Protein L亲和填料和筛选用预装柱产品

通过基因重组制备的抗体片段（Fab）等低分子抗体，与完整抗体相比，其分子尺寸更小，具有易扩散、渗透性强，以及不会与Fc受体产生相互作用、副作用小等优点。并且，可以利用大肠杆菌、CHO细胞等获得高浓度、高表达的抗体片段，因此在抗体药物、诊断用药的应用上备受关注。

一般来讲，低分子抗体的纯化工艺第一步捕获（Capture）步骤推荐使用Protein L亲和层析（AFC），其后接离子交换层析（IEC）等进行精纯。下面介绍几个以Protein L为配基的亲和填料分离纯化低分子抗体的相关文献。

● 抗体的基本结构及分离抗体时使用的亲和层析配基

● 使用Protein L亲和层析等填料从大肠杆菌、CHO细胞中纯化低分子抗体的相关文献

● 从大肠杆菌中分离纯化重组Fab和相关杂质的示例（文献No. 1）

（要点）

• 确立了大肠杆菌表达的重组低分子抗体(Fab)的纯化方法，并对相关杂质进行了分离和识别（表征）。

• 通过使用Protein L亲和层析、Protein G亲和层析及阳离子交换层析的三步层析法（自动化），对4种重组Fab进行纯化，再做质谱分析。

• 识别出纯化产物中的Fab异构体、Fab相关杂质的L链（LC）以及L链的低分子片段（LMW）。

• 自动化Fab纯化及分析法的确立，让生产菌株及培养条件的优化变得容易。

● 使用Protein L亲和层析从大肠杆菌分离纯化重组Fab及相关杂质的示例（出自文献1）

使用TOYOPEARL AF-rProtein L-650F，有效分离出目标物质Fab，以及产品相关杂质的L链（LC）和LC低分子片段（LMW）。

Ref.: C. Schimek et al., Three-dimensional chromatography for purification and characterization of antibody fragments and related impurities from Escherichia coli crude extracts,
J. Chromatography A, available on line November 13, 2020, 461702, https://doi.org/10.1016/j.chroma.2020.461702

● Protein L亲和填料和筛选用预装柱产品一览表

* Ca⁺⁺Pure-HA是美国制造的产品，受美国相关出口法令管辖。

**填料有不同粒径和不同包装规格的产品。

SkillPak分为1 mL预装柱（7 mm I.D.×2.5 cm）和5 mL预装柱（8 mm I.D.×10 cm）。

【1 mL预装柱】

进口：使用“货号0017955 拉紧螺栓型（带包头）”，不可使用“货号0016566 便携式接头·1/16"（PEEK）”。

出口：可直接连接内螺纹接头，连接外螺纹接头时需使用管套（“货号0017898 拉紧螺栓型管套”）等配件。

【5 mL预装柱】

进口和出口：使用“货号0016566 便携式接头·1/16"”或“货号0017955 拉紧螺栓型（带包头）”。