氨水

一、样品信息样品组分结构式柠檬黄新红 苋菜红靛蓝胭脂红 日落黄诱惑红 亮蓝二．实验目的参照《食品中合成着色剂的测定》（GB/T5009.35-2003），建立红酒中的合成着色剂的SPE-HPLC检测方法。三．实验方法3.1实验试剂l 乙酸；l 甲醇；l 乙酸铵溶液（0.02mol/L）：称取1.54g乙酸铵，加水溶解并稀释至1000mL；l 氨水溶液：量取氨水2ml，加水至100mL，混匀；l 甲醇/甲酸（6+4）溶液：量取甲醇60mL，甲酸40mL，混匀；l 柠檬酸溶液：称取20g柠檬酸，加水至100mL溶解，混匀；l 无水乙醇-氨水溶液-水：量取无水乙醇70mL，氨水溶液20mL、水10mL，混匀；l 水（PH=6.0）：水加柠檬酸溶液调节PH=6.0；l 水（PH=4.0）：水加柠檬酸溶液调节PH=4.0；l 水：超纯水l 合成着色剂储备液：每1.0mL中含柠檬黄、新红、苋菜红、靛蓝、胭脂红、日落黄、亮蓝各0.5mg，诱惑红0.1mg的水溶液；l 合成着色剂使用液：上述合成着色剂储备液逐级稀释成每1.0mL中含柠檬黄、新红、苋菜红、靛蓝、胭脂红、日落黄、亮蓝各5&mu g，诱惑红1&mu g的水溶液；Cleanert JXA SPE小柱：规格为1g/6mL，使用前经5mL甲醇和5mL pH=6.0的水活化。3.2.实验耗材名称规格订货号Venusil XBP C185&mu m，100A，4.6*150mm VX951505-0保护柱芯4.6*10mm，4/pkVX950105-0保护柱套适用于4.6*10mm的保护柱芯CH-100Cleanert JXA1g/6ml，30/盒JXA0006Hydrophilic PTFE0.45um，13mm，100/包AS0813453.3.试样处理取试样（某品牌红酒）20ml,加入合成着色剂混标溶液1.0mL，混匀，用10%氨水调节PH约6.0，将全部试样经过Cleanert JXA柱，分别用水（PH=4.0）、甲醇/加酸（6+4）溶液6mL淋洗，再用10mL水淋洗，用乙醇-氨水溶液-水（7+2+1）6ml洗脱，收集洗脱液于50℃水浴蒸发至干，加水定容至1.0mL，经0.45&mu m滤膜过滤，待测。3.4液相色谱条件色谱柱：Venusil XBP C18，5&mu m；4.6*150mm；流动相：A：0.02mol/L的乙酸铵溶液（乙酸调节pH=4）； B：甲醇流 速：1.0mL/min；进样量：20&mu L；波 长：254nm；梯 度：时间A%B%095510802018406025406025.0195540955四．实验结果表1.添加5ppm混标峰面积数据样品组分标品标样过柱1标样过柱2红酒样品1红酒样品2柠檬黄318320315294324新红471474461482473苋菜红266269262277279靛蓝314282279273275胭脂红266267263246240日落黄234238234210212诱惑红3333333534亮蓝3940393737表2.添加5ppm混标回收率数据样品组分标样过柱1（%）标样过柱2（%）红酒样品1（%）红酒样品2（%）柠檬黄100.69992.5102新红100.697.8102100苋菜红10198.5104105靛蓝89.888.886.987.5胭脂红100.398.892.590.2日落黄1011009090.6诱惑红100100106103亮蓝1021009595五、实验结论实验结果表明，Cleanert JXA小柱和Venusil XBP C18液相色谱柱可以用于红酒中的合成着色剂的检测，该方法快速、准确。六、注意事项l 红酒样品呈弱酸性，在上样之前要将其pH值调节至6左右，保证小柱可对合成着色剂有良好地吸附；l 若样品酒精度过高，建议在上样前对样品进行除醇处理；l SPE小柱净化过程中，要注意对流速的控制，建议控制在1mL/min左右；l 洗脱液氮吹复溶后，应选用水系滤膜过滤，防止因滤膜吸附造成样品的损失，建议选用Agela Hydrophilic PTFE滤头。附录：图1 5ppm混标溶液图2 5ppm混标过柱1图3 5ppm混标过柱2图4 红酒空白图谱图5 5ppm基质加标1图6 5ppm基质加标2

五氯酚（PCP）通常以其钠盐（NaPCP）的形式存在，即五氯酚钠，可用作落叶树休眠期喷射剂，以防治褐腐病，也用作除草或杀虫剂、触杀型灭生性除草剂。其进入人体的方式主要通过长期、低剂量的饮食接触，可能会对人体的肝、肾及中枢神经系统造成损害。2019年12月27日，五氯酚钠被列入食品中禁止使用的药物及其他化合物清单，标准要求不得检出，所以，对于食品中五氯酚钠的监测是必要的。五氯酚钠常用的检测标准为GB 23200.92-2016《动物源性食品中五氯酚残留量的测定 液相色谱-质谱法》。本文参考上述标准，样品中的五氯酚残留用碱性乙腈水溶液提取，使用MAX固相萃取柱经睿科SPEVA全自动样品净化浓缩仪一键进行净化和浓缩，复溶后用液相色谱-串联质谱仪检测。在1.0 ug/kg的加标水平下，回收率在81.6%-84.3%之间，RSD值小于5%。本方案回收率高，精密度好，能够很好地运用于牛奶中五氯酚残留量的测定。仪器和耗材1.仪器睿科SPEVA全自动样品净化浓缩仪Agilent 1290Ⅱ/6470高效液相色谱-串联质谱仪SPEVA全自动样品净化浓缩仪2.耗材MAX强阴离子交换固相萃取柱（60mg/3mL）3.试剂甲醇（色谱纯）甲酸（色谱纯）乙腈（色谱纯）浓氨水（分析纯）乙腈-水溶液（7+3）：准确量取70mL乙腈和 30mL水，混合摇匀。5％氨水-乙腈-水溶液：准确量取 5 mL 浓氨水，转移入100mL容量瓶，用乙腈-水溶液（7+3）定容至刻度，混合均匀。5％氨水甲醇溶液：量取5mL浓氨水，转移入 100 mL容量瓶，用甲醇定容至刻度，混合均匀。8％甲酸甲醇溶液：量取8mL甲酸，转移入100mL容量瓶，用甲醇定容至刻度，混合均匀。2％甲酸甲醇水溶液：取25mL 8％甲酸甲醇溶液，转移入100mL容量瓶，用水定容至刻度，混合均匀。样品制备称取牛奶试样2g（精确到0.01 g），置于50 mL离心管中，加入10mL 5%氨水-乙腈-水溶液，旋涡混合1 min，超声提取5min，于4℃、10000 r/min条件下离心5min，收集上清液于上样管中，待净化。1.净化依次用7mL甲醇和7mL水活化固相萃取柱，将提取溶液转入经过预处理的MAX柱中，以1.0 ml/min的流速使样品溶液全部通过固相萃取柱，弃去流出液。依次用4mL 5%氨化甲醇、4mL甲醇、2mL 2％甲酸-甲醇-水溶液淋洗柱子，弃去流出液。淋洗液完全通过小柱后，用氮气吹干固相萃取柱5min。用9 mL 8％甲酸甲醇溶液洗脱，洗脱液用试管收集，于40℃水浴条件下氮吹浓缩至1mL，用水定容至2mL，混匀。溶液以0.22µ m有机滤膜过滤，供测定。固相萃取和浓缩方法如下所示。2.固相萃取净化条件液质检测条件1.液相条件2.液相梯度洗脱条件3.质谱仪器参数4.MRM参数结果与讨论为了验证该方法的回收率，本实验取2g牛奶样品，加入五氯酚标准品进行加标回收验证(n=6)，添加水平为1ug/kg。同时制备5份经提取、净化和浓缩的空白试样，加入适量标准品，配制成浓度为0.5μg/L、1.0μg/L、1.5μg/L、2.0μg/L、5.0μg/L的基质校正曲线进行定量。实验数据如表-2所示。加标回收率在81.6%-84.3%之间，RSD值控制在5%以内。说明该方案能够很好地运用于牛奶中五氯酚残留量的测定。表-2.样品加标回收率及RSD值（n=6）总结本解决方案操作方便，集样品净化和浓缩一体，回收率高，稳定性好，符合GB 23200.92-2016《动物源性食品中五氯酚残留量的测定 液相色谱-质谱法》的质控要求。睿科SPEVA全自动样品净化浓缩仪将高通量固相萃取与高通量氮吹进行一体结合，可同时进行8通道样品净化，支持样品架/收集架/柱架/柱插杆自动识别，氮吹浓缩自带通道红外定容，兼容常规SPE柱模式、大体积上样模式、枪头上样模式和膜萃取模式，一机多用，真正为批量前处理提供帮助。

日前，根据《中华人民共和国食品安全法》和《食品安全国家标准管理办法》规定，经食品安全国家标准审评委员会审查通过，卫生部发布了《食品添加剂氨水》(GB29201-2012)等29项食品安全国家标准的公告。公告详情如下：关于发布《食品添加剂氨水》(GB29201-2012)等29项食品安全国家标准的公告(卫生部公告2012年第23号)　　根据《中华人民共和国食品安全法》和《食品安全国家标准管理办法》规定，经食品安全国家标准审评委员会审查通过，现发布《食品添加剂氨水》(GB29201-2012)等29项食品安全国家标准。其编号和名称如下：　　GB 29201-2012 食品添加剂 氨水.pdf　　GB 29202-2012 食品添加剂 氮气.pdf　　GB 29203-2012 食品添加剂 碘化钾.pdf　　GB 29204-2012 食品添加剂 硅胶.pdf　　GB 29205-2012 食品添加剂 硫酸.pdf　　GB 29206-2012 食品添加剂 硫酸铵.pdf　　GB 29207-2012 食品添加剂 硫酸镁.pdf　　GB 29208-2012 食品添加剂 硫酸锰.pdf　　GB 29209-2012 食品添加剂 硫酸钠.pdf　　GB 29210-2012 食品添加剂 硫酸铜.pdf　　GB 29211-2012 食品添加剂 硫酸亚铁.pdf　　GB 29212-2012 食品添加剂 羰基铁粉.pdf　　GB 29213-2012 食品添加剂 硝酸钾.pdf　　GB 29214-2012 食品添加剂 亚铁氰化钠.pdf　　GB 29215-2012 食品添加剂 植物活性炭（木质活性炭）.pdf　　GB 29216-2012 食品添加剂 丙二醇.pdf　　GB 29217-2012 食品添加剂 环己基氨基磺酸钙.pdf　　GB 29218-2012 食品添加剂 甲醇.pdf　　GB 29219-2012 食品添加剂 山梨糖醇.pdf　　GB 29220-2012 食品添加剂 山梨醇酐三硬脂酸酯（司盘65）.pdf　　GB 29221-2012 食品添加剂 聚氧乙烯（20）山梨醇酐单月桂酸酯（吐温20）.pdf　　GB 29222-2012 食品添加剂 聚氧乙烯（20）山梨醇酐单棕榈酸酯（吐温40）.pdf　　GB 29223-2012 食品添加剂 脱氢乙酸.pdf　　GB 29224-2012 食品添加剂 乙酸乙酯.pdf　　GB 29225-2012 食品添加剂 凹凸棒粘土.pdf　　GB 29226-2012 食品添加剂 天门冬氨酸钙.pdf　　GB 29227-2012 食品添加剂 丙酮.pdf　　GB 14936-2012 食品添加剂 硅藻土.pdf　　GB 10287-2012 食品添加剂 松香甘油酯和氢化松香甘油酯.pdf　　特此公告。　　卫生部　　2012年12月25日