试用装活动试用装申请方式 拨打热线：400-6813-863，即可申请！ 产品信息名称:FGF-2 G3, bFGF STAB, Thermostable FGF-2。分子量:约19.0kDA来源:亚麻荠属植物种子纯度：≥ 95% measured by SDS page活性：比活性为EC50 0.5 ~ 1.0ng/ml。内毒素水平：低内毒素水平≤0.005ng/µg(≤0.005EU/ug蛋白)，采用鲎试剂测定Similarity:人类(99%)，牛(99%)，猪(99%)，小鼠(94%)。 产品优势* 热稳定性高：持续高活性，细胞培养更稳定* 周末无需更换培养基：减少污染，降低50%人工与试剂成本* 活性稳定：长达20天的半衰期，活性长期保持稳定 * 纯度高：有植物系统生产，纯度高达95%-99% 产品热点应用 试用小贴士活动对象：终端客户试用装数量有限，先到先得为保证更多单位可以尽快用上产品进行相关研究，同一课题组的多人参加活动或重复提交表单，将不予累计赠送，敬请谅解需在收到试用装1-3个月内反馈试用结果本活动最终解释权归普瑞麦迪（北京）实验室有限公司所有

产品介绍无糖皮质激素原代上皮培养基是一种完全定义的培养基配方是CnT-PR培养基的改良版本，用于从皮肤、角膜、牙龈、乳腺和膀胱组织中分离和扩增上皮细胞。它含有PCT因子，可最大限度地保留增殖祖细胞，延长寿命，并最大限度地减少分化造成的损失。也不含酚红或抗生素/抗真菌药。CnT-PR-CSF是专为不使用皮质类固醇的环境。根据应用情况，可以自行补充皮质类固醇产品应用1 在无皮质类固醇的环境下工作:消除皮质类固醇的抗炎和免疫抑制作用，使您能够观察自然细胞行为筛选药物并检测免疫反应研究细胞信号传导途径、基因表达模式和对刺激的反应评估特定细胞的活力、增殖和分化类型2 享受改变皮质类固醇水平的自由:在CnT-PR-CSF培养基中补充皮质类固醇，以模拟细胞中CS水平升高的条件免疫和炎症系统的抑制研究产品优势 CnT培养基建立模型的特异性细胞行为与体内样试验的反应性和敏感性一致所有产品均基于通用的基础配方，实现跨多个应用的无缝过渡批次间一致且不含动物源成分的培养基提供准确和高度可复制的2D/3D细胞模型高质量培养基支持临床级应用的建立更多产品选购指南

FIDA Biosystems是一家创新的生物技术公司，其专利的流体动力分散技术（FIDA）通过第一性物理原理直接获取绝对的流体动力学半径（Rh）的变化来表征生物分子的行为和特征。FIDA Biosystems公司推出的最新款产品Fida Neo涵盖亲和力表征、亲和动力学表征、分子质量表征三大功能，是全球唯一一款集多种分子结构、功能、质控表征于一体的生物物理分析平台，一次实验即可获得互作与分子质控的数据，让互作的数据有“法”可依。FIDA技术无需固定、无需加热，甚至无需标记，可兼容所有缓冲液，由于采用第一性原理进行表征，对现有分子互作技术是一次升级。FIDA技术无论在传统的生物大分子、小分子互作分析，还是三元复合物，血清、血浆、粗提物中互作分析都有很好的适用性，而且在一些传统互作技术具有挑战性的领域，例如免纯化样本、脂质体、外泌体、GPCR互作分析领域具有独特的优势，FIDA技术扩展了互作方法的应用领域，非常有利于实验平台进行分子互作仪器技术升级。FIDA技术在分子质量表征方面同样优秀，一次运行只需4微升样品4分钟的时间即可获取多达8个质量参数，其中流体力学半径(Rh)和粘度（Viscosity）为绝对数值，黏性（Stickiness）是FIDA的独家指标，聚集和多分散系数（PDI）为量化参数。FIDA可以用在任何蛋白相关的实验，包括蛋白质控，蛋白稳定性筛选、制剂筛选等常规方向，还可在液-液相分离（LLPS），冷冻电镜样本制备质控、蛋白表达体系筛选等领域有很好的解决方案。FIDA自2019年发布以来全球已有近百家客户，分布在全球高水平的研究院、大学、以及领先的生物制药公司。普瑞麦迪（北京）实验室技术有限公司于2024年5月与FIDA Biosystems公司确立了合作关系，正式成为其公司全线产品的中国区总代理，后续将为中国的用户提供FIDA产品和服务，普瑞麦迪携手中国分子互作和分子稳定性相关研究用户，为中国高水平科研助力。一台FIDA仪器可获得* 亲和力 (KD)* 动力学 (kon & koff)* 量化（聚集体，轻相浓度，颗粒大小分布等）* 8 个质量参数/每个数据点：Size, Aggregation, Viscosity, Stickiness, PDI, Labelling Quality, PDB Correlator & Sample Loss* 高通量（2x96孔板或50x1.5ml瓶产品特点无固定相：溶液中直接检测分子相互作用无标记或荧光标记灵敏度：Rh范围0.5-500nm分辨率：检测到＜5%Rh变化亲和力范围：pM-mM分析物上样体积：≤4μL每个数据点8个质控参数适用于各种样本类型，包括免纯化蛋白、无缓冲液限制

大多数商业SPR仪器使用的是一种常见的SPR相关棱镜耦合器的光学装置。这种组件将光耦合到金属表面，产生表面等离子体现象。在传统的SPR实验装置中，用户必须使用折射率匹配的流体将涂有薄层金的玻璃芯片粘附到棱镜上。镀金玻璃芯片通过位于芯片基板下方的棱镜进行照明。棱镜和芯片之间的空间填充有折射率匹配的流体，通常是浸渍油或弹性流体，其具有适当的折射率以促进光与传感器芯片的相互作用，从而产生表面等离子体激元。图 1 传统的SPR设置使用浸油粘附在棱镜上的镀金载玻片然而，这种流体的使用可能会带来一些挑战。首先，它作为浸油的性质意味着它可以流到芯片的侧面，这可能会影响镀金芯片在棱镜上的定位，并使其在流动池中的安装变得复杂化。此外，流体的滑溜特性会导致芯片在棱镜上移动，可能影响光学对准，从而影响信号。最后，由于流体在接触时会发生扩散，所以需要在安装下一个金芯片之前仔细清洁流动池，这也显著增加了系统设置和清洁的时间。 Affinité's SPR的优势相比之下，Affinité的无透镜SPR系统提供了更有效的解决方案。该系统采用镀金传感器，将金层直接结合到微型棱镜基板上，从而消除了对折射率匹配物质的需求。传感器的这一特征大大减少了安装传感器所需的时间，并消除了添加浸油的需要。图 2 Affinité的金传感器将金层与微型棱镜相结合Affinité的任何分子互作仪的传感器安装过程都非常简单且用户友好。安装我们的传感器只需打开旋臂，将传感器面朝下放入腔室中，关闭旋臂，然后使微流控通道中充满缓冲液。该过程不需要额外的步骤或光学对准。结论Affinité的无透镜SPR系统旨在通过简化传感器安装、减少设置时间和解决传统设置中常见的问题来改进SPR实验。我们努力为SPR分析在各个应用领域的发展做出贡献，希望使其对研究人员和科学家更容易使用。Affinité 个人型SPR分子互作仪Affinité Instruments个人型SPR分子互作仪系列产品主要包括P4SPR 2.0、P4PRO & Affipump和P4PRO +，新一代SPR设备不仅兼具强大的分子互作检测和分析的能力，而且极具性价比，是百万元以内即可拥有的四通道分子互作仪。特点基于SPR原理，实时、无标记、检测相互作用搭配先进的微流控技术，实现高性能和高准确性10分钟内完成1个样本测试一组实验可获得结合特异性、亲和力、动力学等数据四通道检测，结合参照通道信号，可进行背景扣除，获得可信数据仪器稳定，操作简单，维护简便采用注射泵组件，控制精准，信号稳定仪器性价比高，单个实验室即可负担AfficoatTM芯片可减少SPR试验中的非特异性结合芯片耗材成本低，大大降低仪器运行成本 普瑞麦迪（北京）实验室技术公司作为加拿大Affinité Instruments在中国的总代理，欢迎各位专家老师前来咨询了解个人型SPR分子互作仪系列产品。我们拥有专业的技术服务团队，可以随时交流分子互作实验设计与方案的选择。同时，我们还提供完备的亲和力检测服务，收到样品最快不到一周即可出具SPR分析结果。我们不仅有先进的仪器，还拥有有专业的技术团队，全面助力您的分子互作研究。

在医学领域，技术的进步常常意味着更快、更准确的诊断和治疗方法。而今，我们引领医学进步的道路，带来了一项技术——TIGR组织研磨分离仪，以下简称TG。这项技术将彻底改变我们对于细胞诊断的认识，让医学界迈入了一个全新的时代。 TG，是一种基于反向旋转的机械解离装置。通过预先编程的交替切割和研磨步骤，它能够快速、高效地从固体组织中分离出单个活性细胞，无需使用酶类试剂。这项技术的优势不仅在于快速，更在于保留了细胞的生物活性和形态完整性，为后续的诊断和治疗提供了可靠的基础。手术期间快速准确的组织病理诊断对临床决策至关重要。目前常用的术中咨询病理学方法耗时、劳动力成本高，并需要受过训练的病理学家的专业知识。 在这里，研究团队引入了一种替代技术（快速、无标记的固体组织活检诊断方法），通过依次评估悬浮的单个细胞的物理表型，实现了对活检样本进行快速、无标记的分析。该方法结合了使用TIGR组织研磨分离仪进行无酶机械解离组织，快速简便地分离出活性单个细胞，以及使用RT–FDC对成千上万个单个细胞的细胞物理表型进行顺序评估。 这种新的诊断流程将组织的无酶机械解离与测量速率为100-1,000个细胞/秒的实时可变形细胞计数仪和基于机器学习的分析相结合。从单个细胞的明场图像中提取的物理表型参数可以用于区分各种组织中的细胞亚群，而无需先验知识或分子标记。此外，我们展示了我们的方法在炎症性肠病诊断中的潜力。通过无监督的维度降低和逻辑回归，我们准确区分了小鼠和人类活检样本中的健康和肿瘤组织。该方法在30 min内提供结果，为快速、无标记的诊断流程奠定了基础，以检测固体活检中的病理变化，适用于术中诊断和病理变化。这项技术的应用范围广泛，不仅可以用于研究领域的细胞分析，也可以在临床诊断中大显身手。优势1TG配合RT-FDC技术先进的微流控芯片，有高速相机和智能数据处理软件，实现实时形态学、机械和荧光参数的获取和分析。RT-FDC技术通过实时监测细胞形态和变形，还可以通过分析细胞的变形、大小等参数,为科研人员提供了更加丰富的数据维度, 进行更加精准的诊断，甚至可以用于癌症的早期检测和疾病的预后评估。优势2除此之外，TG还具有无酶、高通量的特点，使其在临床应用中具备了巨大的优势。它不仅可以用于术中诊断，还可以用于实时监测疾病的进展和治疗效果，为临床医生提供了更加及时、精准的诊断和治疗方案。首先，我们筛选了不同的小鼠组织，并评估了机械解离组织后的细胞产量、存活率以及RT–FDC测量的可行性。我们展示了仅基于图像提取的物理参数就可以区分组织细胞的亚群，而无需先验知识或额外的分子标记，这可以增强传统的流式细胞术。我们还展示了我们的方法可以通过在微流控系统中测量细胞变形来确定结肠组织中的炎症变化。此外，我们还检查了来自小鼠和人类结肠的冷冻和新鲜活检样本，并通过主成分分析（PCA）和机器学习对多维数据进行分析，展示了RT–FDC可以区分健康和癌变组织。这些发现表明，使用RT–FDC评估组织来源的单个细胞的物理表型是一种检测炎症或恶性状态的替代策略。我们的流程可以在30 min内提供结果，并可以在不偏见和无标记的情况下识别和表征组织中的细胞群体的潜力。结果机械解离组织的物理表型在评估细胞的物理表型之前，面临的第一个挑战是在几分钟的时间内快速从固体组织中提取单个细胞，同时旨在最大程度准确地代表细胞亚群的异质性。为此，我们使用了TG，这是一种基于反向旋转的研磨齿的机械解离装置（图1），装在锥形底离心管中。该装置自动执行预定义的交替切割和研磨步骤，以从固体组织中分离出单个细胞。使用TG或常规酶解方案处理了十种不同的小鼠组织进行比较。大多数组织的存活率为70–90％；细胞产量与酶解离相似且取决于组织种类。机械解离的关键优势在于处理时间不到5 min/样本，而不是酶解方法的数十分钟甚至几个小时。处理速度可能有助于接近原位条件以此来保留生化和生物物理表型。图1| 物理表型分析过程示意图组织样品被切割成小块并放入含有培养基的组织研磨器内转子中。通过预先编程的自动执行的顺时针和逆时针旋转序列进行机械解离。解离的细胞被离心并悬浮在测量缓冲液中。样品被加载到微流控芯片上，并使用RT-FDC进行分析。对典型的大约10,000个细胞的每个单个的亮场图像进行捕获。从图像中提取各种特征，用于多维分析。总的来说，从组织到结果的整个过程不到30 min。 使用组织的机械解离和基于物理表型的无标记分析时，对于肝脏这样的特定组织，这种方法是否能够真实地代表组织中存在的细胞类型的分布进行了仔细研究。在小鼠肝组织解离后，通过细胞形态和大小测量，确定横截面细胞面积大于150平方微米的细胞为肝细胞。肝细胞是肝脏的主要实质细胞，占肝细胞总数的70％，近80％的肝脏体积。使用TG获得的细胞悬液中，肝细胞占总细胞的平均比例为52.5％，通过机械解离获得的细胞悬液中与酶解消化相比更接近组织中的真实比例。利用细胞大小识别不同的肝细胞亚群，这些亚群与不同倍性的肝细胞相关联。 在RT-FDC测量中，数百个单个细胞悬浮在高粘度的甲基纤维素缓冲液中，经过微流控通道狭缩。在这个过程中，细胞受到剪切应力和压力梯度的影响，导致其变形，并且每个细胞的图像被获取。通过实时计算图像中的几个物理参数，包括细胞的变形、大小、亮度、亮度标准差、长宽比和面积比。此外，通过荧光模块检测细胞表面标记的表达情况。 图2展示了从肝脏、结肠和肾脏中提取的细胞的物理参数分布示例。每个聚类代表具有相似物理表型和表面标记表达的细胞组成的群体。通过图像派生的物理参数，例如细胞大小和平均亮度，可以纯粹地区分出上皮细胞群体，而无需使用额外的荧光抗体面板。在结肠上皮细胞中，可以根据亮度和大小确定多个细胞聚类。在肾脏的白细胞群体中，也可以基于细胞大小和变形参数找到不同的聚类。图2| 小鼠肝脏、结肠和肾脏样本细胞物理参数的说明性散点图a，从肝脏分离的细胞的平均亮度与细胞大小的代表性散点图，显示大量细胞簇。标记的细胞群（形成细胞大小为 25-50 μm2 且亮度平均值在 100-115形成了一个明显的簇）富含 EpCAM 阳性（上皮）细胞，但不含 CD31 阳性（内皮）细胞或 CD45 阳性细胞（白细胞））。FITC，异硫氰酸荧光素；PE、藻红蛋白；APC，别藻蓝蛋白。b，EpCAM 和 CD45 细胞表面标记染色的结肠细胞的说明性散点图。在 EpCAM 阳性群体中，可以根据物理参数（例如亮度和细胞大小）的密度图可以区分7个细胞亚群。c，EpCAM 和 CD45 染色的肾细胞的说明性散点图。在 CD45 群体中，根据细胞大小和变形的相似性确定了4个亚群。散点图中的颜色图表示事件密度。 RT–FDC还可用于捕获细胞相互作用。使用长宽比和细胞大小参数，我们在胸腺、脾脏和肾脏样本中确定了细胞双体。许多双体由两种不同的细胞类型组成，根据细胞表面标记来判断（图3）。通道内的细胞位置与荧光峰的位置相结合，使我们能够确定，例如，双体由白细胞（CD45+）和内皮细胞（CD31+）组成。使用RT–FDC排序模块，可以无标记地分离细胞双体进行进一步的分子分析和下游应用，包括对组织中相互作用的免疫细胞进行研究。图3| 使用RT-FDC检测细胞二聚体代表性的细胞从小鼠a胸腺，c脾脏和e肾脏 分离的细胞大小与纵横比的散点图，显示了识别细胞二聚体的门控策略。在b胸腺和d脾脏中鉴定的细胞二聚体及f肾脏中的对应荧光迹线（b、d），显示了白细胞（CD45）与内皮细胞（CD31）相连接，或（f）两个白细胞的相互作用。 人组织制备从埃尔兰根病理学研究所获得的肿瘤或健康组织手术切除的人类活检样本，立即置于含有10% 胎牛血清（FBS）、1% GlutMAXTM、1% HEPES和1% 青霉素/链霉素的DMEM Advanced培养基中，并存放在4 °C下，立即处理或在液氮中冷冻以备后用。组织解离和单细胞制备使用TissueGrinder（TG）进行组织解离。简单地说，将组织样本切成约1-2 mm大小的小块，并放入800μL含有2% FBS的DMEM于TG的转子中。将转子单元放置在一个50 ml离心管的盖子中，带有100 μm细胞筛的定子插入到转子的顶部。将50 ml离心管放置在盖子上，旋紧并放置在TissueGrinder设备上（见图1）。每种组织类型的研磨过程参数总结在表1中。在研磨过程之后，将离心管倒置到架子上，打开，并用5 ml DMEM，2% FBS冲洗细胞过滤器。流过物被转移到15 ml离心管中，并在300 g离心8 min。然后抽取上清液，将细胞沉淀用2 ml PBS(含2% FBS)洗涤，通过带有细胞过滤器盖的FACS管，并在300 g离心5 min。将细胞沉淀悬浮在高粘度测量缓冲液中，该缓冲液由稀释在无钙镁磷酸盐缓冲液（PBS）中的0.6%（w/w）甲基纤维素（4,000 cPs; Alfa Aesar）制备而成。表1：用于机械解离的小鼠器官和相应的TG方案流程，以及用于RT-FDC测量的微流控芯片大小通过细胞的物理表型来鉴定组织炎症炎症性肠病（IBD），如克罗恩病和溃疡性结肠炎，是与受损的上皮/黏膜屏障以及免疫细胞的激活/招募相关的肠道慢性炎症性疾病。尽管IBD的病因尚未完全理解，但我们对IBD的理解很大程度上来自实验动物模型的研究。其中一种模型是将原始T细胞转移入Rag1缺陷小鼠中诱导实验性结肠炎（慢性结肠炎的T细胞转移模型，以下简称转移性结肠炎）。然后通常通过来自结肠组织的用伊红染和伊妥珠染的切片生成的组织病理学评分来量化其严重程度。 在转移性结肠炎动物模型中对结肠细胞的物理表型变化进行的调查。通过细胞的变形与大小的散点图（见图4），发现疾病组织中的细胞似乎比健康组织中的细胞变形较小。在检查CD45+细胞后，发现转移性结肠炎样本中存在大量变形较小的白细胞，可能是淋巴细胞。总体上，转移性结肠炎样本的中位数变形显著减少，并且伴随着白细胞百分比的显著增加，符合淋巴细胞的浸润。细胞的中位数变形与白细胞百分比呈强烈的负相关。此外，细胞大小和变形的中位数值与专家的组织病理学评分相关。值得注意的是，健康组织比患病组织更难机械分离成单个细胞，患病组织产生了更多的分析事件。 我们观察到，在炎症期间细胞的物理表型发生变化，加上越来越多的证据表明慢性炎症与恶性肿瘤相关，这导致我们推测我们的方法可能会检测到肿瘤活检样本的变化。我们证实了这种可能性，对于小鼠和人类样本都是如此。图4| 通过 RT-FDC 进行的细胞物理表型反映了组织炎症a，与健康小鼠结肠组织（对照）相比，从转移结肠炎组织样本（TC）分离的细胞的细胞大小与形变散点图；具有相应的细胞大小和变形直方图。b，对相同的两个结肠样本进行CD45阳性细胞门控，显示转移结肠炎样本中白细胞的富集，并伴随着物理表型参数的变化。散点图中的颜色图表示事件密度。c，a 和 b 中所示样本的核密度估计图，其中等高线标记为 0.5（浅色阴影，外轮廓）和 0.95（深色阴影，内轮廓）水平。d， 中值变形和CD45阳性细胞百分比的量化（三个独立实验中n = 14只生物学独立的动物）。方框从第 25 个百分位延伸到第 75 个百分位，中间有一条线；晶须跨越 1.5 倍四分位距。使用双边Mann-Whitney U检验进行统计比较。e，所有细胞变形中值与白细胞（CD45+细胞）比例的双边Pearson相关性；P = 0.0065和r = −0.69。区分小鼠结肠中的肿瘤组织与健康组织我们的研究发现，肿瘤组织中的细胞的机械特性与对照样本显著不同，表明我们的方法在检测结直肠癌方面具有潜力。图5a-c中单个小鼠的代表性图表显示，肿瘤中的细胞与其健康对应物相比，细胞大小更大，变形更高。对所有32个样本的分析表明，肿瘤中的细胞具有显著较高的平均细胞大小、变形和面积比，效应大小从中等到强（图5d、e和g）。肿瘤样本还表现出更大的异质性，如图5c中广泛的分布以及细胞大小和面积比的标准偏差显著增加（图5d和g）。图5 | 小鼠结肠组织中肿瘤和健康组织细胞的物理表型分析研究团队在验证他们的方法在不同器官组织上的有效性时所采取的步骤和结果。他们将方法应用于来自9名癌症患者的新鲜切除的肺活检样本，并使用主成分分析（PCA）结合逻辑回归来区分健康样本和肿瘤样本。结果显示，他们的方法能够很容易地将7个健康样本与7个肿瘤样本分开，并且进一步正确分类了4个盲样本。在PCA中，PC1和PC2解释了46.9%的方差，其中变形参数对PC1有很大的贡献，表明细胞可变形性测量所带来的独特信息对于区分肿瘤和健康组织是有用的。此外，研究团队还测试了他们的方法对于只存在少量癌细胞的情况的敏感性，如低肿瘤细胞度和广泛的成纤维性肿瘤基质含量的肿瘤，或者经过化学或放射化疗后几乎完全缓解的肿瘤。他们的方法成功地将一个由50%健康和50%肿瘤组织组成的样本分类为肿瘤样本，即使在存在极少量癌细胞的情况下，也能正确地分类样本为肿瘤。 参考文献：Rapid single-cell physical phenotyping of mechanically dissociated tissue biopsies | Nature Biomedical Engineering我司将致力于将这项技术带给更多的医疗机构和患者。我们相信，组织研磨分离仪将成为未来医学领域的重要工具，为人类健康事业作出更大的贡献。让我们携手迈入医学技术的新时代，让组织研磨分离仪成为医学界的强大助力！ 

高通量 无泵 电生理 多细胞共培养 NETRI 是一家工业创新型公司，提供基于人类细胞的分析方法，以编码和探索人类神经元的复杂通路，并为制药、营养和皮肤化妆品等行业提供和开发跨行业应用的治疗方法。从发现到临床阶段，NETRI 提供人体数字化所需的高通量微流体设备、研发服务。 NETRI 凭借其全流程方案，通过将其自主研发的器官芯片技术整合到客户的标准化流程中，实现了在实验室便可研究人类生物学和病理生理学之间的关系，通过提供预测数据和平台来了解发现、临床前或临床阶段的作用模式。NETRI 产品简介NETRI 产品提供通用平台和软件，专为开发治疗行业而设计，以更深入地了解药物、化合物或其他成分的作用模式，通过使用 NETRI 的生理相关设备深入研究早期行动模式。其微流体设备和软件使了解化合物的功效和毒性成为可能，将化合物推向 IND 并上市。NETRI 产品与主要实验室设备兼容，并提供高通量和统计相关的预测数据。产品分类1)  NEUROFLUIDICS DEVICES（神经流体芯片）2)  NEUROFLUIDICS CULTURES（神经流体专向芯片）3)  UpLink软件（电生理数据分析软件）1 NEUROFLUIDICS DEVICES（神经流体芯片）每个芯片都通过微通道技术进行划分。这使得不同细胞类型（角质形成细胞和神经元、神经元和肠道细胞……）的共培养成为可能。微通道技术还可以通过神经元末梢（受神经支配的皮肤、受神经支配的肠道……）对第三通道进行神经支配。通过添加 MEA 选项，记录神经元的电活动以解码来自任何神经支配器官的数据。2 NEUROFLUIDICS CULTURES（神经流体专向芯片）a） Skin:皮肤模型可以创建体外神经支配或皮肤灌注模型。通过添加 MEA 选项，评估成分或产品对神经元的功能影响。b） PNS：PNS模型是模仿人类神经解剖结构的体外模型，以实现相关的损伤或治疗范例。通过添加 MEA 选项，评估化合物对神经元的功能影响。c） CNS:CNS 模型可以创建模仿人体解剖学的体外分隔模型。还可以共培养神经元和非神经元细胞类型（神经元和肿瘤细胞、神经元和免疫细胞……）。通过添加 MEA 选项，评估化合物对神经元的功能影响。3 UpLink软件（电生理数据分析软件）NeuroFluidics Digital（神经流体数据库）该软件能够解释设备中神经元记录的数据，构成数据库。是一种高度通用数据库的软件程序，其中包含适用于 NeuroFluidics MEA 芯片的所有 MEA 指标。栅格图选项卡允许快速评估整个实验，或访问每个栅格图的本地动态 HTML 版本。Metametrics 选项卡包含按通道组合和芯片解析出的所有 Axion BioSystems 指标，可轻松过滤和排序。√  使用 AxIS Navigator 在本地运行√  从活动的 AxIS 会话中检索相关文件√  每个通道的处理 Axion 和网络指标√  生成具有地理相关性的动态栅格地图产品优势高通量:• 标准ANSI 格式（96 孔板）• 无需泵且无需昂贵的设备• 与标准设备（液体处理和成像）兼容   区隔化:分隔的微流体装置可共培养 3 种不同的细胞类型。• 每个隔室都有自己的介质和涂层• 作用方式和机制的区分• 病理生理学应用 兼容数据读取：深入阅读数据，以更好地理解研究结果和潜在影响。• 电生理记录（MEA）• 成像（免疫荧光、钙成像……）• 生物化学分析（ELISA、裂解细胞分析、液相色谱……） 任何器官的神经分布：微通道技术仅允许神经元末梢通过，而将细胞体留在隔室中。• 微生物群-肠-脑枢椎• 微生物群数字标签

AMSBIO的产品涵盖细胞培养、蛋白质研究、分子生物学、抗体和试剂等领域，超过17500种产品供您选择。AMSBIO公司简介AMSBIO被公认为是一家领先的跨国生物公司，通过提供尖端的生命科学技术，产品和服务，为医疗，营养，化妆品和能源行业的研发做出了贡献。致力于为全球科研人员和生物技术行业提供先进的产品和技术解决方案。产品涵盖细胞培养、蛋白质研究、分子生物学、抗体和试剂等领域，旨在帮助科研人员更好地理解生物学过程并加速科学研究的进展。普瑞麦迪为AMSBIO官网指定中国代理AMSBIO主要产品种类01 生物样本库——组织生物库和生物标本02 分子生物学产品和试剂——分子生物学研究的基本产品03 抗体——高特异性抗体用于一系列蛋白质检测应用04 蛋白与多肽——重组蛋白、过表达和敲除裂解物、纯化天然蛋白到多肽和阻断肽05 细胞与细胞培养——细胞系到3D细胞培养产品和转染试剂普瑞麦迪的优势* 产品丰富，超二十家国内与进口试剂品牌代理，涵盖分子生物学、细胞培养与抗体多领域试剂* 到货及时，部分产品现货；以更短的订货周期，更快捷的国际物流以及报关时间为您提供最节省时间的供货保证。* 强大的价格优势和高性价比的选择，AMSBIO的中国总代，为您提供更好的价格与技术服务。其他代理品牌

释放能量，焕发新生普瑞麦迪（北京）实验室技术有限公司是业内知名的生命科学仪器供应商，我们积极响应国务院关于《推动大规模设备更新和消费品以旧换新行动方案》，为客户提供先进的实验设备和专业的技术支持，带来最领先的前沿科技信息，助力您的科研和开发工作。定制化方案  专业支持  最新前沿科技  提效降本  赋能科研，助力创新细胞类产品   组织无酶研磨仪                                                           3D无标记细胞分析仪                                  免胰酶、快速、一步法、适用不同组织             细胞聚团分析、多参数分析、高重复性、库尔特原                                                                                          理3D细胞类器官培养仪                                               3D活细胞CT成像系统                                         无需支架、操作简单、环境监测、长时间培养、   无标记、活细胞长时间实时成像、细胞高内涵数维持细胞功能                                                               据、高通量分析鬼影流式细胞分析分选仪                                          微流控单细胞分配系统                                             双模式分选、无标记分选、AI分选、微流控、          高精度、高准确性、高活性、无死腔量、适配高细胞活性、高通量、高速度                                           各类多孔板无损伤微流控流式细胞分选仪                                              3D生物打印机                                                微流控、无损伤、无特定鞘液、免维护、                       多打印头、同轴打印、无菌打印、高细胞活无死腔量、重复分选                                                         率、模型创建简单循环肿瘤富集回收系统                                                   高通量多通道3D生物模型打印分配仪                                               无标记、FDA认证、高活率、高效率、                             高通量、全自动、预设协议、可调节、模非侵入式、无人值守、灵活的下游分析                              型创建、模型精度高、重复性高智能细胞监控助手                                                       微生物单细胞快速分注系统                                                高易用性、实时监测、轻巧紧凑、高经济性           微生物单细胞分选、自动化、高通量处理、高单                                                                                   细胞率、高分辨率分选微液滴制备仪                                                                      基因递送系统                                                             微流控技术、高通量、高通量、                                  细胞高活性、多基因转染、多次转染、高转自动化、多功能性                                                             染率、无需电导液空间生物学分析系统                                                  多通道单细胞微流控给药控制系统                                                     空间定位、高精度、自动化、数字化、                            单细胞、纳升级给药、多通道、微流控、高效率、多功能                                                                     高精度、药物回收无残留                            分子类产品    细胞原位分子互作动态分析系统                                  多肽合成仪                                     细胞膜蛋白原位SPR、无标记、无人值守、        多通道、模块化、紫外监测、电磁感应加热、不浪  全自动化、高灵敏度、高稳定性                            费珍贵试剂、高准确性、复杂结构合成长片段基因合成仪                                                         个人型SPR分子互作仪                                                                                            8h内快速构建高质量16条1.5kb的DNA，                       简单易操作、多功能、高灵敏度、高性一键式启动完成基因拼接、纠错、纯化步骤                        能、高性价比、免维护蛋白质热稳定性分析仪                                                         非接触式聚焦超声打断仪                                                        多功能、无需标记、热稳定性分析、蛋白质控、                    高通量、高均一性、无污染、耗材成蛋白改造、蛋白变复性研究                                                        本低、高兼容性全自动基因测序文库制备系统                                             高通量蛋白纯化系统                                                        高通量、高效率、低成本、高准确性、                      高通量纯化、全自动操作、快速纯 化、高灵活高兼容性                                                                          性、可编程、高质量、多样化应用长片段基因合成仪                                                   全自动玻片扫描影像分析系统                                          高保真、长片段、全自动、快速合成、               高效扫描、高分辨率、多模块、高通量、全自动、高通量、高纯度、文库构建                                   易操作、数字化数据荧光计                                                                    全自动稀释仪                                 快速、准确、灵敏、特异性的定量DNA、      等比稀释、非等比稀释、全自动、超净台内无菌操作RNA、蛋白荧光定量PCR仪绝对定量，相对定量、溶解曲线、高精度控温、一体化设计、6荧光通道 欢迎来电垂询

CASY，不仅是细胞计数的利器，还在细胞存活率和毒性测量方面大显身手。最新研究揭示了它在评估抗癌药物的细胞毒性方面的潜力，为设计更有效的多药治疗方案带来了新思路。在最近的一项名为“CASY在癌细毒性和化疗敏感性中的应用——抗癌药物组合治疗癌症”的研究中，CASY被用于评估抗癌药物结合化疗的细胞毒性，旨在设计具有更宽治疗窗口的新型多药治疗方案。研究案例：新药物组合的细胞毒性评估在Weinreich等人最近的一项研究中（1）。作者检查了接受胃癌标准三联药物方案（ECF）以及新型双联药物（D-D）多化疗方案治疗胃腺癌细胞系和非恶性细胞系。使用CASY生长抑制测定评估了药物组合的效果：400 μL稀释后的细胞悬液重复测量三次，药物的细胞毒性效应被计算为实验开始时活细胞数量与经过各种药物组合孵育5、10和14天后的细胞计数之间的相对比例。CASY评估窗口设置为仅包括活细胞，并且排除死细胞。来自德国图宾根大学医院实验肿瘤学的 J. Weinreich 博士：使用CASY进行细胞毒性测定能够快速、简单且可靠地评估抗癌药物疗法及其后续癌细胞系的化疗敏感性。CASY的一个主要优势是通过简单的细胞系特异性设置可以屏蔽分析中的碎片和死细胞，仅考虑活细胞及其聚集体。然而，由于记录了细胞的完整状态，所以死细胞和细胞碎片的数据在任何时候都是可用的。1.体外生长曲线图1：ECF对于胃癌细胞系(MKN-45和23132/87)与非恶性细胞系(NHDF和23132/87)的生长抑制是剂量依赖型的,抑制效果不显著2.使用多种组合化疗方案处理细胞14天后的增长率图2：单独使用D-D来作用于胃癌细胞系MKN-45和23132/87，其抑制效果不显著，而且对于非胃癌细胞系的NHDF和CCL-241作用不抑制反而促进。EC D-D对于胃癌细胞系MKN-45的抑制效果显著，对于非胃癌细胞系的抑制效果不显著3.MKN45的细胞计数图3：Day 0，实验开始。存活率=95.6%，活细胞浓度为2.7×106/mL。图解：LML:活细胞数/mL；VIA:%存活率；AGG:聚集；CL，CR：评估游标；NL，NR：标准化游标图4：Day 7,PBS对照组。活率=90.3%；活细胞浓度为7.6×106 /mL图5：MKN45细胞计数的CASY截图。Day 7，0.86 μmol/L D-D。活率=92.4%；活细胞浓度9.5×105 /mL图6：使用EC D-D处理后的MKN-45细胞的细胞增长曲线。red: E=0,37; C=0,45; D-D=0,41 μmol/Lpink: E=0,15; C=0,18; D-D=0,16 μmol/Lblue: E=0,075;C=0,09; D-D=0,082 μmol/Lyellow: PBS control结果评估新药物组合。大体上，通过CASY分析能够监控细胞系对联合药物方案的类型和数量的特异性化学敏感性。一种新的双联药物（D-D）（替代标准ECF组合中的5-FU）已显示出对恶性胃腺癌细胞系的效果比对非恶性细胞系的效果更好，有望成为胃腺癌治疗的前沿替代方案。结论CASY细胞计数和细胞毒性分析显示，一种新的EC D-D抗癌药物疗法有望成为胃腺癌治疗的前景替代方案，取代了标准的ECF三联药物组合。通过CASY分析，我们揭示了胃癌和非恶性细胞系对各种药物组合的敏感性差异，从而评估了药物混合物的抗癌潜力。启示CASY分析的高度特异性化学敏感性为研究人员提供了深入了解药物组合对不同细胞系影响的机会，为精准治疗的发展贡献力量。参考文献✦1. Weinreich J, Archid R, Bajaeifer K, Hack A, Königsrainer A, Schott TC.Growth and Chemosensitivity of Gastric Adenocarcinoma and Non-Malignant Cell Lines in Response to Novel Anti-Cancer Drug Combinations. Chemotherapy. 2014; 60(5-6):346-352.NCBI中的文献索引号：DOI: 10.1159/000438943.

加拿大Affinité Instruments是一家专注于分子互作研究的公司，基于无标记、高灵敏、表面等离子共振技术（SRP技术）开发了性价比极高的个人型分子互作仪，旨在让每位科研工作者和实验室都能够顺利的把分子互作相关实验开展起来，助力生物科学发展。现在，Affinité Instruments对个人型SPR分子互作仪系列产品（P4SPR 2.0、P4PRO & Affipump、P4PRO +）进行了全面升级，新一代SPR设备不仅兼具强大的分子互作检测和分析的能力，而且极具性价比，是百万元以内即可拥有的四通道分子互作仪。特点* 基于SPR原理，实时、无标记、检测相互作用* 搭配先进的微流控技术，实现高性能和高准确性* 10分钟内完成1个样本测试* 一组实验可获得结合特异性、亲和力、动力学等数据* 四通道检测，结合参照通道信号，可进行背景扣除，获得可信数据* 仪器稳定，操作简单，维护简便* 采用注射泵组件，控制精准，信号稳定* 仪器性价比高，单个实验室即可负担* AfficoatTM芯片可减少SPR试验中的非特异性结合* 芯片耗材成本低，大大降低仪器运行成本应用兼容目标小分子、寡核苷酸、核酸适配体、核酸、肽、蛋白质、抗原、抗体、多糖、细胞裂解液、血清……软件①　仪器搭配ezControl软件，可以极大简化SPR实验所产生数据的分析工作；②　通过直观的界面，5分钟即可完成设置，并且进行实时数据处理；③　记录跟踪，带有时间戳详细信息，确保准确性；④　可在方法开发过程中快速决策；⑤　KD测定和浓度分析；⑥　CSV导出，可灵活处理数据，包括TraceDrawer；⑦　灵活的仪器控制，适用于各种实验。传感器我们还提供各种传感器，其量身定制的表面化学成分，以适应各种应用。无论您是要深入研究蛋白质之间的相互作用、研究小分子结合还是探索核酸之间的相互作用，我们的传感器都能满足您的特定研究需求。 传感器表面化学金硫醇化配体羧基利用EDC/NHS偶联在配体上形成胺基NTA组氨酸标记配体链霉亲和素生物素标记配体Afficoat使用EDC/NHS偶联的胺基配体玻璃定制金属表面 普瑞麦迪（北京）实验室技术有限公司作为加拿大Affinité Instruments在中国的总代理，欢迎各位专家老师前来咨询了解个人型SPR分子互作仪系列产品。我们拥有专业的技术服务团队，可以随时交流分子互作实验设计与方案的选择。同时，我们还提供完善的亲和力检测服务，收到样品最快不到一周即可出具SPR分析结果。我们不仅有先进的仪器，还拥有有专业的技术团队，全面助力您的分子互作研究。

未来，个性化医疗将成为医学发展的主旋律，而实现单个细胞水平的精准分析将是这一趋势的关键。一种名为TIGR组织研磨分离仪的技术正在引领这场变革。这项创新技术不仅能够快速、高效地从肿瘤组织中提取细胞，还能够保持细胞的完整性和纯度，为个性化医疗开启了新的篇章。TIGR组织研磨分离仪核心部件是该系统的重要组成部分图1：TIGR组织研磨分离仪的核心单元。(a) 组织研磨器的核心单元利用装有转动磨牙的转子和定子插件。(b) 制造的磨牙插件图片。顺时针是剪切（剪切）过程，逆时针是研磨/摩擦（研磨）运动。由于鳍状几何形状，通过改变旋转方向，可以施加不同的力，从而可以处理各种各样的组织结构。(c) 示意图显示了磨牙之间空间的尺寸。TIGR组织研磨分离仪的工作流程图2展示了组织解离工作流程和台式仪器。(a) 转子插件位于离心管的盖子中。(b) 组织样品放置在转子磨牙之间的自由空间中。(c) 磨牙单元的定子插件插入标准尼龙细胞过滤器中。(d)在接下来的准备步骤中，将离心管放在盖子上并旋紧。(e) 通过形状匹配连接，研磨管和台式仪器相结合。齿轮电机旋转与转子插件连接的轴。旋转方向可以设置为顺时针或逆时针。表格1：TIGR组织研磨分离仪的技术参数的概览技术参数通量4管并行运行细胞筛（尼龙）40、70、100μm网格大小一次性平台标准50 mL的锥形离心管载量/管50-300 mg组织加500 μL缓冲液电机额定功率2.5 W扭矩0.6 Nm研磨速度30~100 rpm旋转模式剪切/研磨和两者组合作为概念验证，我们使用新鲜切除的小鼠肝脏样本验证了组织研磨器的性能。与传统的gentleMACS®标准酶处理相比，TIGR组织研磨分离仪展现了非酶解离的优势。在进行了细胞计数、细胞存活率和解离等级的测定后，结果显示组织研磨分离仪在较短的处理时间内，大部分情况下能够达到或超过活细胞数量和产量。尽管酶预处理在组织样本的解离等级上表现出一定优势，但明显可见，酶处理导致了组织结构的松弛，使得解离更加完全。在这项研究中，组织研磨分离仪的解离时间不到两分钟，而gentleMACS®方法需要约60分钟，因此可以显著节省时间，尤其是考虑到多个样本的并行处理。这些结果表明，组织研磨分离仪在解离实验中具有高效性和可行性，为未来个性化医疗领域提供了一种快速而有效的肿瘤样本处理方法。图3：TIGR组织研磨分离仪和gentleMACS®分离肝组织后的细胞产量和分离等级。A) 与GM-、GM+和TG相比，肝组织分离后的细胞产量。B) 从剩余组织中量化的分离等级，对比了GM-、GM+和TG。传统的组织解离方法存在诸多限制，而无酶机械分离技术通过一种快速、可重复的方式，将细胞从组织基质中温和地移除，大大提高了分析的效率和准确性。这一技术不仅适用于肿瘤细胞等纯净的单个细胞群体，还可以应用于多种组织类型，为未来的个性化医学方法提供了广阔的应用前景。随着技术的不断进步和优化，无酶机械分离技术将成为个性化诊断领域的重要突破口。通过结合高通量的分析技术，我们可以实现对肿瘤的异质性等复杂问题的深入研究，为个性化治疗提供更精准的指导。让我们共同期待无酶机械分离技术为个性化医疗带来的变革！

降低50% iPSC细胞培养成本,干细胞研究与细胞治疗的新金标准解决方案 干细胞生产的巨大挑战iPSC培养的最大障碍之一是需要每天更换培养基，这主要是由成纤维细胞生长因子-2 (FGF-2)的不稳定性驱动的，FGF-2是维持多能性的关键成分。FGF-2容易发生蛋白水解降解，从而影响其调节生物过程的有效性。而FGF-2的半衰期很短(大约10小时)造成维持多能性信号提示的困难，影响细胞健康和同质性。无动物标记的热稳定性重组蛋白细胞因子——FGF-2 STAB®Core Biogenesis的FGF-2 STAB®是现有唯一的植物源性版本，可实现无内毒素表达系统，并产生无动物标记的热稳定性重组蛋白细胞因子。这些独特的优势为iPSCs培养提供了一种稳定、经济的替代方案。研究的结果和在细胞治疗应用的干细胞生产结果表明，FGF-2 STAB®可以作为先进干细胞研究的新金标准解决方案，以及未来基于细胞的药物研究的新原料。产品优势* 100%生物活性保存* 半衰期延长10倍——37℃培养条件下FGF-2稳定活性表达长达20天以上* 降低50%的细胞培养成本100%生物活性保存使用FGF-2 STAB®，FGF-2的全部生物活性以稳定的蛋白质构象保存。与野生型FGF-2相比，细胞应答改善。半衰期延长10倍——37℃培养条件下FGF-2稳定活性表达长达20天以上与野生型FGF-2相比，新的9个氨基酸取代提高了FGF-2 STAB®的热稳定性和半衰期。FGF-2 STAB®提供稳定的生长因子持续暴露于细胞，为开发人员提供更精简的细胞培养计划，并最终在最终干细胞群体中获得更均匀的所需表型。条形图显示了在StemFit中培养的(A) iPSCs，在浓度为50ng/mL和100ng/mL的情况下，(A)重组FGF-2 STAB®(Core Biogenesis)或重组FGF-2 STAB®(Core Biogenesis)中，在5天内的平均扩增率，遵循每天更换培养基的饲喂方案(人重组FGF-2和FGF2 STAB®)，每隔一天更换培养基(EOD)的FGF-2 STAB®，并保持指定的浓度。降低50%的细胞培养成本FGF-2 STAB®蛋白质稳定性的提高导致所需培养基量和喂养次数的显著减少，节省了劳动力成本并避免了不方便的周末喂养。更多产品

化学引诱受体及其同源配体是破坏肿瘤进展级联反应的有前途的药物靶点。大多数化学引诱受体是传统的七次跨膜（7TM）G偶联蛋白受体（GPCRs）1,2。ACKRs（非典型趋化因子受体）与传统的GPCR不同，它不激活引导细胞迁移所需的依赖于 G 蛋白的信号传导3,4。相反，它们通过充当清道夫受体、促进趋化因子内吞作用或产生趋化因子梯度来调节趋化因子的可用性。C-C基序趋化因子受体样2(CCRL2)是一种与 ACKR 家族相关的非信号转导7TM 受体5。然而，CCRL2与ACKRs不同，因为它缺乏配体清除功能，也缺乏与经典趋化因子结合确认的能力。CCRL2 是一种非信号转导受体，它能与趋化配体结合，使白细胞被招募到炎症部位。然而，人们对直接与 CCRL2 结合的配体类型和功能影响还缺乏了解。最近在表面等离子体共振领域技术的进步促进了在自然表达条件下配体-受体相互作用的表征。表面等离子体共振（SPR）显微镜结合了SPR和明场显微镜（图1A）来检测未标记分子与细胞表面目标的结合。6-8图 1 (A)SPRM 仪器的示意图，描绘了 SPR 和明场输入、细胞室和样品流。9（B） Chemerin 与跨膜 CCRL2 受体结合。SPRM 测量整个细胞表面分子相互作用的动力学，对于确定配体与细胞表面表达受体的结合速率（ka）、解离速率（kd）和结合亲和力（KD）至关重要。利用BI的ImageSPR™ 分析软件，SPRM 传感器表面被均匀地划分为数百个兴趣区域（ROI）。在本研究中，使用BI SPRm200仪器证实，在亲代 HEK 293T 细胞和变异型 HEK-huCCRL2 细胞上9，一种非趋化因子趋化蛋白--Chemerin与CCRL2 结合（图 1B）。当Chemerin暴露于HEK-huCCRL2 细胞时，在细胞上观察到大量的ROI（图 2A），但当Chemerin暴露于亲代HEK细胞时，只有少量的ROI出现（图 2B），这表明Chemerin能特异性地结合表达CCRL2 的细胞。采用 1:1 结合模型评估Chemerin与表达 HEK-huCCRL2 细胞结合的动力学数据，显示计算的结合速率、解离速率和结合亲和力（图 2C、D 和 E）直方图趋于稳健高斯分布，其中检测到Chemerin在亲代HEK细胞中的结合率极低，KD 值无法计算。本研究报告了实验中Chemerin与HEK-huCCRL2细胞结合的平均值，包括结合速率（ka = 3.11E+05 M-1 s -1 ）、解离速率（kd = 1.16E-03 s -1 ）和结合亲和力（KD = 5.49 nM）。重要的是，通过 SPRM 测定的Chemerin与 huCCRL2 结合的平均 KD 与之前报道的通过放射性标记的Chemerin与过表达 huCCRL210 的细胞结合而测定的结合亲和力（2.35 nM）相当10。图 2 （A）Chemerin与HEK-huCCRL2细胞结合或（B）Chemerin与HEK细胞结合的SPRM200明场图像；方格表示检测到结合事件的ROI，N=3。根据Chemerin与HEK-huCCRL2细胞结合的ROI传感器图的动力学和数据，产生（C）结合率（ka）、（D）解离率（kd）和（E）结合亲和力（kd）的代表性直方图分布曲线。为了研究生物素标记是否会干扰配体与 HEK-huCCLR2 细胞的结合，使用 SPRm200 仪器评估了一部分无标记的 C-C 趋化因子。当 CCL2 和 CCL5 等无标记趋化因子与 HEK-huCCRL2 细胞孵育时，几乎没有出现 ROI，因此无法计算 KD 值。然而，Biotin-Chemerin与 HEK-huCCRL2 细胞结合的动力学与无标记的Chemerin一致，如表 1 所示。生物素化可以发生在任何活性伯胺上，SPRM 评估Chemerin与 HEKhuCCRL2 细胞结合的结果显示，生物素化对结合的影响可以忽略不计。表 1 Chemerin与 HEK-huCCRL2 的结合概况通过 SPRM，可以对一种以前未报道过的 C-C 趋化因子进行直接结合和动力学分析。研究人员测定了 Chemerin 与 HEK 293T 亲本细胞以及 HEKhuCCRL2 变体细胞上的 CCRL2 的结合动力学。CCRL2 不激活细胞内的 G 蛋白，而是将配体集中在质膜上11 。该受体的下游信号传导机制尚不清楚，因此鉴定能中和 CCRL2 与配体结合的工具是研究其功能的主要途径。为此，我们使用 SPRM 作为一种确证抗体结合的方法，研究两种抗 huCCRL2 单克隆抗体（K097F7 和 152254）与 HEK-huCCRL2 细胞和亲代 HEK 293T 细胞的结合动力学。在 HEK-huCCRL2 细胞上检测到了大量的 ROI（图 3A 和 3B），但在亲代 HEK 细胞上没有检测到。图 3 （A）K097F7与HEK-huCCRL2细胞结合，（B）152254与HEK-huccRL2细胞结合和（C）同型对照抗体与HEK-huCCRL1细胞结合的SPRM200明场图像；方格表示检测到抗体结合事件的ROI。表 2 与 HEK-huCCRL2 结合的中和抗体概况K097F7 和 152254 与 HEK-huCCRL2 细胞的结合亲和力（KD）分别为 2.48 nM 和 4.75 nM（表 2），重要的是，K097F7 和 152254 与亲代 HEK 细胞的最小结合导致 KD 值无法计算。此外，观察到同型对照抗体与 HEK-huCCRL2 细胞的结合极少（图 3C），这表明 K097F7 和 152254 与 CCRL2 是特异性结合。SPRm200系统将光学显微镜与分子互作技术相结合，专为观察和测量细胞膜表面蛋白和其他目标分子结合亲和力及动力学常数设计，为分子相互作用的研究开辟了新的方法。(1)SPRm200系统无需对观察目标进行标记，可以实时定量的进行检测；(2)可同时可视化观察细胞结构和局部结合活性；(3)无需提取细胞膜蛋白，即可在正常活细胞状态下观察和测量药物和膜蛋白的实时相互作用；(4)探测器测量每个像素点的SPR响应，并将其映射到SPR图像中，在每个像素处，记录一个传感图，从而提供更多的局部信息。SPRM技术使在自然条件下研究细胞表面膜蛋白与其他目标分子结合和相互作用成为可能。SPRm200细胞原位分子互作动态分析系统凭借其卓越的灵敏度和稳定性，助力科学研究新发现，推动药物开发新高度。 参考文献1) Zlotnik A, Yoshie O. Chemokines: a new classification system and their role in immunity. Immunity.2000;12(2):121–7. Pmid:107146782) Zlotnik A, Yoshie O. The chemokine superfamily revisited. Immunity. 2012;36(5):705–16. Pmid:226334583) Nibbs RJB, Graham GJ. Immune regulation by atypical chemokine receptors. Nat Rev Immunol.2013;13(11):815–29. Pmid:243197794) Bonecchi R, Graham GJ. Atypical chemokine receptors and their roles in the resolution of the inflammatory response. Front Immunol. 2016;7:224. Pmid:273756225) Schioppa T, Sozio F, Barbazza I, Scutera S, Bosisio D, Sozzani S, et al. Molecular basis for CCRL2 regulation of leukocyte migration. Front Cell Dev Biol. 2020;8:615031. Pmid:333631776) Wang W, Yang Y, Wang S, Nagaraj VJ, Liu Q, Wu J, et al. Label-free measuring and mapping of binding kinetics of membrane proteins in single living cells. Nat Chem. 2012;4(10):846–53. Pmid:230009997) Wang W, Yin L, Gonzalez-Malerva L, Wang S, Yu X, Eaton S, et al. In situ drug-receptor binding kinetics in single cells: a quantitative label-free study of anti-tumor drug resistance. Sci Rep. 2014;4:6609. Pmid:253120298) Zhang F, Wang S, Yin L, Yang Y, Guan Y, Wang W, et al. Quantification of epidermal growth factor receptor expression level and binding kinetics on cell surfaces by surface plasmon resonance imaging. Anal Chem. 2015;87(19):9960–5. Pmid:26368339) Su, Z., Brooks, J., Pelker, J., Andreyeva, T., Sobon, H., Gifford, R., Powers, M., Wang, J., Dower, C., Hegen, M. and Messing, D., 2023. Studies with neutralizing antibodies suggest CXCL8-mediated neutrophil activation is independent of CC motif chemokine receptor-like 2 (CCRL2) ligand binding function. PloS one, 18(1), p.e0280590.10) De Henau O, Degroot GN, Imbault V, Robert V, De Poorter C, McHeik S, et al. Signaling properties of chemerin receptors CMKLR1, GPR1 and CCRL2. PLOS One. 2016;11(10):e0164179. pmid:27716822.11) Del Prete A, Bonecchi R, Vecchi A, Mantovani A, Sozzani S. CCRL2, a fringe member of the atypical chemoattractant receptor family. Eur J Immunol. 2013;43(6):1418–22. pmid:23580473

在药物筛选和发现中的肽纯化实验室必须使用高质量的产物才能在多肽药物的早期研发中取得成功。然而，合成后获得的多肽纯度往往不够，因此，多肽纯化成为多肽实验室工作流程中的必要步骤，通过多肽纯化提高产物的纯度。但是在处理多肽或多肽文库时，这是一项极具挑战性的任务。本文将讨论纯化多肽和构建多肽文库在药物发现和筛选中的重要性。什么是合成肽肽是长度超过两个氨基酸的短蛋白质片段。肽在各种研究应用和药物开发过程中，尤其是在生物制药行业中至关重要。目前市场上已有 100 多种基于多肽的药物或诊断方法获得批准。1多肽可以通过化学方法合成。主要的方法是固相肽合成（SPPS），通过一个氨基酸的羰基碳与另一个氨基酸的氮原子之间形成的酰胺键，在形式上失去水分子的情况下，将相应的氨基酸依次偶联。然而，合成过程会产生含有截断、缺失、溶剂、盐和其他有机碎屑等杂质的粗肽。随着多肽长度的增加，截短和缺失会成为更重要的杂质来源。例如，如果 30 个单链肽的耦合效率为 99%，则会形成超过 25% 的截断。早期筛查中的多肽纯化的5个必要性01分析可靠性截断肽和其他副产品（溶剂、盐、有机残留物）等杂质会干扰测试系统，导致结果偏差，从而难以得出有意义的结论。2  肽纯化可消除这些污染物，确保更高水平的可靠性。02实验的高精确度高准确度在药物发现和筛选过程中，精确度对于理解多肽与靶分子的相互作用及其在各种生物系统中的作用至关重要。因此，研究人员必须使用能准确代表他们打算研究的序列的材料。3  03不同实验之间的一致性保持研究的一致性对于可重复性和比较分析至关重要。具有明确纯度水平的多肽可确保您的实验以统一的序列进行，从而减少批间数据的变异系数。这种一致性简化了在不同研究项目和实验室之间复制实验和比较结果的过程，使您的工作更加高效可靠。404长期成本效益虽然纯化过程可能会给您的研究增加一些初始步骤，但从长远来看，它可以为您节省时间和资源。纯化多肽可降低重复实验或因结果不准确而进行代价高昂的调整的风险。在纯化方面的投资最终可以确保您的研究高效进行。05符合期刊标准研究人员往往面临严格的发表要求。同行评审期刊需要高质量的多肽来满足其质量标准。通过在研究中采用纯化多肽，您可以确保数据的完整性，并满足这些合规要求。这将提高您研究的可信度，并确保其符合行业最佳实践。一种新的多肽纯化技术，无需HPLCPurePep EasyClean (PEC) 技术目前是一种全新的可以高效进行多肽纯化的技术，利用这项技术无需HPLC即可获得平均纯度高达85%的多肽，并且从研究到生产，可以适应各种规模下进行快速、持续的多肽纯化。该技术的核心是使用了一种新开发的可裂解连接分子（PEC Linker RC+）以及修饰琼脂糖珠（Agarose100），基于捕捉和释放（Catch-and-release）的方法来进行多肽纯化。它打破了传统多肽生产的障碍，基于化学选择性分离的方法，可以轻松分离杂质，还可以进行平行纯化，一次并行纯化甚至96个多肽。并且该技术相较于传统的色谱法纯化多肽，它可以有效纯化困难的肽（长肽、聚集肽和疏水性肽），有机溶剂的消耗也极大减少。值得一提的是，PEC纯化技术还可以和多肽合成仪联用，无需购置额外的多肽纯化设备即可在一台仪器上实现多肽高效合成与纯化。 结语在竞争激烈、要求苛刻的多肽筛选和药物发现领域，纯化多肽的重要性怎么强调都不为过。足够的多肽纯度可确保准确性和一致性，使科学家和研究人员能够放心地进行实验。从长远来看，使用纯化多肽不仅能保证数据的完整性，还能节省时间和资源。这就是为什么选择合适的多肽合成和纯化解决方案能使您的研究工作与众不同。让纯化多肽成为您药物发现和筛选工作的关键，从而达到新的高度。您的突破性发现之路将始于纯化多肽的纯度和精度。参考文献1. Vera D'Aloisio et al., Drug Discov. Today 2021, 26, 1409-14192. J. W. de Beukelaar et al., Rapid Commun. Mass Spectrom. 2007, 21, 1282-12883. J. R. Currier et al., Clin. Vaccine Immunol. 2008, 15, 267-2764. A. N. Hofnagel et al., Clin Chem. 2016, 62, 48-69

Chorus助力绿色多肽合成新方向直到现在，DMF一直被认为是固相多肽合成（SPPS）的金标准。但是因为其毒性强，危险系数高，被列为CMR剂（致癌、致突变或对生殖有毒的溶剂）。在2021年11月22日，欧盟在其官方公报上发布法规(EU) 2021/2030，增加第76项关于N,N-二甲基甲酰胺（简称DMF或DMFA）的限制条款，正式将DMF纳入REACH法规限制清单。1  规定从2023年12月12日起，该物质本身及含有该物质浓度≥0.3% 的物质或混合物不得投放市场。正是因为这样，所以亟需找到一种合适的可以替代DMF的方案。世界范围内的多肽相关研究课题组对多种替代性强、更加环保的溶剂或混合物进行了广泛研究，并且对其在SPPS中的潜力进行了评估。2-5结果发现，有两种替代品具有非常好的应用前景，分别是N-甲基-2-吡咯烷酮（NBP）和二甲基亚砜（DMSO）与乙酸乙酯（EtOAc）的混合物。3-5 下面，就让我们一起来看一下它们在SPPS中的实际应用情况吧。我们在寻找替代DMF的溶液时，通常溶剂的极性和粘度是需要考虑的关键因素。2DMSO/EtOAc混合物的危险性比较小，并且可以通过改变各组分的比例来调整溶剂的极性，以获得最佳的反应条件，例如Fmoc去除和偶联。不过，使用二元混合物也会带来一定的挑战，例如在SPPS过程中，针对不同反应需要使用不同的溶剂比例进行溶剂输送。另一种替代品NBP，这是一种极性钝化绿色溶剂，在SPPS中具有良好的性能。不过，NBP的粘度较高，难以准确的输送氨基酸和试剂。利用自带的专利矩阵式液体传输技术（PurePep Pathway）和感应加热功能，PurePep Chorus多肽合成仪可以精确可靠地处理各种溶剂并且自由的调整合适的温度。因此，我们利用它研究了三种不同溶剂系统（DMF、NBP和DMSO/EtOAc）在两种温度下（室温和感应加热到50℃）对三种模型多肽的粗产率和纯度的影响（表1）。方法合成合成三种不同的多肽，分别是Poly-Ala (H-A10K-NH2)、酰基载体蛋白(65-74, ACP, H-VQAAIDYING-OH) 和促性腺激素释放激素(pyroGlu1→Gly, G-LHRH, H-GHWSYGLRPG-NH2)6,7三种肽在常温和高温（50℃）条件下，使用不同的偶联剂二异丙基碳二亚胺/氰基羟基亚胺乙酸乙酯（DIC/Oxyma）和 O-(6-氯苯并三唑-1-基)-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸盐/N-甲基吗啉（HCTU/NMM），以 0. 1 毫摩尔合成规模在三种不同溶剂（DMF、NBP 和 DMSO/EtOAc）中进行合成。以 0.1 mmol 的比例在 Fmoc-Lys(Boc)-Wang树脂 上合成了 PolyAla，在 Fmoc-Gly-Wang 树脂上合成了 ACP，在 Rink Amide MBHA 树脂上合成了 G-LHRH。在 DIC/Oxyma 偶联过程中8使用 0.3 M 氨基酸（6 个当量）、0.4 M Oxyma（8 个当量）和 0.3 M（DIC，6 个当量），持续 2 x 15 分钟。在 HCTU/NMM 反应体系中，使用 0.3 M 氨基酸（6 当量）、0.3 M HCTU（6 当量）和 0.6 M NMM（12 当量）反应 2 x 1 分钟。Fmoc脱保护使用20% PIP在室温或感应加热到50°C下进行2 x 2分钟。无论使用哪种合成溶剂，用TFA:TIS：水（95:2.5:2.5）在室温下从树脂中切割肽2小时，然后在冷 Et2O 中沉淀，离心并倾倒Et2O。 分析使用配备 SPD-M20A 检测器的 Shimadzu LCMS-2020 分析粗肽，色谱柱为 ACE Excel 3 C18-PFP，100 x 3.0 mm。流动相为水（A）和含 0.1% 反式脂肪酸的 MeCN（B）混合物。将 ACP 和 G-LHRH 溶于水/乙腈（1:1）中，在 5 分钟内以 5 70% B 的梯度进行分析。PolyAla 肽溶解在纯水中，用 0-60%B 的梯度在 9 分钟内进行分析，流速均为 1 mL/min。结果和讨论我们的研究重点是三种肽，它们在合成方面存在独特的挑战。第一种是ACP，一种活性酰基载体蛋白片段，由于在合成过程中容易形成内部二级结构，因此被公认为SPPS的评判标准。6,7 第二种肽是Poly Ala，以其自组装特性而闻名。最后，我们研究了G-LHRH，这是一种因其与促黄体生成激素释放激素（LHRH）的关系而备受关注的多肽。7这些肽的选择有利于使用不同的合成溶剂对SPPS中的各种肽的合成过程进行全面研究。在改变溶剂系统和温度之后，我们还测试了两种不同的耦合条件：基于碳二亚胺的金标准耦合系统——DIC/Oxyma与安全高效的试剂—— HCTU/NMM。8,9 在DMF中合成作为参考，使用 DIC/Oxyma 或 HCTU/NMM 偶联试剂在 DMF 中合成 ACP、G-LHRH 和 Poly-Ala，分别在常温和感应加热到50°C。表 2 中显示的结果表明，在50°C下进行DIC/Oxyma偶联比在常温条件下产生的肽纯度更高，这表明温度升高增强了偶联反应并减少了副产物的形成。HCTU/NMM 偶联可实现极快的偶联（2 x 1 分钟）和 Fmoc 去保护（2 x 2 分钟）步骤，从而快速合成所需的多肽。在NBP中合成NBP是一种沸点和闪点都很高的双极性非质子溶剂，经常被用作微波辅助多肽合成的溶剂。NBP具有无生产毒性的优点，可获得与DMF相媲美纯度的粗肽。不过，NBP也有缺点，那就是与DMF（25°C 时为 0.8 cP）相比，NBP 的粘度较高（25°C 时为 4.0 cP），这给自动多肽合成仪中试剂的准确传输带来了挑战。PurePep Chorus多肽合成仪包括一个溶剂校准选项，这对于克服NBP的高粘度带来的输送难题至关重要。通过溶剂校准，用户可以根据需要测量和调整输送到反应容器 (RV) 的液体量。校准后，如表 1 所示，在NBP中于恒温室进行合成时，所有三种肽都顺利进行，没有出现任何错误。4  然而，由于NBP（高粘度）中的偶联率较低，导致肽的粗纯度略低（27.4% - 52.4%，表2）。在DMSO/EtOAc中合成最近的研究表明，DMSO/EtOAc 等非危险性二元溶剂混合物的极性和粘度曲线与DMF相似，可以成为 SPPS 中替代 DMF 的一种可行且危害较小的溶剂。2,3  由于极性对 SPPS 中粗纯度的结果起着至关重要的作用，因此本研究调整了 DMSO/EtOAc 的比例。氨基酸储备溶液（0.3M）以中低极性（DMSO/EtOAc 4:6）配制，DIC溶于EtOAc。另一方面，FMOC的去保护作用是在极性相对较高的溶剂（DMSO/EtOAc 6:4）中进行的。纯 EtOAc 用作封端溶液，后循环洗涤使用DMSO/EtOAc 2:8，详见表3。与微波辅助多肽合成不同，Chorus多肽合成仪允许在 SPPS 合成过程中灵活使用各种二元溶剂系统。如表2所示，在DMSO/EtOAc 溶液中，所有三种肽的合成都在恒温条件下顺利进行，得到的粗肽纯度从68.8%到85.4%不等。在 50°C 进行合成时，平均粗纯度从77.9% 提高到82.4%。图1显示了在 DMF 和 DMSO/EtOAc 中分别获得的粗肽紫外色谱图，证明这两种溶剂系统之间具有良好的转移性。注：众所周知，二甲基亚砜（DMSO）会在 SPPS 过程中导致蛋氨酸残基氧化。然而，我们在氮气环境下使用 DMSO/EtOAc 混合物成功合成了淀粉样β肽，分析方法证实没有发生任何蛋氨酸氧化（数据未显示）。PurePep Chorus多肽合成仪的适用性溶液校准PurePep Chorus 多肽合成仪（图2）是一种功能强大的固相肽合成（SPPS）设备，可以轻松处理高粘度溶剂和溶剂混合物。该系统的溶剂校准选项可确保精确的溶剂输送，而不论其粘度或成分如何，这对SPPS的成功至关重要。比较所有三种溶剂中的SPPS，DMSO/EtOAc 在恒温条件下的粗纯度优于NBP和DMF。感应加热PurePep Chorus 多肽合成仪利用精确的感应加热和振荡功能，在不过热的情况下迅速达到所需的温度。利用这一特点，可以在50℃温度下使用DMSO/EtOAc低沸点二元混合物作为溶剂，进行高效的固相多肽合成 (SPPS)。提高温度可使三种溶剂的平均纯度更高。 结果一览*在PurePep Chorus多肽合成仪上使用NBP和DMSO/EtOAc代替危险的DMF进行多肽自动合成，可获得高质量的多肽*在PurePep Chorus多肽合成仪上切换到绿色溶剂的过程可以顺利而快速地完成*由于可以对二元溶剂混合物进行感应加热，因此可以在高温下使用DMSO/EtOAc*与DMF和NMP相比，DMSO/EtOAc 在恒温条件下显示出更高的粗纯度，而在50°C条件下显示出与DMF相似的纯度 参考文献[1] COMMISSION REGULATION (EU) 2021/2030 of 19 November 2021[2] V. Martin et al., Green Chem 2021, 23, p. 3295[3] S. Jadhav et al., Green Chem 2021, 23, p. 3312[4] J. Lopez et al., Org Process Res. Dev. 2018, 22, p. 494[5] A. Kumar et al., ChemSusChem 2020, 13, p. 5288[6] D.M. M. Jaradat et.al., Green Chem 2022, 24, p. 6360[7] V. Martin et.al., RSC Adv. 2020, 10, p. 42457[8] R. Subirós-Funosas et.al., Eur J Org Chem 2009, 21, p. 9394[9] C. Hood et.al., Am Biotechnol Lab 2008, 26, p. 22

介绍来自动物的肽毒素是离子通道的有效抑制剂，无论是作为治疗一系列疾病的药物还是作为药物研究的宝贵工具，都显示出巨大的前景。法国的一个研究小组已经探索了一种蝎子肽BeKm-1的荧光标记方法，这种肽可以抑制hERG离子通道。hERG离子通道与心脏活动有关，在开发新药时必须避免阻断它。研究小组的方法包括蛋白质-蛋白质对接研究，使他们能够识别肽链中适合标记的溶剂暴露残基。这使他们能够设计和测试保持天然肽的特异性和作用方式的类似物。肽毒素——药物先导化合物和药物研发工具的金矿来自陆地和海洋动物的肽毒素是研究离子通道在生理和病理条件下所起作用的宝贵工具。仅蝎子毒液就含有多达320种肽毒素，这些肽毒素作用于41种不同的离子通道(1)。几种毒素衍生的肽也已成为治疗糖尿病、高血压、慢性疼痛和其他疾病的药物，同时有数十种处于临床前开发或正在进行临床试验(2)。一个例子是FDA批准的多肽药物Prialt®或Ziconotide，这是一种合成的25个氨基酸的肽，发现于海蜗牛的毒液中，可以阻断N型电压门控钙离子通道。Ziconotide作为全身镇痛药，适用于鞘内吗啡不耐受或难治性慢性严重疼痛的患者(3)。成千上万的多肽仍有待研究，作为可能的药理工具或药物先导化合物(4)。设计毒素靶向hERG离子通道该领域的关键驱动因素是目标通道晶体结构的可用性和对毒素结合的研究，这为设计毒素类似物开辟了可能性。一个例子是hERG通道，它与EAG -1通道同属于EAG(ether-go-go)电压门控K+通道家族。编码hERG通道的基因KCNH2突变可导致长QT间期延长综合征(LQT)， LQT综合征涉及心室复极延长，可导致心脏骤停。LQT也可由阻断hERG的药物引起，包括抗生素、抗精神病药物和抗组胺药。这种相互作用是药物开发的主要挑战，必须在开发过程的早期进行研究。评估hERG的一个有力工具是以毒素肽BeKm-1 (IC50 =3.3 nM)形式存在的有效阻断剂，该毒素肽是从蝎子Buthus eupeus的毒液中分离出来的。法国Molsamcules Max Mousseron研究所、Pole d'expertise Biotechnology公司和Smartox Biotechnology公司合作设计了BeKm-1的荧光类似物，专门结合hERG通道，目的是开发能够保持正确结合和抑制该通道的荧光类似物(5)。支持残基选择的模型该团队开发了一个试验模型，使用四聚体hERG通道结构来预测BeKm-1与hERG外部部分的结合，以帮助识别肽毒素上暴露于溶剂中的残基，可用于连接化学基团。分子模拟研究表明，肽毒素的α-螺旋与hERG结合位点底部的疏水表面接触，并且N端 Arg-1和Arg-27的侧链在所有结合模式下都暴露于溶剂，因此决定选择这些残基进行化学标记。BeKm-1类似物的设计与合成该团队设计并合成了四种荧光BeKm-1类似物(图1)。BeKm-1的N端用于将连接物连接到三种类似物上:4-戊酸(+ 4个碳原子; linker 4)，6-叠氮己酸(+6个碳原子; linker 6)，或10-十一烷酸(+ 10个碳原子;linker 10)。所有这些连接子都兼容点击化学(linker 4和linker 10的炔功能，linker 6的叠氮化物功能)。第四个BeKm-1类似物是基于Arg-27的溶剂可及性，但由于Arg-27不参与hERG通道识别，残基被含有炔功能的点击化学兼容的Lys残基所取代。然后将带有额外间隔的Cy5染料基团连接到肽上。在连接子偶联到36-mer BeKm-1序列的N端之前，在Symphony®X全自动多肽合成仪上使用Fmoc固相化学逐步合成多肽链。在BeKm-1 Lys-27中，野生型L-Arg-27残基被L-Lys(pentynoyl)-OH取代。间隔物GS在C端包含左丙炔甘氨酸(Pra)，在侧链上具有炔基功能，Cy5在N端通过肽键偶联。所有多肽合成采用2-氯三甲基氯树脂。经过树脂裂解和脱保护，粗毒素类似物被折叠/氧化，并通过C18反相色谱(RP-HPLC)纯化。利用点击化学方法将Cy5 与连接子偶联得到Cy5- PEG3 -linker4- BeKm-1、Cy5- PEG5 -linker10- BeKm -1、Cy5-spacer- GS -linker6- BeKm -1和Cy5- PEG5 - BeKm -1 Lys275。所有产物均经反相高效液相色谱纯化。类似物保留特异性和作用方式，但亲和力降低利用非洲爪蟾卵母细胞中表达的hERG通道，对荧光标记BeKm-1的效果进行了评价。所有类似物均表现出剂量依赖性的外向电流抑制作用，但IC50值(60-80 nM)高于天然毒素肽(12 nM;图2). BeKm-1和四个类似物的Hill系数都接近于1，表明它们具有相同的作用模式。天然BeKm-1及其类似物对hERG的特异性可以通过对密切相关的K+通道hEAG1缺乏影响来证实，而对一种抗BeKm-1抑制的突变形式的hERG进行的实验显示，天然肽及其类似物对hERG的特异性相似。总的结论是，这些类似物具有与天然肽相同的特异性和作用方式，但对hERG离子通道的亲和力较低。一种开发设计毒素肽的有前景的方法这项研究说明了蛋白质-蛋白质对接工具如何用于修饰毒素肽的设计，这些修饰毒素肽可以用作离子通道成像或生物化学纯化/表征中的报告分子。这样的方法也可以提供有价值的工具来研究新的候选药物对离子通道的不良副作用，表征肽毒素的作用模式，并为药物开发开辟新的可能性。正如Smartox Biotechnology CSO和INSERM高级研究主任Michel De Waard博士所指出的那样，Symphony® X全自动多肽合成仪在这项工作中发挥了关键作用。“Symphony® X是我们在Smartox合成能力的宝贵补充。作为GPT产品的长期用户，我们不仅依赖于该仪器的坚固结构和可靠性能，而且在生产含非天然氨基酸和特殊化学物质的多肽时，该仪器提供了更大的灵活性。能够同时合成多种肽类似物是一个巨大的优势，使我们能够提高我们实验室多肽合成的效率和生产力。” 高通量多肽合成仪Symphony® X介绍Symphony® X是由美国多肽合成仪领军品牌PTI（GPT）推出的经典产品，仪器24通道设计，采用固相合成的原理，可以同时合成24条不同序列的多肽。仪器具有40个氨基酸位、8个试剂瓶位，为客户的研究、优化和生产提供最大的灵活性。*24个平行的独立反应通道，可同时在多个RV上运行不同的合成规模、多肽序列和反应条件，或在运行其他项目时按需使用*12个通道可作预活化*反应溶液的实时紫外线监测，而不是混合过程中的废液检测，以控制脱保护时间，并尽量减少多余的废物，以获得更好的纯度和产量*快速红外加热*Single ShotTM单次添加技术，几乎没有死体积 References1.  Scorpion toxin peptide action at the ion channel subunit level. Housley, D.M et al. 2017.Neuropharmacology 127, 46–78.2.  Pharmacokinetics of Toxin-Derived Peptide Drugs. Stepensky, D. Toxins 2018, 10, 483;doi:10.3390/toxins10110483.3.  Toxins in Drug Discovery and Pharmacology. Peigneur S & Tytgat J. Toxins (Basel). 2018 Mar 16;10(3). pii: E126. doi: 10.3390/toxins10030126.4.  de Souza, J.M., et al, 2018. Animal toxins as therapeutic tools to treat neurodegenerativediseases. Front. Pharmacol. 9, 145.5.  Fluorescent analogues of BeKm-1 with high and specific activity against the hERG channel.Vasseur, L et al Toxicon: X, Volume 2, April 2019, 100010

介绍肽核酸(PNA)是DNA和/或RNA的合成类似物，因为整个磷酸二酯键主链被拟肽主链取代，核酸碱基通过甲基羰基连接，具有几种独特的物理化学性质 (图1)。[1] PNAs是一种非离子核酸类似物，其中性聚酰胺骨架设计可最小化DNA寡核苷酸中经常观察到的非特异性静电效应。因此，短至12个碱基的序列即允许强的特异性杂交，具有改进的序列错配分辨率，比天然寡核苷酸对单点突变更敏感。此外，与天然肽或核酸相比，PNAs对核酸酶和蛋白酶的抗性更强。[2] PNAs能够通过与互补RNA结合抑制基因表达；在一定条件下，PNAs还可以通过链入侵机制与DNA双链序列结合促进基因表达，从而促进D-loop的形成和相应基因的表达。它们的高亲和力和特异性使它们不仅可以作为治疗药物，而且可以用于诊断。[3,4] PNAs的合成通常被认为是一个挑战，因为它们容易聚集，并且脱保护步骤通常伴随着副反应。[5]克服第一个问题的策略之一是在耦合步骤中使用大量过量的试剂；然而，合成所需的受N端保护的PNA单体相对昂贵，使得这种方法经济成本偏高。 在本应用笔记中，我们报告了使用全自动多肽合成仪PurePep®Chorus合成PNA的方法优化。以PNA1作为参考序列，评估不同的合成条件：偶联次数、PNA单体过量倍数、反应时间和温度。得到粗品纯度最高的PNA1的最佳条件，然后用于合成其他五个长度和嘌呤(腺嘌呤和鸟嘌呤)含量不同的序列(表1)。后者构成了合成的一个相关因素，因为它们的偶联通常由于偶联单体的位阻困难而导致低产率。 结果与讨论采用低负荷Rink Amide MBHA树脂(0.27 mmol.g-1)，采用Fmoc/tBu正交保护方案，采用PurePep®Chorus (Gyros Protein Technologies)以25 μmol的浓度规模合成PNA1。在室温下，用20%Pip/DMF进行2 × 5分钟的树脂脱保护。偶联步骤是在HCTU和NMM存在的情况下进行的，在所有的合成过程中，条件都有很大的不同(表2)。偶联步骤之后是一个封端步骤，在室温下，用10%的Acetic Anhydride/DMF溶液，反应5分钟。最终脱保护后，用TFA/ TIS/H2O(95:2.5:2.5)溶液在室温下裂解4小时。 通过分析表2可以看出，使用10倍当量的PNA单体可以得到非常好的粗纯度(81%);然而，这种合成方法经济成本高，因为Fmoc保护的PNA单体是昂贵的。通过将PNA的过量倍数降至4 倍当量，粗品纯度会降至72%。在保持低过量PNA单体的条件下，将反应温度提高到45℃，反应时间缩短到5 min，会进一步降低粗品纯度(61%)。由于反应时间5分钟可能太短而无法完成偶联，因此采用相同的条件，但反应时间增加到10分钟(实验D)，得到的粗纯度(82%)与实验A相似，实验A使用了两倍多的PNA单体。E方法采用双偶联的方法，对反应作进一步优化。使用相同数量的原料总当量和相同的时间，粗品纯度进一步提高了5%。 当确定了产生最佳粗纯度PNA1的耦合方案，使用相同的策略(方法E)合成其余序列。结果如表3所示。 合成的PNA序列的粗纯度在66-91%之间，可以认为是很好的粗品收率，特别是对于肽核酸。有趣的是，嘌呤含量较高的PNA序列具有较好的粗品纯度。 结论在本应用笔记中，我们描述了使用全自动多肽合成仪PurePep® Chorus合成PNA的耦合策略的优化。我们首先在室温下使用10倍当量的PNA单体进行1小时的偶联反应，该策略产生了非常好的粗品PNA(81%)。我们希望减少单体原料的过量倍数，同时尽量减少粗品纯度的损失，使这种反应在经济上更具可持续性和“绿色”。最终，我们开发了一种耦合策略，不仅减少了当量的数量和反应时间，而且产生了比原始策略更好的粗品PNA。通过在45℃下进行双耦合，每次2 倍当量，持续5分钟，我们能够将PNA1的粗纯度从81%提高到87%。最后，将该耦合策略应用于其他序列的合成。该方案应用于具有不同的长度和嘌呤含量的序列，产生了非常好的粗肽核酸。PurePep® Chorus被证明是这项工作的关键工具，因为在PurePep® Chorus全自动多肽合成仪上，从当量、重复次数、反应温度、耦合时间等合成程序均可以很容易地调整。 参考文献[1]   P. E. Nielsen, R. H. Berg, Sci 1991, 6, 254(5037), 1497-1500.[2]   A. Gupta et al., J Biotechnol 2017, 259, 148–159.[3]   P. E. Nielsen, Chem Biodivers 2010, 7(4), 786-804.[4]   C. Cordier et al., PLoS One 2014, 9, e104999.[5]   C. Li, ACS Cent Sci 2022, 8, 2, 205–213.[6]   D. Al Sulaiman et al., Angew Chem Int Ed 2017, 56, 5247–5251.[7]   “Low-Scale Automated Synthesis of a PNA-Peptide Conjugate on the Prelude®” (Application Note 12; D0029149/B).[8]   L. Goltermann et al., Front Microbiol 2019, 10, 1032.[9]   C. Avitabile et al., Tetrahedron Lett 2010, 51, 3716–3718

选择一台能满足您特定需求的多肽合成仪可能是一项艰巨的任务。以下是一些需要考虑的关键因素，以便能够合成高质量的多肽，并使其数量和规模与您的应用相匹配。01 产量和平行合成问题不同的应用和研究阶段需要不同数量的多肽。肽类药物发现项目可能需要筛选数百（甚至数千）种肽来寻找目标肽，然后利用构效关系(SAR)，最终确定一种可用于临床的候选药物。因此，成功的关键在于选择一种合成仪，它的反应容器要能提供与您的应用相匹配的并行合成水平1。 02 合成规模研发过程的不同阶段也需要不同数量的多肽。例如，随着多肽疗法从早期筛选到先导化合物的优化和临床前开发，所需数量也会增加。合适的多肽合成器可以满足当前的规模需求，甚至可以灵活地进行扩展升级以扩大规模，可以满足下一步的需求1。03 序列难度和多肽长度合成多肽可能会遇到许多基于序列的难题，例如某些残基组合导致的聚集或二级结构形成。要克服这些难题，就必须选择一款能帮助您优化合成的多肽合成仪。追求尽可能高的纯度包括优化许多参数，如反应时间、偶联试剂的选择、浓度、树脂类型、温度和结构破坏残基的位置2,3。多通道合成仪仪器是并行测试不同参数的理想选择。加热可加速化学反应并提高许多困难序列的纯度，这意味着具有可选加热功能的仪器可成为首选系统。例如，感应加热可以独立设置多个反应容器的温度，从而在寻找最佳合成条件时提供最大的灵活性 4,5。在合成高难度多肽时，尽量减少试错的一种方法是使用实时紫外监测，而不是像大多数市售仪器那样监测废液流。在反应溶液混合时对其进行监测的合成器可对反应时间进行过程控制，从而大大提高产量和纯度6。如果您合成的是长肽，那么最大限度地提高每个步骤的反应效率至关重要，因为即使是微小的低效和副反应也会导致纯度和产量的急剧下降。为了提高合成效率，一些仪器配备了流体系统，可确保反应步骤之间无死体积和无交叉污染，从而最大限度地减少固相多肽合成中的添加、删除和其他常见副反应。04 对特殊化学的需求您是要合成标准线性肽，还是要合成环肽、拟肽或其他拟肽化合物？您是否要使用 PNA、PMO 或寡聚物？环肽的合成通常需要使用特殊保护的氨基酸衍生物以及正交脱保护和环化反应步骤。合成拟肽和其他类型的拟肽物以及 PNA、寡聚物和寡聚拟物都需要独特的单体和试剂。制备这些类型的分子需要一台在合成方案和氨基酸瓶位置方面具有最大灵活性的仪器。这就是为什么有些仪器在合成过程中使用多达 40 种氨基酸或其他单体，而不是将天然氨基酸限制在 20 个位置的原因。用于这些特殊化学反应的许多单体和试剂可能非常昂贵或珍贵，因此有些合成仪还提供从任何氨基酸/单体瓶位进行"Single-Shot"的功能，以确保不造成任何浪费。在某些情况下，特殊步骤可能会使用对空气或湿气敏感的催化剂，因此必须在惰性氮气或氩气环境下的封闭系统中进行化学反应。虽然目前大多数 SPPS 都使用 Fmoc 保护氨基酸，但有些研究小组仍在使用 Boc 化学，而在这种环境下使用的仪器必须与浓三氟乙酸 (TFA) 溶液兼容。因此，关键还在于选择一款能灵活处理实验室所用特殊化学成分的多肽合成仪。05 寻找能提供经济高效、面向未来的解决方案的合作伙伴，以满足您的多肽合成需求对于大多数实验室和生产设施来说，购买一台多肽合成仪是一笔不小的开支，需要根据投资回报率来进行评估。该仪器预计可无忧运行多年，并能提高团队的生产率。理想情况下，仪器应具有满足当前和未来预期需求的灵活性。如果目前的预算有限，或者团队的需求发生了变化，应该可以升级或提供以旧换新的价值，以换取功能或容量更强的系统。自始至终，您的仪器合作伙伴都应为您提供支持，确保您能实现目标。自 20 世纪 80 年代以来，Gyros Protein Technologies公司一直是自动化 固相多肽合成（SPPS）领域的创新者，如今已成为世界领先的多肽合成仪器供应商。所有仪器均采用专有的 PurePepTM Pathway 专利矩阵式液体传输技术，以最大限度地提高纯度并提供行业领先的可靠性。为了满足不同用户的需求，Gyros Protein Technologies公司的合成仪提供不同级别的通量。例如，PurePep® Chorus一次可以合成1到6条多肽，而 Symphony® X 可以同时合成多达 24 条多肽。使用Symphony® X 采用快速方案合成的短肽甚至长肽肽库可在一夜之间制备完成，一周内可生产多达 120 条肽。PurePep® Chorus和 Symphony® X均可使用 IntellisynthTM 系统进行实时紫外监测，并提供加热选项。Gyros Protein Technologies公司的所有合成仪都可用于高效合成微摩尔级的多肽，根据序列的长度，合成量可从几毫克到 50 毫克左右不等。在这些系统中，每个反应容器的最大刻度约为 1 mmol，这意味着在PurePep® Chorus和 Symphony® X上合成中等长度的多肽，刻度分别超过 25 g和 100 g。如果您需要数百克的肽用于动物实验，那么 Sonata® + 的最大合成量可达 200 mmol左右。 普瑞麦迪（北京）实验室技术有限公司是Gyros Protein Technologies公司中国区总代理，普瑞麦迪的员工在多肽化学领域拥有数十年的经验，可提供高水平的客户服务和技术支持。普瑞麦迪一定是您值得信赖的多肽合成解决方案合作伙伴。 References1.    Cyf Ramos-Colón, Daniel Martinez, Andrew Kennedy and James Cain. High-throughput parallel synthesis optimization of Glucagon-like Peptide 1 receptor agonists. Poster presented at EPS 20182.    Cyf Ramos-Colón, Daniel Martinez, Andrew Kennedy and James Cain. Turning up the heat on peptide purity. Chemistry Today – vol. 36(4) July/August 20183.    Daniel Martinez, Cyf Ramos-Colón, and James P Cain. Efficient synthesis of 84-mer human parathyroid hormone for the study of osteoporosis and hypoparathyroidism. Poster presented at APS 2017.4.    James P. Cain, Daniel Martinez, and Cyf Ramos-Colón. Optimized crude purity of cyclic melanocortin receptor agonist Melanotan II using induction heating. Poster presented at German Peptide Symposium 20185.    Andrew Kennedy, Daniel Martinez, James Cain and Cyf Ramos-Colón. Fast solid phase peptide synthesis method development for the synthesis of complex peptides. Poster presented at German Peptide Symposium 20196.    Comparison of Alternative Deprotection Reagents to Piperidine for the Synthesis of a Poly-Alanine Peptide. Application Note #207.    Paramjit Arora and Ganesh Jedhe. Fully Automated Synthesis of Oxopiperazine Helix Mimics on Prelude® X. Application note #258.    Cyf Ramos-Colón, Daniel Martinez, and James P. Cain. Synthesis of [des-Arg7]-Dynorphin A peptoid analogue: faster methods using parallel automated synthesis and induction heat. Poster presented at Foldamers 20189.    James Cain, Daniel Martinez, Andrew Kennedy, and Cyf Ramos-Colón. Synthesis of therapeutic stapled peptides: Fully automated peptide cyclization via olefin metathesis, Poster presented at EPS 201810.  Cyf Ramos-Colón, Daniel Martinez, Andrew Kennedy, and James Cain. Parallel automated solid phase synthesis: efficient high-throughput optimization for therapeutic discovery and development of peptide nucleic acids. Poster presented at TIDES 2018

植物源重组蛋白系列产品 “生长因子控制细胞的维持、增殖和分化，是干细胞研究和再生医学的关键工具“内毒素污染的微小差异会对细胞培养产生巨大影响“无动物成分和无内毒素生长因子可提高细胞培养物的一致性，这是获得可重复结果和过渡到临床应用的关键 公司介绍 Core Biogenesis是一家来自法国的以细胞因子产品线闻名业内的厂家，致力于为干细胞研究和细胞制造工业提供下一代重组蛋白。其独家研发的植物来源细胞因子，打破了传统细胞因子局限性，以无动物、无抗生素、无内毒素、无致热性，无细菌、病毒和朊病毒等优势，迅速占领国际细胞因子市场。 植物系统-生产平台 CORE BIOGENSIS研发了专有的植物系统生产平台-亚麻荠，用来进行重组蛋白的表达和生产。其生产的多个物种(如人，牛)的重组生长因子和细胞因子，广泛应用于iPSCs, MSCs，免疫细胞等领域。 FGF-2 STAB®专为干细胞生产设计   FGF-2 STAB®   FGF-2 STAB®是一种  新型的热稳定生长因   子，可让您以更少的培养基更换更高效地生长FGF-2依赖性细胞培养物。 应用场景 干细胞培养（iPSCs、NSCs、MSC）类器官培养与生产细胞治疗生产 产品特点 “高纯度：均大于95%的纯度“不含动物成分与内毒素：无动物成分和无内毒素生长因子可提高细胞培养物的一致性，这是获得可重复结果和过渡到临床应用的关键。“半衰期长：较传统FGF-2生长因子半衰期延长10倍，长达20天“生物活性高且稳定：全部生物活性保持在稳定的蛋白质构象中“周末无需进行换液操作“降低至少50%培养成本 热稳定性=长达20天半衰期+稳定的蛋白质结果+生物活性 由于FGF-2 STAB中9个氨基酸，FGF-2 STAB®的热稳定性有所提高。这导致细胞培养条件下的半衰期延长至 37°C，与野生型相比，蛋白质稳定性提高了 10 倍。 50%成本降低+周末无需换液工作 研究人员和制造商在多能干细胞培养过程中必须保持非常严格的每日计划，以避免自发分化会降低培养质量。FGF-2 STAB®具有增加半衰期和蛋白质稳定性的性质，可将稳定的生长因子持续暴露于细胞中，从而为显影剂提供更简化的喂养计划，并最终在最终干细胞群中实现所需表型的更均匀的组成。实现FGF-2 STAB®蛋白稳定性的切实好处：显著减少补料细胞所需的培养基量，并减少补料次数，节省人工成本，避免不方便的周末补料。 产品规格  产品规格FGF-2 STAB®（RUO）FGF-2 STAB®（cGMP）身份分子量质谱分析生物 活性EC50系列EC50 +  - 国际单位 （IU）纯度SDS-PAGE 的 >95%UPLC>95-97%无菌无菌过滤 0.2 μm + 生物负荷测试无菌 USP 和欧洲药典 2.6.7内毒素低于检测水平的鲎试剂测定USP 欧洲药典2.6.14支原体不适用阴性宿主细胞DNA/蛋白质含量不适用附件测试自主批次不含动物成分不含不含批次间一致性不适用是的法规遵从性ISO9001ISO9001， USP ， 欧洲药典 5.2.12

多肽是一种具有生物活性的物质，和蛋白质雷同，由氨基酸通过酰胺键连接形成，在多种生物学过程中发挥调控。随着生物学研究的深入以及医药学的不断发展，多肽在基础研究、医学诊断、治疗药物以及组织材料等领域应用越来越广泛。近年来，细胞穿膜肽、肿瘤新抗原、多肽疫苗、减肥药、化妆品肽相关研究方兴未艾；医药大厂也都在加码布局多肽研发管线。多肽作为一个新的风口，热度逐年上升。现在正是投入多肽研究的好时机，使用我们最新的双通道全自动多肽合成仪PurePep® Chorus或带感应加热功能的双通道 PurePep® Chorus ，帮助您推进实验进度，提升多肽研究工作的效率。使用PTI多肽合成仪的优势发现新技术并将其应用于多肽合成工作流程的可能性可进一步升级为 4 或 6 通道仪器的模块化系统确保业务的连续性和合成能力的持续性 PurePep Chorus 的特点和优势 模块化多肽合成器，可在实验室内从 2 个反应通道升级到 4 或 6 个反应通道，轻松提高合成产量实时紫外线监测，可在多个反应通道同时进行配置，以监控和优化脱保护步骤独立感应加热，温度范围高达 90˚C，便于方法优化 PurePep® Pathway实现高纯度和高产率符合 21 CFR Part11的图形化直观软件平台，带有预编程方法和试剂配置计算器，可实现快速无障碍的工作流程“在明尼苏达大学化学系，我们使用 PTI公司的 PS3 多肽合成仪已经成功工作了多年。目前，我们需要用更新的系统来取代它，于是我们决定购买PTI公司的 PurePep® Chorus。说服我们做出这一决定的原因之一是它的模块化系统。对于每个预算有限的研究者来说，随时升级系统以提高合成能力是一个非常有意义的选择。内置的切割系统也非常吸引人，该系统可在对我们有用的范围内运行，与其他仪器相比也相对简单。鉴于很多人都在使用它，我们认为这是一个优势。与 PS3 相比， Chorus 的新软件和方法编辑是一项重大改进，同时合成两种肽的能力也是如此。” ——明尼苏达大学化学系 Mark Distefano 教授

在漫长而充满挑战的药物研发过程中，需要通过确定候选药物对细胞靶点的亲和力以及相互作用的动力学来筛选候选药物。表面等离子体共振（SPR）、生物膜干涉测量法（BLI）、石英晶体微天平（QCM）和表面声波（SAW）等多种有标记和无标记的方法被用于对从细胞中提取的或重组表达分离的蛋白进行动力学研究。这些技术要求将提纯的蛋白质固定在传感器表面，以便测量其与溶液中分析物的相互作用。不幸的是，异源蛋白的表达和纯化很繁琐，并引入不确定性，如天然构象的改变，这可能会改变表达蛋白的结构和行为。此外，由于各种细胞异质性因素，如细胞表型、生长周期、膜的刚性、受体的可及性和构象以及邻近蛋白的影响，分离提纯蛋白受体的结合动力学可能与细胞原位天然受体的结合动力学大不相同。天然蛋白受体与分离提纯蛋白受体之间的这些生理差异及其对受体功能的潜在影响，使得基于细胞原位的相互作用分析方法更具药理学相关性和生物学意义。                   图1，不同形式的抗HER2抗体与HER2分子结合示意图 有几种方法可用于测量细胞天然受体的结合动力学，如表面等离子体共振显微镜（SPRM）、配体示踪剂（LT）和石英晶体微天平（QCM）。然而，SPRM 是唯一具有单细胞分辨率的技术，因此能够直接解决细胞异质性问题。这种固有的异质性会产生范围广泛的结合相互作用行为，而不能像通常的做法那样，简单地将整个细胞群的行为平均处理。本案例对人表皮生长因子受体 2（HER2）的天然形式和重组形式的结合动力学进行了详细研究和比较。由于各种因素的影响，重组形式和天然形式的 HER2 受体的取向可能不同。图 1 展示了通过（A）胺基偶联固定在葡聚糖基质芯片和（B）静电作用固定在培养皿上的 HER2 重组蛋白。固定化后，重组 HER2（rHER2）受体的结构域 IV 可及性更好。然而，细胞原位天然受体HER2是定向的，结合结构域 IV 非常靠近(C)活细胞和(D)固定细胞的细胞膜。因此，细胞膜可以通过对抗体施加一定的立体位阻影响相互作用。通过对不同受体方向的观察，我们可以发现，提纯的重组 HER2 受体固定后，结合域 IV 比其天然形式更容易接近。利用 SPRm200 系统研究了抗 HER2 抗体与 SKBR3 细胞原位的 HER2 的结合动力学，并与分离提纯的 rHER2 的结合动力学进行了比较。培养 SKBR3 细胞并让其附着于二分之一的聚赖氨酸涂层传感器表面（图 2A）；另一半传感器表面用作参照区。进行系列动力学滴定注射，使细胞先后暴露于6种浓度的anti-HER2-FITC 溶液（1.00、5.00、10.00、20.00 和 50.00 nM）中。                                  图2，SPRm200细胞原位分子互作动态分析系统实验分析ImageSPR™ 软件用于分析 SPRM 传感图。图 2B 显示了单个感兴趣区 (ROI) 的代表性结合反应。对蓝色 ROI 中观察到的结合反应进行分析，以生成图 2C-E 中的结合直方图。对直方图进行高斯分布拟合，以确定每个动力学参数的平均值和 95% 的置信区间。抗体与天然 HER2 受体之间的结合相互作用遵循 1:2 结合模型。这一观察与先前的研究结果非常吻合，先前的研究表明赫赛汀与天然和糖基化的 HER2 受体的结构域 IV 的结合方式为 1:2 结合，与非糖基化受体的结合力更强，而与糖基化受体的结合力更弱。将从 SKBR3 细胞的天然受体获得的动力学相互作用值与从提纯、固定的重组受体获得的值进行了比较。对重组受体rHER2 蛋白的结合研究是在采用 BI-DirectFlow™ 技术的五通道 BI-4500A SPR 系统上进行的。rHER2 分子通过胺基偶联固定在羧甲基葡聚糖（CM-葡聚糖）传感器芯片上。                   图3，BI-4500A多功能分子互作分析仪实验分析由于 rHER2 受体上缺乏糖基化修饰，因此采用更简单的 1:1 相互作用动力学模型进行拟合分析（图 3）。如表 1 所示，与重组受体相比，细胞内天然受体的结合速率较慢。这一点在第二组细胞原位动力学峰上表现得尤为明显，这些峰归因于糖基化，其结合率慢约 3.5 倍，亲和力弱约 17 倍。我们怀疑提纯的 rHER2受体固定后的取向和缺乏糖基化阻碍有助于提高 rHER2 受体结合域 IV 的可及性，从而使抗体结合速率更快，亲和力更强。                   表1，抗 HER2 抗体与细胞原位HER2和重组 HER2 相互作用测得的动力学参数本案例在细胞原位天然蛋白受体形式和固定重组蛋白受体形式之间观察到了截然不同的相互作用行为。这些差异凸显了基于细胞原位的分子互作动力学研究对药物开发的重要性，从而能更全面地评估药效、生物相关药效代动力学和基本的细胞生物学过程。SPRm200系统将光学显微镜与分子互作技术相结合，专为观察和测量细胞膜表面蛋白和其他目标分子结合亲和力及动力学常数设计，为分子相互作用的研究开辟了新的前沿。(1)SPRm200系统无需对观察目标进行标记，可以实时定量的进行检测；(2)可同时可视化观察细胞结构和局部结合活性；(3)无需提取细胞膜蛋白，即可在正常活细胞状态下观察和测量药物和膜蛋白的实时相互作用；(4)探测器测量每个像素的SPR响应，并将其映射到SPR图像中，在每个像素处，记录一个传感图，从而提供更多的局部信息。SPRM技术使在自然条件下研究细胞表面膜蛋白与其他目标分子结合和相互作用成为可能。SPRm200细胞原位分子互作动态分析系统凭借其卓越的灵敏度和稳定性，助力科学研究新发现，推动药物开发新高度。参考文献1) Wang, Qi, et al. "Research advances on surface plasmon resonance biosensors." Nanoscale 14.3 (2022):564-591.2) Olaru, Andreea, et al. "Surface plasmon resonance (SPR) biosensors in pharmaceutical analysis." Critical reviews in analytical chemistry 45.2 (2015): 97-105.3) Tao, Yi, et al. "Tailored biosensors for drug screening, efficacy assessment, and toxicity evaluation." ACSsensors 6.9 (2021): 3146-3162.4) Dong, Tianbao, et al. "Live Cells versus Fixated Cells: Kinetic Measurements of Biomolecular Interactions with the LigandTracer Method and Surface Plasmon Resonance Microscopy." Molecular Pharmaceutics (2023).

尊敬的科研工作者们！你们一定听说过CERO 3D Incubator & Bioreactor这款细胞培养系统吧！它在类器官研究领域具有显著优势，让我们一起来了解一下吧！首先，CERO提供了最佳的细胞培养环境，通过独特的3D细胞培养技术，监测和控制温度、pH和二氧化碳水平，为类器官的生长和发育提供最适宜的条件。其次，CERO能够提高类器官的复杂性和成熟度，模拟更真实的生理结构和功能。这对于研究类器官在特定生理环境下的反应和功能具有重要意义，让我们的研究更加接近真实，更有说服力。再次，CERO减少了对嵌入基质的依赖，提供最大的均匀性和稳定性(如CEROtubes有独特的鳍状设计)，使得类器官的培养更加标准化和可重复。这对于研究结果的可靠性和可比较性非常重要，让我们的实验更精准，更可信。最后，CERO适用于各种组织类型的类器官培养，如肝脏、肾脏、肠道、皮肤等，具有广泛的应用价值。无论你是研究肝脏还是皮肤，CERO都能满足你的需求。我们一起了解一下类器官的前世今生类器官的起源——自组织现象：类器官的起源可以追溯到1907年，当时44岁的美国贝克罗莱那大学教授威尔逊 (H. V. Wilson)发现通过机械分离的海绵(sponge)细胞可以重新聚集并自组织成为新的具有正常功能的海绵有机体，他的研究结果于1910年发表。Wilson, H. V. Development of sponges from dissociated tissue cells(1910)我们要知道类器官是由多个不同类型的细胞组成，协同工作以执行特定的功能，类似于真正的器官。它们可以是人工合成的，也可以是通过再生医学技术生长出来的。类器官的来源总结还有如下图六种：Xu et al. Journal of Hematology & Oncology (2018)近年来火热的干细胞研究，主要开始于上世纪末。1987年，A.J. Friedenstein发现间充质干细胞 (Mesenchymal Stem Cell,MSC)。1998年，美国生物学家James Thomson首次分离得到人胚胎干细胞。2007年，Thomson教授成功制造出人诱导多能干细胞 (induced Pluripotent Stem Cells,iPSC).如今，绝大多数类型的非肿瘤来源的人源类器官均可由MSC或iPSC发育而来，干细胞研究的飞速进展为类器官研究带来新的活力。近十余年类器官的发展，如下图类器官发展历程(Claudia Corrò et al. Am J Physiol Cell Physiol, 2020) CERO是如何促进类器官的研究进展的呢？我们这里有几个案例可以给大伙儿一起分享一下吧·CERO进行心脏组织模型的研究（心脏类器官的研究案例）干细胞来源的心肌细胞在心血管研究、疾病模型和药物开发等领域受到越来越多的关注。研究方法：使用CERO作为一个完整的工作流平台，让干细胞以均匀的聚集体形式扩增，然后直接诱导成为大量的跳动的心脏体。使用CERO进行多能干细胞的扩增和心肌分化，与传统的轨道振荡器相比，可以提高心肌细胞的质量、均匀性、完整性和产量。研究结果：使用CERO可以实现从干细胞到心肌细胞的高效转化，形成具有生理功能的心脏组织模型，用于各种应用。CERO 3D与轨道振荡器的比较—鼠胚干细胞诱导心肌细胞后的3、8和13天分化研究 这里有一段来自CERO的客户（Jaya Krishnan教授，法兰克福歌德大学心血管再生研究所，Genome Biologics联合创始人）的评价：“我们所有研究的最终目标是识别和开发具有临床相关性的治疗人类心脏病的药物。为此，我们利用人类自组织的心脏类器官进行高通量药物筛选，以及利用体内的人类先天性疾病的遗传模型，作为我们的实验平台，结合腺相关病毒（AAV）和反义RNA作为治疗剂。CERO 3D大大简化了我们的心脏类器官生成的工作流程，并使我们能够显著提高类器官的生产规模。使用CERO 3D生成的类器官显示出更好的细胞组织，以及在生产批次内外的均匀性和一致性。” ·不仅如此，CERO还应用于猪的肌源性类器官的研究（该研究于2022年在Cells上发表，影响因子≥4.9）三维细胞培养技术比平面表面更适合模拟体内细胞环境。球体是多细胞聚集体，我们旨在使用中型培养箱和生物反应器混合设备，制备无支架的肌源性起源球体，称为肌球体。首次使用这种技术从原始猪肌细胞（PMC）获得球体，并将其形态学和生长参数、标记物表达和肌源潜能与C2C12来源的球体进行了比较。两种细胞类型都能在生物反应器中在24小时后形成圆形球体。C2C12球体的平均直径（44.6µm）大于PMC球体（32.7µm），最大直径超过了1mm。C2C12细胞形成的聚集体较PMC更少，并具有更高的密集度（细胞核/平方毫米）。从球体中分离后，C2C12细胞和PMC开始再次增殖，并能够分化为肌源系谱，通过肌管形成和FActin、Desmin、MyoG和Myosin的表达来证明。在C2C12中，球体中观察到多核合体和Myosin的表达，表明加速了肌源分化。总之，中型培养箱和生物反应器系统适用于从原始肌细胞中形成和培养球体，并保持其肌源潜能。Cells 2022, 11,1453. https://doi.org/10.3390/cells11091453·CERO还应用于脑类器官的发育研究：“跨发育过程中从中等到纳米尺度成像三维脑器官结构”并在2022年发表于HUMAN DEVELOPMENT文献索引：Development(2022)149,dev200439.doi:10.1242/dev.200439根据Paşca等人（2015）的改良方案，使用CERO 3D培养箱-生物反应器的步骤如下：1、iPSCs解离：使用StemProAccutase将iPSCs解离成单细胞悬浮液。2、类器官形成：将1.5×106个iPSCs转移到AggreWell800板中，每个微孔中含有5000个细胞。使用培养基，包括50% DMEM-F12 GlutaMax、50%神经基底培养基。添加以下成分到培养基中：1:100 B-27、1:200 N-2、1:200 MEM-NEAA、1mM L-谷氨酰胺、1:1000 β-巯基乙醇、10μg/ml胰岛素。添加两种SMAD途径抑制剂dorsomorphin（1μM）和SB-431542（10μM），以及ROCK抑制剂Y-27632（10μM）。将具有和不具有霍乱弧菌诱导eGFP构建物的iPSC按10/90的比例混合。在最初的5天里，每天更换不含ROCK抑制剂的培养基。类器官培养：将类器官转移到CEROtubes中，放入旋转的CERO 3D生物反应器。从第5天到第12天，每隔一天喂养类器官。在第12天，改用含有bFGF（10ng/ml）而不是SMAD抑制剂的培养基培养4天。从第16天开始，类器官在未添加补充物的情况下维持，每隔一天更换一次培养基。·LSFEM的器官样本准备LSFEM的器官样本准备包括固定、渗透化、免疫染色、嵌入和消化等步骤。通过对样本的处理和扩张，可以实现清晰的成像和超分辨率的分析。（F，G）示例展示了根据II方案（CERO培养制备）的3个月大脑器官样本（F）和根据I方案(6孔板培养制备)的2个月大脑器官样本（G）的光学切片。两者都经过Hoechest和ZO1的染色。综合以上步骤，CERO 3D生物反应器能够在中-纳米级光学分辨率下对整个脑器官体进行缩放，获得关于脑器官体结构和亚细胞细节的全面视图。同时，通过LSFEM的超分辨率成像，可以可视化保留有空间信息的突触，实现对超分辨率下的扩展神经回路的分析。通过LSFM和LSFEM的结合，CERO为成熟的脑类器官的分析提供了一种有效的方法。 总的来说，CERO在类器官研究方面具有多种优势，如提供最佳细胞培养环境、提高类器官成熟度与复杂性、标准化和可重复培养，适用于多种组织类型。类器官的优势在于模拟人体生理状态、提高实验可靠性与准确性，广泛应用于基础研究、药物研发、临床试验和再生医疗。让我们共同努力，将类器官研究推向新的高度！

目前随着生物医学研究的深入，多肽药物开发已拓展到多种适应症领域，包括糖尿病、肿瘤、抗感染、减肥、疫苗、诊断等。从业者或手动合成多肽，或采用用多肽合成仪进行半自动/全自动的合成；而多肽纯化通常采用制备色谱纯化收集。多肽通常需要单独的机器进行合成或纯化，导致通量低、操作复杂。为了高效的多肽药物研发，开发人员寻求简化、可靠的解决方案。有没有可能在一台仪器上同时实现多肽合成与多肽纯化的功能呢？答案是肯定的随小编一起了解下Protein Technologies,Inc.(PTI)公司的解决方案：美国多肽合成仪研发与制造商Protein Technologies,Inc.(PTI)公司【即Gyros Protein Technologies公司】生产多款全自动多肽合成仪，包括PurePep®Chorus(2，4，6通道)，Symphony®X(24通道)，PurePep®Sonata+(单通道工业级)。PurePep®Chorus与Symphony®X均支持多通道平行多肽合成，可满足科研客户及医药研发企业的实验需求。 近年来PTI公司又推出了PurePep EasyClean (PEC)多肽纯化技术，进一步打破了多肽生产的壁垒。开发者设计了一种基于新型无痕可裂解连接分子(PEC-Linkers)和活性过滤材料的捕获-释放方法，用于合成多肽的纯化和修饰。PTI公司生产这些创新的PEC-Linkers，并为您提供第一个广泛适用的肽纯化试剂盒以及相关耗材，方便您迅速的将该技术应用于多肽化学实际工作中。通过捕获和释放的方法进行PEC纯化的方案包括下图所示的六个步骤1Linker偶联目标肽：在固相肽合成(SPPS)结束时，将PEC-Linker偶联到目标肽上。（每个氨基酸偶联循环作封端反应。）2切割肽：使用TFA混合溶液从SPPS树脂上切割肽3沉淀并溶解肽4捕获Linker：通过共价捕获(“Catch”)将肽链偶联在活化的过滤材料上5洗脱非目标肽：漂洗，共价捕获允许洗出未结合的物质，例如截断的序列、副产物等，并且您能够选择性地修饰结合的未受保护的肽。6a) Linker还原：PEC-Linker的还原使系统致敏，以保障安全释放多肽；b)酸敏感化释放：通过弱酸性试剂洗脱(“Release”)目标肽 PurePep EasyClean (PEC)多肽纯化技术详细介绍，请参考无需HPLC，一种实现多肽高效纯化的新方法 PurePep® EasyClean Auto KitPTI公司推出的PurePep® EasyClean Auto Kit，可在多肽合成仪上使用，进行多肽纯化。PurePep EasyClean自动化试剂盒是您的终极解决方案，可实现自动化平行纯化多肽。该套件包含PEC-Linker，预先填充活化过滤材料的墨盒，以及所需耗材，量身定制，以适应您现有的PurePep®Chorus多肽合成仪或Symphony®X多肽合成仪。试剂盒组成 品类内容PEC-LinkerRC+活性过滤材料6个墨盒（Agarose100填充）耗材6个45mL反应器1个SingleShot玻璃管还原剂DL -二硫苏糖醇封闭剂L -半胱氨酸缓冲液缓冲柠檬酸-碳酸钠的混合物主要特点3个手动步骤（仪器设置；加入多肽产物并运行；收集多肽与乙醚沉淀）与色谱法相比，每次肽纯化的手动操作时间减少90%6条或更多的自动多肽纯化所需时间不到6小时与传统色谱相比，毒性溶剂使用减少85%该试剂盒适用于在PurePep®Chorus或Symphony®X多肽合成仪上平行纯化6 x 100 μmol(Synthesis scale)多肽。PurePep®Chorus多肽合成仪结合了稳定自动化的多肽合成、多肽切割及多肽纯化；可先平行合成6条不同肽序，并原位切肽，然后在同一台仪器上，平行纯化6条多肽；使用感应加热能快速合成多肽，同时正交捕获-释放PurePep EasyClean (PEC)技术可实现高效多肽纯化；可有效应用于疏水肽(hydrophobic peptides)及聚集肽(aggregating peptides)的合成与纯化。

背景丹参(Lamiaceae)是用于治胸痹症、心绞痛的传统中药。瞬时受体电位通道1 (Transient receptor potential canonical channel 1, TRPC1)是心肌损伤治疗的重要靶点。目的筛选丹参中作用于TRPC1的活性成分。材料与方法采用中药系统药理学数据库与分析平台(TCMSP)，参照Lipinski的五法则，检索丹参化合物库进行初步筛选。然后，以TRPC1蛋白为基础，用AutoDock Vina软件对化合物组进行综合评分。利用表面等离子体共振(SPR)测定了最佳化合物与TRPC1蛋白的亲和力。采用Western blot方法观察最佳化合物对HL-1细胞TRPC1蛋白表达的影响，采用Fura-2/AM检测观察最佳化合物对HEK293细胞钙离子内流的影响。结果：同源建模TRPC5蛋白是TRPC家族成员，已知有蛋白晶体结构。TRPC1与TRPC5相似度46.33%。研究者以TRPC5晶体结构为基础，作了TRPC1的同源建模；利用POCASA预测了TRPC1蛋白的活性口袋。图1  POCASA预测TRPC1蛋白活性口袋。紫色区域代表潜在活性位点虚拟筛选&分子对接采用中药系统药理学数据库与分析平台(TCMSP)，参照Lipinski的五规则【分子量小于500Da；不超过5个氢键供体；不超过10个氢键受体；辛醇-水分配系数（Clog P）不超过5；口服生物利用度大于50%】以及类药性大于0.18，检索丹参化合物库进行初步筛选，从202个化合物中发现有20个化合物有良好的特征参数。然后利用AutoDock Vina软件对这20个化合物进行计算；通过配体受体间形状匹配与结合能量等参数进行评分。分子对接结果显示，其中迷迭香酸（Rosmarinic acid）得分最高。图2  RosA 与 TRPC1分子对接图谱亲和力测定小分子化合物RosA与TRPC1蛋白是否会发生结合呢？研究者采用SPR技术，利用P4SPR分子互作仪对RosA与TRPC1蛋白作了结合验证以及亲和力测量。检测发现，RosA与TRPC1蛋白的亲和力KD值为1.27uM；同时对照组TRPC1蛋白与TRCP1抗体的KD值是0.05 uM；TRPC1蛋白与抑制剂SKF96365的KD值是200uM。结果显示RosA可直接结合于TRPC1蛋白。图3  RosA与TPPC1蛋白的SPR结合曲线活性评价研究者进一步采用Western blot方法观察最佳化合物RosA对HL-1细胞TRPC1蛋白表达的影响，RosA (50uM)可降低HL-1细胞氧-葡萄糖剥夺/再灌注(OGD/R)后TRPC1蛋白水平(417.1%)，而对正常组没有影响。图4  RosA抑制HL-1细胞OGD/R 损伤后TRPC1蛋白水平 TRPC1蛋白属于离子通道蛋白家族，研究者又采用Fura-2/AM方法检测观察最佳化合物RosA对HEK293细胞钙离子内流的影响，发现RosA可抑制HEK293细胞中TRPC1蛋白介导的Ca2+内流损伤(0.07 Fura-2 Ratio340/380)。图5  RosA抑制HEK293细胞中TRPC1蛋白介导的Ca2+内流讨论与结论研究者利用“同源建模-虚拟筛选-分子对接-亲和力测定-活性评价”的方法，从传统中药丹参化合物库中获得了作用于TRPC1的潜在活性成分RosA，推测RosA可能是一种有前景的心肌损伤治疗临床候选药物。 文中“亲和力测定”环节采用了P4SPR个人型分子互作P4SPR优势Affinité instruments 的 P4SPR 是一款模块化、个人型的多通道分子互作系统，既可用于生物学机制的解析，也可用于药物筛选的验证。它的模块化设计允许与液流传输系统轻松集成。多通道特性提高了测量精度，其灵敏度允许检测低分子量的小分子。特异性强、灵敏度高且用户友好的P4SPR 系统可以用于快速收集SPR 数据来表征两分子间结合的相互作用，非常适合用于对生物功能背后作用机制的探索以及药物筛选等研究。 参考文献1,A CD36 ectodomain mediates insect pheromone detection via a putative tunnelling mechanism, Nature Communications,Richard Benton etc.2, Screening of rosmarinic acid from Salvia miltiorrhizaeacting on the novel target TRPC1 based on the‘homology modelling–virtual screening–molecular docking–affinity assay–activity evaluation’ method, PHARMACEUTICAL BIOLOGY.

近十年来，肽的合成在序列长度和复杂度方面对化学家们提出了越来越高的要求。基于40多个残基，多分支体系，环化结构等，越来越多的肽被用作活性药物成分(APIs)或诊断工具。此外，它们的合成可能需要适宜的合成策略，如拼接或引入翻译后修饰，如二硫键桥和糖基化残基等。本文汇总报道了化学家在PurePep®Chorus平台上成功合成了两种难合成肽：01 覆盖SARS-CoV-2刺突蛋白受体结合界面(受体结合基序，RBM436-507)的一种72聚合物肽。【1】【2】AcWNSNNLDSKVGGNYNYLYRLFRKSNLKPFERDISTEIYQAGSTP[CNGVEGFNC]YFPLQSYGFQPTNGVGYQP-NH202 头尾相连的二硫键桥联双环肽(BCL):一种具有明显金属结合特性的肽，由于两个His基团的存在，可以形成单核和双核复合物。【3】【4】BCL:c(PKKHP-c(CFWKTC)-PKKH)合成策略01    72聚合物肽合成策略 02  双环肽合成策略合成结果01  72聚合物肽合成结果文献报道了在仪器上合成时，封端与不封端效果的对比。采取封端策略获得粗品的色谱图显示出一个更尖锐的峰，从而实现更有效的纯化收集。此外，在封端策略的情况下，所有来自不完全偶联的片段(见下文)都属于疫苗开发所要求的肽序列。Ac-YFPLQSYGFQPTNGVGYQP-NH2Ac-FPLQSYGFQPTNGVGYQP-NH2Ac-PLQSYGFQPTNGVGYQP-NH202  双环肽合成结果文献报道了在仪器上经过on -树脂首尾环化，以及在溶液中反应形成二硫键桥，获得双环肽。 结论使用PurePep®Chorus®(Gyros Protein Technologies, Tucson AZ, USA)全自动肽合成仪，在感应加热的辅助下成功合成了两种难合成肽(72mer peptide和BCL)。PurePep®Chorus®不仅可以成功的的实现耦合和Fmoc-脱保护反应，还可以进行封端反应、树脂上首尾环化和完全去除烯丙基等。PurePep Chorus多肽合成仪，模块化设计，2、4、6通道灵活配置，可选配加热模块和UV实时监测模块，总有一种机型满足您的实验需求，为您的多肽合成提供最优选择!参考文献(1) Pratesi F, Errante F, Pacini L, Peña-Moreno IC, QuicenoS, Carotenuto A, BalamS, KonatéD, Diakité MM, Arévalo-Herrera M, KajavaAV, RoveroP, CorradinG, Migliorini P, Papini AM, Herrera S. A SARS-CoV-2 Spike Receptor Binding Motif Peptide Induces Anti-Spike Antibodies in Mice and Is Recognized by COVID-19 Patients. Front Immunol.(2022); 13:879946. doi: 10.3389/fimmu.2022.879946.(2) Traoré A, GuindoMA, KonatéD, Traoré B, Diakité SA, KantéS, DembéléA, CisséA, IncandelaNC, KodioM, Coulibaly YI, Faye O, KajavaAV, Pratesi F, Migliorini P, Papini AM, Pacini L, RoveroP, Errante F, Diakité M, Arevalo-Herrera M, Herrera S, CorradinG, BalamS. Seroreactivityof the Severe Acute spiratory Syndrome Coronavirus 2 Recombinant S Protein, Receptor-Binding Domain, and Its Receptor-Binding Motif in COVID-19 Patient sand Their Cross-Reactivity With Pre-COVID-19 Samples From Malaria-EndemicAreas. Front Immunol. (2022); 13:856033. doi: 10.3389/fimmu.2022.856033.(3) Marciniak A, PaciniL, Papini AM, BrasuńJ.Bicyclopeptides: a new class of ligands for Cu(II) ions. Dalton Trans. (2022); acceptedmanuscript. doi: 10.1039/D2DT01497A.(4) AlcaroMC, Sabatino G, UzielJ, Chelli M, Ginanneschi M, RoveroP, Papini AM. On-resinhead-to-tail cyclization of cyclotetra peptides: optimization of crucial parameters. JPeptSci. (2004);10(4):218-28. doi: 10.1002/psc.512

关于我们普瑞麦迪（北京）实验室技术有限公司，成立于2012年，坐落于中关村科技园丰台园区，是致力于生命科学实验室整体解决方案的高新技术企业，代理国际多家领先的科研仪器和试剂的全国代理商。目前为止产品涵盖流式细胞术解决方案、分子生物学产品、 PCR试剂等常规实验室试剂。代理国际知名品牌40多家，并且自主研发多款生物学试剂和细胞培养基，目前无血清间充质干细胞培养基、上皮细胞培养基、流式抗体、SPR技术服务与试剂等众多产品与国内多所科研单位已达成长期合作。 为什么选择普瑞麦迪01 产品线丰富：独家代理国际知名品牌40多家，并有多款自主研发产品重点产品品牌展示02 产品客户粘性强、满意度高：多款产品均与国内多所科研单位与企业达成合作，倍受好评03 强大的团队保障：售前售后团队均为硕士学历以上，及时提供全方位的支持 合作优惠政策*优质产品高质量供应：供应多种类、满足上下游应用的高质量产品*优惠的经销政策：为签约经销商提供充足的利润空间*多维度市场支持：从宣传物料、促销活动、市场宣传活动等多维度支持经销商的市场工作*无忧的售前售后服务：强大高学历支持团队随时提供售前售后服务 合作要求*熟悉区域内的生物科研市场，有稳定客户资源*具备良好商业信誉和商业道德的公司*具有区域市场操作经验，较强的市场开发能力*生物试剂行业优先 品牌目录

现代细胞研究的进展离不开单细胞分析的支持。在微生物学、免疫肿瘤学以及药物发现等领域，温和地将单个细胞从细胞基质中解离出来，是进行准确的单细胞分析的前提条件。在这个方向上，OLS作为您理想的细胞研究伙伴，引以为傲地推出了TIGR全自动单细胞制备仪。这款全自动、无酶、快速和可重复的仪器，能够从组织样本中高效地获得纯净的单个细胞。TIGR全自动单细胞制备仪在OLS公司位于不来梅的实验室中得到广泛应用。它兼容标准的细胞培养耗材，例如50毫升离心管和常规的细胞过滤器，能够对组织样本进行机械解离和并行处理，从而大大缩短处理时间。      TIGR由一个台式仪器和研磨管组成，其中研磨管是一种一次性无菌耗材，内部集成了核心单元和细胞过滤器。核心单元由转子和定子插件组成，两者之间配备了对向旋转的研磨齿。TIGR的灵活性是其主要优点之一。研究人员可以调整处理参数，例如时间、旋转方向、加速度、速度和处理步骤的数量。事实上，这使得可以为每个特定的应用创建一个定制的实验协议，以满足不同研究需求。       另一个显著的优势是节省时间。使用TIGR进行解离的过程仅需不到两分钟的时间。与其他基于酶的技术相比，这大大缩短了处理时间，而其他方法可能需要长达60分钟，尤其是在需要同时处理多个样本时。TIGR全自动单细胞制备仪的亮点包括以下几个方面1.温和的样品制备：TIGR采用无酶的机械解离方法，确保对细胞样本的温和处理，避免了酶法可能引起的细胞伤害或变性。2.无酶和标准化的单细胞解离：TIGR通过机械研磨和过滤的方式，能够高效地将组织样本解离为纯净的单个细胞。这种无酶解离的方法避免了酶处理可能带来的影响，保持了细胞的完整性和生物活性。同时，TIGR采用标准化的解离过程，确保每个样本的一致性和可比性，为后续的单细胞分析提供了可靠的基础。3.易于使用的软件和可定制的协议：TIGR配备了用户友好的软件界面，使操作变得简单和直观。研究人员可以根据自己的需求和实验设计，自由调整处理参数和步骤，以创建特定的实验协议。这种定制化的灵活性使得TIGR适用于各种不同的应用和实验要求。4.节省时间：TIGR的高效性可以极大地节省处理时间。相比于传统的基于酶的方法，TIGR的解离过程只需要不到两分钟的时间。这对于需要高通量处理的实验，特别是在同时处理多个样本时，具有极大的优势。研究人员可以更快地获得大量的单细胞样本，提高实验的效率和产出。5.过程控制：TIGR提供了精确的过程控制，研究人员可以调整和优化解离过程的各个参数。这种精准的控制使得实验可重复性高，能够稳定地获得高质量的单细胞样本。研究人员可以根据需要进行多次实验，得到可靠的结果。TIGR全自动细胞制备仪的原理基于研磨单元之间排列的齿的锁定机制。通过对向旋转的研磨齿，组织样本被破碎并转化为单细胞悬浮液。这种机械解离的方法简便而高效，能够提供高质量的单细胞样本，为后续的细胞分析提供可靠的基础。       总结起来，TIGR全自动细胞制备仪作为OLS公司的一款创新产品，具备温和的样品制备、无酶和标准化的单细胞解离、易于使用的软件和可定制的协议、节省时间以及精确的过程控制等多重优势。它为现代细胞研究提供了一种高效、可靠的解离方法，满足了细胞研究领域对于单细胞分析的需求。      相对于传统方法，TIGR组织研磨和解离器具有明显的优势。首先，传统方法中常使用酶来进行细胞解离，但酶的使用可能会对细胞造成损伤或变性，影响后续的分析结果。而TIGR采用无酶解离的方法，能够保持细胞的完整性和生物活性，确保获得准确的单细胞数据。      其次，传统方法中的细胞解离过程通常较为繁琐，需要耗费大量的时间和操作步骤。而TIGR的解离过程非常快速，仅需不到两分钟的时间即可完成。这使得研究人员能够更高效地处理大量的样本，并在较短的时间内获取到丰富的单细胞数据。      此外，TIGR具有高度的灵活性和可定制性。研究人员可以根据自己的实验需求，自由调整解离过程的参数，如时间、旋转方向、加速度、速度等，以及处理步骤的数量。这使得TIGR能够满足不同应用的要求，并为每个特定的实验设计定制合适的操作协议。      在实验操作方面，TIGR使用简单易学的软件界面，使操作变得直观和方便。同时，其提供的过程控制功能让研究人员能够对解离过程进行精准控制，确保实验的可重复性和结果的稳定性。总的来说，TIGR全自动单细胞制备仪作为一种无酶、快速、可重复的单细胞解离方法，为现代细胞研究提供了强大的支持。它的优势在于温和的样品制备、无酶和标准化的解离过程、易于使用的软件和可定制的协议、节省时间和精确的过程控制。通过使用TIGR，研究人员可以更加高效、准确地进行单细胞分析，推动细胞研究的发展。 具体应用介绍1.3D细胞培养：TIGR可用于制备3D细胞培养模型，如细胞球（Spheroids）、器官样体（Organoids）和肿瘤样体（Tumoroids）。通过温和的解离方法，TIGR可以将细胞从基质中解离出来，并用于构建复杂的3D细胞模型，模拟更真实的生理环境，用于药物筛选、疾病研究和组织工程等。2.单细胞计数：TIGR可用于快速、准确地进行单个细胞计数。通过解离组织样本，TIGR可以将细胞分散成单个细胞悬液，从而方便进行单细胞计数和准确的细胞浓度测量。这在细胞培养、细胞治疗和实验室操作中都是至关重要的。3.原代细胞分离：TIGR可用于分离原代细胞，如原代细胞培养、肿瘤组织等。通过机械解离的方式，TIGR能够高效地将细胞从组织中解离出来，获得纯净的原代细胞群落，为研究细胞功能、细胞类型特征以及药物响应提供可靠的材料。4.癌细胞系的建立：TIGR在癌症研究中也具有重要应用。通过解离肿瘤组织样本，TIGR可以获得单个肿瘤细胞，从中筛选和建立新的癌细胞系。这对于研究癌症发生机制、肿瘤异质性、药物敏感性等具有重要意义。5.流式细胞术：TIGR解离出的单细胞悬液可用于流式细胞术的分析。流式细胞术结合荧光标记和细胞分类技术，可以对细胞进行高通量的表型分析、表面标记物检测、细胞凋亡分析等。6.组织模型：TIGR可用于构建复杂的组织模型，如器官样体（Organoids）和肿瘤样体（Tumoroids）。通过解离和分散组织样本，TIGR可以生成单个细胞悬液，并将其重新组装成3D结构，模拟原生组织的结构和功能。这对于研究器官发育、组织再生和疾病模型构建具有重要意义。7.初级细胞的分离：TIGR在初级细胞的分离方面也具有应用价值。通过温和的解离方法，TIGR可以从组织样本中分离出原代细胞，如神经元、肌肉细胞、心肌细胞等。这为初级细胞的研究提供了宝贵的材料，有助于了解其生理功能和疾病机制。8.肿瘤模型研究：TIGR可用于构建肿瘤模型，如肿瘤球（Tumor Spheroids）和肿瘤切片（Tumor Slice）。通过解离和处理肿瘤组织，TIGR可以获得单个肿瘤细胞或组织切片，用于构建复杂的肿瘤模型。这有助于研究肿瘤的发展、耐药机制以及评估抗肿瘤药物的疗效。

普瑞麦迪关注未来：与ThinkCyte一同探索细胞世界的无限可能ThinkCyte是一家成立于2016年的初创公司，总部位于美国加州。以其独特的AI驱动细胞分选平台VisionSort™引领生命科学领域的变革，为免疫学、细胞生物学、肿瘤学等多领域提供了突破性技术和工具。其ghost cytometry技术结合了传统荧光流式细胞分选和无标记细胞分选，开创了新的研究和应用可能性。Ghost Cytometry技术原理Ghost Cytometry采用AI驱动的高速图像信息分析和细胞分类技术，结合了无标记和荧光模式。该技术基于一种专有的光学设计，利用结构照明捕捉细胞的图像信息，实现细胞亚细胞级分辨率的成像。图像信息被记录并压缩为1D波形，称为GMI波形，代表细胞的光谱指纹。通过AI训练分类器，他们可以仅基于GMI波形进行无标记的分析和细胞分选。Ghost Cytometry的训练学习与测试AI双模式分析，高内涵独特的细胞指纹处理与对照细胞的GMI信号不同流式分选各种形态的细胞Ghost Cytometry是一种创新的嵌入式人工智能AI技术，以细胞的物理特性（形态学）为基础进行表征和分选，并且于2018年在备受尊崇的《Science》杂志上得到认可。2021年5月19日，专注于开发新型细胞治疗、药物发现和诊断平台的生物技术公司ThinkCyte宣布完成2600万美元B轮融资。该轮融资由SPARX Group、Sysmex Corporation、Sumitomo Mitsui Trust Investment、SBI Group和Itochu Technology Ventures领投。ThinkCyte已经在国际知名的生物医学研究机构Broad Institute（布罗德研究所）完成VisionSort™的装机，并且于近期在加利福尼亚州红木城总部为Broad Institute提供了该平台技术的培训。普瑞麦迪（北京）实验室技术有限公司于2023年9月与THINKCYTE公司确立了合作关系，正式成为其公司产品VisionSort™的中国区总代理。 VisionSort™技术平台的独特之处双模式的AI驱动细胞表征和分选超高速：每秒分选3000个细胞高分辨率“细胞指纹”技术用于无偏发现、无人为干扰区分不同的细胞类型，包括免疫细胞、癌细胞和干细胞等识别细胞的不同状态如细胞活力和活化等实现蛋白质的亚细胞定位以及蛋白质的相互作用等分析结合前向散射、侧向散射、GMI信号、荧光等探测器实现多维度细胞分析的能力ThinkCyte的VisionSort™技术已经引起了科研界的广泛兴趣和认可，它不仅改变了我们对细胞的认知，还为生命科学的未来带来了巨大的潜力。产品应用领域广泛的应用细胞存活率（活/死/凋亡）细胞增值率核转移细胞器定位蛋白质-蛋白质相互作用线粒体形态杂质/碎片新陈代谢……免疫学T细胞耗竭T细胞糖酵解水平B/浆细胞分化Terg分类巨噬细胞亚型细胞-细胞间相互作用血液学WBC(白细胞差异)干细胞iPSCMSC肿瘤学癌细胞鉴定慢性粒细胞白血病亚群（有监督/无监督）药物筛选CRISPRDNA条形码化合物临床诊断如检测急性淋巴细胞白血病（ALL）和急性髓系白血病（AML）患者的骨髓细胞中的白血病细胞，而无需依赖生物染色

会议日程&报名：https://www.instrument.com.cn/webinar/meetings/icfcm2023/据普瑞麦迪（在线展位）官方消息，该企业成为ThinkCyte公司VisionSort™鬼影流式细胞仪中国区总代理。借此机会，本文特别梳理了关于ThinkCyte公司以及VisionSort™流式细胞仪的相关动态如下：历经7年，商业化布局AI赋能的流式分析与分选技术ThinkCyte成立于2016年，总部位于美国加州。是一家开创基于新型人工智能 (AI) 的细胞分析、表征和分离技术的生物技术公司，2023年开始商业发布其新的细胞分选平台VisionSort™。该流式平台是由Ghost Cytometry提供支持，这是一种创新的AI驱动技术，用于根据细胞的形态学对细胞进行表征和分类。它是第一个将传统荧光流式分选仪的分析功能与执行无标记细胞分选和细胞群无偏形态分析的能力相结合的细胞分选仪。值得强调的是，Ghost Cytometry是一种创新的嵌入式人工智能AI技术，以细胞的物理特性（形态学）为基础进行表征和分选，并且于2018年在《Science》杂志上得到认可。（详情点击查看：SCIENCE：AI驱动"鬼影"流式，实现高通量分选、分析）VisionSort Platform技术简介具体而言该技术基于一种专有的光学设计，利用结构照明捕捉细胞的图像信息，实现细胞亚细胞级分辨率的成像。图像信息被记录并压缩为1D波形，称为GMI波形，代表细胞的光谱指纹。通过AI训练分类器，他们可以仅基于GMI波形进行无标记的分析和细胞分选。结合的功能可以使研究人员不仅可以根据已知标记和形态学表型的组合来查看细胞，还可以挑选出独特的群体用于下游处理或分子分析。ThinkCyte企业动态ThinkCyte成立于2016年，是一家专注于开发新型细胞治疗、药物发现和诊断平台的生物技术公司，总部位于美国加州。2023年10月，普瑞麦迪成为ThinkCyte公司VisionSort™鬼影流式细胞仪中国区总代理。2023年7月17日，ThinkCyte宣布与赫尔辛基大学芬兰分子医学研究所（FIMM-HiLIFE）建立战略研究合作伙伴关系，旨在促进对白血病的理解和治疗。这项研究合作利用了ThinkCyte新的人工智能（AI）驱动的细胞表征和分选平台VisionSort，以及FIMM世界知名的临床注释白血病样本生物库和药物筛选方面的专业知识，旨在揭示如何治疗白血病和其他血液恶性肿瘤的新见解。2023年1月23日，生物技术公司ThinkCyte宣布任命Dr. Diether Recktenwald Ph.D.和Dr. Bo E. H. Saxberg M.D., Ph.D.为高级科学顾问委员会（SAB）成员。这些任命补充了ThinkCyte现有咨询团队的优势，并为ThinkCyte科学顾问委员会带来了对新兴流式细胞仪市场、战略产品开发和临床应用的深刻经验见解。2023年1月10日，生物技术公司ThinkCyte与Axcelead Drug Discovery Partners（DDP）宣布了一项研究合作，重点是开发新的方法来筛选治疗人类疾病的候选药物。这项合作将把ThinkCyte的人工智能驱动的细胞表征和分选技术Ghost Cytometry与Axcelead DDP的表型筛选技术及其超过150万种候选药物的多样化化合物库结合起来，评估这些化合物如何在疾病环境中改变细胞表型。2021年5月19日，ThinkCyte宣布完成2600万美元B轮融资。该轮融资由SPARX Group、Sysmex Corporation、Sumitomo Mitsui Trust Investment、SBI Group和Itochu Technology Ventures领投。2020年 7月1日，日立（Hitachi）表示将与ThinkCyte合作开发人工智能驱动的细胞分析和分选系统。ThinkCyte用于高通量和高含量单细胞分选技术“ghost cytometry”，将与日立大规模仪器制造能力相结合2020年5月29日，ThinkCyte宣布完成1500万美元B轮融资。该轮融资方有：SPARX Group、Fuyo General Lease、Itochu Technology Ventures。

高纯度、高产量    微量多种样本    高效率MagSi  免费试用装产品信息·组织与细胞核酸提取试剂盒（磁珠法） ·病毒核酸提取试剂盒（磁珠法） ·cfDNA尿液/血液核酸提取试剂盒（磁珠法） MagSi 试用装活动参与方式 扫码填写相关信息，审核通过后即刻获得试用装填写试用反馈后更有精美小礼品赠送哟 MagSi 产品详情1组织与细胞核酸提取试剂盒产品特点·流程简单，96个样品制备时间：约40min·不需要苯酚/氯仿等危险化学品的使用·不需要重复离⼼、真空或柱分离·优秀的完整性DIN > 8.1 ·基因组DNA的高产量和高纯度 ·适用于多种下游应用·适用于不同类型样本（包括海洋生物组织样本或珍稀细胞样本） 产品性能提取后不同小鼠组织(肝、脑、肺、尾)与国际主流供应商的DNA浓度进行对比。使用Agilent TapeStation 4150对比提取后产物与竞品从冷冻小鼠肝组织中纯化DNA的完整性。Magtivio产品所有DNA完整性指数(DIN)均>8.1。从结果来看：magtivio组织与细胞核酸提取试剂产品对小鼠组织的提取效果均优于国外某品牌，表明本公司试剂盒（磁珠法）产品性能较优。2 病毒核酸提取试剂盒产品特点·验证了SARS-CoV-2诊断⼯作流程·流程简单，可在室温完成 ，产量高 ·从粘性样品裂解物中也可快速分离 ·96个样品制备时间： ·适用于多种酶的下游流程·易于实现自动化操作 ·可用于多种样品采集装置中 产品性能在SARS-CoV-2检测测试中，将不同数量的SARSCoV-2阳性唾液样本稀释在SARS-CoV-2阴性唾液中。采用qRT-PCR检测SARS-CoV-2的RNA靶序列(S-和n2基因)。在所有样品中均获得内源控制基因(IC， β - actin)的均匀扩增，表明不存在PCR抑制。3 cfDNA血液/尿液核酸提取试剂盒产品特点·适用于新鲜或冷冻血浆、血清与尿液样本·用于1至4ml样品，同时支持扩展用于大体积10ml样品容量 ·平均产量:每毫升人血浆0.5至4 ng cfDNA(但供者与供者之间高度可变)·在56°C裂解后，所有其他步骤均在RT下完成 ·不需要载体RNA ·磁珠在优化的存储缓冲液中供应，以减少沉淀时间 ·适用于许多酶的下游应用，特别是RT- qpcr和测序·24个样品的处理时间:~60分钟产品性能采集的人血浆中纯化的cfDNA的电泳图(a) magtivio (b)国际主流供应商，使用magtivio试剂盒获得高质量的cfDNA，而另一产品产物显示高分子量的DNA污染(高亮)从不同体积的样本中提取cfDNA，并使用TapeStation 4150定量cfDNA检测(无细胞DNA检测)。在不同样品体积的提取中均获得了高cfDNA产量。