三种微囊藻毒素

[font='times new roman'][size=13px]前言[/size][/font]微囊藻毒素(Microcystin，MC)是一类具有生物活性的环状七肽化合物，为分布最广泛的肝毒素。其具有相当的稳定性，它能够强烈抑制蛋白磷酸酶的活性，还是强烈的肝脏肿瘤促进剂。中国生活饮用水卫生标准（GB 5749-2006）的颁布实施对水源水的质量提出了更高的要求。本文参照“GB/T 20466-2006水中微囊藻毒素的测定”利用 Sepaths UP 柱膜通用全自动固相萃取系统对水中的微囊藻毒素-LR进行固相富集萃取，采用[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/5p][color=#3333ff]液相色谱[/color][/url]进行检测，建立了一套水中微囊藻毒素-LR的检测方法，且方法的回收率及平行性良好，适合水中微囊藻毒素-LR的检测。[font='times new roman'][size=13px]关键词[/size][/font]Sepaths UP全自动固相萃取系统，水，微囊藻毒素-LR， GB/T 20466-2006[font='times new roman'][size=13px]1、设备及试剂[/size][/font] Sepaths UP 柱膜通用全自动固相萃取系统； 高效[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/5p][color=#3333ff]液相色谱仪[/color][/url]：LC600 二元高压梯度高效[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/5p][color=#3333ff]液相色谱[/color][/url]；标样：微囊藻毒素-LR标准物质（农业部环境保护科研监测所，20μg/mL，溶剂：甲醇）；标样工作液：将20μg/mL标样用甲醇稀释至浓度为2μg/mL；甲醇（色谱纯， Fisher Chemical）三氟乙酸（分析纯）磷酸二氢钾（分析纯）磷酸（分析纯）超纯水固相萃取柱（Labtech C18 500mg/6mL）磷酸二氢钾溶液（0.05mol/L）：称取6.8g磷酸二氢钾，用水溶解，定容至1000.0mL磷酸盐缓冲液：用20%（体积分数）磷酸溶液将磷酸二氢钾溶液调至pH到3洗脱液：用甲醇将0.1mL三氟乙酸定容至100.0mL[font='times new roman'][size=13px]2、测试过程[/size][/font][font='times new roman'][size=13px]2.1 样品准备[/size][/font] 1000.0mL 纯净水中加入200μL的 2μg/mL 微囊藻毒素-LR标准工作液。[font='times new roman'][size=13px]2.2 SPE富集及浓缩[/size][/font] 按照图1所示的方法进行Sepaths UP方法编辑，并加载方法到相应通道。Sepaths UP进行2.1中样品的SPE富集过程。 收集样品到收集瓶中，然后进行氮吹浓缩，当收集液浓缩到近干时，加入流动相定容到1.0mL，取出样品待检测。[align=center][/align][align=center][/align][align=center][img]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2022/10/202210091029061085_5576_5237388_3.png[/img][/align][align=center][size=12px]图1 微囊藻毒素-LR[/size][size=12px] [/size][size=12px]SPE富集方法[/size][/align][align=center][/align][align=center][/align][font='times new roman'][size=13px]2.3 [/size][/font][font='times new roman'][size=13px]HPLC[/size][/font][font='times new roman'][size=13px]检测方法[/size][/font]色谱柱：Promosil C18反相柱，5μm，4.6*250mm；波长：238nm；流速：1mL/min；柱温：35[font='宋体']℃[/font]；进样量：20μL；流动相：甲醇：磷酸盐缓冲溶液= 65：35[font='times new roman'][size=13px]3、测试结果[/size][/font][font='times new roman'][size=13px]3.1 [/size][/font][font='times new roman'][size=13px]0.4[/size][/font][font='times new roman'][size=13px]ppm微囊藻毒素-LR混标色谱图[/size][/font]图2为浓度为0.4ppm的微囊藻毒素-LR混标色谱图。[align=center][img]" style="max-width: 100% max-height: 100% [/img][/align][align=center][font='times new roman'][size=13px]图2 0.4ppm微囊藻毒素-LR混标色谱图[/size][/font][/align]3.2 加标样品色谱图图3为加标样品的色谱图。[align=center][img]" style="max-width: 100% max-height: 100% [/img][/align][align=center][font='times new roman'][size=13px]图 3 加标样品色谱图[/size][/font][/align]3.3 加标回收率 表1为加标回收率结果，微囊藻毒素-LR类化合物的回收率在92.21~98.61%。[align=center][/align][align=center][/align][align=center][font='times new roman'][size=13px]表1 加标回收率结果[/size][/font][/align][table][tr][td=1,2][align=center][size=12px]标样[/size][/align][/td][td=4,1][align=center][size=12px]4 组平行样回收率，%[/size][/align][/td][td=1,2][align=center][size=12px]RSD，%[/size][/align][/td][/tr][tr][td][align=center][size=12px]1[/size][/align][/td][td][align=center][size=12px]2[/size][/align][/td][td][align=center][size=12px]3[/size][/align][/td][td][align=center][size=12px]4[/size][/align][/td][/tr][tr][td][align=center][size=12px]微囊藻毒素-LR[/size][/align][/td][td][align=center][size=12px]93.75[/size][/align][/td][td][align=center][size=12px]92.21[/size][/align][/td][td][align=center][size=12px]98.61[/size][/align][/td][td][align=center][size=12px]93.82[/size][/align][/td][td][align=center][size=12px]2.93[/size][/align][/td][/tr][/table][font='times new roman'][size=13px]4、结果与讨论[/size][/font]本方法参考GB/T 20466-2006方法，使用Sepaths UP 柱膜通用全自动固相萃取系统对水中微囊藻毒素-LR进行了富集固相萃取，利用[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/5p][color=#3333ff]液相色谱[/color][/url]进行检测，得到方法回收率为92.21~98.61%。且通道间的平行性良好，适合水中微囊藻毒素-LR的检测。[font='times new roman'][size=13px]参考标准[/size][/font]GB/T 20466-2006 水中微囊藻毒素的测定

[size=4][font=黑体][color=#dc143c]维权声明：本文为[/color]shoppingone[color=#dc143c]原创作品，本作者与仪器信息网是该作品合法使用者，该作品暂不对外授权转载。其他任何网站、组织、单位或个人等将该作品在本站以外的任何媒体任何形式出现的，均属侵权违法行为，我们将追究法律责任。[/color]1 [/font][/size][size=4][font=黑体]引言[/font][/size][size=3][font=宋体]近年来，长江、黄河以及珠江中下游的许多湖泊和水库都相继发生了不同程度的蓝藻水华。[/font][/size][size=3][font=宋体]水华藻类在水面堆集，不但散发鱼腥臭味，而且堵塞管道[/font][/size][size=3][sup][font=Times New Roman][1-4][/font][/sup][size=3][font=宋体]，更严重的是异常增殖藻类释放生物毒素——藻毒素[/font][/size][size=3][font=宋体]，[/font][/size][size=3][font=宋体]这些次级代谢产物严重危害了人类的健康和生态安全。目前在蓝藻植物中发现约有30 个水华蓝藻种类是产毒的，主要包括微囊藻、鱼腥藻、束丝藻、节球藻、念珠藻和颤藻等，其中微囊藻在世界各国湖泊、河流中普遍发生水华[/font][/size][sup][font=Times New Roman][5][/font][/sup][size=3][font=宋体]。微囊藻毒素由于在人体和动物体内具有富集作用，已成为令世人关注的环境卫生问题。从2007年7月1日起，中国实施了新的生活饮用水标准，其中最引入注目的是微囊藻毒素被列入水质检测指标。微囊藻毒素[/font][/size][size=3][font=宋体]-[/font][/size][size=3][font=宋体]LR [/font][/size][size=3][font=宋体]是目前已知的毒性最强、急性危害最大的一种淡水蓝藻毒素。基于此[/font][/size][size=3][font=宋体]，[/font][/size][size=3][font=宋体]我国现执行的生活饮用水水质中藻毒素限值为[/font][/size][size=3][font=宋体]1.0[/font][/size][size=3][font=宋体]μ[/font][/size][size=3][font=宋体]g/L[/font][/size][sup][font=Times New Roman][6][/font][/sup][size=3][font=宋体]。[/font][/size][/size][size=3][font=宋体]因此，[/font][/size][size=3][font=宋体]研究灵敏、快速、简单、高效的藻毒素监测技术方法，[/font][/size][size=3][font=宋体]防范藻毒素给水环境及人类健康带来的威胁，[/font][/size][size=3][font=宋体]为饮用水安全保障提供技术支撑具有重要的意义。[/font][/size][size=3][font=宋体]目前针对微囊藻毒素的检测方法主要有以下几大类[/font][/size][sup][size=3][font=Times New Roman][7][/font][/size][/sup][size=3][font=宋体]：生物毒性测试法、化学测试法、免疫测试法（ELISA）、细胞毒性检测技术、酶活性抑制技术、竞争性结合检测技术等。而HPLC 法则是最为经典和最广泛使用的方法, 它可以对不同类型的MC 进行定性分析和定量检测，检测限一般在[/font][/size][size=3][font=Times New Roman]ng[/font][/size][size=3][font=宋体] [/font][/size][size=3][font=宋体]以下，准确度和选择性较为突出。[/font][/size][size=4][font=黑体]2 [/font][/size][size=4][font=黑体]材料与方法[/font][/size][size=3][font=黑体]2.1 [/font][/size][size=3][font=黑体]试剂和仪器[/font][/size][size=3][font=宋体]安捷伦[/font][/size][size=3][font=Times New Roman]1200[/font][/size][size=3][font=宋体]型高效液相色谱[/font][/size][size=3][font=宋体]仪, Agilent XDB C18 分析色谱柱(4.6 ×150 mm ,5μm)，C18 固相萃取柱(500 mg/6mL),[/font][/size][size=3][font=Times New Roman] [/font][size=3][font=宋体]Caliper Auto Trace SPE workstation[/font][/size][/size][size=3][font=宋体]。[/font][/size][size=3][font=宋体]微囊藻毒素标样[/font][/size][size=3][font=Times New Roman]MC - RR[/font][/size][size=3][font=宋体]、[/font][/size][size=3][font=Times New Roman]YR[/font][/size][size=3][font=宋体]、[/font][/size][size=3][font=Times New Roman]LR [/font][/size][size=3][font=宋体]甲醇[/font][/size][size=3][font=Times New Roman]([/font][/size][size=3][font=宋体]色谱纯[/font][/size][size=3][font=Times New Roman]) [/font][/size][size=3][font=宋体]三氟乙酸[/font][/size][size=3][font=Times New Roman]([/font][/size][size=3][font=宋体]分析纯[/font][/size][size=3][font=Times New Roman]) [/font][/size][size=3][font=宋体]超纯水。[/font][/size][size=3][/size][size=3][font=黑体]2.2 [/font][/size][size=3][font=黑体]色谱分析条件[/font][/size][size=3][font=宋体]流动相采用含[/font][/size][size=3][font=Times New Roman]0.05% TFA[/font][/size][size=3][font=宋体]的甲醇水溶液[/font][/size][size=3][font=Times New Roman]([/font][/size][size=3][font=宋体]体积比水[/font][/size][size=3][font=Times New Roman]:[/font][/size][size=3][font=宋体]甲醇[/font][/size][size=3][font=Times New Roman]=40:60)[/font][/size][size=3][font=宋体]，流速为[/font][/size][size=3][font=Times New Roman]1ml/min[/font][/size][size=3][font=宋体]，柱温[/font][/size][size=3][font=Times New Roman]40[/font][/size][size=3][font=宋体]℃[/font][/size][size=3][font=宋体]，检测波长[/font][/size][size=3][font=Times New Roman]238nm[/font][/size][size=3][font=宋体]，样品进样量[/font][/size][size=3][font=Times New Roman]10μL[/font][/size][size=3][font=宋体]。以保留时间定性，外标法定量。[/font][/size][size=3][/size][size=3][font=黑体]2.3 [/font][/size][size=3][font=黑体]样品制备[/font][/size][size=3][font=黑体][/font][/size][size=3][font=宋体]用[/font][/size][size=3][font='Times New Roman','serif']SPE[/font][/size][size=3][font=宋体]富集水样的具体操作是先取[/font][/size][size=3][font='Times New Roman','serif']500 mL[/font][/size][size=3][font=宋体]水样，经[/font][/size][size=3][font='Times New Roman','serif']0.45μm[/font][/size][size=3][font=宋体]玻璃纤维滤膜减压过滤，使滤液通入已预先活化[/font][/size][size=3][font='Times New Roman','serif']([/font][/size][size=3][font=宋体]用[/font][/size][size=3][font='Times New Roman','serif']10mL [/font][/size][size=3][font=宋体]甲醇、[/font][/size][size=3][font='Times New Roman','serif']10mL [/font][/size][size=3][font=宋体]超纯水各清洗[/font][/size][size=3][font='Times New Roman','serif']1[/font][/size][size=3][font=宋体]次[/font][/size][size=3][font='Times New Roman','serif'])[/font][/size][size=3][font=宋体]的[/font][/size][size=3][font='Times New Roman','serif']C18[/font][/size][size=3][font=宋体]固相萃取[/font][/size][size=3][font='Times New Roman','serif'](SPE)[/font][/size][size=3][font=宋体]柱进行富集（控制流速为[/font][/size][size=3][font='Times New Roman','serif']10 mL/min[/font][/size][size=3][font=宋体]）[/font][/size][size=3][font=宋体]。富集完毕，依次用[/font][/size][size=3][font='Times New Roman','serif']10mL 10%[/font][/size][size=3][font=宋体]甲醇和[/font][/size][size=3][font='Times New Roman','serif']10mL 20%[/font][/size][size=3][font=宋体]甲醇淋洗剂过[/font][/size][size=3][font='Times New Roman','serif']C18 SPE[/font][/size][size=3][font=宋体]柱，以淋洗去除杂质。再用[/font][/size][size=3][font='Times New Roman','serif']10mL[/font][/size][size=3][font=宋体]含[/font][/size][size=3][font='Times New Roman','serif']0. 1% TFA[/font][/size][size=3][font=宋体]的甲醇洗脱，洗脱液用氮吹浓仪定容至[/font][/size][size=3][font='Times New Roman','serif']1 ml[/font][/size][size=3][font=宋体]，[/font][/size][size=3][font='Times New Roman','serif'] - 20[/font][/size][size=3][font=宋体]℃[/font][/size][size=3][font=宋体]保存待测。[img=448,225]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2010/08/201008251529_238750_2149877_3.jpg[/img][/font][/size][size=4][font=黑体]3[/font][/size][size=4][font=黑体]结果与讨论[/font][/size][color=red][size=3][font=黑体][/font][/size][/color][size=3][font=黑体]3.1 [/font][/size][size=3][font=黑体]藻毒素富集方法的优化[/font][/size][size=3][font='Times New Roman','serif'] [/font][/size][size=3][font=宋体]天然水体中微囊藻毒素的含量通常为[/font][/size][size=3][font='Times New Roman','serif']ug/L[/font][/size][size=3][font=宋体]甚至[/font][/size][size=3][font='Times New Roman','serif']ng/L[/font][/size][size=3][font=宋体]级，而且环境样品组分复杂，很难进行目标组分的直接检测。当水样中[/font][/size][size=3][font='Times New Roman','serif']MC-RR[/font][/size][size=3][font=宋体]、[/font][/size][size=3][font='Times New Roman','serif']MC-YR[/font][/size][size=3][font=宋体]和[/font][/size][size=3][font='Times New Roman','serif']MC-LR[/font][/size][size=3][font=宋体]浓度小于[/font][/size][size=3][font='Times New Roman','serif']50 ng/L[/font][/size][size=3][font=宋体]时，直接用[/font][/size][size=3][font='Times New Roman','serif']HPLC[/font][/size][size=3][font=宋体]测试，精度不够，必须进行水样富集预处理。[/font][/size][size=3][font='Times New Roman','serif'][/font][/size][size=3][font=宋体]我们采用全自动大体积液体固相萃取[/font][/size][size=3][font=Times New Roman](SPE)[/font][/size][size=3][font=宋体]仪，与传统的手动萃取方法相比，全自动固相萃取技术显著的优势体现在：[/font][/size][size=3][font=Times New Roman]①[/font][/size][size=3][font=宋体]提高样品处理通量，可同时萃取多个样品，大大提高工作效率；[/font][/size][size=3][font=Times New Roman]②[/font][/size][size=3][font=宋体]可自动选择不同溶剂进行[/font][/size][size=3][font=Times New Roman]SPE[/font][/size][size=3][font=宋体]柱的活化、淋洗、洗脱，减少操作人员在化学气雾中的暴露；[/font][/size][size=3][font=Times New Roman]③[/font][/size][size=3][font=宋体]大大减少溶剂的消耗和废物的产生；[/font][/size][size=3][font=Times New Roman]④[/font][/size][size=3][font=宋体]回收率高，重现性好；[/font][/size][size=3][font=Times New Roman]⑤[/font][/size][size=3][font=宋体]是[/font][/size][size=3][font=Times New Roman]EPA[/font][/size][size=3][font=宋体]方法中水样测试认可标准方法；[/font][/size][size=3][font=Times New Roman]⑥[/font][/size][size=3][font=宋体]萃取速度一致性好、控制调整方便。[/font][/size][size=3][/size][size=3][font=黑体]3.2 [/font][/size][size=3][font=黑体]线性范围和检测限[/font][/size][size=3][font=宋体]将[/font][/size][size=3][font=Times New Roman]MC-LR[/font][/size][size=3][font=宋体]、[/font][/size][size=3][font=Times New Roman]MC-RR [/font][/size][size=3][font=宋体]和[/font][/size][size=3][font=Times New Roman]MC-YR [/font][/size][size=3][font=宋体]标准品逐级稀释配制成[/font][/size][size=3][font=Times New Roman]0.1[/font][/size][size=3][font=宋体]、[/font][/size][size=3][font=Times New Roman]0.2[/font][/size][size=3][font=宋体]、[/font][/size][size=3][font=Times New Roman]0.5[/font][/size][size=3][font=宋体]、[/font][/size][size=3][font=Times New Roman]1[/font][/size][size=3][font=宋体]、[/font][/size][size=3][font=Times New Roman]1. 5[/font][/size][size=3][font=宋体]和[/font][/size][size=3][font=Times New Roman]2 mg/L[/font][/size][size=3][font=宋体]系列质量浓度，在色谱分析条件下依次测定，以峰面积[/font][/size][size=3][font=Times New Roman](Y[/font][/size][size=3][font=宋体]，[/font][/size][size=3][font=Times New Roman]mg/L) [/font][/size][size=3][font=宋体]对相应的进样量[/font][/size][size=3][font=Times New Roman](X [/font][/size][size=3][font=宋体]，[/font][/size][size=3][font=Times New Roman]μVs) [/font][/size][size=3][font=宋体]进行线性回归，回归方程、线性范围及相关系数列于表[/font][/size][size=3][font=Times New Roman]1[/font][/size][size=3][font=宋体]。[/font][/size][size=3][/size][align=center][font=黑体]表[/font][font=Times New Roman]1 HPLC[/font][font=黑体]测定[/font][font=Times New Roman]MC[/font][font=黑体]的线性范围及线性方程[/font][/align][align=center][table=545][tr][td=1,1,94][align=center][size=3][font=宋体]藻毒素[/font][/size][/align][/td][td=1,1,119][align=center][size=3][font=宋体]线性范围（[/font][font=Times New Roman]mg/L[/font][font=宋体]）[/font][/size][/align][/td][td=1,1,117][align=center][size=3][font=宋体]检测限[/font][font=宋体]（[/font][font=Times New Roman]ng/L[/font][font=宋体]）[/font][/size][/align][/td][td=1,1,117][align=center][size=3][font=宋体]线性方程[/font][/size][/align][/td][td=1,1,98][align=center][size=3][font=宋体]相关系数[/font][font=Times New Roman](r)[/font][/size][/align][/td][/tr][tr][td=1,1,94][align=center][size=3][font=Times New Roman]MC-RR[/font][/size][/align][/td][td=1,1,119][align=center][size=3][font=Times New Roman]0.1[/font][font=宋体]～[/font][font=Times New Roman]2[/font][/size][/align][/td][td=1,1,117][align=center][size=3][font=Times New Roman]61[/font][/size][/align][/td][td=1,1,117][align=center][size=3][font=Times New Roman]Y=7.547x+2.279[/font][/size][/align][/td][td=1,1,98][align=center][size=3][font=Times New Roman]0.9999[/font][/size][/align][/td][/tr][tr][td=1,1,94][align=center][size=3][font=Times New Roman]MC-YR[/font][/size][/align][/td][td=1,1,119][align=center][size=3][font=Times New Roman]0.1[/font][font=宋体]～[/font][font=Times New Roman]2[/font][/size][/align][/td][td=1,1,117][align=center][size=3][font=Times New Roman]23[/font][/size][/align][/td][td=1,1,117][align=center][size=3][font=Times New Roman]Y=19.416x+2.233[/font][/size][/align][/td][td=1,1,98][align=center][size=3][font=Times New Roman]0.9999[/font][/size][/align][/td][/tr][tr][td=1,1,94][align=center][size=3][font=Times New Roman]MC-LR[/font][/size][/align][/td][td=1,1,119][align=center][size=3][font=Times New Roman]0.1[/font][font=宋体]～[/font][font=Times New Roman]2[/font][/size][/align][/td][td=1,1,117][align=center][size=3][font=Times New Roman]18[/font][/size][/align][/td][td=1,1,117][align=center][size=3][font=Times New Roman]Y=16.949x+0.01[/font][/size][/align][/td][td=1,1,98][align=center][size=3][font=Times New Roman]0.9999[/font][/size][/align][/td][/tr][/table][/align][font=Times New Roman][img]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2010/08/201008251531_238751_2149877_3.jpg[/img][font=宋体]图[/font][font='Times New Roman','serif']1 MC-RR/YR/LR[/font][font=宋体]的标准曲线图[/font][/font][size=3][font=黑体]3.3[/font][/size][size=4][font=黑体] [/font][/size][size=3][font=黑体]实际水样的测定[/font][/size][size=4][font=黑体][/font][/size][size=3][font=宋体]通过优化测试条件，建立了[/font][/size][size=3]SPE - HPLC[/size][size=3][font=宋体]同时测定水中的[/font][/size][size=3]3[/size][size=3][font=宋体]种微囊藻毒素的分析方法，其检出限和回收率可满足实际监测的要求。[/font][/size][size=3][/size][size=3][font=黑体]3.3[/font][/size][size=3][font=黑体].1 [/font][/size][size=3][font=黑体]太湖原水藻毒素检测[/font][/size][size=3][font=宋体]水样取自[/font][/size][size=3][font='Times New Roman','serif']2009[/font][/size][size=3][font=宋体]年[/font][/size][size=3][font='Times New Roman','serif']8[/font][/size][size=3][font=宋体]月份的太湖水样，用我们优化过的藻毒素检测方法检测出[/font][/size][size=3][font='Times New Roman','serif']MC[/font][/size][size=3][font=宋体]浓度见表[/font][/size][size=3][font='Times New Roman','serif']2[/font][/size][size=3][font=宋体]。[/font][/size][size=3][font='Times New Roman','serif'][/font][/size][align=center][font=黑体]表[/font][font='Times New Roman','serif']2 2009[/font][font=黑体]年[/font][font='Times New Roman','serif']8[/font][font=黑体]月太湖水体中[/font][font='Times New Roman','serif']MC[/font][font=黑体]含量[/font][font='Times New Roman','serif'] ([/font][font=黑体]单位：[/font][font='Times New Roman','serif']ug/L)[/font][size=3][font='Times New Roman','serif'][/font][/size][/align][align=center][table=407][tr][td=1,1,102][align=center][size=3][font=宋体]藻毒素[/font][/size][/align][/td][td=1,1,128][align=center][size=3][font=Times New Roman]1#[/font][/size][/align][/td][td=1,1,91][align=center][size=3][font=Times New Roman]2#[/font][/size][/align][/td][td=1,1,85][align=center][size=3][font=Times New Roman]3#[/font][/size][/align][/td][/tr][tr][td=1,1,102][align=center][size=3][font=Times New Roman]MC- RR [/font][/size][/align][/td][td=1,1,128][align=center][size=3][font=Times New Roman]0.88[/font][/size][/align][/td][td=1,1,91][align=center][size=3][font=Times New Roman]0.95[/font][/size][/align][/td][td=1,1,85][align=center][size=3][font=Times New Roman]1.8[/font][/size][/align][/td][/tr][tr][td=1,1,102][align=center][size=3][font=Times New Roman]MC-LR[/font][/size][/align][/td][td=1,1,128][align=center][size=3][font=Times New Roman]0.036[/font][/size][/align][/td][td=1,1,91][align=center][size=3][font=Times New Roman]0.064[/font][/size][/align][/td][td=1,1,85][align=center][size=3][font=Times New Roman]0.044[/font][/size][/align][/td][/tr][/table][/align][size=3][font=宋体]由于太湖水富营养化严重，藻类大量繁殖，水体已受到微囊藻毒素的污染，[/font][/size][size=3]MC-RR[/size][size=3][font=宋体]的浓度较高，[/font][/size][size=3]1#[/size][size=3][font=宋体]和[/font][/size][size=3]2#[/size][size=3][font=宋体]都已接近[/font][/size][size=3]1 ug/L[/size][size=3][font=宋体]，[/font][/size][size=3]3#[/size][size=3][font=宋体]更高达[/font][/size][size=3]1.8 ug/L[/size][size=3][font=宋体]，[/font][/size][size=3]MC-LR[/size][size=3][font=宋体]的浓度普遍较低，都在[/font][/size][size=3]100 ng/L[/size][size=3][font=宋体]以下。需注意的是[/font][/size][size=3]“[/size][size=3][font=宋体]水华[/font][/size][size=3]”[/size][size=3][font=宋体]暴发期间，水体中的微囊藻毒素浓度较低，但随着藻细胞的死亡，水体中的微囊藻毒素浓度随之增大，并且胞内藻毒素[/font][/size][size=3]- LR[/size][size=3][font=宋体]的含量也会明显升高，因此[/font][/size][size=3]“[/size][size=3][font=宋体]水华[/font][/size][size=3]”[/size][size=3][font=宋体]暴发后受微囊藻毒素污染的水体对人体健康的危害更大，应加强水源地水体中微囊藻毒素浓度的监测，确保饮用水的安全。[/font][/size][size=3][/size][size=3][font=黑体]3.3[/font][/size][size=3][font=黑体].2 [/font][/size][size=3][font=黑体]上海某水源水库原水藻毒素检测[/font][/size][size=3][font='Times New Roman','serif']2009[/font][/size][size=3][font=宋体]年[/font][/size][size=3][font='Times New Roman','serif']8[/font][/size][size=3][font=宋体]月，在上海某水源水库原水（水库[/font][/size][size=3][font='Times New Roman','serif']A[/font][/size][size=3][font=宋体]）的进水处和出水处采集水样进行藻毒素检测。由图[/font][/size][size=3][font='Times New Roman','serif']3[/font][/size][size=3][font=宋体]可以看出，水库[/font][/size][size=3][font='Times New Roman','serif']A[/font][/size][size=3][font=宋体]中未检测出[/font][/size][size=3][font='Times New Roman','serif']MC-LR[/font][/size][size=3][font=宋体]和[/font][/size][size=3][font='Times New Roman','serif']MC-YR[/font][/size][size=3][font=宋体]这两种微囊藻毒素，且在进水处的[/font][/size][size=3][font='Times New Roman','serif']MC-RR[/font][/size][size=3][font=宋体]也仅为[/font][/size][size=3][font='Times New Roman','serif']108 ng/L[/font][/size][size=3][font=宋体]左右。原因可能是由于微囊藻毒素一般是由蓝藻释放产生的，而水库[/font][/size][size=3][font='Times New Roman','serif']A[/font][/size][size=3][font=宋体]中的藻类以绿藻为主，蓝藻数目相对较低，所以藻毒素浓度很低。[/font][/size][img]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2010/08/201008251538_238755_2149877_3.jpg[/img][font=黑体]图[/font]2 [font=黑体]水库（[/font]A[font=黑体]）原水藻毒素检测[/font]HPLC[font=黑体]色谱图[/font][size=4][font=黑体]4[/font][/size][size=4][font=黑体]结论[/font][/size][color=red][size=3][font=黑体][/font][/size][/color][size=3][font=宋体]本研究对藻毒素的监测过程中遇到的一些问题进行了探讨，并提出了优化措施，应用优化后的前处理和[/font][/size][size=3][font='Times New Roman','serif']SPE-HPLC[/font][/size][size=3][font=宋体]检测方法同时测定分析不同水源原水的[/font][/size][size=3][font='Times New Roman','serif']3[/font][/size][size=3][font=宋体]种微囊藻毒素[/font][/size][size=3][font=宋体]（MC-RR、YR、LR）[/font][/size][size=3][font=宋体]，取得较为理想的分析效果，其检出限和回收率可满足实际监测的要求。[/font][/size][size=3][font='Times New Roman','serif'][/font][/size][size=3]1)[/size][size=3][font=宋体]水样中胞外微囊藻毒素测定的前处理优化流程：水样经微孔滤膜过滤，滤液过[/font][/size][size=3]C18[/size][size=3][font=宋体]柱，[/font][/size][size=3] [/size][size=3][font=宋体]经[/font][/size][size=3]10%[/size][size=3][font=宋体]甲醇[/font][/size][size=3]+ 20%[/size][size=3][font=宋体]甲醇方案梯度淋洗，用[/font][/size][size=3]0.1% TFA-[/size][size=3][font=宋体]甲醇进行洗脱，[/font][/size][size=3] [/size][size=3][font=宋体]洗脱收集液用浓缩仪定容至[/font][/size][size=3]1mL[/size][size=3][font=宋体]。[/font][/size][size=3][font='Times New Roman','serif']2) HPLC [/font][/size][size=3][font=宋体]进样分析时，选用甲醇和[/font][/size][size=3][font='Times New Roman','serif']0.05% TFA[/font][/size][size=3][font=宋体]水溶液作为流动相进行等梯度洗脱，对于[/font][/size][size=3][font='Times New Roman','serif']MC-RR[/font][/size][size=3][font=宋体]、[/font][/size][size=3][font='Times New Roman','serif']MC-YR[/font][/size][size=3][font=宋体]和[/font][/size][size=3][font='Times New Roman','serif']MC-LR[/font][/size][size=3][font=宋体]有较好的分离效果，且保留时间适中，同时又可以尽可能地避免杂质干扰。[/font][/size]

采用了液相串联质谱法对动物源性水产品中的7种微囊藻毒素进行了检测。请各位指正。http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2013/07/201307182305_452258_1751239_3.jpghttp://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2013/07/201307182305_452259_1751239_3.jpg想详细了解的版友可以下载，内容很多，硕士论文啊

各位前辈，你们好： 我现在要分析仪有机指标：微囊藻毒素，根据国标5-69 GBT5750_8，有些技术专用词不懂，请各位大侠指教：1、请问什么是GF/C过滤啊？2、请问藻细胞冻融是什么意思啊？具体操作是什么？此外，请问有没有市面上有没有用索氏提取器上用石油醚提取4h的玻璃棉或是脱脂棉啊？盼各位大侠的指导！谢谢！http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2011/05/201105091711_293299_1638724_3.jpg

[align=center][font='helvetica'][size=21px][color=#333333]水中低含量微囊藻毒素[/color][/size][/font][font='helvetica'][size=21px][color=#333333]（[/color][/size][/font][font='helvetica'][size=21px][color=#333333]RR[/color][/size][/font][font='helvetica'][size=21px][color=#333333]）[/color][/size][/font][font='helvetica'][size=21px][color=#333333]高效[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/5p]液相色谱[/url]法检测[/color][/size][/font][/align][font='helvetica'][color=#333333]摘要[/color][/font][font='helvetica'][color=#333333] 本文用高效[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/5p][color=#3333ff]液相色谱[/color][/url]法检测水中微囊藻毒素（[/color][/font][font='helvetica'][color=#333333]RR[/color][/font][font='helvetica'][color=#333333]），针对水中微囊藻毒素含量低，难检出问题，对常规高效[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/5p][color=#3333ff]液相色谱[/color][/url]做了两种优化改进，在线富集进样、大定量进样，大大降低了检出限，获得了满意的结果。[/color][/font][font='helvetica'][color=#333333] 关键词[/color][/font][font='helvetica'][color=#333333] [/color][/font][font='helvetica'][color=#333333][url=https://insevent.instrument.com.cn/t/5p][color=#3333ff]液相色谱[/color][/url][/color][/font][font='helvetica'][color=#333333] [/color][/font][font='helvetica'][color=#333333]在线富集[/color][/font][font='helvetica'][color=#333333] [/color][/font][font='helvetica'][color=#333333]大定量进样[/color][/font][font='helvetica'][color=#333333] [/color][/font][font='helvetica'][color=#333333]微囊藻毒素[/color][/font][font='helvetica'][color=#333333] [/color][/font][font='helvetica'][color=#333333]检出限[/color][/font][font='helvetica'][color=#333333]前言[/color][/font][font='helvetica'][color=#333333] 微囊藻毒素（[/color][/font][font='helvetica'][color=#333333]RR[/color][/font][font='helvetica'][color=#333333]）[/color][/font][font='helvetica'][color=#333333]具有[/color][/font][font='helvetica'][color=#333333]较强的[/color][/font][font='helvetica'][color=#333333]毒性及危害性。随着中国水体富营养化程度[/color][/font][font='helvetica'][color=#333333]加剧，蓝藻水华和赤潮的发生逐渐增加。[/color][/font][font='helvetica'][color=#333333]80%[/color][/font][font='helvetica'][color=#333333]的蓝藻水华都可以检测出次生代谢产物[/color][/font][font='helvetica'][color=#333333]----[/color][/font][font='helvetica'][color=#333333]微囊藻毒素（[/color][/font][font='helvetica'][color=#333333]microcystins[/color][/font][font='helvetica'][color=#333333]，[/color][/font][font='helvetica'][color=#333333]MCs[/color][/font][font='helvetica'][color=#333333]），它对水体环境和人群健康的危害已成为全球关注的重大环境问题之一。[/color][/font][font='helvetica'][color=#333333] 环境改善[/color][/font][font='helvetica'][color=#333333]，[/color][/font][font='helvetica'][color=#333333]检测[/color][/font][font='helvetica'][color=#333333]、防控[/color][/font][font='helvetica'][color=#333333]和治理是必不可少的工作内容。本文主要介绍水中低含量[/color][/font][font='helvetica'][color=#333333]微囊藻毒素（[/color][/font][font='helvetica'][color=#333333]RR[/color][/font][font='helvetica'][color=#333333]）[/color][/font][font='helvetica'][color=#333333]的检测方法。[/color][/font][font='helvetica'][color=#333333] 本方法检出限低或超低，主要针对[/color][/font][font='helvetica'][color=#333333]水中低含量微囊藻毒素（[/color][/font][font='helvetica'][color=#333333]RR[/color][/font][font='helvetica'][color=#333333]）高效[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/5p][color=#3333ff]液相色谱[/color][/url]法检测[/color][/font][font='helvetica'][color=#333333]，[/color][/font][font='helvetica'][color=#333333]适用于饮用水、湖泊水、河水、地表水等[/color][/font][font='helvetica'][color=#333333]水样检测。[/color][/font] 本方法参考《GB/T 5750.8-2006 生活饮用水标准检验方法 有机物指标》中第13部分 微囊藻毒素，优化出两种检测方案。实验部分方案一：[align=left] 在线富集高效[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/5p][color=#3333ff]液相色谱[/color][/url]法检测。 [/align][align=center][img]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2022/09/202209011932297209_8902_2369266_3.png[/img][/align][align=center]图1 在线富集高效[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/5p][color=#3333ff]液相色谱[/color][/url]法检测流程图[/align] 仪器配置：高压输液泵2台，在线脱气机（两路以上脱气）1台，六通自动进样阀2个（1个带2ml定量环1套，一个带富集柱1根），预柱1根，色谱柱1根，柱温箱1台，紫外检测器1台，三通电磁阀1个，进样泵（或高效[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/5p][color=#3333ff]液相色谱[/color][/url]自动进样器）1台，工作站1套，配件1套（包括废液桶、管路、接头等）。 核心部件： 核心部件1：进样系统。进样系统包括两个进样阀，一个在定量环处连接适当的管路作为定量环，负责定量进样，另一个在定量环处连接富集柱，负责把大量的样品富集到富集柱这样一个小的容积内。两个进样阀的切换由程序按照进样过程时间表时间控制。[align=center][img]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2022/09/202209011932300237_5409_2369266_3.png[/img][/align][align=center]图2 六通自动进样阀[/align] 核心部件2：富集柱。富集柱有分体的和一体的，分体富集柱市面上较常见，包括柱体、柱芯，柱芯污染或故障后可随时更换，具有较好的性价比。选择和色谱柱相同或相近类型填料（粒径3.5μm～10μm，长度3㎝左右），能大量富集低浓度水样品。[align=center][img]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2022/09/202209011932303506_3493_2369266_3.png[/img][/align][align=center]图3 富集柱[/align] 核心部件3：色谱柱。该检测方法对色谱柱要求较高，要求色谱柱耐污染能力强，耐水性，分离速度快，分离效果好，色谱峰形好等。本文选择的这款色谱柱通过对孔径、比表面和碳含量等色谱参数的优化，绝佳的平衡了保留、分离度、耐污染关系，寿命较长。[align=center][img]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2022/09/202209011932303235_7720_2369266_3.png[/img][/align][align=center]图4 色谱柱[/align]色谱条件：色谱柱：ODS C[size=9px]18[/size]色谱柱，Venusil XBP (L) 4.6mm×150mm×5μm流动相：流动相A（色谱洗脱液）：乙腈：水：三氟乙酸=40%：60%：0.05%流动相B（富集液）：甲醇：水=15%：85%进样过程（以2ml进样体积为例）时间表，A、B输液泵保持持续运行[table][tr][td][align=center]时间（min）[/align][/td][td][align=center]进样状态[/align][/td][td][align=center]进样过程[/align][/td][/tr][tr][td][align=center]0[/align][/td][td]装样，进样泵启动[/td][td]样品由进样泵注入定量进样阀定量环中[/td][/tr][tr][td][align=center]1[/align][/td][td]富集，进样泵停止[/td][td]切换定量进样阀，样品由输液泵B带入富集进样阀富集柱中[/td][/tr][tr][td][align=center]4[/align][/td][td]进样[/td][td]切换富集进样阀，富集柱中样品由输液泵A带入色谱柱，样品进入色谱柱由洗脱液（流动相A）洗脱后进入检测器检测，最后排入废液桶中[/td][/tr][tr][td][align=center]14[/align][/td][td][align=center]定量、富集进样阀恢复初始状态，进样泵启动[/align][/td][td]通过切换进样泵前三通电磁阀，进样泵将清洗液注入定量进样阀，清洗定量环[/td][/tr][tr][td][align=center]15[/align][/td][td][align=center]进样泵停止[/align][/td][td]该进样、检测周期完成[/td][/tr][/table]流速：1ml/min检测器：紫外检测器检测波长：238nm柱温：35℃ 工作流程：输赢泵A、B保持正常运行。进样泵向定量进样阀注入处理好的样品，定量后切换该进样阀，样品由流动相B（富集液，来自输液泵B）带入富集进样阀富集柱，富集在富集柱中。切换富集进样阀，样品由流动相A（洗脱液，来自输液泵A）经过预柱后带入色谱柱，样品在色谱柱中经过流动相A洗脱逐渐分离，分离后的样品由流动相A带入紫外检测器检测，检测谱图及结果在电脑工作站中显示储存，检测完成后样品及流动相A流入废液桶中。进样泵完成对管路及进样阀清洗后各工作单元恢复初始，该检测周期完成。 试验对比（进样量相同，进样体积不同）： 直接进样20μl，标准样品浓度20ng/ml，色谱图情况[align=center][img]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2022/09/202209011932306387_4566_2369266_3.png[/img][/align][align=center]图5 微囊藻毒素（RR）标准样品浓度20ng/ml色谱图[/align] 该检测方法噪声约3.6μAu，样品峰高32μAu，标准样品浓度20ng/ml，按3倍噪声计算检出限，检出限约6.75 ng/ml。 在线富集进样2ml，标准样品浓度0.2ng/ml，色谱图情况[align=center][img]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2022/09/202209011932307364_8661_2369266_3.png[/img][/align][align=center]图6 微囊藻毒素（RR）标准样品浓度0.2ng/ml色谱图[/align] 该检测方法噪声约3.5μAu，样品峰高28μAu，标准样品浓度0.2ng/ml，按3倍噪声计算检出限，检出限约0.073 ng/ml。 直接进样20μl，标准样品浓度400ng/ml，色谱图情况[align=center][img]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2022/09/202209011932306672_3479_2369266_3.png[/img][/align][align=center]图7 微囊藻毒素（RR）标准样品浓度400ng/ml色谱图[/align] 该检测方法检测400ng/ml微囊藻毒素（RR），保留时间7.33min，峰高631，峰面积13205。 在线富集进样2ml，标准样品浓度4ng/ml，色谱图情况[align=center][img]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2022/09/202209011932309444_5108_2369266_3.png[/img][/align][align=center]图8 微囊藻毒素（RR）标准样品浓度4ng/ml色谱图[/align] 该检测方法检测4ng/ml微囊藻毒素（RR），保留时间7.76min，峰高542，峰面积12541。峰高比直接进样（等效进样量）略低，峰面积相当于直接进样的94.97%。 4ng/ml样品经过固相萃取、氮气吹干、定量等前处理富集后直接进样20μl，样品浓度等效直接进样400ng/ml，色谱图情况[align=center][img]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2022/09/202209011932310791_9645_2369266_3.png[/img][/align][align=center]图9 微囊藻毒素（RR）标准样品经过固相萃取等前处理色谱图[/align] 该检测方法检测，保留时间7.30min，峰高615，峰面积11495。峰高比直接进样（等效进样量）略低，峰面积相当于直接进样的87.05%。小结： 直接进样20μl，检出限约6.75 ng/ml；在线富集进样2ml，检出限约0.073 ng/ml，检出限比直接进样低92.47倍（进样量相同，进样体积相当于100倍），实现更低检出限（进样体积还可以更大，检出限会更低）检测。直接进样20μl，样品浓度400ng/ml，色谱峰面积13205；在线富集进样2ml，样品浓度4ng/ml，色谱峰面积12541，等效进样量峰面积是直接进样峰面积的94.97%（该处介绍的是富集过程中样品损耗情况。色谱检测标准品和样品在同一色谱系统中进行，采用外标法分析，外标法对检测结果影响很小）；经固相萃取、氮气吹干等前处理后进样20μl，样品浓度等效400ng/ml（不考虑前处理损耗），色谱峰面积11495，等效进样量峰面积是直接进样峰面积的87.05%。 在线富集高效[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/5p][color=#3333ff]液相色谱[/color][/url]法检出限低，富集过程中的损耗较实验室富集前处理损耗低，可实现水中低含量甚至超低含量微囊藻毒素（[font='times new roman']RR[/font]）高效[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/5p][color=#3333ff]液相色谱[/color][/url]法在线检测。 该方案的优势： 检出限非常低。样品中微囊藻毒素含量如果非常低的话，常规高效[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/5p][color=#3333ff]液相色谱[/color][/url]法是根本无法检测出来的（国标《GB/T 5750.8-2006 生活饮用水标准检验方法 有机物指标》是在实验室样品经过前处理，将5L水样浓缩到1ml，进样量20μl，检出限为0.06μg/L，不考虑前处理，直接进样检出限相当于6ng/ml，这个检出限在常规方法中算是低的）。该方法可根据样品中微囊藻毒素的含量选择适当的进样量，进样量0.01ml～1000ml（甚至更大）可选，进样体积由所安装的定量环容积决定。检出限能降低几十、几百、甚至几千倍，是低含量尤其是在线低含量微囊藻毒素水样检测的好方法。方案二： 大定量进样高效[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/5p][color=#3333ff]液相色谱[/color][/url]法检测。 在检测允许范围内进样量尽可能大（只针对低含量样品），保证色谱峰高足够高，以减小分析误差。[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/5p][color=#3333ff]液相色谱[/color][/url]法分析，进样量大会影响色谱峰宽及色谱峰形，所以进样量也只能在一个合理的范围，不能无限大。既要保证进样量大又要保证色谱峰宽及色谱峰形，色谱条件的选择非常关键，尤其是色谱柱和流动相。[align=center][img]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2022/09/202209011932310119_8947_2369266_3.png[/img][/align][align=center]图10 大定量进样高效[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/5p][color=#3333ff]液相色谱[/color][/url]法检测流程图[/align] 仪器配置：高压输液泵1台，六通自动进样阀1个（带1套0.5ml定量环），色谱柱1根，柱温箱1台，紫外检测器1台，三通电磁阀1个，进样泵（或高效[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/5p][color=#3333ff]液相色谱[/color][/url]自动进样器）1台，工作站1套，配件1套（包括废液桶、管路、接头等）。 核心部件：色谱柱。该检测方法对色谱柱要求较高，要求色谱柱耐污染能力强，耐水性，分离速度快，分离效果好，色谱峰形好等。本文选择的这款色谱柱通过对孔径、比表面和碳含量等色谱参数的优化，绝佳的平衡了保留、分离度、耐污染关系，寿命较长。[align=center][img]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2022/09/202209011932312862_9074_2369266_3.png[/img][/align][align=center]图11 色谱柱[/align]色谱条件：色谱柱：ODS C[size=9px]18[/size]色谱柱，Venusil XBP (L) 4.6mm×150mm×5μm流动相：乙腈：水：三氟乙酸=40%：60%：0.05%进样过程（以0.5 ml进样体积为例）时间表：[table][tr][td][align=center]时间（min）[/align][/td][td][align=center]进样状态[/align][/td][td][align=center]进样过程[/align][/td][/tr][tr][td][align=center]0[/align][/td][td]装样，进样泵启动[/td][td]样品由进样泵注入进样阀定量环中[/td][/tr][tr][td][align=center]1[/align][/td][td]进样，进样泵停止[/td][td]切换定量进样阀，样品由输液泵带入色谱柱中，样品进入色谱柱由流动相洗脱后进入检测器检测，最后排入废液桶中[/td][/tr][tr][td][align=center]14[/align][/td][td][align=center]定量进样阀恢复初始状态，进样泵启动[/align][/td][td]通过切换进样泵前三通电磁阀，进样泵将清洗液注入定量进样阀，清洗定量环[/td][/tr][tr][td][align=center]15[/align][/td][td][align=center]进样泵停止[/align][/td][td]该进样、检测周期完成[/td][/tr][/table]流速：1ml/min检测器：紫外检测器检测波长：238nm柱温：35℃ 工作流程：输液泵保持正常运行。进样泵向进样阀注入处理好的样品，定量后切换该进样阀，样品由流动相（来自输液泵）带入色谱柱，样品在色谱柱中经过流动相洗脱逐渐分离，分离后的样品由流动相带入紫外检测器检测，检测谱图及结果在电脑工作站中显示储存，检测完成后样品及流动相流入废液桶中。进样泵完成对管路及进样阀清洗后各工作单元恢复初始，该检测周期完成。 试验对比（进样量相同，进样体积不同）： 直接进样20μl，标准样品浓度20ng/ml，色谱图情况[align=center][img]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2022/09/202209011932312483_9082_2369266_3.png[/img][/align][align=center]图12 微囊藻毒素（RR）标准样品浓度20ng/ml色谱图[/align] 该检测方法噪声约3.6μAu，样品峰高32μAu，标准样品浓度20ng/ml，按3倍噪声计算检出限，检出限约6.75 ng/ml。 大定量进样0.5ml，标准样品浓度0.8ng/ml，色谱图情况[align=center][img]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2022/09/202209011932314152_8360_2369266_3.png[/img][/align][align=center]图13 微囊藻毒素（RR）标准样品浓度0.8ng/ml色谱图[/align] 该检测方法噪声约3.8μAu，样品峰高33μAu，标准样品浓度0.8ng/ml，按3倍噪声计算检出限，检出限约0.28 ng/ml。 直接进样20μl，标准样品浓度400ng/ml，色谱图情况[align=center][img]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2022/09/202209011932315266_8178_2369266_3.png[/img][/align][align=center]图14 微囊藻毒素（RR）标准样品浓度400ng/ml色谱图[/align] 该检测方法检测400ng/ml微囊藻毒素（RR），保留时间7.33min，峰高631，峰面积13205。 大定量进样0.5ml，标准样品浓度16ng/ml，色谱图情况[align=center][img]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2022/09/202209011932318086_573_2369266_3.png[/img][/align][align=center]图15 微囊藻毒素（RR）标准样品浓度16ng/ml色谱图[/align] 该检测方法检测16ng/ml微囊藻毒素（RR），保留时间7.63min，峰高568，峰面积12779。峰高比直接进样（等效进样量）略低，峰面积相当于直接进样的96.77%。 4ng/ml样品经过固相萃取、氮气吹干、定量等前处理富集后直接进样20μl，样品浓度等效直接进样400ng/ml，色谱图情况[align=center][img]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2022/09/202209011932319756_5075_2369266_3.png[/img][/align][align=center]图16 微囊藻毒素（RR）标准样品经过固相萃取等前处理色谱图[/align] 该检测方法检测，保留时间7.30min，峰高615，峰面积11495。峰高比直接进样（等效进样量）略低，峰面积相当于直接进样的87.05%。小结： 直接进样20μl，检出限约6.75 ng/ml；大定量进样0.5ml，检出限约0.28ng/ml，检出限比直接进样低24.11倍（进样量相同，进样体积相当于25倍），实现更低检出限检测。直接进样20μl，样品浓度400ng/ml，色谱峰面积13205；大定量进样0.5ml，样品浓度16ng/ml，色谱峰面积12779，等效进样量峰面积是直接进样峰面积的96.77%（该处介绍的是常规进样和大定量进样检测的差别。色谱检测标准品和样品在同一色谱系统中进行，采用外标法分析，外标法对检测结果影响很小）。 大定量进样高效[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/5p][color=#3333ff]液相色谱[/color][/url]法检出限低，进样过程中的损耗较实验室富集前处理损耗低，可实现水中低含量微囊藻毒素（[font='times new roman']RR[/font]）高效[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/5p][color=#3333ff]液相色谱[/color][/url]法在线检测。 优势：检出限低。样品中微囊藻毒素（RR）含量较低，常规高效[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/5p][color=#3333ff]液相色谱[/color][/url]法无法检出。该方法可根据样品中微囊藻毒素的含量选择适当的进样量（定量环），进样量在0.02 ml～0.6ml范围可选。这样检出限就能降低几倍到几十倍。仪器配置相对简单，成本低很多。该方法是样品中微囊藻毒素（RR）含量较低时比较理想（可以优先考虑）的检测方法。 结论：以上两种检测方案都能较好的检测含量较低的微囊藻毒素（RR）样品，区别是第一种方案进样量更大检出限更低，更适用于超低含量检测，但仪器配置较复杂，成本较高。第二种方案检出限没有第一种低，但仪器配置较简单，成本较低，适用于较低含量检测。具体检测时可根据实际情况选择理想的检测方法，从而达到更满意的结果。 以上两种方法检出限均较低，可供其它低含量样品高效[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/5p][color=#3333ff]液相色谱[/color][/url]法检测（在线富集进样或大定量进样）参考。参考文献[font='calibri']［[/font]1[font='calibri']］[/font][font='calibri']GB/T 5750.8-2006[/font] 生活饮用水标准检验方法 有机物指标.[font='calibri']［[/font]2[font='calibri']］[/font][font='calibri']GB/T 20466-2006 水中微囊藻毒素的测定[/font][font='calibri'].[/font][font='calibri']［[/font]3[font='calibri']］[/font][font='calibri']在线固相萃取-高效[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/5p][color=#3333ff]液相色谱[/color][/url]法测定水体中的多环芳烃 陈静等 分析化学（FENXI HUA XUE）研究报告 2014：[/font][font='calibri']1785-1790.[/font]