低场核磁共振技术在层析填料孔径分布研究中的应用

层析填料的基质一般为交联多糖（琼脂糖、葡聚糖等）、高分子聚合物等。一般根据层析技术原理（凝胶过滤、离子交换、亲和层析、疏水层析、反相层析）、目的物性质等分类选择填料，来满足过滤、分离纯化、批量吸附、提高载药量等生产需要。层析填料的孔道大小对生物蛋白产品的分离、装载等过程有重要的意义，孔道过大则会导致蛋白全部通过，孔道过小则导致蛋白无法进入孔中，无法有效过滤或装载[1]。蛋白分子尺寸从几纳米到几百纳米不等，因此对不同尺寸的目标对象有效地设计合适的孔径就显得非常关键。 层析填料的孔径在设计过程中，可通过增大孔道，来增加比表面积，增大吸附容量，提高流速，减少介质的用量，可使有限的柱子体积内，增大样品处理量。因此孔道的测定应尽可能的精确[2]。一、层析填料孔径分布各类检测分析方法的比较层析填料的孔结构参数，主要包括颗粒尺寸大小、孔径分布、形状、孔隙率等。其中孔径分布比其他参数重要，要求孔径分布集中，这样以便对目标尺寸的蛋白进行有效过滤或吸附装载。不同类型的介质其孔径变化范围也不一样，且范围较大，一般从nm级到μm级。层析填料常用的孔径分布测试方法主要有：氮吸法、压汞法、热孔法、逆体积排阻层析法等[3]。