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简介: 代谢流量组是研究代谢途径中代谢反应速率的组学,反应了基因、蛋白质和代谢物相互作用对代谢网络的综合效应,是唯一不能被直接测量,需要数学模型分析的组学。因此,准确测定代谢物及其同位素异素体的含量至关重要。本文针对中心碳代谢物稳定性
简介: 代谢流量组是研究代谢途径中代谢反应速率的组学,反应了基因、蛋白质和代谢物相互作用对代谢网络的综合效应,是唯一不能被直接测量,需要数学模型分析的组学。因此,准确测定代谢物及其同位素异素体的含量至关重要。本文针对中心碳代谢物稳定性差、含量低的特点,利用统计分析等技术对同位素标记培养的细胞样本从细胞获取、淬灭和提取等环节进行了前处理方法的优化。然后,采用超高效液相色谱-高分辨质谱联用技术建立了中心碳代谢物标准品库,确保对每种同位素异素体的准确定性与定量分析。利用建立的标准分析方法,成功找到了绿针假单胞菌代谢途径中的合成生物学改造靶点,指导构建了吩嗪-1-甲酰胺高产菌株,证明了所建立的代谢流量标准分析方法的可行性。该方法在精准医学和合成生物学领域将具有广泛的应用前景。
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