参考GB 5009.120食品中丙酸钠、丙酸钙的测定

1. 标准品分析结果

国标方法中流动相使用纯水相，所以选用可耐受100%水相的高极性C18柱CAPCELL PAK C18 AQ按照标准方法对丙酸标准品进行了分析。

在CAPCELL PAK C18 AQ S5;4.6 mmi.d.×150 mm色谱柱上丙酸保留时间为8.2 min，理论塔板数12537，不对称因子1.15（如图1所示），能够获得良好分析结果。

同时，按照国标方法中要求，对丙酸系列浓度标准品（0.04-0.5 mg/mL）进行分析，得到良好线性结果，r=0.9999（如图2所示）。

图1  标准品分析结果

图2  线性分析结果

【色谱条件】

色谱柱：CAPCELL PAK C18 AQ S5; 4.6×150

流动相：1.5 g/L磷酸氢二铵，磷酸调节pH为2.7

流动速：1.0 mL/min

温动度：35 °C

检动测：PDA 214 nm

浓动度：0.3 mg/mL

进样量：20 µL

2. 实际样品分析结果

按照5.2.2直接浸提法，对面包和调味料样品进行了前处理，并进样分析（分析结果如图3所示），选取的两种实际样品均未检测出丙酸峰。

图3 样品分析结果

【色谱条件】

色谱柱：CAPCELL PAK C18 AQ S5; 4.6×150

流动相：1.5 g/L 磷酸氢二铵，磷酸调节pH为2.7

流动速：1.0 mL/min

温动度：35 °C

检动测：PDA 214 nm

浓动度：5.2.2直接浸提法:准确称取5 g试样至100 mL烧杯中,加水20 mL,加入1 mol/L磷酸溶液0.5 mL,混匀,经超声浸提10 min后,用1 mol/L磷酸溶液调pH为3左右,转移试样至50 mL容量瓶中,用水定容至刻度,摇匀。将试样全部转移至50 mL具塞塑料离心管中, 10000 r/min离心10 min,取上清液,经0.25 μm微孔滤膜过滤。

进样量：20 µL

3. 分析注意事项探讨

（1）在进样过程中发现，由于该分析方法为等度方法且为纯水相流动相，样品基质中有较多成分无法洗脱，对后续样品分析及色谱柱寿命均可能存在影响，因此尝试通过梯度条件加入有机相对色谱柱进行冲洗（分析结果如图4所示），可以看到在高比例有机相冲洗时，大量基质峰被洗脱出来。

图4 梯度条件分析结果

【色谱条件】

色谱柱： CAPCELL PAK C18 AQ S5; 4.6×150

流动相：A：1.5 g/L 磷酸氢二铵，磷酸调节pH为2.7，B：乙腈

动动动动B  0%(0 min)-0%(8 min)-70%(8.1 min)-70%(12 min)-0%(12.1 min)-0%(20 min)

流动速：1.0 mL/min

温动度：35 °C

检动测：PDA 214 nm

浓动度：5.2.2直接浸提法:准确称取5 g试样至100 mL烧杯中,加水20 mL,加入1 mol/L磷酸溶液0.5 mL,混匀,经超声浸提10 min后,用1 mol/L磷酸溶液调pH为3左右,转移试样至50 mL容量瓶中,用水定容至刻度,摇匀。将试样全部转移至50 mL具塞塑料离心管中, 10000 r/min离心10 min,取上清液,经0.25 μm微孔滤膜过滤

进样量：20 µL

（2）为了在较短时间内即获得良好检测结果，本实验使用了150 mm柱长耐纯水C18 AQ色谱柱。若更换为国标要求使用的250 mm柱长色谱柱，同样能够获得良好分析结果，保留时间为12.5 min，可根据实际分析需求选择柱长。

结     论

综上所述，使用CAPCELL PAK C18 AQ S5; 4.6mm i.d.×150mm或250mm色谱柱，按照《GB 5009.120-2016 食品安全国家标准 食品中丙酸钠、丙酸钙的测定》中方法，能够获得良好检测结果，满足标准要求。

《GB 5009.120-2016

食品中丙酸钠、丙酸钙的测定》

推荐用柱

F92044 CAPCELL PAK C18 AQ