猪肉中非洲猪瘟检测方案(超低温冰箱)

什么是 ASF? 非洲猪瘟 (African Swine fever， ASF)是由非洲猪瘟病毒(African Swine fever virus， ASFV)感染家猪和各种野猪(非洲野猪、欧洲野猪等)引起一种急性、出血性、烈性传染病。世界动物卫生组织(OIE)将其列为法定报告动物疫病，该病也是我国重点防范的一类动物疫情。其特征是发病过程短，最急性和急性感染死亡率高达100%，临床表现为发热(达40~42℃)，心跳加快，呼吸困难，部分咳嗽，眼、鼻有浆液性或粘液性脓性分泌物，皮肤发绀，淋巴结、肾、胃肠粘膜明显出血，非洲猪瘟临床症状与猪瘟症状相似，只能依靠实验室监测确诊。2018年8月3日我国确诊首例非洲猪瘟疫情。 ASFV 可经过口和上呼吸道系统进入猪体，在鼻咽部或是扁桃体发生感染，病毒迅速蔓延到下颌淋巴结，通过淋巴和血液遍布全身。强毒感染时细胞变化很快，在呈现明显的刺激反应前，细胞都已死亡。弱毒感染时，刺激反应很容易观察到，细胞核变大，普遍发生有丝分裂。发病率通常在 40%-85%之间，死亡率因感染的毒株不同而有所差异。高致病性毒株死亡率可高达90-100%； 中等致病性毒株在成年动物的死亡率在20%-40%之间，在幼年动物的死亡率在70%-80%之间；低致病性毒株死亡率在10%-30%之间。 自然感染潜伏期5~9天，往往更短，临床实验感染则为2~5天，发病时体温升高至41℃，约持续四天，直到死前四十八小时，体温始下降为其特征，同时临床症状直到体温下降才显示出来，故与猪瘟体温升高时症状出现不同，最初三至四日发热期间，猪只之食欲，显出极度脆弱，猪只躺在舍角，强迫赶起要它走动，则显示出极度累弱，尤其後肢更甚，脉搏动快，咳嗽，呼吸快约三分之一，显呼吸困难，浆液或粘液脓性结膜炎，有些毒株会引起带血之下痢，呕吐，血液变化似猪瘟，从三至五个病例中，显示有50%之白血球数减少现象，淋巴球 也同样减少，体温升高时发生白血球性贫血，至第四日白血球数便降至40%才不下降，未成熟中性球数增加也可观察到，往往发热后第七天死亡，或症状出现仅一、二天便死亡。 非洲猪瘟病毒(ASFV)诊断方法 根据2018年8月中国动物卫生与流行病学中心颁布的《非洲猪瘟病毒检测操作流程(试行)》办法，，可采用实时荧光定量 PCR 法对猪瘟病毒进行检测分析(此文献的方法一)。 整个实验可分为两部分： Step 1 核酸提取 Step 2 实时荧光定量 PCR 检测此外，还需对猪瘟病毒检测过程进行评价和质量控制。 为加强非洲猪瘟防控工作，助力各检测机构迅速建立非洲猪瘟病毒(ASFV)检测系统，来宝商城为您提供“非洲猪瘟病毒(ASFV)检测整体解决方案”，集样品的便捷采集、快速提取与一体，配合多样化、安全可靠的实验室检测设备及检验管理系统，助您的迅速构建符合 ASF检测标准的实验室检测体系。 分类 产品名称 推荐品牌 制冷设备 低温冰箱 博科、松下、中科美菱 样品处理 离心机 博科、卢湘仪、艾本德 研磨仪 卡尤迪、托摩根、天根 清洗消毒 高压蒸汽灭菌器 博科、申安、上海三申 红外线灭菌器 博科、欧莱博、大龙 安全净化 超净工作台 博科、苏州净化、孚夏(原浙江苏净) 生物安全柜 博科 恒温|干燥|加热 电热恒温培养箱 欧莱博、一恒、精宏 鼓风干燥箱 欧莱博、一恒、恒字 移液操作 单道移液器 迈德飞、艾斯玛特、艾本德 多道移液器 艾斯玛特、艾本德 免疫|生化 洗板机 博科、科华、英诺华 酶标仪 博科、科华、英诺华 全自动酶免分析系统 博科 纯化合成 纯水机与超纯水机 博科、欧莱博、和泰 分子生物学仪器 核酸提取仪 天根、天隆、基赛 金属浴 欧莱博、一恒、其林贝尔 PCR仪 伯乐、ABI、天 塑料制品 吸头 博科、欧莱博、巴罗克 吸头盒 欧莱博、海门万泰 个人防护用品 手套 巴罗克、爱马斯、麦迪康 防护口罩 3M、爱马斯、麦迪康 分子生物学类耗材 PCR管 巴罗克、爱思进、伯乐 离心管 欧莱博、巴罗克、爱思进 医用常规耗材 采血管 康捷、BD、三力 采血针 BD、三力、康德莱 BIO-RAD PCR仪 BIOBASE 生物安全柜 BIOBASE 低温冰箱 BIOBASE 高速离心机 BIOBASE高压蒸汽灭菌器 BIOBASE 超工工作台 产品介绍 BIOBASE 生物安全柜(二级生物安全柜)是为操作原代培养物、菌毒株以及诊断性标本等具有感染性的实验材料时，用来保护操作者本人、实验室环境以及实验材料，使其避免暴露于上述操作过程中可能产生的感染性气溶胶或溅出物。 BIOBASE 超净工作台 宝商面 BIOBASE 超净工作台是一种提供局部无尘无菌工作环境的单向流型空气净化设备。适用于医药卫生、生物制药、食品、医学科学实验、光学、电子、无菌室实验、无菌微生物检验、植物组培接种等需要局部洁净无菌工作环境的科研和生产。 BIOBASE 低温冰箱主要用途：用于科研研究、医疗用品的保存、生物制品、远洋制品、电子元件、化工材料等特殊材料的低温实验及储存。 BIOBASE 高速冷冻离心机 来宝味 BIOBASE 高速冷冻离心机，利用离心机转子高速旋转产生的强大的离心力将悬浮液中的固体颗粒与液体分开，或将乳浊液中两种密度不同、又互不相溶的液体分开，也可用于排除湿固体中的液体。大量应用于化工、石油、食品、制药、选矿、煤炭、水处理。 BIOBASE 高压蒸汽灭菌器可杀灭包括芽胞在内的所有微生物。在103.4kPa (1.05kg/cm2)蒸汽压下，温度达到121.3℃，维持15~20分钟。适用于普通培养基、生理盐水、手术器械、玻璃容器及注射器、敷料等物品的灭菌。 PCR就是利用 DNA 聚合酶对特定基因做体外或试管内 In Vitro 的大量合成，基本上它是利用 DNA 聚合酶进行专一性的连锁复制。目前常用技技术，可以将一段基因复制为原来的一百亿至一千亿倍。根据 DNA 扩增的目的和检测的标准，可以将 PCR 仪分为普通 PCR 仪， 梯度PCR仪， 原位 PCR 仪，实时荧光定量 PCR 仪四类。 非洲猪瘟检疫情况简介1、非洲猪瘟（African Swine fever，ASF）是由非洲猪瘟病毒（African Swine fever virus，ASFV）感染家猪和各种野猪（非洲野猪、欧洲野猪等）引起一种急性、出血性、烈性传染病。  2、2018年8月3日我国确诊首例非洲猪瘟疫情。     3、进而已经在黑龙江、江苏、浙江、安徽内蒙古、吉林、辽宁、天津、山西、贵州、湖南、重庆、湖北、福建、云南、上海、北京等地排查出非洲猪瘟疫情   4、2019年1月1日，农业农村部接到中国动物疫病预防控制中心报告，经黑龙江省动物疫病预防控制中心确诊， 黑龙江省绥化市明水县一养殖场发生非洲猪瘟疫情。截至目前，该养殖场存栏生猪约73000头、发病4686头、死亡3766头。                          5、2019年1月12日，农业农村部接到中国动物疫病预防控制中心报告，经江苏省动物疫病预防控制中心确诊，江苏省泗阳县一公司下辖的两个养殖场发生非洲猪瘟疫情。截至目前，上述两场合计存栏生猪68969头、发病2452头、死亡1369头。                   6、2019年1月18日，农业农村部接到中国动物疫病预防控制中心报告，经中国动物卫生与流行病学中心确诊, 甘肃省兰州市七里河区两养殖户发生非洲猪瘟疫情。截至目前，两个养殖户合计存栏生猪190头、发病143头、死亡37头。                               7、非洲猪瘟对于猪来说是“灭顶之灾”，2018年8月传入中国，发病致死率高。但对于人来说，只要高温煮熟的猪肉即可完全杀灭肉中的病毒，且非洲猪瘟并非人畜共患病，是一种只会在猪群中传播，而不会传染给人的疾病。非洲猪瘟检疫方法概述（1）红细胞吸附试验：将健康猪的白细胞加上非洲猪瘟猪的血液或组织提取物，37℃培养，如见许多红细胞吸附在白细胞上，形成玫瑰花状或桑椹体状，则为阳性。（2）直接免疫荧光试验：荧光显微镜下观察，如见细胞浆内有明亮荧光团，则为阳性。（3）动物接种试验（4）间接免疫荧光反应：将非洲猪瘟病毒接种在长满WERO细胞的盖玻片上，并准备未接种病毒的Vero细胞对照。试验后，对照正常，待检样品在细胞浆内出现明亮的荧光团核荧光细点可被判定为阳性。（5）酶联免疫吸附：对照成立时（阳性血清对照吸收值大于0.3，阴性血清吸收值小于0.1），待检样品的吸收值大于0.3时，判定为阳性。（6）免疫电泳试验：抗原于待检血清间出现白色沉淀线者可判定为阳性。（7）间接酶联免疫蚀斑试验：肉眼观察，或显微镜下观察，蚀斑呈棕色则为阳性，无色则为阴性。