花生油和粮谷中黄曲霉毒素检测方案(固相萃取)

DiKMAA reliable partner for your lab 花生油和粮谷中黄曲霉毒素的检测-J——UPLC-MS/MS法解决方案 黄曲霉毒素包括 B1、B2、G1、G2、M1、M2等多种形式，但是目前有关这些毒素的检测方法很少，且以酶联免疫(ELISA)法和薄层色谱(TLC)法等筛选方法检测黄曲霉毒素B1为主；液相色谱法(HPLC)容易受到杂质干扰，而且检出限很难达到要求。高效液相色谱-串联质谱(HPLC-MS/MS)是一种集高效分离和多组分定性、定量于一体的系统，已成为近年来研究黄曲霉毒素检测的主要方向，并已经应用到黄曲霉毒素的污染检测中。 方法优势： 迪马科技开发的《花生油和粮谷中黄曲霉毒素的检测-UPLC-MS/MS 法》采用固相萃取-UPLC-MS/MS法，可同时检测5种黄曲霉毒素，并能够达到准确定性定量，检出限是0.5 pg/kg， 远低于国家标准《GB 2761-2011食品安全国家标准食品中真菌毒素限量》；对比国标方法《GB/T 18979-2003食品中黄曲霉毒素的测定免疫亲和层析净化高效液相色谱法和荧光光度法》，本方案具有：(1)前处理步骤简单、回收率高、方法稳定性好、净化效果优异等特点； (2)避免了免疫亲和柱容易受环境影响而引起黄曲霉毒素回收率低和净化效果不好的弊端，保证了实验结果的重现性和准确性； (3)过柱方法简单易操作，对操作人员要求不高，检测成本相对较低，能被很多企事业单位采用。 以下为详细解决方案，敬请参考! 花生油和粮谷中黄曲霉毒素的检测-J——UPLC-MS/MS 法 1、适用范围 本方案适用于花生油、小米、高粱、糙米等样品中黄曲霉毒素的检测。本方案定量限是 0.5 pg/kg。 2、提取 称取2.0g样品，加入8mL 85%乙腈水，振荡2 min， 超声 10 min， 6000 rpm离心2 min， 收集上清液，待净化。 北京：400-608-7719 上海：021-61263966 天津：400-633-6606 广州：020-85593520 成都：028-86612625 沈阳：024-22943513 石家庄：0311-66686220 青岛：0532-83725230 济南：0531-83681355 重庆：023-62568657 3、净化——ProElut AFT-3 12 mL (Cat#： 65915) 将待净化液加入柱中，收集2mL流出液，在50℃水浴下减压蒸干，用初始流动相定容到1mL，过膜上机分析。 4、分析条件 4.1 UPLC 条件： 色谱柱： Leapsil C18， 100 × 2.1 mm， 2.7 um(Cat#： 86005 流速：0.3 mL/min 进样量： 5pL 柱 温：40℃ 流动相：乙乙：0.1%日甲酸水 梯度 时间(min) 0 6 7 15 乙腈(%) 30 70 30 30 0.1%甲酸水(%) 70 30 70 70 4.2质谱条件： 电离模式：ESI扫描方式：正离子扫描检测方式：多反应监测电喷雾电压：5500V雾化气压力：50 psi辅助气压力：50 psi气帘气压力：20 psi离子源温度：500℃ 定性离子对、定量离子对、碰撞气能量及去簇电压见下表 药物名称 定性离子对(m/z) (母离子/子离子) 定量离子对(m/z) (母离子/子离子) 碰撞气能量/eV 去簇电压/V AFB1 313.0/241.0 313.0/241.0 51 78 313.0/285.0 51 AFB2 315.0/259.0 315.0/259.0 40 77 315.0/287.0 40 AFG1 329.0/200.0 329.0/200.0 56 74 329.0/243.0 56 AFG2 331.0/189.0 331.0/189.0 60 61 331.0/313.0 60 AFM1 329.0/273.0 329.0/273.0 40 64 329.0/243.0 40 5、添加回收结果 粮谷及油类样品中黄曲霉毒素检测(添加水平10 pg/kg) 的添加回收结果(%) 基质 AFB1 AFB2 AFG1 AFG2 AFM1 花生油 94.0 102.4 106.6 93.2 96.2 糙米 96.0 99.2 87.2 108.4 87.6 高粱 94.4 93.8 86.4 95.0 92.6 小米 96.8 90.6 112.8 91.4 89.0 1 XIC of +MRM (12 pairs)： 313.000/241.000 Da ID： AFB1-1 from Sample 1 (10... Max.3250.0 cps. 2.95 3200- 3000- 2800· 2600- 2400 2200- 2000- 1800- 1600- 1400 1200- yourlal 1000 800-600-400- 200- M-A4m忧AMAM 4.0 9.0 AM， min Max.3250.0 cps. 5种黄曲霉毒素 10 pg/L MRM 色谱图 XIC of +MRM (12 pairs)： 313.000/241.000 Da ID： AFB1-1 from Sample 13 (1... Max.3190.0 cps. 2.92 RT 2.92 min AFB1 your lab ren 0 10.0 11.0 12.0 13.0 14.0 黄曲霉毒素 B1 10 pg/L XIC 色谱图 XIC of +MRM (12 pairs)： 315.000/259.000 DaID：AFB2-1 from Sample 13(1... Max. 1850.0 cps. 2.60 RT 2.60 min AFB2 el ba h9.0 10.0 11.0 12.0 13.0 14.0 黄曲霉毒素 B2 10 pg/L XIC 色谱图 1100110501000100 XIC of +MRM (12 pairs)： 329.000/200.000 Da ID： AFG1-1 from Sample 13 (1... Max. 1120.0 cps. 2.60 RT 2.60 min AFG1 o artner liable p 90 100 11.0 12.0 130 14.0 黄曲霉毒素 G1 10 pg/L XIC 色谱图 1503 145 140 130- 125- 120 115- 110 105 100- 95- 90- 01 53 01 65- 50- 45- 40 35- 30- 251 0.49 1.45 2.16 XIC of +MRM (12 pairs)： 331.000/189.000 Da ID： AFG2-1 from Sample7(10.... Max. 150.0 cps. 2.33 RT2.33 min AFG2 0ruyo o rne 3.30 5.025.42 0 7.73 9.93 11.41 12.12 13.25 14.13 2.793.194.20 5.466.28 7.948.63 9.86 .12.165 黄曲霉毒素 G2 10 pg/L XIC色谱图 XIC of +MRM (12 pairs)： 329.000/273.000 Da ID： AFM1-1 from Sample 7(10... Max. 1120.0 cps. 1.95 1000 RT 1.95 min AFM1150 el ba v9.0 10.0 1C Max. 1120.0 cps. 黄曲霉毒素 M1 10 pg/L XIC 色谱图 花生油和粮谷中黄曲霉毒素检测检UPLC-MS/MS 法相关产品信息： 货号 名称 规格 样品前处理 65915 ProElut AFT-3 12 mL，20/pk 244358 12管防交叉污染真空 SPE 萃取装置 12位 4806 考克(控制流量) 15/pk 99011 真空/正压两用泵，无油 1/pk 99013 抽滤瓶套装 (包括硅橡胶管2米，2L抽滤瓶及橡胶塞) 1/pk 30039 FitMax 针头式过滤器 Nylon 13 mm，0.22 um 100/pk 30040 FitMax针头式过滤器 Nylon 13 mm，0.45 um 100/pk 标准品 82O-S02017-1ML 黄曲霉毒素 B1(AFB1)[1162-65-8] 2 ug/mL 溶于乙腈， 1 mL 82O-S02018-1ML 黄曲霉毒素 B2(AFB2) [7220-81-7] 0.5 ug/mL 溶于乙腈，1 mL 82O-S02019-1ML 黄曲霉毒素 G1(AFG1)[1165-39-5] 2 pg/mL 溶于乙腈， 1mL 82O-S02020-1ML 黄曲霉毒素 G2(AFG2)[7241-98-7] 0.5 ug/mL 溶于乙腈，1 mL 82O-S02030-1ML 黄曲霉毒素M1(AFM1)[6795-23-9] 0.5 ug/mL 溶于乙腈，1 mL 色谱柱及保护柱 86005 Leapsil C18 2.7 pm UHPLC/HPLC兼容反相色谱柱 100×2.1 mm， 2.7 um HPLC 溶剂·缓冲盐·离子对试剂 50101 乙腈 HPLC级 4L 50144 甲酸 HPLC级 50mL 通用色谱产品 52401B 瓶架/蓝色(现货) 50 孔 52401A 瓶架/白色(现货) 50孔 1034 样品瓶(棕色/螺纹) 2 mL， 100/pk 1035 样品瓶盖/含垫(已经组装) 100/pk H80465 HPLC 进样针 25 uL 红色产品货号#30039、#30040、#1034、#1035火热促销中 北京：400-608-7719上海：021-61263966天津：400-633-6606广州：020-85593520成都：028-86612625沈阳：024-22943513石家庄：0311-66686220青岛：0532-83725230 济南：0531-83681355 重庆：023-62568657 济南： 重庆： 北京： 上海： 天津： 广州：都： 沈阳： 石家庄： 青岛：南： 重庆： 黄曲霉毒素包括B1、B2、G1、G2、M1、M2等多种形式，但是目前有关这些毒素的检测方法很少，且以酶联免疫(ELISA)法和薄层色谱(TLC)法等筛选方法检测黄曲霉毒素B1为主；液相色谱法(HPLC)容易受到杂质干扰，而且检出限很难达到要求。高效液相色谱-串联质谱(HPLC-MS/MS)是一种集高效分离和多组分定性、定量于一体的系统，已成为近年来研究黄曲霉毒素检测的主要方向，并已经应用到黄曲霉毒素的污染检测中。方法优势：迪马科技开发的《花生油和粮谷中黄曲霉毒素的检测-UPLC-MS/MS法》采用固相萃取-UPLC-MS/MS法，可同时检测5种黄曲霉毒素，并能够达到准确定性定量，检出限是0.5 μg/kg，远低于国家标准《GB 2761-2011 食品安全国家标准 食品中真菌毒素限量》；对比国标方法《GB/T 18979-2003 食品中黄曲霉毒素的测定 免疫亲和层析净化高效液相色谱法和荧光光度法》，本方案具有：前处理步骤简单、回收率高、方法稳定性好、净化效果优异等特点；避免了免疫亲和柱容易受环境影响而引起黄曲霉毒素回收率低和净化效果不好的弊端，保证了实验结果的重现性和准确性；过柱方法简单易操作，对操作人员要求不高，检测成本相对较低，能被很多企事业单位采用。以下为详细解决方案，敬请参考！花生油和粮谷中黄曲霉毒素的检测——UPLC-MS/MS法1、适用范围本方案适用于花生油、小米、高粱、糙米等样品中黄曲霉毒素的检测。本方案定量限是0.5 μg/kg。2、提取称取2.0 g 样品，加入8 mL 85%乙腈水，振荡2 min，超声10 min，6000 rpm离心2 min，收集上清液，待净化。3、净化——ProElut AFT-3 12 mL（Cat#：65915）将待净化液加入柱中，收集2 mL流出液，在50 ℃水浴下减压蒸干，用初始流动相定容到1 mL，过膜上机分析。4、分析条件4.1 UPLC 条件：色谱柱：Leapsil C18，100 × 2.1 mm，2.7 μm (Cat#：86005)流  速：0.3 mL/min   进样量：5 μL  柱  温：40 ℃流动相：乙腈：0.1% 甲酸水梯度时间（min）06715乙腈（%）307030300.1% 甲酸水（%）703070704.2质谱条件：电离模式：ESI扫描方式：正离子扫描检测方式：多反应监测电喷雾电压：5500 V雾化气压力：50 psi辅助气压力：50 psi气帘气压力：20 psi离子源温度：500 ℃定性离子对、定量离子对、碰撞气能量及去簇电压见下表药物名称定性离子对（m/z）(母离子/子离子)定量离子对（m/z）(母离子/子离子)碰撞气能量/eV去簇电压/VAFB1313.0/241.0313.0/241.05178313.0/285.051AFB2315.0/259.0315.0/259.04077315.0/287.040AFG1329.0/200.0329.0/200.05674329.0/243.056AFG2331.0/189.0331.0/189.06061331.0/313.060AFM1329.0/273.0329.0/273.04064329.0/243.0405、添加回收结果粮谷及油类样品中黄曲霉毒素检测（添加水平10 μg/kg）的添加回收结果（%）基质AFB1AFB2AFG1AFG2AFM1花生油94.0102.4106.693.296.2糙米96.099.287.2108.487.6高粱94.493.886.495.092.6小米96.890.6112.891.489.0 花生油和粮谷中黄曲霉毒素检测—UPLC-MS/MS法相关产品信息：货号名称规格样品前处理65915ProElut AFT-312 mL, 20/pk24435812管防交叉污染真空SPE萃取装置12位4806考克(控制流量)15/pk99011真空/正压两用泵，无油1/pk99013抽滤瓶套装(包括硅橡胶管2米,2L抽滤瓶及橡胶塞)1/pk30039FitMax针头式过滤器 Nylon13 mm,0.22 μm 100/pk30040FitMax针头式过滤器 Nylon13 mm,0.45 μm 100/pk标准品82O-S02017-1ML黄曲霉毒素B1(AFB1) [1162-65-8]2 μg/mL溶于乙腈, 1 mL82O-S02018-1ML黄曲霉毒素B2(AFB2) [7220-81-7]0.5 μg/mL溶于乙腈,1 mL82O-S02019-1ML黄曲霉毒素G1(AFG1) [1165-39-5]2 μg/mL溶于乙腈, 1 mL82O-S02020-1ML黄曲霉毒素G2(AFG2) [7241-98-7]0.5 μg/mL溶于乙腈,1 mL82O-S02030-1ML黄曲霉毒素M1(AFM1) [6795-23-9]0.5 μg/mL溶于乙腈,1 mL色谱柱及保护柱86005Leapsil C18 2.7 μm UHPLC/HPLC兼容反相色谱柱100×2.1 mm，2.7 μmHPLC溶剂?缓冲盐?离子对试剂50101乙腈  HPLC级4 L50144甲酸  HPLC级50 mL通用色谱产品52401B瓶架/蓝色（现货）50孔52401A瓶架/白色（现货）50孔1034样品瓶（棕色/螺纹）2 mL, 100/pk1035样品瓶盖/含垫（已经组装）100/pkH80465HPLC 进样针25 μL红色产品货号#30039、#30040、#1034、#1035火热促销中