茶叶中黄曲霉毒素检测方案（液相+液质）

茶叶中黄曲霉毒素检测方案

针对茶叶复杂基质，参考【GB 5009.22-2016 食品安全国家标准 食品中黄曲霉毒素B族和G族的测定】，建议实验过程如下：

1检测方法

1.1 第一法（液相色谱法-串联质谱法）

黄曲霉毒素混合标准工作液：AFB1：AFB2：AFG1：AFG2为1：0.3：1：0.3ug/mL

黄曲霉毒素混合同位素内标工作液：AFB1：AFB2：AFG1：AFG2为0.5 ug/mL

称取 5g试样（根据样品吸水性可调整）+50uL混合标准工作液+40uL混合同位素内标工作液+84%乙腈 20mL→振荡30min→离心 10min（离心速度 4000r/min）→取上清液4mL过PriboFast®MFC160/260固相净化柱→取2mL净化液+16mL吐温PBS稀释→将全部稀释液通过PriboFast®AFT免疫亲和柱→先用10mLPBS淋洗，再用10mL水淋洗免疫亲和柱→弃去淋洗液，使空气进入柱子，将水挤出柱子→用2mL甲醇洗脱，收集洗脱液于试管中→50℃下氮气吹至近干，用0.5mL流动相复容→微孔滤膜（0.22μm）滤过，取续滤液上机。

1.2 第二法（液相色谱法）

黄曲霉毒素混合标准工作液：AFB1：AFB2：AFG1：AFG2为1：0.3：1：0.3 ug/mL

称取 5g试样+50uL混合标准工作液+84%乙腈 20mL→振荡30min→离心 10min（离心速度 4000r/min）→取上清液4mL过PriboFast®MFC160/260固相净化柱→取2mL净化液+16mL吐温PBS稀释→将全部稀释液通过PriboFast®AFT免疫亲和柱→先用10mLPBS淋洗，再用10mL水淋洗免疫亲和柱→弃去淋洗液，使空气进入柱子，将水挤出柱子→用2mL甲醇洗脱，收集洗脱液于试管中→50℃下氮气吹至近干，用0.5mL流动相复容→微孔滤膜（0.22μm）滤过，取续滤液上机。

样品来源：检测样品库中，选取红茶、绿茶各一种有代表性的茶叶，分别做两种方法的本底和加标平行。