兔p53(p53)ELISA 检测试剂盒
本试剂仅供研究使用
试验原理:
p53试剂盒是固相夹心法酶联免疫吸附实验(ELISA).已知p53浓度的标准品、未知浓度的样品加入微孔酶标板内进行检测。先将p53和生物素标记的抗体同时温育。洗涤后,加入亲和素标记过的HRP。再经过温育和洗涤,去除未结合的酶结合物,然后加入底物A、B,和酶结合物同时作用。产生颜色。颜色的深浅和样品中p53的活性浓度呈比例关系。
试剂盒内容及其配制
试剂盒成份(2-8℃保存) | 96孔配置 | 48孔配置 | 配制 |
96/48份酶标板 | 1块板(96T) | 半块板(48T) | 即用型 |
塑料膜板盖 | 1块 | 半块 | 即用型 |
标准品:400ng/ml | 1瓶(0.6ml) | 1瓶(0.3ml) | 按说明书进行稀稀 |
空白对照 | 1瓶(1.0ml) | 1瓶(0.5ml) | 即用型 |
标准品稀释缓冲液 | 1瓶(5ml) | 1瓶(2.5ml) | 即用型 |
生物素标记的抗p53抗体 | 1瓶(6ml) | 1瓶(3.0ml) | 即用型 |
亲和链酶素-HRP | 1瓶(10ml) | 1瓶(5.0ml) | 即用型 |
洗涤缓冲液 | 1瓶(20ml) | 1瓶(10ml) | 按说明书进行稀释 |
底物A | 1瓶(6.0ml) | 1瓶(3.0ml) | 即用型 |
底物B | 1瓶(6.0ml) | 1瓶(3.0ml) | 即用型 |
终止液 | 1瓶(6.0ml) | 1瓶(3.0ml) | 即用型 |
自备材料
1. 蒸馏水。
2. 加样器:5ul、10ul、50ul、100ul、200、500ul、1000ul。
3. 振荡器及磁力搅拌器等。
安全性
1. 避免直接接触终止液和底物A、B。一旦接触到这些液体,请尽快用水冲洗。
2. 实验中不要吃喝、抽烟或使用化妆品。
3. 不要用嘴吸取试剂盒里的任何成份。
兔p53(p53)ELISA 检测试剂盒操作注意事项
1. 试剂应按标签说明书储存,使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃,不可保存。
2. 实验中不用的板条应立即放回包装袋中,密封保存,以免变质。
3. 不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。保质前使用。
4. 使用一次性的吸头以免交叉污染,吸取终止液和底物A、B液时,避免使用带金属部分的加样器。
5. 使用干净的塑料容器配置洗涤液。使用前充分混匀试剂盒里的各种成份及样品。
6. 洗涤酶标板时应充分拍干,不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。
7. 底物A应挥发,避免长时间打开盖子。底物B对光敏感,避免长时间暴露于光下。避免用手接触,有毒。实验完成后应立即读取OD值。
8. 加入试剂的顺序应一致,以保证所有反应板孔温育的时间一样。
9. 按照说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。
兔p53(p53)ELISA 检测试剂盒样品收集、处理及保存方法
1、 血清-----操作过程中避免任何细胞刺激。使用不含热原和内毒素的试管。收集血液后,1000×g离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。
2、 血浆-----EDTA、柠檬酸盐、肝素血浆可用于检测。1000×g离心30分钟去除颗粒。
3、 细胞上清液---1000×g离心10分钟去除颗粒和聚合物。
4、 保存------如果样品不立即使用,应将其分成小部分-70 ℃保存,避免反复冷冻。尽可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量颗粒,检测前先离心或过滤。不要在37℃或更高的温度加热解冻。应在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。
试剂的准备
1. 标准品:标准品的系列稀释应在实验时准备,不能储存。稀释前将标准品振荡混匀。稀释比例按下表中进行:
400ng/ml | (6号标准品) | 原倍浓度不用稀释直接加入50ul。 |
200ng/ml | (5号标准品) | 100ul的原倍标准品加入100ul的标准品稀释液 |
100ng/ml | (4号标准品) | 100ul的5号标准品加入100ul的标准品稀释液 |
50ng/ml | (3号标准品) | 100ul的4号标准品加入100ul的标准品稀释液 |
25ng/ml | (2号标准品) | 100ul的3号标准品加入100ul的标准品稀释液 |
12.5ng/ml | (1号标准品) | 100ul的2号标准品加入100ul的标准品稀释液 |
0ng/ml | (空白对照) | 原始浓度不用稀释直接加入50ul。 |
2. 洗涤缓冲液(50×)的稀释:蒸馏水50倍稀释。
兔p53(p53)ELISA 检测试剂盒操作步骤
1. 使用前,将所有试剂充分混匀。不要使液体产生大量的泡沫,以免加样时加入大量的气泡,产生加样上的误差。
2. 根据待测样品数量加上标准品的数量决定所需的板条数。每个标准品和空白孔建议做复孔。每个样品根据自己的数量来定,能使用复孔的尽量做复孔。
3. 加入稀释好后的标准品50ul于反应孔、加入待测样品50ul于反应孔内。立即加入50ul的生物素标记的抗体。盖上膜板,轻轻振荡混匀,37℃温育1小时。
4. 甩去孔内液体,每孔加满洗涤液,振荡30秒,甩去洗涤液,用吸水纸拍干。重复此操作3次。如果用洗板机洗涤,洗涤次数增加一次。
5. 每孔加入80ul的亲和链酶素-HRP,轻轻振荡混匀,37℃温育30分钟。
6. 甩去孔内液体,每孔加满洗涤液,振荡30秒,甩去洗涤液,用吸水纸拍干。重复此操作3次。如果用洗板机洗涤,洗涤次数增加一次。
7. 每孔加入底物A、B各50ul,轻轻振荡混匀,37℃温育10分钟。避免光照。
8. 取出酶标板,迅速加入50ul终止液,加入终止液后应立即测定结果。
9. 在450nm波长处测定各孔的OD值。
性能
1. 灵敏度:最小的检测浓度小于1号标准品。稀释度的线性。样品线性回归与预期浓度相关系数R值为0.990。
2. 特异性:不与人其它细胞因子反应。
3. 重复性:板内、板间变异系数均小于10%。
4.局限性:6号标准品以上的结果为非线性的,根据此标准曲线无法得到精确的结果。
结果 判 断 与 分 析
1、仪器值:于波长450nm的酶标仪上读取各孔的OD值
2、以吸光度OD值为纵坐标(Y),相应的p53标准品浓度为横坐标(X),做得相应的曲线,样品的p53含量可根据其OD值由标准曲线换算出相应的浓度。
3、检测值范围:0-400ng/ml
4、敏感度: 1.0ng/ml
相关产品如下:
XY-EL-H0388c 人脂筏特征蛋白2(FLOT2)ELISA试剂盒 Human FLOT2 (Flotillin 2) ELISA Kit
XY-EL-H0389c 人糖盏蛋白(GC)ELISA试剂盒 Human GC (Glycocalicin) ELISA Kit
XY-EL-H0390c 人OJ抗体/抗异亮氨酰tRNA合成酶抗体(OJ/IleRS)ELISA试剂盒 Human OJ/IleRS (Anti-OJ-Antibody) ELISA Kit
XY-EL-H0391c 人谷氧还蛋白3(GLRX3)ELISA试剂盒 Human GLRX3 (Glutaredoxin 3) ELISA Kit
XY-EL-H0392c 人胃内因子(GIF)ELISA试剂盒 Human GIF (Gastric Intrinsic Factor) ELISA Kit
XY-EL-H0393c 人P62抗体(AP62A)ELISA试剂盒 Human AP62A (Anti-P62 Antibody) ELISA Kit
XY-EL-H0394c 人C4结合蛋白β(C4BPβ)ELISA试剂盒 Human C4BPβ (C4 Binding Protein Beta) ELISA Kit
XY-EL-H0395c 人碳酸酐酶IV(CA4)ELISA试剂盒 Human CA4 (Carbonic Anhydrase IV) ELISA Kit
XY-EL-H0396c 人C4结合蛋白α(C4BPα)ELISA试剂盒 Human C4BPα (C4 Binding Protein Alpha) ELISA Kit
XY-EL-H0397c 人糖基化磷脂酰肌醇特异性磷脂酶D1(GPLD1)ELISA试剂盒 Human GPLD1 (Glycosylphosphatidylinositol Specific Phospholipase D1) ELISA Kit
XY-EL-H0398c 人脯氨酸/精氨酸丰富端亮氨酸丰富重复蛋白(PRELP)ELISA试剂盒 Human PRELP (Proline Arginine Rich End Leucine Rich Repeat Protein) ELISA Kit
XY-EL-H0399c 人抗磷脂酰丝氨酸抗体(APSA)ELISA试剂盒 Human APSA (Anti-Phosphatidyl Serine Antibody) ELISA Kit
XY-EL-H0400c 人抗磷脂抗体(APA)ELISA试剂盒 Human APA (Anti-Phospholipid Antibody) ELISA Kit
XY-EL-H0401c 人抗丙氨酰tRNA合成酶抗体(Anti-AlaRS/Anti-PL12)ELISA试剂盒 Human Anti-AlaRS (Anti-Alanyl-tRNA Synthetase/Anti-PL12-Antibody) ELISA Kit
XY-EL-H0403c 人苏氨酰tRNA合成酶(TARS)ELISA试剂盒 Human TARS (Threonyl tRNA Synthetase, cytoplasmic) ELISA Kit
XY-EL-H0404c 人通用转录因子II A肽1(GTF2A1)ELISA试剂盒 Human GTF2A1 (General Transcription Factor IIA, Polypeptide 1) ELISA Kit
XY-EL-H0405c 人鸟苷酸环化酶激活因子2A(GUCA2A)ELISA试剂盒 Human GUCA2A (Guanylate Cyclase Activator 2A) ELISA Kit
XY-EL-H0406c 人胰岛素样蛋白3(INSL3)ELISA试剂盒 Human INSL3 (Insulin Like Protein 3) ELISA Kit
XY-EL-H0407c 人胰岛素样蛋白5(INSL5)ELISA试剂盒 Human INSL5 (Insulin Like Protein 5) ELISA Kit
XY-EL-H0409c 人钙非依赖性磷脂酶A2(iPLA2)ELISA试剂盒 Human iPLA2 (Phospholipidase A2, Calcium Independent) ELISA Kit
XY-EL-H0410c 人鸟苷酸环化酶激活因子2B(GUCA2B)ELISA试剂盒 Human GUCA2B (Guanylate Cyclase Activator 2B) ELISA Kit
XY-EL-H0411c 人颗粒酶K(GZMK)ELISA试剂盒 Human GZMK (Granzyme K) ELISA Kit
XY-EL-H0413c 人花生四烯酸脂加氧酶3(ALOXE3)ELISA试剂盒 Human ALOXE3 (Arachidonate Lipoxygenase 3) ELISA Kit
XY-EL-H0414c 人细胞色素P450家族成员26A1(CYP26A1)ELISA试剂盒 Human CYP26A1 (Cytochrome P450, family 26, subfamily A, polypeptide 1) ELISA Kit
XY-EL-H0415c 人血红蛋白(HB)ELISA试剂盒 Human HB (Hemoglobin) ELISA Kit
XY-EL-H0416c 人全细胞色素C合酶(HCCS)ELISA试剂盒 Human HCCS (Holocytochrome C Synthase) ELISA Kit
XY-EL-H0417c 人钙/钙调蛋白依赖性蛋白激酶IIα(CAMK2α)ELISA试剂盒 Human CAMK2α (Calcium/Calmodulin-Dependent Protein Kinase II Alpha) ELISA Kit
XY-EL-H0418c 人Bcl2关联永生基因3(BAG3)ELISA试剂盒 Human BAG3 (Bcl2 Associated Athanogene 3) ELISA Kit
XY-EL-H0419c 人芳基硫酸酯酶B(ARSB)ELISA试剂盒 Human ARSB (Arylsulfatase B) ELISA Kit
更多
更多
企业名称
上海信裕生物技术有限公司
企业信息已认证
企业类型
信用代码
310112001202097
成立日期
2012-08-17
注册资本
50
经营范围
上海信裕生物技术有限公司
公司地址
上海市松江区新九广场卖新公路2077号3楼8306室
客服电话