。质谱 (MS) 的引入改善了这种分析方式，但传统 GC/MS 分析需要长时间的色谱分离才能确保可靠的鉴定和定量。本研究开发并验证了一种用于红细胞 (RBC) 等生物样本中 FA 高通量分析的特异、快速而灵敏的分析方法。为此，使用化学电离 (CI) 与气相色谱串联质谱 (GC/MS/MS) 结合来测定 FA。采用这些技术可得到过去使用 GC/MS 进行 FA 分析的改进方法。
结论
本研究开发了一种用于测定从衍生化到 FAME 的整个过程生物基质中 FA 谱的 GC/MS/MS 分析方法。方法可在 9 分钟内完成 45 种 FA 谱的定量分析，并有良好的分析灵敏度与选择性。同时研究了其他参数，包括样品前处理步骤、方法稳定性以及 GC 和 MS/MS 条件。可认为该方法稳定且分析时间短，对 FA 分析有很广泛的适用性。
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