甲型副伤寒沙门氏菌

甲型副伤寒沙门氏菌操作前打开紫外灯30-60分钟，这个大家都知道。不过你别忘了还要在操作前至少10分钟打开抽滤装置来保证效果，但紫外消毒期间建议不要进去一次特意打开抽滤装置，可以与紫外灯一起打开，甲型副伤寒沙门氏菌此时不需要抽滤开的过大就可以。（所谓的抽滤装置就是就是那个风机，就是吹风超净工作台，不是过滤培养液的）!

细胞传代培养（消化法）具体操作：

一：传代前准备；

1.预热培养用液：把已经配制好的装有培养液、PBS液和胰蛋白酶的瓶子放入37℃水浴锅内预热。

2.用75％酒精擦拭经过紫外线照射的超净工作台和双手。

3.正确摆放使用的器械：保证足够的*作空间，不仅便于*作而且可减少污染。

4.点燃酒精灯：注意火焰不能太小。

5.准备好将要使用的消毒后的空培养瓶，放入微波炉内高火，8分钟再次消毒。

6.取出预热好的培养用液：甲型副伤寒沙门氏菌取出已经预热好的培养用液，用酒精棉球擦拭好后方能放入超净台内。

7.从培养箱内取出细胞：注意取出细胞时要旋紧瓶盖，用酒精棉球擦拭显微镜的台面，再在镜下观察细胞。

8.打开瓶口：将各瓶口一一打开，同时要在酒精灯上烧口消毒。

二：胰蛋白酶消化；

1.加入消化液：小心吸出旧培养液，用PBS清洗（冲洗），加入适量消化液（胰蛋白酶液），注意消化液的量以盖住细胞最好，最佳消化温度是37℃。

2. 甲型副伤寒沙门氏菌 显微镜下观察细胞：倒置显微镜下观察消化细胞，若胞质回缩，细胞之间不再连接成片，表明此时细胞消化适度。

3.吸弃消化液加入培养液：弃去胰蛋白酶液，注意更换吸管，加入新鲜的培养液。

三：吹打分散细胞；

1.吹打制悬：用滴管将已经消化细胞吹打成细胞悬液。

2.吸细胞悬液入离心管：将细胞悬液吸入10ml离心管中。

3.平衡离心：平衡后将离心管放入台式离心机中，以1000转/分钟离心6-8分钟。

4.弃上清液，加入新培养液：弃去上清液，加入2ml培养液，用滴管轻轻吹打细胞制成细胞悬液。

四：分装稀释细胞；

1.分装：将细胞悬液吸出分装至2-3个培养瓶中，加入适量培养基旋紧瓶盖。

2.显微镜下观察细胞：倒置显微镜下观察细胞量，必要是计数。注意密度过小会影响传代细胞的生长，传代细胞的密度应该不低于5×105/ml。最后要做好标记。

五：继续培养；

用酒精棉球擦拭培养瓶，适当旋松瓶盖，放入CO2培养箱中继续培养。甲型副伤寒沙门氏菌传代细胞2小时后开始贴附在瓶壁上。当生长细胞铺展面积占培养瓶底面积25％时为一个＋，占50％为＋＋，占75％时为＋＋＋。 

XY0583 人肾细胞腺癌细胞,ACHN细胞

XY0584 人肾细胞腺癌细胞,769-P细胞,

XY0585 人肾透明细胞腺癌细胞,786-O细胞

XY0586 人肾透明细胞癌细胞,Caki-2细胞

XY0587 人肾透明细胞癌细胞,ACHN细胞

XY0588 人肾透明细胞癌皮肤转移细胞,Caki-1细胞

XY0589 人肾透明细胞癌 Caki-1细胞

XY0590 人肾上腺腺瘤细胞,NCI-H205细胞

XY0591 人肾上腺神经母细胞瘤细胞(脑转移) KP-N-NS细胞,

XY0592 人肾上腺皮质小细胞癌细胞,SW-13细胞

XY0593 人肾上腺皮质腺癌细胞,NCI-H295R细胞

XY0594 人肾上皮细胞,GES细胞

XY0595 人肾乳头状细胞癌细胞,SKRC39细胞

XY0596 人肾皮质近曲小管上皮细胞,HK-2细胞

XY0597 人肾母细胞瘤细胞,SK-NEP-1细胞,

XY0598 人肾癌细胞系(769-P) 769-P细胞

XY0599 人肾癌细胞系 ACHN细胞

XY0600 人肾癌细胞系 A498细胞

XY0601 人肾癌细胞,SK-RC-42细胞

XY0602 人肾癌细胞,OS-RC-2细胞

XY0603 人肾癌细胞,Ketr-3细胞

XY0604 人肾癌细胞,KC细胞

XY0605 人肾癌细胞,GRC-1细胞

XY0606 人肾癌细胞,A498细胞,

XY0607 人肾癌细胞,A498-EGFP-puro细胞

XY0608 人肾癌Wilms细胞,G401细胞

XY0609 人神经上皮瘤细胞,SK-N-SH细胞

XY0610 人神经上皮瘤细胞,SK-N-MC细胞

XY0611 人神经上皮瘤细胞,SH-SY5Y细胞

XY0612 人神经母细胞瘤细胞株 SH-SY5Y细胞

XY0613 人神经母细胞瘤细胞,SK-N-SH细胞

XY0614 人神经母细胞瘤细胞,SK-N-BE(2)细胞

XY0615 人神经母细胞瘤细胞,SH-SY5Y细胞

XY0616 人神经母细胞瘤细胞,M，BE(2)-M17细胞