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斑点气单胞菌PCR试剂盒原理是由一对引物介导，能在动植物体外对特定基因(DNA)片断进行快速酶促扩增，经过n个热循环扩增，扩增产物中所含特定基因数是原始模板数的(1+E)n(0＜E＜1,扩增效率＝倍，使得检测扩增产物中的特定基因成为可能。
特异性强
PCR反应的特异性决定因素为：
①引物与模板DNA特异正确的结合；
②碱基配对原则；
③Taq DNA聚合酶合成反应的忠实性；
④靶基因的特异性与保守性。
斑点气单胞菌PCR试剂盒产品及特点 ：
聚合酶链式反应（PCR）是体外酶促合成特异DNA片段的一种方法，由高温变性、低温退火（复性）及适温延伸等几步反应组成一个周期，循环进行，使目的DNA得以迅速扩增，具有特异性强、灵敏度高、操作简便、省时等特点。本产品就是为满足这一需求根据 PCR 原理开发的产品，它具有下列特点：
1. 一管式操作，用户只需要提供样品即可。
2. 根据大豆热休克蛋白基因保守区域设计引物，能专一性检测出样品中的大豆成分，但不能检测其他非大豆成分。
3. 快速，整个检测过程（按一个样品计）所需时间仅为 2.0 小时。
4. 只需要普通 PCR 仪和凝胶电泳仪，无需配置贵重仪器设备。
5. 对混合样品中大豆成分的检测下限为 0.1%，对样品中大豆成分的核酸检测下限为 1.0ng/μL。
6. 本只能用于科研，足够 50 次 40uL 体系的常规 PCR。
斑点气单胞菌PCR试剂盒包装规格及成分：
编号 | 成分 | 十孔盒包装（去纸托） |
试剂一 | 2×PCR MagicMix | 1mL（亮黄盖） |
试剂二 | 源性成分 PCR 引物混合液 | 100 uL（白盖） |
试剂三 | 源性成分 PCR 阳性对照 | 50 uL（黄盖） |
试剂四 | 超纯水 | 1 mL（本色盖） |
试剂五 | DNA 释放剂试用装 | 50 次（成分见下） |
试剂六 | 免 DNA 提取试剂溶液 A 成分一 | 50 uL（白盖） |
试剂七 | 免 DNA 提取试剂溶液 A 成分二 | 100uL（绿盖） |
试剂八 | 免 DNA 提取试剂溶液 B | 400 uL（红盖） |
试剂九 | 使用手册 | 1 份 |
运输及保存：低温运输，-20℃保存，有效期一年。使用本试剂盒提供的阳性对照时，由于其浓度较高，一定要注意不要污染其他试剂和成分。在专门的区域操作。
自备试剂：DNA 模板。
斑点气单胞菌PCR试剂盒使用方法：
一、样品 DNA 的制备
1. 用自选方法纯化样品的 DNA，本产品跟市场上绝大多数核酸纯化产品兼容。
2. 如果有 N 个样品，则需要进行 N+2 个样品提取，多出的一个用作样品制备阳性对照管、另一个用作样品制备阴性对照管。如果用本试剂盒自带的DNA 释放剂试用装。则按下面步骤操作：
3. 配制溶液 A 工作液。以配制 1mL 工作液（足够 10 个样品）为例：在一干净塑料管中加入 10uL 溶液 A 成分一，20uL 溶液 A 成分二和 970uL 超纯水，充分混合均匀即可。溶液 A 工作液可室温放置，但在一周内用完，不要长期放置。一次检测一个样品需要 100uL 溶液 A 工作液，1mL 工作液足够 10 个样品。如果待测样品数量为其他数字，配制的溶液 A 工作液的体积需要做相应的调整。
4. 在标记好的 N+2 个离心管中，加入 1-5mg 固体样品（半粒芝麻大小）或 5uL 液体样品待测样品。在样品制备阳性对照中加入 5uL 阳性对照，在样品制备阴性对照中加入 5uL 水。
5. 在每个管中加入 100 uL 溶液 A 工作液，确保固体样品被溶液淹埋，如果是液体样品则震荡混匀。
6. 95℃保温 10 分钟。
7. 待冷却到常温后加入 10uL 溶液 B 并混匀得 DNA 释放液。每个样品得到的 DNA释放液足够进行 50-100 次 PCR。
二、斑点气单胞菌PCR试剂盒 设置 PCR 反应（40 uL 体系）
8. 在 N+2 个 PCR 管中加入下列成分，下面以样品数为 1 举例（注意：如果一次使用DNA 释放剂，每个样品设置两个模板用量的 PCR 反应，两个反应的模板使用量差 10 倍，由此确定用量，以后就用效果好的那个模板用量）：
成份 | 样品（用量1） | 样品（用量2） | 阳性对照 | 阴性对照 |
即用型 PCR Mix 3.0 | 20 uL | 20 uL | 20 uL | 20 uL |
源性 PCR 引物混合液 | 2 uL | 2 uL | 2 uL | 2 uL |
制备的样品 | 18 uL | 2 uL | 无 | 无 |
样品制备阳性对照 | 不加 | 不加 | 2 uL | 不加 |
样品制备阴性对照 | 不加 | 不加 | 不加 | 2 uL |
超纯水 | 不加 | 16 uL | 16 uL | 16 uL |
9. 轻柔混匀后上机，按下面参数进行 PCR。
过程 | 温度 | 时间 |
预变性 | 94℃ | 10分钟 |
PCR 反应 （35 个循环） | 94℃ | 30s |
60℃ | 30s | |
72℃ | 30s | |
延伸 | 72℃ | 7分 |
10. 电泳检测 PCR 产物。预期的 PCR 产物长度为 216bp。阳性对照必须有此条带出
现，阴性对照必须无任何扩增，否则实验无效。对没有扩增产物的样品，需要用通用引物（如真核生物专一 PCR 引物，需自备）测试是否有抑制剂或样品是否浓度达到 PCR 的要求，如果通用引物也扩不出来，需要浓缩并再次纯化 DNA 样品，或者更换 DNA 提取方法，直到通用引物能够扩增出预计大小的片段。
关联PCR试剂盒：
13-18610 Leishmania donovani杜氏利什曼原虫(黑热病病原虫)PCR试剂盒 50次
13-18620 Leishmania infantum婴儿利什曼虫PCR试剂盒 50次
13-18630 Leishmania major硕大利什曼原虫PCR试剂盒 50次
13-18600 Leishmania spp.利什曼原虫通用PCR试剂盒 50次
13-18640 Leishmania tropica热带利什曼原虫PCR试剂盒 50次
13-79300 Lentivirus、except HIV慢病毒(除HIV外)通用RT-PCR试剂盒 50次
13-12700 Leptospira interrogans问号钩端螺旋体PCR试剂盒 50次
13-42710 Leucocytozoon caulleryi卡氏住白细胞原虫PCR试剂盒 50次
13-42720 Leucocytozoon sabrezis沙氏住白细胞原虫PCR试剂盒 50次
13-42700 Leucocytozoon spp.住白细胞原虫属通用PCR试剂盒 50次
13-64310 Listeria ivanovii伊氏李斯特菌PCR试剂盒 50次
13-64320 Listeria monocytogenes单核细胞增生李斯特菌PCR试剂盒 50次
13-64300 Listeria spp.李斯特菌通用PCR试剂盒 50次
13-76900 Loboa lobai罗布罗布芽生菌PCR试剂盒 50次
13-29300 Louping Ill Virus跳跃病病毒RT-PCR试剂盒 50次
13-29040 Low Pathogenic Porcine Reproductive and Respiratory Syndrome Virus(PRRSV)低致病性猪生殖与呼吸综合症病毒RT-PCR试剂盒 50次
13-69300 Lump Skin Disease Virus(LSDV)疙瘩皮肤病病毒PCR试剂盒 50次
13-76500 Lymphocytic Choriomeningitis Virus(LCMV)淋巴细胞性脉络丛脑膜炎病毒RT-PCR试剂盒 50次
13-78500 Machupo Virus(MACV)马秋博病毒RT-PCR试剂盒 50次
13-19800 Macrobrachium Rosenbergii Nodavirus(MrNV)罗氏沼虾诺达病毒RT-PCR试剂盒 50次
13-71910 Madurella grisea灰马杜拉分枝菌PCR试剂盒 50次
13-71920 Madurella mycetomatis足马杜拉分枝菌PCR试剂盒 50次
13-71900 Madurella spp.马杜拉分枝菌PCR试剂盒 50次
13-21700 Maedi-Visna Virus(MVV，同CAEV)梅迪-维斯纳病病毒PCR试剂盒 50次
13-66200 Malignat Catarrhal Fever Virus(MCFV)恶性卡他热病毒PCR试剂盒 50次
13-77500 Malleomyces mallei马鼻疽杆菌PCR试剂盒 50次
13-78210 Marek's Disease Virus(MDV)马立克氏病病毒1型PCR试剂盒 50次
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企业名称
上海联迈生物工程有限公司
企业信息已认证
企业类型
信用代码
310117003747946
成立日期
2017-09-26
注册资本
100
经营范围
从事生物科技、医疗科技领域内的技术开发、技术咨询、技术服务、技术转让,仪器仪表、机电设备、机械设备、玻璃制品、电子产品、一类医疗器械、化工产品及原料(除危险化学品、监控化学品、烟花爆竹、民用爆炸物品、易制毒化学品)的销售。【依法须经批准的项目,经相关部门批准后方可开展经营活动】
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