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二氨基嘌呤核苷

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  • 【分享】一起分享核苷酸

    【分享】一起分享核苷酸

    [img]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2009/10/200910241555_177765_1610969_3.jpg[/img][color=#DC143C]核苷酸　[/color]　　　一类由嘌呤碱或嘧啶碱、核糖或脱氧核糖以及磷酸三种物质组成的化合物。又称核甙酸。戊糖与有机碱合成核苷，核苷与磷酸合成核苷酸，4种核苷酸组成核酸。核苷酸主要参与构成核酸，许多单核苷酸也具有多种重要的生物学功能，如与能量代谢有关的三磷酸腺苷（ATP）、脱氢辅酶等。某些核苷酸的类似物能干扰核苷酸代谢，可作为抗癌药物。根据糖的不同，核苷酸有核糖核苷酸及脱氧核苷酸两类。根据碱基的不同，又有腺嘌呤核苷酸(腺苷酸，AMP)、鸟嘌呤核苷酸(鸟苷酸，GMP)、胞嘧啶核苷酸(胞苷酸， CMP)、尿嘧啶核苷酸(尿苷酸,UMP)、胸腺嘧啶核苷酸（胸苷酸，TMP）及次黄嘌呤核苷酸(肌苷酸，IMP)等。核苷酸中的磷酸又有一分子、两分子及三分子几种形式。此外，核苷酸分子内部还可脱水缩合成为环核苷酸。 　　核苷酸是核糖核酸及脱氧核糖核酸的基本组成单位，是体内合成核酸的前身物。核苷酸随着核酸分布于生物体内各器官、组织、细胞的核及胞质中，并作为核酸的组成成分参与生物的遗传、发育、生长等基本生命活动。生物体内还有相当数量以游离形式存在的核苷酸。三磷酸腺苷在细胞能量代谢中起着主要的作用。体内的能量释放及吸收主要是以产生及消耗三磷酸腺苷来体现的。此外，三磷酸尿苷、三磷酸胞苷及三磷酸鸟苷也是有些物质合成代谢中能量的来源。腺苷酸还是某些辅酶，如辅酶Ⅰ、Ⅱ及辅酶A等的组成成分。 　　在生物体内，核苷酸可由一些简单的化合物合成。这些合成原料有天门冬氨酸、甘氨酸、谷氨酰胺、一碳单位及 CO2等。嘌呤核苷酸在体内分解代谢可产生尿酸，嘧啶核苷酸分解生成CO2、β－丙氨酸及β-氨基异丁酸等。嘌呤核苷酸及嘧啶核苷酸的代谢紊乱可引起临床症状（见嘌呤代谢紊乱、嘧啶代谢紊乱）。 　　核苷酸类化合物也有作为药物用于临床治疗者，例如肿瘤化学治疗中常用的5-氟尿嘧啶及6-巯基嘌呤等。 　　有些核苷酸分子中只有一个磷酸基，所以可称为一磷酸核苷(NMP)。5''-核苷酸的磷酸基还可进一步磷酸化生成二磷酸核苷(NDP)及三磷酸核苷(NTP)，其中磷酸之间是以高能键相连。脱氧核苷酸的情况也是如此。 　　体内还有一类环化核苷酸，即单核苷酸中磷酸部分与核糖中第三位和第五位碳原子同时脱水缩合形成一个环状二酯、即3''，5''-环化核苷酸，重要的有3''，5''-环腺苷酸(cAMP)和3''，5''-环鸟苷酸(cGMP)。

  • 【分享】植物生长调节剂的种类

    按用途分有以下几种：用途 适用的植物生长调节剂名称延长贮藏器官休眠 青鲜素，萘乙酸钠盐，萘乙酸甲酯。打破休眠促进萌发 赤霉素、激动素、硫脲，氯乙醇，过氧化氢。促进茎叶生长 赤霉素、6—苄基氨基嘌呤，油菜素内酯，三十烷醇。促进生根 吲哚丁酸，萘乙酸，2，4—D，比久，多效唑，乙烯利，6—苄基氨基嘌呤。抑制茎叶芽的生长 多效唑，优康唑，矮壮素，比久，皮克斯，三碘苯甲酸，青鲜素，粉绣宁。促进花芽形成 乙烯利，比久，6—苄基氨基嘌呤，萘乙酸，2，4—D，矮壮素。抑制花芽形成 赤霉素，调节膦。疏花疏果 萘乙酸，甲萘威、乙烯利、赤霉素、吲熟酯，6—苄基氨基嘌呤。保花保果 2，4—D，萘乙酸，防落素，赤霉素，矮壮素，比久，6—苄基氨基嘌呤。延长花期 多效唑，矮壮素，乙烯利，比久。诱导产生雌花 乙烯利，萘乙酸，吲哚乙酸，矮壮素。诱导产生雄花 赤霉素切花保鲜 氨氧乙基乙烯基甘氨酸，氨氧乙酸，硝酸银，硫代硫酸银。形成无籽果实 赤霉素，2，4—D，防落素，萘乙酸，6—苄基氨基嘌呤。促进果实成熟 乙烯利，比久。延缓果实成熟 2，4—D，赤霉素，比久，激动素，萘乙酸，6—苄基氨基嘌呤。延缓衰老 6—苄基氨基嘌呤，赤霉素，2，4—D，激动素。提高氨基酸含量 多效唑，防落素，吲熟酯。提高蛋白质含量 防落素，西玛津，莠去津，萘乙酸。提高含糖量 增甘膦，调节膦，皮克斯。促进果实着色 比久，吲熟酯，多效唑。增加脂肪含量 萘乙酸，青鲜素，整形素。提高抗逆性 脱落酸，多效唑，比久，矮壮素。

  • GB 5413.40-2016 婴幼儿食品和乳品中核苷酸的测定

    [align=left][color=black]核苷酸是一类由嘌呤碱或嘧啶碱、核糖或脱氧核糖以及磷酸三种物质组成的化合物。根据碱基的不同，分别有胞嘧啶核苷酸（CMP）、腺嘌呤核苷酸（AMP）、尿嘧啶核苷酸（UMP）、[/color]鸟嘌呤核苷酸（GMP）及次黄嘌呤核苷酸（IMP）等。由于核苷酸类化合物的极性较强，在常规反相C18色谱柱上难以保留，通常通过添加离子对试剂等方式增强保留。[/align][align=left][b]第一部分[color=red]CAPCELL PAK C18 AQ[/color]检测方法[/b][/align][align=left][/align][align=left][b]C[color=black]APCELL PAK C18 AQ[/color][/b][color=black]色谱柱可耐受纯水条件，适用于极性较大物质的高水相条件下的分析，因此也非常适合《GB 5413.40-2016 婴幼儿食品和乳品中核苷酸的测定》。[/color][color=black]按照国标方法，对核苷酸标准品以及样品进行分析，可得到良好线性以及定量分析结果；对30个样品进行前处理后进行分析，样品中各核苷酸与其前后杂质分离良好，且不同样品之间各核苷酸的保留时间相一致。[/color][/align][align=left][b][color=red] [/color][/b][/align][align=left][b]《GB 5413.40-2016 婴幼儿食品和乳品中核苷酸的测定》方法微调[/b][/align][align=left][img=,600,248]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2019/03/201903051502543279_7587_2222981_3.jpg!w813x337.jpg[/img][/align][align=left][img=,600,174]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2019/03/201903051503129151_4402_2222981_3.jpg!w776x226.jpg[/img][/align][align=left][/align][align=left] 下表为样品定量浓度结果[/align][align=left][img=,600,126]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2019/03/201903051455159701_7741_2222981_3.jpg!w900x190.jpg[/img][/align][align=left][img=,600,221]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2019/03/201903051456000129_1190_2222981_3.jpg!w844x311.jpg[/img] 上图为核苷酸样品与标准品的对比谱图[/align][align=left][/align][align=left]基于个别样品分析时遇到的CMP与其前杂质未得到良好分离的情况，通过对洗脱条件进行调整，可实现CMP与其前杂之间的良好分离。[/align][align=left][img=,600,215]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2019/03/201903051456501881_4082_2222981_3.jpg!w843x303.jpg[/img][img=,600,175]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2019/03/201903051456507871_7358_2222981_3.jpg!w900x263.jpg[/img][/align][align=left][/align][align=left][b]第二部分[color=red]CAPCELL PAK ADME[/color]色谱柱的分析[/b][/align][align=left][color=black]CAPCELLPAK ADME[/color][color=black]键合了笼状金刚烷基团，兼具高极性和疏水性特点，对高极性化合物有出色的保持和分离效果。[/color]在国标原条件下，不论是标准品还是样品均可使用CAPCELL PAK ADME得到5种核苷酸的良好保留与分离结果。[/align][align=left]值得注意的是，ADME色谱柱的溶出顺序与常规反相C18色谱柱不尽相同，再次印证了其独特的保留分离模式。对于不局限于C18色谱柱的老师来说，具有独特溶出模式的CAPCELL PAK ADME色谱柱是分析强极性化合物的不二之选。[/align][align=left][img=,500,346]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2019/03/201903051457304991_1509_2222981_3.jpg!w758x525.jpg[/img][/align][align=left][color=black] 上图为CAPCELL PAK ADME对5种核苷酸标准品的分析结果[/color][/align][align=left][/align][align=left][img=,500,347]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2019/03/201903051458490969_9562_2222981_3.jpg!w758x527.jpg[/img][/align][align=left][color=black] 上图为CAPCELL PAK ADME对5种核苷酸实际样品的分析结果[/color][/align]

  • GB 5413.40-2016 婴幼儿食品和乳品中核苷酸的测定

    GB 5413.40-2016 婴幼儿食品和乳品中核苷酸的测定

    [align=left][/align][align=left][color=black]核苷酸是一类由嘌呤碱或嘧啶碱、核糖或脱氧核糖以及磷酸三种物质组成的化合物。根据碱基的不同，分别有胞嘧啶核苷酸（CMP）、腺嘌呤核苷酸（AMP）、尿嘧啶核苷酸（UMP）、[/color]鸟嘌呤核苷酸（GMP）及次黄嘌呤核苷酸（IMP）等。由于核苷酸类化合物的极性较强，在常规反相C18色谱柱上难以保留，通常通过添加离子对试剂等方式增强保留。[/align][align=left][b]第一部分[color=red]CAPCELL PAK C18 AQ[/color]检测方法[/b][/align][align=left][/align][align=left][b]C[color=black]APCELL PAK C18 AQ[/color][/b][color=black]色谱柱可耐受纯水条件，适用于极性较大物质的高水相条件下的分析，因此也非常适合《GB 5413.40-2016 婴幼儿食品和乳品中核苷酸的测定》。[/color][color=black]按照国标方法，对核苷酸标准品以及样品进行分析，可得到良好线性以及定量分析结果；对30个样品进行前处理后进行分析，样品中各核苷酸与其前后杂质分离良好，且不同样品之间各核苷酸的保留时间相一致。[/color][/align][align=left][b][color=red] [/color][/b][/align][align=left][b]《GB 5413.40-2016 婴幼儿食品和乳品中核苷酸的测定》方法微调[/b][/align][align=left][img=,600,248]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2019/03/201903051502543279_7587_2222981_3.jpg!w813x337.jpg[/img][/align][align=left][img=,600,174]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2019/03/201903051503129151_4402_2222981_3.jpg!w776x226.jpg[/img][/align][align=left][/align][align=left]下表为样品定量浓度结果[/align][align=left][img=,600,126]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2019/03/201903051455159701_7741_2222981_3.jpg!w900x190.jpg[/img][/align][align=left][img=,600,221]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2019/03/201903051456000129_1190_2222981_3.jpg!w844x311.jpg[/img]上图为核苷酸样品与标准品的对比谱图[/align][align=left][/align][align=left]基于个别样品分析时遇到的CMP与其前杂质未得到良好分离的情况，通过对洗脱条件进行调整，可实现CMP与其前杂之间的良好分离。[/align][align=left][img=,600,215]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2019/03/201903051456501881_4082_2222981_3.jpg!w843x303.jpg[/img][img=,600,175]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2019/03/201903051456507871_7358_2222981_3.jpg!w900x263.jpg[/img][/align][align=left][/align][align=left][b]第二部分[color=red]CAPCELL PAK ADME[/color]色谱柱的分析[/b][/align][align=left][color=black]CAPCELLPAK ADME[/color][color=black]键合了笼状金刚烷基团，兼具高极性和疏水性特点，对高极性化合物有出色的保持和分离效果。[/color]在国标原条件下，不论是标准品还是样品均可使用CAPCELL PAK ADME得到5种核苷酸的良好保留与分离结果。[/align][align=left]值得注意的是，ADME色谱柱的溶出顺序与常规反相C18色谱柱不尽相同，再次印证了其独特的保留分离模式。对于不局限于C18色谱柱的老师来说，具有独特溶出模式的CAPCELL PAK ADME色谱柱是分析强极性化合物的不二之选。[/align][align=left][img=,500,346]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2019/03/201903051457304991_1509_2222981_3.jpg!w758x525.jpg[/img][/align][align=left][color=black] 上图为CAPCELL PAK ADME对5种核苷酸标准品的分析结果[/color][/align][align=left][/align][align=left][img=,500,347]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2019/03/201903051458490969_9562_2222981_3.jpg!w758x527.jpg[/img][/align][align=left][color=black] 上图为CAPCELL PAK ADME对5种核苷酸实际样品的分析结果[/color][/align][align=left][color=black][/color][/align][align=left][color=black][/color][/align][align=left][/align]

  • HPLC液相检测奶粉中核苷酸

    HPLC检测奶粉中核苷酸，出现标品没有问题，或偶尔有杂峰样品开始没有问题，后来出现A腺嘌呤峰分裂，柱子，机子都已经换过，请问是什么问题

  • GB5413.40 核苷酸标准品

    求助：GB5413.40 核苷酸标准品中有5种核苷酸的标准品要购买，不知道应该买哪里的。请教各位，能具体告知下购买的品牌和货号吗？胞嘧啶核苷酸 CMP：标准品，C9H14N3O8P，纯度≥99%次黄嘌呤核苷酸 IMP：标准品，C10H13N4O8P，纯度≥99%鸟嘌呤核苷酸 GMP：标准品，C10H14N5O8P，纯度≥99%尿嘧啶核苷酸 UMP：标准品，C9H13N2O9P，纯度≥99%腺嘌呤核苷酸 AMP：标准品，C10H14N5O7P，纯度≥99%

  • 【原创大赛】GBT 23381-2009液相色谱法检测豆芽中的6-苄基腺嘌呤

    【原创大赛】GBT 23381-2009液相色谱法检测豆芽中的6-苄基腺嘌呤

    [font=宋体][size=14pt]GBT 23381-2009[/size][/font][font=宋体][size=14pt]液相色谱法检测豆芽中的[/size][/font][font=Times New Roman][size=14pt]6-[/size][/font][font=宋体][size=14pt]苄基腺嘌呤[/size][/font][font=宋体][size=14pt][font='Times New Roman']6-苄氨基嘌呤[/font][font='Times New Roman']（[/font][font='Times New Roman']6-BA[/font][font='Times New Roman']）是一种人工合成的细胞分裂素，与植物内源激素具有相似的结构和性质，能够抑制植物叶内叶绿素、[/font][font='Times New Roman']核酸和蛋白质分解，广泛用作[/font][font='Times New Roman']无根豆芽[/font][font='Times New Roman']的生长调节剂。它是一种能使豆芽细胞快速分裂的激素类农药，同氮肥一样对人体都有致癌、致畸的作用。超量摄入激素类药品后，会对人体产生一定的危害，如使儿童发育早熟、女性生理发生改变、老年人骨质疏松等等。即使有些危害不会在短时间内出现，但是长久沉积必然会给健康带来不利影响。[/font][/size][/font][font=宋体][size=14pt][font=宋体]试剂：[/font][/size][/font][font='Times New Roman'][size=14pt][size=10.5000pt]0.02 mol/L醋酸铵水[/size][/size][/font][font=宋体][size=14pt][size=10.5000pt]（0.1%乙酸）[/size][/size][/font][font='Times New Roman'][size=14pt][size=10.5000pt]：[/size][/size][/font][font=宋体][size=14pt][size=10.5000pt]1.0 L超纯水中加入1.54 g醋[/size][/size][/font][font='Times New Roman'][size=14pt][size=10.5000pt]酸[/size][/size][/font][font=宋体][size=14pt][size=10.5000pt]铵和1.0 mL冰醋酸，混匀超声[/size][/size][/font][font='Times New Roman'][size=14pt][size=10.5000pt]，过0.45[/size][/size][/font][font='Times New Roman'][size=14pt][size=10.5000pt]μm滤膜备用[/size][/size][/font][font=宋体][size=14pt][size=10.5000pt]；[/size][/size][/font][font=宋体][size=14pt][font='Times New Roman']2[/font][font=宋体].5[/font][font='Times New Roman']%甲酸[/font][font=宋体]水[/font][font='Times New Roman']：[/font][font=宋体]2.5 [/font][font='Times New Roman']mL甲酸加入[/font][font=宋体]水中[/font][font='Times New Roman']，定容[/font][font=宋体]至1[/font][font='Times New Roman']00[/font][font='Times New Roman']mL[/font][font=宋体]；[/font][font=宋体]20[/font][font='Times New Roman']%氨水甲醇：[/font][font=宋体]20[/font][font='Times New Roman']mL氨水加入甲醇定容[/font][font=宋体]至[/font][font='Times New Roman']100[/font][font='Times New Roman']mL[/font][font=宋体]；[/font][font=宋体]20%甲醇水：[/font][font='Times New Roman']量取[/font][font=宋体]20 [/font][font='Times New Roman']mL[/font][font=宋体]甲醇[/font][font='Times New Roman']、纯水定容[/font][font=宋体]至[/font][font='Times New Roman']100[/font][font='Times New Roman']mL，混匀备用[/font][font=宋体]；[/font][font='Times New Roman']混合型阳离子交换柱；60[/font][font='Times New Roman']mg[/font][font=宋体]，[/font][font='Times New Roman']3[/font][font='Times New Roman']mL，使用前分别用3[/font][font='Times New Roman']mL甲醇、3[/font][font='Times New Roman']mL[/font][font=宋体] 2.5%甲酸[/font][font='Times New Roman']水活化[/font][font=宋体]；[/font][font='Times New Roman'] 方法原理[/font][font='Times New Roman']6-苄氨基嘌呤[/font][font=宋体]:[/font][font='Times New Roman']豆芽样品经粉碎后在酸化的乙腈水溶液提取条件下提取效率高、能消除干扰。高效液相色谱测定，紫外[/font][font='Times New Roman']检测器检测，以保留时间定性，峰面积或峰高定量。[/font][font='Times New Roman']前处理条件[/font][font='Times New Roman']称[/font][font=宋体]取[/font][font='Times New Roman']样品[/font][font=宋体]10[/font][font='Times New Roman'].0[/font][font='Times New Roman']g[/font][font=宋体]至50 [/font][font='Times New Roman']m[/font][font=宋体]L[/font][font='Times New Roman']离心管, 加入[/font][font=宋体]20 [/font][font='Times New Roman']mL[/font][font=宋体]甲醇，超声提取15 min[/font][font='Times New Roman']，4000[/font][font='Times New Roman']r/min 离心[/font][font=宋体]5[/font][font='Times New Roman']分钟，上清夜[/font][font=宋体]转移至1[/font][font='Times New Roman']50[/font][font='Times New Roman']m[/font][font=宋体]L鸡心瓶中，再[/font][font='Times New Roman']加入20[/font][font='Times New Roman']m[/font][font=宋体]L甲醇[/font][font='Times New Roman']，[/font][font=宋体]超声提取15 min，[/font][font='Times New Roman']4000[/font][font='Times New Roman']r/min 离心5分钟，[/font][font=宋体]合并上清液，用旋转蒸发仪40℃减压[/font][font='Times New Roman']浓缩[/font][font=宋体]（水浴温度不得超过60℃） ，除尽甲醇。残液中加入3滴6 mol/L HCl（残液体积不足2mL时，加入3 mL [/font][font='Times New Roman']2[/font][font=宋体].5[/font][font='Times New Roman']%甲酸[/font][font=宋体]水），涡旋，高速离心，[/font][font='Times New Roman']上清液过用[/font][font=宋体]3 [/font][font='Times New Roman']mL甲醇、[/font][font=宋体]3 mL [/font][font='Times New Roman']2[/font][font=宋体].5[/font][font='Times New Roman']%甲酸[/font][font=宋体]水[/font][font='Times New Roman']活化过的[/font][font=宋体]PCX[/font][font='Times New Roman']小柱[/font][font=宋体]净化[/font][font='Times New Roman']，[/font][font=宋体]依次[/font][font='Times New Roman']用[/font][font=宋体]3 mL [/font][font='Times New Roman']2[/font][font=宋体].5[/font][font='Times New Roman']%甲酸[/font][font=宋体]水[/font][font='Times New Roman']和[/font][font=宋体]3 [/font][font='Times New Roman']mL甲醇洗涤柱子，再用[/font][font=宋体]5 [/font][font='Times New Roman']mL[/font][font=宋体] 10 [/font][font='Times New Roman']%氨水甲醇溶液洗脱[/font][font=宋体]，[/font][font='Times New Roman']收集洗脱液于50[/font][font='Times New Roman']℃氮气吹干，[/font][font=宋体]20%甲醇水[/font][font='Times New Roman']涡旋[/font][font=宋体]洗脱[/font][font='Times New Roman']，[/font][font=宋体]定容5[/font][font='Times New Roman'].0[/font][font='Times New Roman']m[/font][font=宋体]L，[/font][font='Times New Roman']过[/font][font=宋体]0.45 um水[/font][font='Times New Roman']膜[/font][font=宋体]，[/font][font='Times New Roman']上机测定。[/font][font=宋体]【说明】：标准中称样量为10.0 g，40 mL甲醇分两次超声提取后，使用C18固相萃取柱净化，甲醇定容，过0.45 um有机膜后上机测定。[/font][font=宋体]本文[/font][font=宋体]使用阳离子交换柱净化，20%甲醇水洗脱，过水膜后上机测定。[/font][font=宋体][1] 温度高时，6-苄基腺嘌呤容易发生转化；[/font][font=宋体][2] 调pH=1.0~2.0，低于6-苄基腺嘌呤pKa（为3.8）两个单位，保证6-苄基腺嘌呤上柱前99%以上处于离子态，保证回收；减压浓缩除尽甲醇后，剩余液体的体积大于4 mL，可以不加3 mL 2.5%甲酸水，直接使用6 mol/L HCl调节酸性后，高速离心，上柱净化；[/font][font=宋体][3]高速离心，沉淀非水溶性固体，溶液澄清后提高过柱速度；[/font][font=宋体][4]使用5%氨水甲醇5 mL洗脱，阳离子交换柱上有残留，回收低；[/font][font=宋体][5]若使用有机滤膜会引入吸收波长为247nm的干扰峰。[/font][font=宋体][6]干样称2 g，加8 mL水，提取、净化步骤同新鲜样品，使用5%氨水甲醇3 mL洗脱，收集洗脱液，于50℃氮气吹干，20%甲醇水洗脱，定容1.0 mL。[/font][font=宋体][[/font][font=宋体]7[/font][font=宋体]]因流动相中含有0.1%乙酸，仪器要平衡足够长时间（待基线完全直线,一般一个小时以上）[/font][font='Times New Roman']仪器分析条件[/font][font='Times New Roman']1[/font][font=宋体]、[/font][font='Times New Roman']色谱的选择[/font][font='Times New Roman']6-苄氨基嘌呤[/font][font='Times New Roman']在甲醇和乙腈等有机试剂中有较好的溶解度，用这些试剂提取再配合液相色谱仪，可大大简化前处理过程，缩短前处理时间，且高效液相色谱仪[/font][font='Times New Roman']应用较为普遍，其易于推广应用，实用性强。[/font][font='Times New Roman']2[/font][font=宋体]、[/font][font='Times New Roman']色谱的[/font][font='Times New Roman']优化[/font][font='Times New Roman']实验过程中通过对色谱条件规定的参数要求进行了多次调整，以使仪器的灵敏度、稳定性和分离效率均处于最佳状态，获得满意的分离效果，达到回收率的要求。经过多次的试验摸索，确定实验参数。[/font][font=宋体](1)[/font][font='Times New Roman']色谱柱的选择[/font][font='Times New Roman']选用[/font][font='Times New Roman']C18[/font][font='Times New Roman']色谱柱，该色谱柱可在宽[/font][font='Times New Roman']pH [/font][font='Times New Roman']范围[/font][font='Times New Roman'](pH 2-9) [/font][font='Times New Roman']内提供良好的峰形，实验证明，该色谱柱适合分离豆芽中的[/font][font='Times New Roman']6-苄氨基嘌呤[/font][font='Times New Roman']，[/font][font='Times New Roman']峰形完全能满足检测要求且与干扰物质进行有效分离。[/font][font='Times New Roman'](2) [/font][font='Times New Roman']色谱条件的选择[/font][font='Times New Roman']通过对[/font][font='Times New Roman']0.5[/font][font='Times New Roman']mg/L[/font][font='Times New Roman']的[/font][font='Times New Roman']6-苄氨基嘌呤[/font][font='Times New Roman']的甲醇溶液并以甲醇为参比进行[/font][font='Times New Roman']200-400 nm[/font][font='Times New Roman']范围的紫外扫描，结果发现，[/font][font='Times New Roman']6-苄氨基嘌呤[/font][font='Times New Roman']在[/font][font='Times New Roman']267[/font][font='Times New Roman']nm[/font][font='Times New Roman']处有最大吸收，因此紫外吸收波长确定为[/font][font='Times New Roman']267[/font][font='Times New Roman']nm[/font][font='Times New Roman']。[/font][/size][/font][font=宋体][size=14pt][font='Times New Roman'] [img=,624,495]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2020/06/202006010609342120_2678_2166779_3.jpg!w624x495.jpg[/img][/font][/size][/font][font='Times New Roman'][size=10.5000pt][font=宋体] 6-苄氨基嘌呤光谱图[/font][/size][/font][font=宋体][font=宋体][size=10.5000pt]（3）仪器的工作条件为：仪器型号：WATERS 2695色谱柱： C18/250*4.6mm检测器：PDA 267 nm进样量：10μL；流速：1.0mL/min柱 温：35 ℃流动相：梯度洗脱 B:甲醇； A:0.02 mol/L醋酸铵乙酸水（0.1%乙酸）[/size][/font][/font][font=宋体][font=宋体][size=10.5000pt][img=,577,79]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2020/06/202006010612124022_9207_2166779_3.png!w577x79.jpg[/img][/size][/font][/font][font=宋体][size=10.5000pt][font=宋体]（4） 液相色谱法线性范围6-苄氨基嘌呤标准系列工作液浓度分别为0.10 mg/L、0.2 mg/L、0.5mg/L、1.00 mg/L、2.00 mg/L、将各浓度按照建立的方法依次进样后，检测得出一系列峰面积与浓度的对应点，连点成线，得到拟合标准曲线，直线方程为[b]Y=0.9013X-0.0051[/b]，相关系数r=1.0000。可见在0.1～2mg/L浓度范围内线性很好。如果实测样品的含量超过此范围，可对其进行稀释。方法检出限：取豆芽样品，加标浓度为0.05mg/kg，S/N值为6.2。[/font][/size][/font][font=宋体][size=10.5000pt][font=宋体][img=,638,506]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2020/06/202006010614227772_157_2166779_3.png!w638x506.jpg[/img][/font][/size][/font][font=宋体][font=宋体][size=10.5000pt] 样品检出限色谱图[/size][/font][/font][font=宋体][font=宋体][size=10.5000pt]方法的回收率分别以黄豆芽和绿豆芽为加标对象，分别加入2个水平的6-苄氨基嘌呤标准溶液，进行回收率的测定，每个样品重复6次，计算出每个添加水平的回收率和相应的相对标准偏[/size][/font][/font][font=宋体][font=宋体][size=10.5000pt]差（RSD）值。方法回收率结果见表1。 [/size][/font][/font][font=宋体][font=宋体][size=10.5000pt] [img=,690,385]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2020/06/202006010636575612_5770_2166779_3.png!w690x385.jpg[/img] [img=,600,483]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2020/06/202006010626546266_2432_2166779_3.jpg!w600x483.jpg[/img][/size][/font][/font][font=宋体][size=10.5pt] 样品加标0.1mg/kg堆栈难色谱图[/size][/font][font=宋体][font=宋体][size=10.5000pt] [img=,555,459]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2020/06/202006010628451672_2213_2166779_3.jpg!w555x459.jpg[/img][/size][/font][/font][font=宋体][font=宋体][size=10.5000pt] 样品加标0.25mg/kg堆栈难色谱图[/size][/font][/font][font='Times New Roman'][size=10.5pt][size=10.5000pt] 6-苄氨基嘌呤[/size][/size][/font][font='Times New Roman'][size=10.5pt][size=10.5000pt]属五大类植物激素中的细胞激动素类，其主要功能为促进非分化组织分化，促进生物体内物质的积累，促进侧芽发生，防止老化等作用，因此被广泛应用于农业、果树和园艺作物从发芽到收获的各个阶段。因此，有所检出可能为豆子本身的残留，而非人为添加。[/size][/size][/font][font='Times New Roman'][size=10.5pt][size=10.5000pt]结论：[/size][/size][/font][size=10.5000pt][color=#ff0000][font=宋体]【说明】：1、标准中称样量为10.0 g，40 mL甲醇分两次超声提取后，使用C18固相萃取柱净化，甲醇定容，过0.45 um有机膜后上机测定。本文使用阳离子交换柱净化，20%甲醇水洗脱，过水膜后上机测定。2、 温度高时，6-苄基腺嘌呤容易发生转化；3、 调pH=1.0~2.0，低于6-苄基腺嘌呤pKa（为3.8）两个单位，保证6-苄基腺嘌呤上柱前99%以上处于离子态，保证回收；减压浓缩除尽甲醇后，剩余液体的体积大于4 mL，可以不加3 mL 2.5%甲酸水，直接使用6 mol/L HCl调节酸性后，高速离心，上柱净化；4、高速离心，沉淀非水溶性固体，溶液澄清后提高过柱速度；5、使用5%氨水甲醇5 mL洗脱，阳离子交换柱上有残留，回收低；6、若使用有机滤膜会引入吸收波长为247nm的干扰峰。7、干样称2 g，加8 mL水，提取、净化步骤同新鲜样品，使用5%氨水甲醇3 mL洗脱，收集洗脱液，于50℃氮气吹干，20%甲醇水洗脱，定容1.0 mL。8、因流动相中含有0.1%乙酸，仪器要平衡足够长时间（待基线完全直线,一般一个小时以上）[/font][/color][/size]

  • 【求助】腺嘌呤如何进行脱氨反应

    本人最近在做关于腺嘌呤去氨基反应，到网上查找到重氮反应可以去氨基，但是做了几次都比较失败，所用的是在腺嘌呤中加入盐酸和亚硝酸钠，在0度左右进行反应，结果是腺嘌呤并没有太大变化，请问有做过腺嘌呤如何去氨基的吗，或者还有什么别的方法能去掉环上的氨基？

  • 【资料】蛹虫草及其培养基中主要核苷类成分的分析比较

    采用高效液相色谱法测定虫草中的核苷类成分，优化后的色谱条件为YMC-Polyamine 柱(250mm × 4.6mm，5μm)；采用梯度洗脱，流动相：乙腈- 水(V/V)：0～15min 为90:10，15～20min 为86.5:13.5，20～30min 为75:25，30～35min 为70:30；流速：1mL/min；柱温：30℃；检测波长：259nm；进样量：10μL。结果表明：胸腺嘧啶、虫草素、尿嘧啶、腺苷、腺嘌呤、尿苷、鸟嘌呤、次黄嘌呤均能得到较好分离，该方法稳定性好、精密度高、重现性好，适用于虫草中的核苷类成分的分析。经分析发现，蛹虫草子实体核苷类物质组成大致相似，但含量差异非常显著，同时发现蛹虫草培养基残基及固体发酵产物中虫草素含量较高，其他核苷类成分很少，因此认定蛹虫草培养基残基及固体发酵产物是非常优良的分离纯化虫草素的原料。

  • 1.2 反相高效液相色谱法测定乳制品中核苷酸方法的研究

    1.2 反相高效液相色谱法测定乳制品中核苷酸方法的研究

    作者：郝岩平　 姜金斗(国家乳制品质量监督检验中心 ,哈尔滨 　150086)胡向蔚(中国食品发酵工业研究院 ,北京 　100027)摘要：建立了高效液相色谱法测定乳制品中核苷酸含量的方法。采用紫外检测器 ,波长为 2 5 4nm ;色谱柱为迪马钻石C18,柱温为 2 5℃ ,流动相为① 0 0 1mol/LK2 HPO496 0ml+0 1mol/LK2 HPO440mlpH5 ;测定腺嘌呤核苷 (AMP)、鸟嘌呤核苷 (GMP)、次黄嘌呤核苷 (IMP)。②乙腈 :(0 0 1mol/LKH2 PO4+0 0 0 5mol/LK2 HPO4+1mmol/L四丁基溴化氨 ,磷酸调 pH5 0 ) =5 :95 ,测定胞嘧啶核苷 (CMP)、脲嘧啶核苷 (CMP)。流速为 1 0ml/min。五种核苷酸组分。标准曲线相关系数r为CMP 0 986 8;UMP 0 9879;GMP 0 9792 ;IMP 0 9799;AMP0 95 5 3;回收率为 94 6 % ;8次样品重复测定变异系数为 1 79%。谱图：http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2012/07/201207161012_377763_1606903_3.jpg

  • 【求助】关于检测核苷酸的难题

    [size=4]请教各位，近期俺要设计一个实验，但经过4、5天反复思考和查资料都没有找到太好的方案，遂进来赐教！是这样的，有一个混合样品，已知里面含有蛋白质（少量）、多肽和游离氨基酸（占绝大部分≥50%）、核苷酸（可能有三种存在形式：核苷、核苷酸、碱基）、还有其他可溶性化合物质。要求：检测样品当中核苷酸的含量。疑难：由于样品中多肽和游离氨基酸含量较多，遂不能用紫外分光光度计法测量（蛋白质和核苷酸的吸光峰值很相近，只有在蛋白质含量（包括蛋白质、多肽和游离氨基酸）较少的情况下用此法才准确）。 我的思路是，先把多肽和游离氨基酸与核苷酸分离开，然后再用紫外分光光度计法测量核苷酸含量。但本人才疏学浅，不知用什么方法才能把两者分离开。请各位赐教~~[/size]

  • 【液相色谱之家】低聚的核苷酸大家一般的HPLC分析方法大概？

    问题: 低聚的核苷酸大家一般的HPLC分析方法大概？我有个问题，比方说鸟嘌呤，它在水中的溶解性很差，为什么大体上方法都采用百分之九十以上缓冲水溶液呢？我一直以为难溶于水的结构，会在c18上有较强的保留，要靠高比例的有机相洗脱。C18到底是看输水作用还是靠非极性作用呢？极性强不一定在水中溶解度大，能跟水形成H键，这个时候亲水能力才能跟极性几乎同等看。还是说嘌呤的结构还有极性基团，一方面与c18作用小，另一个方面，有机相对他作用力大于水，为了让它保留强点，综合起来只能通过降低有机相比例了。

  • ADME色谱柱的特性　～以核苷作为标准品的全新评价方法～

    ADME色谱柱的特性　～以核苷作为标准品的全新评价方法～

    ADME色谱柱的特性　～以核苷作为标准品的全新评价方法～键合金刚烷基的ADME色谱柱对极性化合物的保留与分离具有良好表现，因此适用于对代谢产物的分析。目前为止，我们一直是基于对10种标准物质的测定结果对ADME色谱柱特性进行评价的（参照http://bbs.instrument.com.cn/topic/6210561）；本次，我们将采用全新的评价体系，以核苷类化合物作为标准物质，分别使用CAPCELL PAK ADME、CAPCELL PAK C18 AQ、CAPCELL PAK C18 MGII、2款他社杂化型ODS色谱柱及1款他社高极性ODS色谱柱（粒径均为5 μm）进行分析，考察各款色谱柱的溶出行为并进行比较。http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2017/02/201702161023_01_2222981_3.pnghttp://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2017/02/201702161023_02_2222981_3.png【HPLC conditions】Column size : 2.0 or 2.1 mm i.d. x150 mm Mobile phase : 10 mmol/L HCOONH4 / CH3OH = 95 / 5Flow rate : 0.2 mL/minTemperature : 40 ˚CDetection : UV 254 nmInj. vol. : 1 μLSample dissolved in : H2O(100 ppm each)如图2，键合金刚烷基的CAPCELL PAK ADME色谱柱保留能力最强。根据所得结果计算得到的参数见表1。http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2017/02/201702161035_01_2222981_3.png将各款色谱柱对应的尿嘧啶核苷（峰1）、2’-脱氧尿苷（峰2 ）、鸟嘌呤核苷（峰3）与2’-脱氧鸟苷（峰5）的分配系数比进行比较，可知与其他C18色谱柱相比，CAPCELL PAK ADME对应参数值最大，说明其对羟基具有优秀的识别能力；同时，将尿嘧啶核苷（峰1）与5-甲基尿苷（峰4）的分离系数比进行比较，可知ADME色谱柱对于甲基也具有适度的识别能力，因此对于疏水性化合物来说，具有与C18[/col

  • 没有内标，做单，二，三磷酸的核苷酸分析，可以定量吗？

    目前想用Thermo Fisher的四级杆－静电轨道离子阱质谱做一个药物单，二，三磷酸核苷酸分析。文献报道是用同位素做内标，是他们实验室自己合成的，买不到现成的。用阴离子，MRM模式来做。想问，如果没有内标的话，只有该药物的单，二，三磷酸核苷酸的标准品的话，能够定量吗？第一次发帖求助，先谢谢大家的热心帮助！

  • 【分享】极性化合物分析实例

    很多种类的极性化合物分离条件。􀂗 UDP-葡萄糖􀂗 UDP-葡萄糖、UDP-半乳糖、磷酸半乳糖􀂗 葡萄糖􀂗 蔗糖􀂗 红细胞中的UDP-葡萄糖、UDP-半乳糖、三磷酸腺苷（ATP）􀂗 ADP-葡萄糖、CDP-葡萄糖􀂗 糖核苷酸􀂗 胞嘧啶、胸腺嘧啶、尿嘧啶、鸟嘌呤、腺嘌呤􀂗 三磷酸腺苷（ATP）、一磷酸腺苷（AMP）􀂗 黄嘌呤-磷酸、鸟嘌呤-三磷酸􀂗 体液中的黄嘌呤、尿酸、次黄嘌呤􀂗 色胺、五羟色胺、多巴胺􀂗 L-天冬氨酸、L-精氨酸􀂗 L-精氨酸、L-赖氨酸、L-组氨酸􀂗 谷氨酸、赖氨酸􀂗 亮氨酸、异亮氨酸􀂗 L-甲硫氨酸、L-谷氨酸􀂗 甲基琥珀酸、戊二酸、草酸、肌酸、4-羟脯氨酸、天冬氨酸、鸟氨酸􀂗 叶酸􀂗 抗坏血酸􀂗 胆汁酸􀂗 柠檬酸、马来酸、反式乌头酸􀂗 马来酸、富马酸􀂗 3-羟基肉桂酸􀂗 矮壮素、甲哌啶􀂗 苯海拉明􀂗 4-二甲氨基吡啶􀂗 草甘膦􀂗 三聚氰胺、三聚氰酸􀂗 胍

  • 【资料】极性化合物分析实例

    很多种类的极性化合物分离条件。􀂗 UDP-葡萄糖􀂗 UDP-葡萄糖、UDP-半乳糖、磷酸半乳糖􀂗 葡萄糖􀂗 蔗糖􀂗 红细胞中的UDP-葡萄糖、UDP-半乳糖、三磷酸腺苷（ATP）􀂗 ADP-葡萄糖、CDP-葡萄糖􀂗 糖核苷酸􀂗 胞嘧啶、胸腺嘧啶、尿嘧啶、鸟嘌呤、腺嘌呤􀂗 三磷酸腺苷（ATP）、一磷酸腺苷（AMP）􀂗 黄嘌呤-磷酸、鸟嘌呤-三磷酸􀂗 体液中的黄嘌呤、尿酸、次黄嘌呤􀂗 色胺、五羟色胺、多巴胺􀂗 L-天冬氨酸、L-精氨酸􀂗 L-精氨酸、L-赖氨酸、L-组氨酸􀂗 谷氨酸、赖氨酸􀂗 亮氨酸、异亮氨酸􀂗 L-甲硫氨酸、L-谷氨酸􀂗 甲基琥珀酸、戊二酸、草酸、肌酸、4-羟脯氨酸、天冬氨酸、鸟氨酸􀂗 叶酸􀂗 抗坏血酸􀂗 胆汁酸􀂗 柠檬酸、马来酸、反式乌头酸􀂗 马来酸、富马酸􀂗 3-羟基肉桂酸􀂗 矮壮素、甲哌啶􀂗 苯海拉明􀂗 4-二甲氨基吡啶􀂗 草甘膦􀂗 三聚氰胺、三聚氰酸􀂗 胍

  • 急！要做这些药在辣椒黄瓜番茄和豇豆中的残留 用什么色谱柱？

    要做这些药在辣椒黄瓜番茄和豇豆中的残留 用什么色谱柱 3-羟基克百威矮壮素灭蝇胺对氯苯氧乙酸霜霉威吡虫啉2，4-D啶虫脒萘乙酸6-苄氨基嘌呤克百威噻唑磷抗蚜威氯吡脲嘧霉胺多效唑三唑磷虫酰肼咪鲜胺甲基嘧啶磷茚虫威虫螨腈噻嗪酮阿维菌素哒螨灵双甲脒仲丁威烯酰吗啉还请指导。 C18，2.1*100mm*1.7um和 HILIC，2.1*50mm*1.7um的除了waters的UHPLC外还有什么柱子可以选择？

  • 【讨论】双波长法测定呈味核苷二钠的含量

    取0.400g样品于２５０mL容量瓶中，用蒸馏水定容至刻度。吸取5.0mL溶液于另一容量瓶中，用0.01mol/LHcl溶液定容至刻度，用石英比色皿，0.01mol/LHcl溶液做空白，在250 nm,280nm处分别测其吸光度。我测定的吸光度很不稳定，变化比较大。有没有检测呈味核苷二钠的含量（包括IMP含量、GMP含量）的同行，我们讨论一下体会？

  • 选择合适做嘌呤类碱基的液相色谱柱

    如题，本人想选择一款可以很好分离，成型四种嘌呤的液相色谱柱，分别是鸟嘌呤，腺嘌呤，黄嘌呤，次黄嘌呤，文献中的色谱柱是waters的Atlantic T3 流动相是0.05mol/L的磷酸二氢钾缓冲盐，不含有机相，现在我的疑问是1、waters这款柱子到底适不适合这种纯水相的条件2、waters这款色谱柱有点小贵，有没有其他品牌但是效果差不多的色谱柱呢，当然要是再贵一点，但是比这款柱子更适合的也可以希望懂的人能够给与解答，不胜感激

  • 【分享】PCR和RT-PCR基础大全（三）

    【分享】PCR和RT-PCR基础大全（三）

    PCR和RT-PCR 兰州大学 王映珍第五章 增加PCR特异性引物设计 细心地进行引物设计是PCR中最重要的一步。理想的引物对只同目的序列两侧的单一序列而非其他序列退火。设计糟糕的引物可能会同扩增其他的非目的序列。下面的指导描述了一个可以增加特异性的引物所具有的令人满意的特点： * 典型的引物18到24个核苷长。引物需要足够长，保证序列独特性，并降低序列存在于非目的序列位点的可能性。但是长度大于24核苷的引物并不意味着更高的特异性。较长的序列可能会与错误配对序列杂交，降低了特异性，而且比短序列杂交慢，从而降低了产量。 * 选择GC含量为40％到60％或GC含量反映模板GC含量的引物。 * 设计5'端和中间区为G或C的引物。这会增加引物的稳定性和引物同目的序列杂交的稳定性。 * 避免引物对3'末端存在互补序列，这会形成引物二聚体，抑制扩增。 * 避免3'末端富含GC。设计引物时保证在最后5个核苷中含有3个A或T。 * 避免3'末端的错误配对。3'端核苷需要同模板退火以供聚合酶催化延伸。 * 避免存在可能会产生内部二级结构的序列，这会破坏引物退火稳定性。 目的序列上并不存在的附加序列，如限制位点和启动子序列，可以加入到引物5'端而不影响特异性。当计算引物Tm值时并不包括这些序列，但是应该对其进行互补性和内部二级结构的检测。 有时候，仅有有限的序列信箱可供用于引物设计。比如，如果仅知道氨基酸序列，可以设计简并引物。简并引物是指代表编码单个氨基酸所有不同碱基可能性的不同序列的混合物。为了增加特异性，可以参考密码子使用表，根据不同生物的碱基使用偏好，减少简并性。次黄嘌呤可以同所有的碱基配对，降低引物的退火温度。不要在引物的3'端使用简并碱基，因为3'端最后3个碱基的退火足以在错误位点起始PCR。使用较高的引物浓度（1μM到3μM），因为许多简并混合物中的引物不是特异性针对目的模板。 引物退火温度 引物的另一个重要参数是熔解温度（Tm）。这是当[/

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