关注
已关注
已认证
粉丝量 0
采购咨询：400-629-8889
售后咨询：400-820-3278
无需手动纯化直接分析合成的寡核苷酸——使用 Agilent InfinityLab 二维液相色谱解决方案进行在 线脱盐和离子对反相液相色谱分析
2024/01/08 14:51
阅读：76
分享：
方案摘要：
产品配置单：
Agilent 1290 Infinity II 二维液相色谱解决方案
型号： 1290 2D-LC
产地： 德国
品牌： 安捷伦
面议
参考报价
联系电话
方案详情：
在分子生物学和分子诊断中，聚合酶链式反应 (PCR)、基因沉默以及相关技术1 都需要标准的和经修饰的合成寡核苷酸。此外，合成寡核苷酸在作为治疗剂治疗各种疾病（例如癌症和病毒性疾病）方面的重要性日益突显2。寡核苷酸类药物包括反义寡核苷酸、小干扰 RNA (siRNA) 和适配体。反义寡核苷酸和 siRNA 均通过阻止 mRNA 翻译从而阻止蛋白质合成。适配体通过形成适配体-蛋白质复合物，从而抑制蛋白质的生物学功能3。
寡核苷酸通常通过亚磷酰胺化学法合成2,4。可获得的纯度通常大于 70%，合成后存在的常见杂质包括缺失或增加序列的寡核苷酸连同未完全去保护的产物、缺失嘌呤
碱基的寡核苷酸以及其他降解产物2。通常使用离子对反相液相色谱 (IP-RPLC) 和阴离子交换色谱对合成的去保护寡核苷酸进行分析分离与纯化2,4。
阴离子交换纯化馏分通常含有高浓度的盐，如氯化钠 (NaCl) 或溴化钠 (NaBr)。当使用 IP-RPLC 对这些馏分进行分析时，高浓度的盐会削弱寡核苷酸参与离子配对的能力，从而导致保留时间变化、峰分裂以及峰流穿5。为了对阴离子交换纯化馏分进行成功的 IP-RPLC 分析，需要在分析前对样品进行脱盐5，而这一过程通常手动完成。
本应用简报展示了高盐浓度溶液中寡核苷酸的直接二维液相色谱分析，这一盐浓度与寡核苷酸合成后阴离子交换纯化馏分中的盐浓度相当。二维液相色谱分析的第一维用于在线脱盐，随后在第二维中进行IP-RPLC 分析。在该设置中，二维液相色谱的使用可以节省时间并避免手动的样品前处理步骤。省去手动样品前处理步骤可以提高重现性，且可以避免样品前处理过程中的样品损失。
下载本篇解决方案：
更多
应用 QuEChERS 方法结合 Agilent 7000 系列三重四极杆气质联用仪测定甜菜中 的多农药残留
本文介绍了一种用于分析甜菜中 267 种农药的简便、高通量方法。该方法将 QuEChERS 样品前处理方法与 Agilent 7000 系列三重四极杆气质联用系统相结合，并通过基质匹配标样校准进行定量，以降低基质干扰引起的定量偏差。结果表明，该方法在 2–200 μg/kg 的基质加标浓度范围内具有良好的线性关系。绝大部分目标农药化合物的定量限 (LOQ) 低至2 μg/kg，灵敏度高。加标回收率测试表明，在 2、5、10、100 和 200 μg/kg 的加标浓度下，大部分农药化合物的回收率在 80%–120% 的范围内 (n = 5) ，且相对标准偏差 (RSD)低于 10%。该方法适用于对甜菜中的多种农药残留进行常规分析。
食品/农产品
2024/05/13
使用 Agilent BioTek Synergy Neo2 Hybrid 多功能微孔板检测仪测定脂质纳米颗粒表观 pKa
脂质纳米颗粒 (LNPs) 已被用作各种有效载荷的递送系统。本应用简报展示了 Agilent BioTek Synergy Neo2 Hybrid 多功能微孔板检测仪用于测定 mRNA LNPs 表观 pKa 的实用性。
制药/生物制药
2024/05/13
使用 ICP-OES 结合自动稀释测定锂盐中的多种元素
使用 Agilent 5800 VDV ICP-OES 和 Agilent ADS 2 自动稀释器自动分析锂离子电池前驱体化学品
能源/新能源
2024/05/13
使用配备高级稀释系统的 ICP-MS 对 高基质样品进行高效分析
在用 Agilent 7850 ICP-MS 分析前，使用 Agilent ADS 2 对沉积物和土壤进行自动稀释
环保
2024/05/13
