盐酸克林霉素含量测定和碘海醇水解物的分析

1. 盐酸克林霉素含量测定  参考《中国药典》（2020版）

盐酸克林霉素 M.W. 461.444

按照20版药典盐酸克林霉素含量测定项下方法，使用CAPCELL PAK C18 MGII色谱柱，对供试品进行了分析，结果如图1图2所示。

供试品分析结果中，主峰保留时间11.013min，与相对保留时间0.8的7-差向克林霉素峰（8.988min）分离度为6.17，相对保留时间0.65的克林霉素B峰（7.247min）与7-差向克林霉素峰分离度为6.817，均能够满足药典分离度不低于3的要求。

图1 盐酸克林霉素分析结果

图2 局部放大图

【色谱条件】

色谱柱：CAPCELL PAK C18 MGII S5; 4.6×250

流动相：以磷酸二氢钾溶液（每1 mL中含磷酸二氢钾6.8 mg，用25%的氢氧化钾溶液调节pH值至7.5）/ 乙腈 = 55 / 45

流动速：1.0 mL/min

温动度：35 °C

检动测：PDA 210 nm

浓动度：供试品溶液 1 mg/mL（甲醇）

进样量：20 µL

结     论

使用CAPCELL PAK C18 MGII色谱柱可在药典条件下，实现盐酸克林霉素含量测定分析，分离度及保留时间符合药典要求。

2. 碘海醇水解物的分析

客户提供了碘海醇水解物（固体），并反映使用Y公司的ODS-AQ柱做该项目色谱柱寿命短，希望本实验室能够筛选出对碘海醇水解物具有良好分离，同时还能有良好的使用寿命的色谱柱。

使用CAPCELL PAK C18 MGII色谱柱进行了分析，按照客户提供方法，对碘海醇水解物的分析结果见图3和表1。主峰前分离出两个比较明显的杂质峰，且两个杂质以及杂质与主峰之间的分离度均大于1.5。

图3  C18 MGII色谱柱分析结果

表1   各峰积分结果表

【色谱条件】

色谱柱：CAPCELL PAK C18 MGII S3; 4.6×250

流动相：A，0.05%三氟乙酸水   B，三氟乙酸 / 乙腈 / 甲醇 = 0.05 / 50 / 50

         B% 1%(0 min)-10%(42 min)-75%(53 min)-75%(58 min)-1%(58.01 min)-1%(70 min)

流动速：0.6 mL/min

温动度：45 ℃

检动测：UV 254 nm

进样量：15 µL

浓动度：1 mg/mL（溶剂为甲醇：水=1：99）

结     论

使用CAPCELL PAK C18 MGII色谱柱，按照客户提供分析方法，对碘海醇水解物供试品进行分析，分离度较好。

流动相条件中，梯度起始有机相比例仅为1%，因此在不同设备上可能会出现保留时间和分离度上略有差异的情况。建议适当调整梯度中有机相的起始比例，并在色谱柱使用完后及时进行冲洗，以减少高水相流动相可能对色谱柱带来的损伤。