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618液相柱经典应用 | 亲水色谱法分析无机离子和药物中的反离子
无机离子的分析是许多实验室的核心功能，由于高极性离子在非极性键合相保留特性较差，一般通过离子交换（IEX）和离子色谱（IC），分析时间长、对仪器的要求更高，一直是一个难题。
亲水相互作用色谱 Hilic
随着亲水相互作用色谱（HILIC）化学键合相的发展，高效分析各种高极性化合物成为可能。
与 IEX 和 IC 方法相比，HILIC 有几项独特的优势：
可以在单次进样中同时分析阳离子、阴离子和极性中性化合物
采用标准的水-乙腈洗脱液，无需任何强酸或碱性添加剂
系统无需再生、抑制器或洗脱液发生器
HILIC 可使用更高效的硅胶型基质取代聚合物树脂
除此之外，使用安捷伦王牌产品，表面多孔填料 Agilent InfinityLab Poroshell 120，更可以可实现 UHPLC 低反压高效分离。
采用 Poroshell 120 Hilic 色谱柱
分析金属卤化物和无机离子
本应用采用表面多孔型 Agilent InfinityLab Poroshell 120 HILIC-Z 和 HILIC-OH5 2.7 µm。
实验部分
样品前处理
将无机离子作为盐进行分析，将其溶于水中，并单独进样无需进一步前处理。
流动相前处理
根据所需浓度称取甲酸铵，与水混合。然后用甲酸将洗脱液的 pH 调节至 3。HPLC 级乙腈直接使用，无需进一步前处理。
仪器
Agilent G4218A ELSD 的 Agilent 1260 二元液相色谱系统。
色谱条件
色谱柱
Agilent InfinityLab Poroshell 120 HILIC-Z, 2.1 × 100 mm, 2.7 µm（部件号 685775-924）
Agilent InfinityLab Poroshell 120 HILIC-OH5, 2.1 × 100 mm, 2.7 µm（部件号 685775-601）
Agilent InfinityLab Poroshell 120 HILIC, 2.1 × 100 mm, 2.7 µm（部件号 695775-901T）
仪器条件
选择性比较
三种 InfinityLab Poroshell 120 HILIC 固定相对无机离子表现出差异极大的选择性。
图 1. Agilent InfinityLab Poroshell 120 HILIC-Z (A)、HILIC-OH5 (B) 和 HILIC (C) 色谱柱之间选择性的比较
果聚糖键合相的 Poroshell 120 HILIC-OH5 和两性离子键合相的 Poroshell 120 HILIC-Z 用于快速分离无机离子的 HILIC 方法，彼此表现出正交选择性。与硅胶型 HILIC 固定相相比，Poroshell 120 HILIC-Z 和 Poroshell 120 HILIC-OH5 使大多数离子（特别是阴离子）表现出显著改善的保留特性和分离度。
基于 HILIC 模式分析无机离子的案例，可拓展用于替代离子色谱柱，检测原料药中的反离子和其它无机离子。
案例
原料药硫酸核糖霉素中的反离子（硫酸根）检测
色谱柱
Agilent InfinityLab HILIC-Z 2.1 x 100 mm, 2.7 um
仪器系统
Agilent 1260 II –ELSD 检测器
Mobile Phase
A-100mM acetate; B-ACN
Gradient
0-1min, 65%B; 1-5min 65%B-55%B, stop time 10 min, post run: 3min
Flowrate
0.4ml/min
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