新鲜动物内脏组织中提取DNA、RNA检测方案(研磨机)

DHS 鼎昊源TL2010S中通量组织研磨仪研磨新鲜动物组织 —— DNA提取适用性评估对比 实验样品：新鲜动物内脏组织 实验仪器：DHS 鼎昊源TL2010S中通量组织研磨仪（北京鼎昊源科技有限公司生产） 实验目的： 对比鼎昊源TL2010S中通量组织研磨仪与手工液氮法研磨后的新鲜组织样本在DNA提取、RNA提取性能方面的差异，评估自动研磨仪的适用性。 实验材料及试剂： 1.实验材料准备：将10例新鲜样本分别用吸水纸吸干表面的水分后，称重后分装为2管/例，20 mg±0.3 mg/管。 2.实验试剂：天根DP422 DNA/ RNA共提试剂盒 实验过程： 1.研磨 【自动研磨】向离心管内加入300μl裂解液。将离心管放于液氮中，冷冻处理。 液氮冷冻处理后的离心管固定于鼎昊源TL2010S中通量组织研磨仪适配器中，向离心管中加入2粒3mm磁珠。小心将适配器正确安装至自动研磨仪上，设置研磨参数： 5轮循环数，60 s/轮，10 s间隔。启动仪器，研磨组织。研磨后，再向离心管中加入300μl裂解液（裂解液总使用量为600μl） 。 【手工研磨】 取样本放于研钵中，加入液氮后迅速研磨。将组织粉末转移至离心管中，称重后向其中加入 600μl裂解液。 2.核酸提取、检测及保存 将上述分别使用两种研磨方法处理后的样本，使用DNA RNA共提试剂盒同时提取DNA和RNA。使用微量分光光度计测定DNA、RNA的浓度及纯度。DNA提取后于-20℃保存，RNA于-80℃保存。 实验结果： 实验结论： 鼎昊源TL2010S中通量组织研磨仪处理与手工液氮研磨处理后提取样本的 DNA、RNA 在浓度、纯度上均无显著性差异（成对检验 P>0.05）。但手工研磨有较大的样本损失率，对于DNA提取浓度较低的样品来说，自动研磨仪可以做到样品0损失，在DNA提取上有着明显的优势，且手工处理的过程复杂、易交叉污染，操作所用时间等方面均不及鼎昊源TL2010S中通量组织研磨仪，因此自动研磨仪对于DNA提取工作相对于手工研磨处理有很大优势。 本文关键词：新鲜动物内脏组织研磨，组织研磨仪，TL2010S中通量组织研磨仪，鼎昊源 DHS 鼎昊源TL2010S中通量组织研磨仪研磨新鲜动物组织—— DNA提取适用性评估对比实验样品：新鲜动物内脏组织实验仪器：DHS 鼎昊源TL2010S中通量组织研磨仪（北京鼎昊源科技有限公司生产）实验目的：对比鼎昊源TL2010S中通量组织研磨仪与手工液氮法研磨后的新鲜组织样本在DNA提取、RNA提取性能方面的差异，评估自动研磨仪的适用性。实验材料及试剂：1.实验材料准备：将10例新鲜样本分别用吸水纸吸干表面的水分后，称重后分装为2管/例，20 mg±0.3 mg/管。2.实验试剂：天根DP422 DNA/ RNA共提试剂盒实验过程：1.研磨【自动研磨】向离心管内加入300μl裂解液。将离心管放于液氮中，冷冻处理。液氮冷冻处理后的离心管固定于鼎昊源TL2010S中通量组织研磨仪适配器中，向离心管中加入2粒3mm磁珠。小心将适配器正确安装至自动研磨仪上，设置研磨参数： 5轮循环数，60 s/轮，10 s间隔。启动仪器，研磨组织。研磨后，再向离心管中加入300μl裂解液（裂解液总使用量为600μl） 。【手工研磨】 取样本放于研钵中，加入液氮后迅速研磨。将组织粉末转移至离心管中，称重后向其中加入 600μl裂解液。2.核酸提取、检测及保存 将上述分别使用两种研磨方法处理后的样本，使用DNA RNA共提试剂盒同时提取DNA和RNA。使用微量分光光度计测定DNA、RNA的浓度及纯度。DNA提取后于-20℃保存，RNA于-80℃保存。实验结果：实验结论：鼎昊源TL2010S中通量组织研磨仪处理与手工液氮研磨处理后提取样本的 DNA、RNA 在浓度、纯度上均无显著性差异（成对检验 P>0.05）。但手工研磨有较大的样本损失率，对于DNA提取浓度较低的样品来说，自动研磨仪可以做到样品0损失，在DNA提取上有着明显的优势，且手工处理的过程复杂、易交叉污染，操作所用时间等方面均不及鼎昊源TL2010S中通量组织研磨仪，因此自动研磨仪对于DNA提取工作相对于手工研磨处理有很大优势。 本文关键词：新鲜动物内脏组织研磨，组织研磨仪，TL2010S中通量组织研磨仪，鼎昊源