薄层色谱-质谱-Flash 纯化联用，实现合成过程中反应监控和智能快速纯化化

薄层色谱-质谱-Flash联用，实现智能快速纯化

应用指南

质谱: expression® CMS

薄层色谱：Plate Express® TLC

直接进样分析探针：Atmospheric Solids Analysis Probe® (ASAP)

制备色谱: Interchim puriFlash® XS520 plus

在本应用指南中，我们演示了Advion和Interchim技术的结合是如何加快化合物的合成、纯化和鉴定的。应用中配备了Advion expression®质谱仪(CMS)，Plate Express TLC薄层色谱质谱接口，ASAP大气压固体分析探头，以及Interchim puriFlash®XS520plus纯化系统。

介绍

化合物的合成，纯化和鉴定过程通常会面临很多挑战。从确保产品的成功合成，到建立快速纯化方法，最后确定馏分的ID，冗长的工作流程既耗时又重复。

本应用指南演示了一个新的工作流程，该流程实现了从合成、纯化到鉴定的无缝衔接，可快速、轻松地推动从反应监测到纯化和馏分ID确认的过程。包括以下三个主要步骤：

•步骤1:使用Advion Plate Express TLC Plate Reader和expression CMS监测Suzuki反应，然后进行TLC/CMS分析。

•步骤2:TLC到Flash，通过自动从手机TLC板图像开发的方法，使用Interchim puriFlash XS520 Flash Chromatography Genius®系统纯化化合物。

•步骤3:通过CMS和ASAP，30s内鉴定馏分ID。

方法

步骤1:用薄层色谱监测反应

溴代苯胺和苯硼酸在乙醇中用钯催化剂（图1）在室温下反应2小时。2小时后，取样品在硅胶TLC板上点样，在二氯甲烷和环己烷溶剂中展开。

图1:样品混合物包括分子量、结构和反应量

然后通过TLC / CMS监测反应-Plate Express与小型台式质谱仪联用，进行质谱分析（图2）。该系统通过直接从TLC板中获取质谱图来明确识别斑点（图3）。

图2：使用Plate Express TLC，放置展开的TLC并对准感兴趣的点。图3:TLC板上斑点的质谱信息。

图2 将TLC板置于Plate Express TLC上

图3 TLC板上斑点的质谱信息

步骤2:TLC到FLASH：纯化化合物

将TLC分离信息拍照上传至Interchim puriFlash智能系统，为馏分收集提供合适的分离方法。用Advion Plate Express确认后，使用Interchim puriFlash XS520进行纯化。我们通过应用程序TLC to Flash（图4），将TLC信息上传至电脑，开始纯化化合物。

对TLC板进行拍照。输入标题等详细信息、标记溶剂前沿和感兴趣的产品、纯化量（400mg）和所用溶剂（环己烷，10%和二氯甲烷，90%）。然后，将数据发送到puriFlash系统，Genius软件将协助构建该方法的其余部分(图5)。

图4：使用TLC to Flash应用程序，拍摄TLC板的照片。化合物将被自动检测出来，点击选择感兴趣的斑点，应用程序计算Rf 和δcv (=δk)。最后，在规定区域标明溶剂、比例和备注信息，并发送到puriFlash。

图5：Genius软件上显示的TLC数据，系统根据TLC数据推荐合适的梯度纯化方法。

图6：完成运行后的TLC板和总UV曲线。

屏幕显示运行后的总UV谱图（图6），使用触摸屏功能，可以找到馏分中峰的位置，以便下一步进行馏分确认分析。

步骤3:通过CMS和ASAP，30s内鉴定馏分ID。

我们取每种化合物的中间馏分收集液，通过ASAP/CMS进行分析（图7）。

在此馏分中（图8），使用ASAP可以再次看到并确认m/z 170显示预期的反应产物p-NH2-Biphenyl。

快速取样技术是快速确定馏分信息的最后一步，只需将ASAP探针浸入馏分收集管中，然后直接插入质谱进行分析。

图7:将大气固体分析探头(ASAP)浸入其中一个已识别的馏分收集管中，然后插入到质谱仪中，APCI离子源立即对其进行分析。

图8：可以快速轻松地识别出170 m / z，与预期的结果一致。

总结

Advion CMS，Plate Express和ASAP直接进样以及Interchim puriFlash快速色谱系统的完整工作流程，提供了简便的采样技术，直观的操作软件和先进的检测技术。通过一站式的工作流程，可以轻松、自信的合成、鉴定和纯化化合物。直观的工作流程确保:

1、使用Plate Express和CMS鉴定TLC斑点并进行纯化。

2、使用Interchim puriFlash XS520plus和Genius软件，推荐Flash纯化的优化方法。

3、用ASAP探针和Advion CMS对Flash馏分进行鉴定。