盐酸考来维仑中丙烯胺检测方案(制备液相色谱)

Agela Technologies博纳艾杰尔产品应用案例 盐酸考来维仑中丙烯胺分析报告 AP10079 应用及技术服务部 摘要：本实验采用高效液相色谱 (HPLC) 法结合荧光检测器，并选择 Venusil MP C18(2)(5 um， 110A， 4.6×250mm)色谱柱对盐酸考来维仑中丙烯胺进行了测定。结果表明：控制激发波长为 390 nm，发射波长为 475 nm， 流动相为 0.05 mol/L 磷酸二氢钾(磷酸调节 pH=2.5)：乙腈=60∶40(v/v)时，测得的盐酸考来维仑中丙烯胺拖尾因子为1.00，能够满足检测要求。 关键词：高效液相色谱法；荧光检测器；盐酸骏来维仑；丙烯胺；； VenusilMP C18(2)色谱柱 前言 盐酸考来维仑是一个非吸收性聚合物类降脂药物，它可与肠道中的胆酸结合并显著减少后者的再吸收。由于胆酸的耗竭会提高胆固醇转化为胆酸的平衡，故能用来降低胆固醇浓度。 丙烯胺，常用作制药中间体，乳液改性剂、有机合成和树脂改性剂、硅产品等的中间体。 表1.丙烯胺化学信息 样品名称 英文名 结构式 分子式 分子量 CAS编号 丙烯胺 Allylamine H2N、 C3H7N 57.09 107-11-9 实验部分 仪器、试剂与材料 主要仪器设备 LC-10AD 岛津高效液相色谱仪， N2000 色谱工作站； 试剂材料 磷酸、乙腈、二甲基亚砜、四硼酸钠均为色谱纯； 磷酸二氢钾为分析纯试剂； ( 电话：022-25321032 传真：022-25321033 ) ( Email： s e r vi c e@ag e l a .co m. cn 网址： w w w .ag e la.co m . c n 客服：400-606-8099 ) 稀释剂：乙腈：水=50：50(v/v)； 0.037 mol/L四硼酸钠：精密称取十水合四硼酸钠适量，用水超声溶解并稀释制成每1.0 mL中约含14.0 mg 十水合四硼酸钠的溶液，E即得； 衍生化溶液：称取荧光胺 3.0mg， 加10 mL 二甲基亚砜溶解； 对照溶液储备液：取烯丙胺对照品50 mg， 精密称定，置于 50 mL量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀，作为对照品储备液； 荧光胺：由某医药科技有限公司提供； 丙烯胺对照品：由某医药科技有限公司提供； 盐酸考来维仑：白色粉末，，由某医药科技有限公司提供； 高效液相色谱柱：： Venusil"MP C18(2))；； 5 um， 110A， 4.6×250mmo 样品制备 对照溶液(1)：精密量取对照品储备液适量，用水稀释制成每1mL中约含1 ug烯丙胺的溶液，目即得； 对照溶液(2)：精密量取对照溶液(1)适量，用萃取液稀释制成每1 mL 中约含0.2 ug烯丙胺的溶液，即得； 系统适用性溶液：取10 mL离心管，加入0.037 mol/L 四硼酸钠溶液2.0 mL，水1.9mL 和对照品溶液(1)0.1mL，加衍生化溶液0.5 mL， 涡旋混合20秒，静置3分钟，加入稀释剂5.5 mL，摇匀，静置2小时，待测； 供试品：取盐酸考来维仑200 mg，称定两份，分别置10 mL的离心管中，一份加入萃取液10 mL， 另一份加入对照品溶液(2)10 mL，涡旋混合1min， 摇匀30 min 后在涡旋 1 min， 4500 转/分钟转速离心20分钟，滤过，取续滤液分别作为供试品溶液(1)和供试品溶液(2)。 色谱条件 色谱柱：Venusil"MP C18(2)； 5 um， 110A，，4.6×250 mm： 流动相：0.05 mol/L 磷酸二氢钾(磷酸调节 pH=2.5)：乙腈=60：40(v/v)； 激发波长：390nm； 发射波长：：475nm； 流速：1.2mL/min： ( 地址： 天 津经济开发区西区南大街179号 邮编：300462 ) ( 电话：022-25321032 传真：022-25321033 ) ( Email： s e r vi c e@ag e l a .co m. cn 网址： w w w .ag e la.co m . c n 客服：400-606-8099 ) 柱温：25℃； 进样量：10uL； 结果与讨论 本实验采用 Venusil MP C18(2)色谱柱对盐酸考来维仑中丙烯胺进行了测定，由表2及图3、4可知，流动相使用磷酸盐缓冲液与乙腈，等度洗脱时，待测物拖尾因子良好。 表2.盐酸考来维仑中丙烯胺测试结果 样品名称 峰序号 化合物名称 保留时间/min 理论塔板数 拖尾因子 分离度 系统适用性溶液 1 烯丙胺 17.732 18321 1.005 图1 供试品溶液(1) 1 未知物 4.332 8092 1.063 图2 2 烯丙胺 17.582 18209 1.008 图3 供试品溶液(2) 1 未知物 4.307 7999 1.063 2 烯丙胺 17.657 18167 1.013 图1.盐酸考来维仑稀释剂高效液相色谱图 30- 图2.盐酸考来维仑系统适用性溶液高效液相色谱图 ( 电话：022-25321032 传真：022-25321033 ) 图3..盐酸考来维仑供试品溶液(1)高效液相色谱图 图4..盐酸考来维仑供试品溶液(2)高效液相色谱图 结论 本实验采用 Venusil MP C18(2)色谱柱(5 um， 110A， 4.6×250 mm)使用磷酸盐缓冲液与乙腈为流动相，测试盐酸考来维仑中的丙烯胺。供试品溶液中丙烯胺拖尾因子为1.0<2.0，能够满足检测要求。 附：相关产品 产品名称 规格描述 包装数量 订货号 Venusil@ MP C18(2) 5 um， 110A，4.6×250 mm 1支 VA952505-2 1.5mL样品瓶 短螺纹透明带书写处 100/PK 1109-0519 32×11.6 mm 1.5 mL 样品瓶盖 9 mm 中心孔蓝盖，红色橡胶/米色 PTFE 隔垫45°Shore A； 1.0 mm 100/PK 0915-1819 微孔滤膜 单膜， 13mm， 0.45 um 100个/包 AS021345-T 地址：天津经济开发区西区南大街179号 邮编：300462 ( 电话：022-25321032 传真：022-25321033 ) ( Email： s e r vi c e@ag e l a .co m. cn 网址： w w w. ag e la.co m . c n 客服：400-606-8099 ) 博纳艾杰尔产品应用案例 -次性注射器 2mL无针头 100 支/包 LZSQ-2ML 乙腈 4L/瓶，色谱纯 4×4L/箱 AH015-4 ( Email： s e r vi c e@ag e l a .co m. cn 网址： w w w.ag e la.co m . c n 客服：400-606-8099 ) 地址：天津经济开发区西区南大街 邮编： 地址：天津经济开发区西区南大街 邮编：mail： service@agela.com.cn 网址： www.agela.com.cn 客服：