CAMA-1人乳腺癌细胞的特点与应用及培养操作！

                CAMA-1人乳腺癌细胞的特点与应用及培养操作！

一、背景

CAMA-1人乳腺癌细胞系是一种用于研究乳腺癌的实验细胞模型。这种细胞系来自人乳腺癌细胞，经过一定的培养条件，可以在实验室中培养和繁殖。

CAMA-1细胞系的形态为上皮细胞样，具有贴壁生长的特性。这些细胞可以用于研究乳腺癌的生物学特性、药物筛选和肿瘤治疗等方面的实验。通过观察细胞的生长、增殖和凋亡等生物学行为，可以深入了解乳腺癌的发生、发展和转移机制，为乳腺癌的诊断和治疗提供新的思路和方法。

CAMA-1人乳腺癌细胞系是一种从人乳腺癌组织中分离出的细胞系。

二、该细胞系具有以下特点

形态特征：CAMA-1人乳腺癌细胞呈多角形或长条形，大小不一，有明显的核仁和胞质。

生长特性：CAMA-1人乳腺癌细胞具有较强的增殖能力，可以在体外持续传代，并且可以在体内形成肿瘤。

基因表达：CAMA-1人乳腺癌细胞通常表达多种与乳腺癌相关的基因，如ER、PR、HER2等。

CAMA-1人乳腺癌细胞系在生物学研究中具有广泛的应用价值，例如用于研究乳腺癌的发生和发展机制、筛选抗肿瘤药物、评估治疗效果等。同时，由于乳腺癌是女性常见的恶性肿瘤之一，因此CAMA-1人乳腺癌细胞系也被广泛应用于乳腺癌的研究中。

三、CAMA-1人乳腺癌细胞系培养操作

1)复苏CAMA-1人乳腺癌细胞系：以下细胞培养冻存处理仅供参考，具体操作步骤以随货产品说明书为主。

将含有1 mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻，加4 mL培养基混合均匀。在1000 rpm条件下离心3 min，弃去上清液，加1-2 mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入含适量培养基的培养瓶中培养过夜（或将细胞悬液加入10 cm皿中，加入约8 mL培养基，培养过夜）。第二天换液并检查细胞密度。

2)CAMA-1人乳腺癌细胞系传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。

a、弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。

b、加1 mL消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，使消化液浸润所有细胞，弃去消化液，将培养瓶置于37℃培养箱中消化1 min，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。

c、按6-8 mL/瓶补加培养基，轻轻打匀后装入无菌离心管中，1000 rpm离心4 min，弃去上清液，补加1-2 mL培养液后吹匀。

d、将细胞悬液按1:2比例分到新的含8 mL培养基的新皿中或者瓶中，置于培养箱中培养。

3)CAMA-1人乳腺癌细胞系冻存：待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。

下面T25瓶为例；

a、收集细胞及细胞培养液，装入无菌离心管中，1000 rpm条件下离心4 min，弃去上清液，用PBS清洗一遍，弃尽PBS，进行细胞计数。

b、根据细胞数量加入无血清细胞冻存液，使细胞密度5×106~1×107/mL，轻轻混匀，每支冻存管冻存1mL细胞悬液，注意冻存管做好标识。

c、将冻存管放入-80℃冰箱，24 h后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。

四、应用

CAMA-1人乳腺癌细胞系可以用于双微体的分子细胞遗传学研究：

从ATCC公司筛选所有携带双微体的肿瘤细胞系，进行细胞培养，并在第3代、8代、13代时获取细胞。利用染色体核型分析技术检测双微体的数目及分布情况及粗略的细胞遗传学特征，发现不同肿瘤细胞系所携带双微体的数目及分布相差极大。继而通过arrayCGH获得扩增的基因，并明确其断裂点，采用相应的DNA探针，利用荧光原位杂交确认基因扩增并进一步确认染色体的来源及明确扩增的形式。

发现在10个细胞系中，血液肿瘤占10%（HL-60细胞系），MC-IXC细胞系，COLO-320DM细胞系，SW480细胞系及HL-60细胞系中由于MYC扩增基因所致，双微体广泛存在，但其扩增区域的断裂点不同，其中前2个细胞系MYC双微体与MYC均质染色区共存，后2个细胞系仅存在MYC双微体。SW1783细胞系、5637细胞系、CAMA-1人乳腺癌细胞系的扩增区域分别包含PDGFRA基因、RAF1基因及SOX4基因、MYEOV基因及CCND1基因，均以均质染色区的形式存在。T84细胞系、SNU-1细胞系及NCI-N87细胞系仅在部分细胞中见少量双微体，arrayCGH未见明显扩增的区域，未行扩增基因FISH检测。

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