辅酶Q10中有关物质检测方案(制备液相色谱)

Agela Technologies博纳艾杰尔产品应用案例 辅酶Q10原料药分析报告(中国药典) AP10036应用及技术服务部 摘要：本实验采用高效液相色谱法结合紫外检测器，按中国药典2015年版二部方法，选择 DurasehllC18-AM(5 um， 100A， 4.6×250mm)色谱柱对辅酶Q10原料进行了测定。结果表明：在波长为275nm， 流动相为甲醇：无水乙醇=1：1(v/v)时，测得的辅酶Q1o原料药中辅酶 Q9与辅酶 Qio峰分离度为6.98，理论塔板数以辅酶Q10峰计算为8040，能够满足检测要求。 关键词：高效液相色谱法；紫外检测器；辅酶 Q1o； Durasehll C18-AM 色谱柱 前言 辅酶Q10，属于辅酶类药，是重要的抗氧化剂和免疫增强剂。主要用于治疗心脏病(如心肌梗死、狭心症等)、心律失常、窦性心动过速、早搏、高血压和癌症的辅助治疗，以及用于急慢性病毒性肝炎、亚急性肺坏死的综合治疗。 表1.辅酶Q1o化学信息 样品名称 英文名 结构式 分子式 分子量 CAS 编号 辅酶Q10 Ubidecarenone C59H90O4 863.34 303-98-0 实验部分 仪器、试剂与材料 试剂材料 甲醇、无水乙醇均为色谱纯； 辅酶Q10原料药：黄色粉末，由上海普康药业有限公司提供； 高效液相色谱柱： DurasehllC18-AM；1； 5 um， 100 A，4.6×250mm。 样品制备 取本品20 mg， 精密称定，加无水乙醇40 mL， 在50℃水浴中振摇溶解，放冷后， 移至100 mL量瓶中，用无水乙醇稀释至刻度，摇匀，经0.45um 滤膜过滤后取续滤液作为供试品溶液。 色谱条件 色谱柱： Durasehll C18-AM； 5 um， 100A，，4.6×250 mm： 流动相：甲醇：无水乙醇=1：1(v/v)； 检测波长：275nm； 流速：1.0 mL/min： 柱温：：35℃： 进样量：20uL。 结果与讨论 本实验采用Durasehll C18-AM 色谱柱对辅酶Q10原料药中有关物质进行了测定，由表2及图1可知，流动相使用甲醇与无水乙醇，等度洗脱时，待测物峰形、分离效果良好。 表2.辅酶Q10原料药中有关物质测试结果 样品名称 峰序号 化合物名称 保留时间/min 理论塔板数 拖尾因子 分离度 辅酶Q10原料药供试品 1 辅酶Q9 11.158 8000 _ 溶液 2 辅酶Q10 15.286 8040 1.06 6.98 图1.辅酶Q10供试品溶液高效液相色谱图 ( Email： s e r vi c e@ag e l a .co m. cn 网址： w w w .ag e la.co m . c n 客服：400-606-8099 ) 图2.辅酶Q10供试品溶液高效液相色谱图(纵坐标局部放大) 结论 本实验按照中国药典2015年版二部辅酶Q10项下测试方法，采用 Durasehll C18-AM色谱柱(5 um， 100 A，4.6×250 mm)使用甲醇与无水乙醇为流动相，分离辅酶 Q10 原料药中有关物质。结果表明色谱柱对辅酶Q10原料药中辅酶 Q9与辅酶Q10峰分离度为6.98，理论塔板数以辅酶Q10峰计算为8040，能够满足检测要求。 附：相关产品 产品名称 规格描述 包装数量 订货号 Durasehll C18-AM 5 um， 100A， 4.6×250 mm 1支 DC952505-AM 1.5 mL 样品瓶 短螺纹透明带书写处32×11.6 mm 100/PK 1109-0519 1.5mL样品瓶盖 9 mm中心孔蓝盖，红色橡胶/米色 PTFE 隔垫 45°Shore A； 1.0 mm 100/PK 0915-1819 散孔滤膜 单膜，13 mm， 0.45 um 100个/包 AS021345-T 一次性注射器 2 mL 无针头 100支/包 LZSQ-2ML ( Email： s e r vi c e@ag e l a .co m. cn 网址： w w w .ag e la.co m . c n 客服：400-606-8099 ) 地址：天津经济开发区西区南大街 邮编：话： 传真：mail： service@agela.com.cn 网址： www.agela.com.cn 客服： 地址：天津经济开发区西区南大街 邮编：话： 传真：