食品中匹可硫酸钠检测方案

匹可硫酸钠是一种具有润肠通便功效的药品，由于服药后的不良反应和副作用，需医生处方指导使用。2020年4月，有公司非法在食品中使用匹可硫酸钠当作酵素进行添加，做成软糖、蜜饯和果冻类酵素食品。国家有关机关已经发文严格禁止此类行为。 迪马科技参考国家市场监督管理总局批准的《BJS 201911 食品中匹可硫酸钠的测定》食品补充检验方法，建立了液体果汁、果冻、糖类，固体果汁、蜜饯等食品中匹可硫酸钠的检测方法，采用 Spursil 色谱柱结合LC-MS/MS， 前处理采用两种方法，两种方法定量限均为 0.125mg/kg，可供广大分析工作者参老。 方法一：按照标准采用 ProElut PA 聚酰胺固相萃取柱净化； 方法二：迪马优化方法，采用 ProElut PWA-2 弱阴离子交换固相萃取柱净化，更快速。 食品中匹可硫酸钠的测定 1、适用范围 本方案适用于果冻、蜜饯、糖果、果汁、固体果汁等样品中匹可硫酸钠的测定。 2、标准品配制 2.1标准储备溶液：准确称取标准品，用水配制成 1.0mg/mL的标准储备液； 2.2标准工作液：取适量标准储备液，用甲醇配制成 1.25pg/mL 的标准工作液。 方法一：参考 BJS 201911 3、提取 (1)液体饮料类样品 称取1.0g样品于50mL离心管中，加入20mL水，80℃水浴 10min， 冷却后，转移至25mL 容量瓶中，加入2.5mL1%三氯乙酸，用水定容至25mL(若提取液浑浊，可将提取液离心， 6000rpm 离心 2min)， 取出上清液10mL 待净化。 (2)果冻类样品 称取 1.0g样品， 加入20mL 水，80℃水浴 10min， 冷却后，转移至25mL容量瓶中，加入2.5mL1%三氯乙酸，用水定容至25mL(若提取液浑浊，可将提取液离心， 6000rpm离心2min)，取出上清液 10mL待净化。 (3)糖果类和固体饮料类样品 称取1.0g样品，加入40mL水，80℃水浴15min，冷却后， 转移至50mL容量瓶中，加入5mL1%三氯乙酸，用水定容至50mL。(若提取液浑浊，军将提取液离心， 6000rpm 离心2min)， 取出上清液 5mL待净化。 (4)蜜饯类样品 称取 1.0g样品，加入40mL水， 超声提取 15min， 6000rpm 离心2min， 转移至50 mL 容量瓶中，加入 5mL1%三氯乙酸，用水定容至50mL。(若提取液浑浊，可将提取液离心，6000rpm 离心2min)， 取出上清液 10mL 待净化。 4、净化 ProElut PA 1g/6mL (Cat#：65944) 1、活化：10mL甲醇，10mL水活化，弃去流出液； 2、上样：加入待净化液，弃去流出液； 3、淋洗：加入10mL水，15mL70%甲醇水，弃去流出液； 4、洗脱：加入20mL 氨水乙醇溶液*，收集流出液； 5、重新溶解：80℃减压蒸干，用水定容至合适的体积(液体饮料和果冻定容至10mL， 蜜饯定至5mL、奶糖和固体果汁类样品定容至2.5mL)， 过 PES 膜(Cat#：30017)，上机分析。 *氨水乙醇溶液：氨水：水：乙醇=1：2：7(体积比) 注：同方法制备基质匹配标准溶液。 方法二：迪马优化方法 3、提取 称取1.0g样品于50mL离心管中，加入20mL 水， 80℃水浴 10min(多摇几次，保证样品充分溶解)，冷却后，转移至25mL容量瓶中，加入2.5mL1%三氯乙酸，用水定容至25mL(若提取液浑浊，可将提取液离心， 6000rpm 离心2min)， 取出上清液10mL 待净化。 4、净化 ProElut PWA-2 150mg/6mL (Cat#：65815) 1、活化：10mL甲醇，10mL水活化； 2、上样：加入待净化液，弃去流出液； 3、淋洗：加入10mL水，15mL70%甲醇水，弃去流出液； 4、洗脱：加入20mL氨水乙醇溶液*，收集流出液； 5、重新溶解：80℃减压蒸干，用水定容至10mL， 过 PES 膜(Cat#：30017)，上机分析。 *氨水乙醇溶液：氨水：水：乙醇=1：2：7(体积比) 注：同方法制备基质匹配标准溶液。 5、色谱条件 UPLC 条件 色谱柱： Spursil C18， 100x2.1mm， 3pm (Cat#： 82012) 流速：0.3mL/min 进样量：5pL 柱温：35℃ 流动相：10mmol/L乙酸铵：乙腈=85：15 质谱条件 电离模式：ESI 扫描方式：正离子扫描 检测方式：多反应监测 电喷雾电压：5500V 雾化匕压力：50psi 辅助气压力：50psi 气帘气压力：20psi 离子源温度：500℃ 定性离子对、定量离子对、碰撞气能量及去簇电压见下表 药物名称 定性离子对(m/z) (母离子/子离子) 定量离子对(m/z) (母离子/子离子) 碰撞气能量/eV 去簇电压/V 匹可硫酸钠 437.8/183.7 437.8/183.7 45 110 437.8/278.1 30 437.8/357.8 25 6、添加回收结果 食品中匹可硫酸钠检测的添加回收结果(%) 基质 第一法 ProElut PA 净化 第二法 ProElut PWA-2净化 添加加平 125pg/kg 基质效应(%)基质标/溶剂标 添加水平125pg/kg 基质效应(%)基质标/溶剂标 加标量：中间液混标1.25pg/mL， 加 100pL 加标量：中间液混标1.25pg/mL， 加 100uL 果粒橙 94.5 75.7 104.4 86.2 果冻 118.6 91.3 127.5 71.5 固体果珍 100.5 78.3 93.2 83.2 话梅 108.2 99.5 95.1 86.2 棒棒糖 107.8 81.9 95.9 80.3 匹可硫酸钠 5.0pg/L 的 MRM 色谱图 相关产品信息： 货号 名称 规格 样品前处理 65944 ProElut PA聚酰胺固相萃取柱 1g/6mL 100/pk 65815 ProElut PWA-2 弱阴离子交换固相萃取柱 150mg/6mL 30/pk 244358 12管防交叉污染真空 SPE 萃取装置 12立 4806 考克(控制流量) 15/pk 99011 真空/正压两用泵， 无油 1/pk 99013 抽滤瓶套装(包括硅橡胶管2米，2L抽滤瓶及橡胶塞) 1/pk 色谱柱 82012 Spursil C18 极性改性反相色谱柱 100×2.1mm，3pm HPLC溶剂•缓冲盐•离子对试剂 50102 甲醇 HPLC级 4L 50101 乙腈 HPLC 级 4L 50108 乙醇 HPLC级 4L 50138 乙酸铵 HPLC 级 100g 通用色谱产品 52401A 瓶架/白色 50孔 52401B 瓶架/蓝色 50 孔 1034 样品瓶(棕色/螺纹) 2mL，100/pk 1035 样品瓶盖/含垫(已经组装) 100/pk 30017 ProMax Syringe Filter， PES(聚醚砜) 13mm 0.22um PES 100/pk H80465 HPLC进样针 25uL 红色产品货号#1034、#1035火热促销中        匹可硫酸钠是一种具有润肠通便功效的药品，由于服药后的不良反应和副作用，需医生处方指导使用。2020年4月，有公司非法在食品中使用匹可硫酸钠当作酵素进行添加，做成软糖、蜜饯和果冻类酵素食品。国家有关机关已经发文严格禁止此类行为。　　迪马科技参考国家市场监督管理总局批准的《BJS 201911食品中匹可硫酸钠的测定》食品补充检验方法，建立了液体果汁、果冻、糖类，固体果汁、蜜饯等食品中匹可硫酸钠的检测方法，采用Spursil色谱柱结合LC-MS/MS，前处理采用两种方法，两种方法定量限均为0.125mg/kg，可供广大分析工作者参考。方法一：按照标准采用ProElut PA聚酰胺固相萃取柱净化；方法二：迪马优化方法，采用ProElut PWA-2弱阴离子交换固相萃取柱净化，更快速。食品中匹可硫酸钠的测定1、适用范围本方案适用于果冻、蜜饯、糖果、果汁、固体果汁等样品中匹可硫酸钠的测定。2、标准品配制2.1 标准储备溶液：准确称取标准品，用水配制成1.0mg/mL的标准储备液；2.2 标准工作液：取适量标准储备液，用甲醇配制成1.25μg/mL的标准工作液。方法一：参考BJS 2019113、提取(1) 液体饮料类样品称取1.0g样品于50mL离心管中，加入20mL水，80℃水浴10min，冷却后，转移至25mL容量瓶中，加入2.5mL1%三氯乙酸，用水定容至25mL(若提取液浑浊，可将提取液离心，6000rpm离心2min)，取出上清液10mL待净化。(2) 果冻类样品称取1.0g样品，加入20mL水，80℃水浴10min，冷却后，转移至25mL容量瓶中，加入2.5mL1%三氯乙酸，用水定容至25mL(若提取液浑浊，可将提取液离心，6000rpm离心2min)，取出上清液10mL待净化。(3) 糖果类和固体饮料类样品称取1.0g样品，加入40mL水，80℃水浴15min，冷却后，转移至50mL容量瓶中，加入5mL1%三氯乙酸，用水定容至50mL。(若提取液浑浊，可将提取液离心，6000rpm离心2min），取出上清液5mL待净化。(4) 蜜饯类样品称取1.0g样品，加入40mL水，超声提取15min，6000rpm离心2min，转移至50 mL容量瓶中，加入5mL1%三氯乙酸，用水定容至50mL。(若提取液浑浊，可将提取液离心，6000rpm离心2min)，取出上清液10mL待净化。4、净化ProElut PA 1g/6mL (Cat#: 65944)1、活化：10mL甲醇，10mL水活化，弃去流出液；2、上样：加入待净化液，弃去流出液；3、淋洗：加入10mL水，15mL70%甲醇水，弃去流出液；4、洗脱：加入20mL氨水乙醇溶液*，收集流出液；5、重新溶解：80℃减压蒸干，用水定容至合适的体积(液体饮料和果冻定容至10mL，蜜饯定至5mL、奶糖和固体果汁类样品定容至2.5mL)，过PES膜(Cat#: 30017)，上机分析。*氨水乙醇溶液：氨水:水:乙醇=1:2:7(体积比)注：同方法制备基质匹配标准溶液。方法二：迪马优化方法3、提取称取1.0g样品于50 mL离心管中，加入20mL水，80℃水浴10min(多摇几次，保证样品充分溶解)，冷却后，转移至25mL容量瓶中，加入2.5mL1%三氯乙酸，用水定容至25mL(若提取液浑浊，可将提取液离心，6000rpm离心2min)，取出上清液10mL待净化。4、净化ProElut PWA-2 150mg/6mL (Cat#: 65815)1、活化：10mL甲醇，10mL水活化；2、上样：加入待净化液，弃去流出液；3、淋洗：加入10mL水，15mL70%甲醇水，弃去流出液；4、洗脱：加入20mL氨水乙醇溶液*，收集流出液；5、重新溶解：80℃减压蒸干，用水定容至10mL，过PES膜(Cat#: 30017)，上机分析。*氨水乙醇溶液：氨水:水:乙醇=1:2:7(体积比)注：同方法制备基质匹配标准溶液。5、色谱条件UPLC条件 色谱柱：Spursil C18，100x2.1mm，3μm (Cat#：82012)流  速：0.3mL/min进样量：5μL  柱  温：35℃流动相：10mmol/L乙酸铵:乙腈=85:15质谱条件电离模式：ESI扫描方式：正离子扫描检测方式：多反应监测电喷雾电压：5500V雾化气压力：50psi辅助气压力：50psi气帘气压力：20psi离子源温度：500℃6、添加回收结果相关产品信息：