漏芦中β蜕皮甾酮检测方案(液相色谱柱)

中国药典2010年版对应高效液机色谱方法图谱库(第一册)引领分析沂技.在北尿谱oaQQ4006165163 中国药典2010版对应高效液相色谱图集 漏芦分析 漏芦的高效液相色谱 《中国药典》收载情况 【来源】本品为菊科植物祁州漏芦Rhaponticum uniflorum (L.)DC.的干燥根。春、秋二季采挖，除去须根及泥沙，晒干。 【功能与主治】清热解毒，消痈，吓下乳，舒筋通脉。用于乳痈肿痛，痈疽发背，瘰疬疮毒，乳汁不通，湿痹拘挛。 【含量测定】色谱条件与系统适用性试验：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；齐甲醇-水(31：69)为流动相， 待β-蜕皮甾酮色谱峰出峰后，用甲醇洗脱6分钟；检测波长为247nm。理论板数按β-蜕皮甾酮峰计算应不低于6000。 对照品溶液的制备：取β-蜕皮甾酮对照品适量，精密精定，加甲醇制成每1mL含20ug的溶液，即得。 供试品溶液液制备：取本品粉末(过三号筛)约1g，精密称定，精密加入30%甲醇20mL，称定重量，加热回流1小时，放冷，再称定重量，用30%甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得。 测定法：分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10uL，注入液相色谱仪，测定，即得， 漏芦药材高效液相色谱方法的建立 【色谱行为描述】《中国药典》中漏芦的含量测定以β-蜕皮甾酮为质量评价依据，β-蜕皮甾酮在Inertsil ODS-3中的色谱特点为：检测波长在247nm时β-蜕皮甾酮的吸收最强，色谱图较好；在流动相组成为甲醇-水系统时，流动相的比例对β-蜕皮甾酮及相邻色谱峰的分离具有显著的影响，流动相甲醇的比例愈低，其分离度愈好，选择甲醇比例在26-31%(v/v)之间均可以获得满意的分离度；柱温对β-蜕皮甾酮及相邻色谱峰的分离也一定影响，选择柱温30~35度均有较好的分析效果，考虑到分析时间长短，采用上述色谱柱，优化流动相比例为甲醇-水(29：71)，柱温为35度。 漏芦 样品来源：本品为菊科植物祁州漏芦Rhaponticum uniflorum (L.)DC.的干燥根。产地：河北。 对照品：β-蜕皮蜕酮(上海同田生物技术有限公司，批号：09020221，含量：99%) 供试品溶液的制备：取本品粉末(过三号筛)约1g，精密称定，精密加入30%甲醇20mL，称定重量，加热回流1小时，放冷，再称定重量，用30%甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得。 对照品溶液的制备：取β-蜕皮甾酮对照品适量，精密称定，加甲醇制成每1mL含20ug的溶液，即得。 色谱柱： Inertsil ODS-3 (4.6x150 mm，5pm)济流动相：甲醇-水(29：71) 柱温：35℃检测波长：247nm流速：1.0 mL/min 进样量：10pL ※此条件同样适用于Inertsil ODS-4(4.6×150mm，5 pm)色谱柱对漏芦的分析 .中国药典2010年版对应高效液色谱方法图谱库(第一册)引领分析析技.在北尿谱牙oaQQ4006165163 漏芦 推荐使用条件范围：仪器配置：色谱柱： Intersil ODS-3(4.6×150 mm， 5 um)LC-20AD高压泵流动相：甲醇-水(26~31：74~69)SPD-20AV紫外可见光检测器柱温：30~35℃CTO-20AC柱温箱检测波长：247 nmCBM-20Alite 系统控制器流速：1.0mL/minSIL-20AC 自动进样器DGU-20A3 脱气机 标准样品 实际样品 Delector A：247nm β蜕皮标准品 (1) 名称 保留时间 面积 高度 理论塔板 拖尾因子 β-蜕皮甾酮 51.070 321165 3741 8000 0.99 β-蜕皮甾酮标准曲线 β-蜕皮甾酮重现性 No. 标准样品 实际样品 保留时间 峰面积 保留时间 峰面积 2 3 52.446 33490252.392 33374752.352 335231 51.014 32453251.541 321453 51.673 322787 AverageRSD% 52.400 3346260.09 0.23 51.410 322924 0.66 0.48 浓度mg/L *本数据山北京大学医学部陈世忠教授课题组提供 中国药典word版exe版pdf版及培训资料精华帖http：//www.yaojia.org/forum. php?mod=viewthread&tid=fromuid= 色谱柱Inertsil ODS-3 (4.6x150mm,5μm) 流动相: 甲醇-水(29:71 )柱温: 35℃检测波长247 nm 流速1.0ml/min进样量10μL※此条件同样适用于Inertsil ODS-4 (4.6 x 150 mm, 5μm)