蛋白质中溶解性检测方案(Zeta电位仪)

用离子电荷监测蛋白质的溶解性 引言 蛋白质溶解度对 pH 的依赖是影响稳定的蛋白质溶液形成的一个关键因素。蛋白质的溶解度取决于 pH 值、盐浓度、离子类型、温度和溶剂。蛋白质分子如溶菌酶、胰岛素或白蛋白有含离子侧基团的聚电解质特征。在等电点(IEP)蛋白质溶解度是零。因此，会发生聚合。 Stabino@实验 使用 PARTICLE METRIX Stabino@， PH滴定，10毫升盐或聚电解质溶液，0.001-10%体积比的浓度分散可以在几分钟内完成。监控信号是流动电位 SP， 它与在颗粒或大分子界面的离子电荷强度相关。流动电位还与蛋白质溶液的溶解度有关。振荡活塞诱发流动电位SP 信号，同时将标准滴定液与样品混合，同时阻止悬浮液发生沉淀。两个滴定单元集成在 Stabino@中允许高效的颗粒和聚电解质电荷滴定。 Stabino@的原理：在自动滴定期间，活塞在测量筒内上下运动使产生颗粒界面的流动电位和达到混匀的目的。 结果 上图显示的是10 mL 1%质量体积比的母鸡(OVE)和牛(BOV)白蛋白的 pH 滴定。1nm 母鸡白蛋白的等电点 pH=4.7， 而5nm牛白蛋白的等电点 pH=5.2。滴定结束时样品发生了凝固。 OVE albumin 用180°DLS 异相背散射 NANOflex 测量探头测得的粒径大小。 结论 Stabino@是一个不需要样品参数信息就可以做滴定的有效的工具。该仪器适合用于筛选工作。 蛋白质溶解度对pH 的依赖是影响稳定的蛋白质溶液形成的一个关键因素。蛋白质的溶解度取决于pH 值、盐浓度、离子类型、温度和溶剂。蛋白质分子如溶菌酶、胰岛素或白蛋白有含离子侧基团的聚电解质特征。在等电点(IEP)蛋白质溶解度是零。因此，会发生聚合。