前言追溯人类医学史，我们发现无数的突破都源于对人体内部奥秘的探索。而今，科学的潮流正助力我们跨越更深层次的理解，揭示着生命的神秘面纱。让我们一起探索类器官的神奇世界吧！ 类器官是干细胞、前体细胞或分化细胞通过细胞-细胞相互作用以及细胞-基质间的相互作用而自发组织的体外三维结构，能够在多个方面再现体内相应组织或器官的结构与功能。2021年，全球16个国家的60多位专家共同明确了类器官的定义。 类器官技术极大推动了基础研究进程。传统二维细胞培养模型与体内组织差异较大，而类器官不仅具备多种细胞类型，还能方便进行基因编辑。在发育生物学研究中，类器官通过胚胎干细胞或诱导多能干细胞定向分化，模拟器官发育过程。类器官芯片技术结合微流控和生物传感，实现规模化、自动化培养，模拟体内组织特性。类器官在疾病研究、药物筛选和再生医学中价值重大，特别是在新冠病毒研究中，通过类器官系统探索病毒入侵机制和药物筛选，提供了重要的研究基础。 这篇文章给我们分享了一个关于类器官整合方案的知识，让我们一起探索一下吧：仪器名称与功能仪器名称功能图片TIGR组织无酶研磨仪高效快速生成均一性的单细胞悬液  CASY无标记3D细胞分析系统质控单细胞的质量、大小、均一性，质控类器官的大小与均一性   CEROplate96/CEROplate 384超低吸附3D细胞培养板（U型底）用于培养液体生成聚集体进而分化为球状体或者类器官  CELLINK 3D生物打印机BIOX/BIOX63D生物打印机是一种先进的生物制造设备，专门设计用于精确和高效地构建复杂的3D生物结构，包括类器官。 CELLINK个人型高精度3D生物打印机器BIO ONE高精度的打印含有（或无）细胞结构液滴球  CERO 3D细胞类器官培养系统培养聚集体成为球状体、类器官等CellDynamics W8 3D细胞分析仪精确质控量化类器官的结构特征On-chip SiPS单细胞生成系统自动稀释与分配单个细胞 NETRI器官芯片通过对器官芯片(或类器官模型)中细胞的电生理特征进行分析，可以评估细胞的兴奋性、传导性和整体功能状态，从而推断出器官的功能状态和潜在的异常情况 仪器的原理和应用TIGR组织无酶研磨仪在医学领域，技术的进步常常意味着更快、更准确的诊断和治疗方法。而今，我们引领医学进步的道路，带来了一项技术——TIGR无酶研磨仪，以下简称TG，它是一种基于反向旋转的机械解离装置。通过预先编程的交替切割和研磨步骤，TG技术通过高效、快速、保留生物活性的细胞分离，为类器官研究提供了坚实的基础和工具。CASY无标记3D细胞分析系统CASY是一种用于细胞计数和细胞质量分析的先进设备。它能够在三维细胞结构中测量细胞的大小、形状和数量，并评估细胞的健康状态。这种仪器通常用于生物医学研究、药物筛选、细胞培养和生产等领域。在类器官的质控方面，CASY无标记3D细胞分析系统可以用于评估类器官的细胞质量和细胞数量。类器官是体外培养的三维细胞结构，可以模拟人体器官的结构和功能。在类器官的培养和研究过程中，确保细胞的数量、健康状态和一致性非常重要，这些因素直接影响到类器官实验的可重复性和结果的可信度。CEROplate 96/CEROplates 384CEROplate 96/384孔板通过提供一个理想的3D培养环境、抗粘附表面、长期培养能力、高通量应用的支持和良好的兼容性，为类器官研究提供了一个强大的工具。它简化了类器官的培养过程，提升了实验效率和数据一致性，使得类器官的研究和应用更加便捷和可靠。这两种超低吸附的U型底的孔板设计独特，材质对细胞无损，不仅可以在用于诱导产生PSC&ESC&iPSC的聚集体产生从而为类器官的培养和分化创造条件。也可以用于类器官的高通量药物筛选等下游试验的研究。BIO X/BIO X6BIOX和BIOX6 3D生物打印机通过其多材料打印、精确控制的微环境和高效生产能力，为类器官研究和应用提供了强有力的支持。通过打印的类器官在疾病模型、药物筛选和组织工程中的应用，将显著推动生物医学研究的进步。BIO ONEBIO ONE 个人型高精度3D生物打印机通过其高效、高精度、可温控的打印技术，为类器官研究和药物开发提供了强有力的支持。它能够优化细胞微环境，提高球状体/类器官的生长质量，节约资源，并加速药物筛选和研发进程。通过提供高通量和高重复性的实验条件，BIO ONE显著提升了类器官研究的效率和效果，使其成为药物研发中的得力助手。CERO 3D细胞类器官培养系统CERO 3D悬浮培养系统通过其模拟体内环境的动态悬浮培养方式、高效细胞产量、长期培养能力和精确的环境控制，为类器官研究提供了理想的工具。该系统不仅提高了类器官的细胞活力和成熟度，还降低了运行成本，优化了资源利用，显著促进了类器官的研究和应用。通过CERO系统，研究者能够更高效、可靠地培养类器官，加速药物研发和生物医学研究的进程。CellDynamics W8 3D细胞分析仪W8 3D细胞分析仪通过其先进的微流控技术、高速摄像机实时监测和独特的分选操作，为类器官研究提供了重要的技术支持。它能够精确量化类器官的结构特征（类器官的密度、大小、细胞外基质、有无空洞和腔隙等），建立密度值与类器官生理状态之间的关联，简化日常实验流程，提高实验效率和数据质量。W8的多功能平台使其在类器官及其他3D细胞模型的研究中发挥了举足轻重的作用，为科学家提供了强大的工具，助力药物研发和生物医学研究的进程。On-chip SiPS单细胞生成系统On-chip SiPS单细胞生成系统通过其自动化、精确控制的单细胞液滴生成技术，为类器官研究提供了理想的工具。其高效、精确和灵活的操作特点，确保了类器官形成和分析的高质量和高可靠性。该仪器不仅在类器官研究中发挥关键作用，还显著优化了实验流程和数据分析，为科学家提供了强大的支持，助力类器官相关的生物医学研究和药物开发。和TIGR单细胞制备仪联用，获取类器官的单细胞，用于后期单细胞测序或数字PCR扩增等下游分析来反馈类器官的指标。NETRI器官芯片细胞接种在小室中通过腔中的ECM相互作用，模拟类器官的生理、药理、毒理学功能。这项技术的主要目的是在体外模拟人体器官的生理和病理过程，以便更好地理解疾病的发生机制、药物的作用机制以及个体化医疗的应用。NETRI器官芯片电生理是一种用于研究人体器官功能的技术。它基于生物医学工程原理，利用微型芯片和生物材料构建模拟人体器官的微型环境，以模拟器官的结构和功能。在这种器官芯片中，通过集成电极和传感器等设备，可以对模拟器官的电活动进行实时监测和记录。类器官的解决方案一NETRI器官芯片电生理技术通过模拟人体器官的微型环境和实时监测电活动，促进对生理和病理过程的理解，为个体化医疗提供重要支持。类器官的解决方案二通过TG分离出病变组织中的细胞，培养成类器官，可以用于研究癌症、遗传性疾病和感染性疾病等的发病机制和进展。例如，利用患者肿瘤组织分离出的细胞培养肿瘤类器官，可以用于个体化药物筛选和治疗方案的制定。具体步骤如下：通过TIGR组织无酶研磨仪分离出病变组织中的细胞，生成单细胞的悬液； CASY来检测分析单细胞的质量好坏、大小尺寸、均一性、生物丰度等指标；类器官的生成和培养：方式1：使用BIO ONE 3D生物分配打印机打印干细胞或其他前体细胞形成球状体液滴，打印到CERO plate 96或者CERO plate 384低吸附板中，然后通过温度或者离子交联的方式使得液滴阵列固化；继续在孔板中添加诱导培养基来诱导类器官的生成；当聚集体的尺寸为＞300µm时，请按1:30的比例；向培养基中加入CERO solution1；然后转移至CERO 3D细胞类器官培养系统中加入分化培养基来继续培养类器官；期间通过CellDynamic W8来监控类器官的均一性、质量密度、大小尺寸，CERO可以实时监控培养基的pH，我们定期更换培养基。注意事项：类器官培养很容易延续至一年或更长时间。CERO solution1 (添加1:30)的使用对类器官的尺寸、致密性和裂变/聚变比有积极的影响，根据类器官的大小，增加培养基的粘度可以支持长期培养。为了自动检测pH值，每个CEROtube至少需要30 ml的培养基。更换培养基的最少的期限应该在7到12天之间。建议一周更换一次CEROtube。方式2：也可以使用CERO 3D细胞类器官培养系统来直接培养PSC&ESC&癌细胞形成干细胞（或者癌细胞的）聚集体；类器官的诱导：*停止旋转5-10min。使PSC聚集体沉降下来；*小心去除上清；*用15ml PBS （无Ca2+ 和 Mg2+）清洗1次；*去除清洗用的PBS；*加入15ml诱导培养基孵育CERO PSC诱导和培养设置如下：每周更换2次或视需要而定。与2D培养相比，更换频率下降。建议每周更换一次CEROtube。进行诱导7 - 12天。类器官的培养：停止旋转5-10min，使类器官沉降下来；小心去除上清；用15ml PBS （无Ca2+ 和 Mg2+）清洗1次；去除清洗用的PBS；按照下表加入分化培养液（期间通过CellDynamic W8来监控类器官的均一性、质量密度、大小尺寸）：参考pH值从开始的颜色变化作为指示来更换培养基；停止旋转5-10min，让类器官沉降下来；小心去除上清，按比例添加新的培养液。方式3：使用CEROplate 96或者CEROplate 384来形成干细胞或者癌细胞的聚集体，然后剩余的步骤与方式2一致。类器官的解决方案三生物打印的工作流程：BIO X/BIO X6 3D生物打印机采用挤出式打印技术，通过计算机控制，在 DNA Studio 软件的协同下，在内置洁净室内使用生物墨水将含有细胞、生长因子等生物材料自动打印成与三维数字模型相符的实体模型，满足多学科交叉的生物3D打印领域研究需求。选择适当的细胞类型：根据类器官的性质和功能需求，选择合适的细胞类型，包括基础细胞、上皮细胞、间质细胞等。使用CASY对于各种细胞类型进行质控。优化生物墨水配方：调整生物墨水的成分和比例，以提高细胞生存率和类器官结构的稳定性。设计合适的支架结构：不需要繁琐的CAD建模软件的使用。仪器附带的DNA studio 4软件可以设计出适合类器官生长和发育的支架结构，包括通道、孔隙等细微构造。考虑生物相容性和功能性：在设计和打印过程中，充分考虑生物墨水和支架材料的生物相容性和功能性，以确保细胞的生长和功能发挥。优化打印参数：根据生物墨水的特性和类器官的需求，优化BIOX/BIOX6的打印参数，以实现最佳的打印效果和类器官结构。进行预实验和调试：在正式打印类器官之前，进行预实验和调试，验证打印方案的可行性和稳定性。实施打印和培养计划：根据设计方案，使用BIOX/BIOX6进行类器官的3D打印，并在打印完成后进行细胞种植和培养，以实现类器官的生长和发育。使用CellDynamic W8精确量化类器官的结构特征（类器官的密度、大小、细胞外基质、有无空洞和腔隙等），建立密度值与类器官生理状态之间的关联，简化日常实验流程，提高实验效率和数据质量。进行功能性评估和验证：对打印出的类器官进行功能性评估和验证，验证其生物学特性和应用潜力，为后续的研究和应用提供支持和指导。通过以上步骤和方案，可以有效地利用3D生物打印技术打印出复杂的类器官结构，为生物医学研究和临床应用提供新的可能性。类器官的应用与优化

 未来的研究的核心，是正在发生着范式转变的：从依赖2D二维细胞培养转向接受3D三维细胞培养。那么为什么这么说呢：无数研究表明，在二维环境中，研究人员面临多重挑战。无论是细胞与细胞外基质（ECM）之间的低相互作用，还是塑料培养器皿对细胞行为的影响，都导致系统的预测性低且不能很好地代表人类生物学的实际情况。然而，在三维环境中，相关的相互作用显著改善，无论是细胞之间的相互作用，还是细胞与ECM之间的相互作用。此外，还可以控制微环境和生物机械信号。 那么无论是球状体、类器官还是3D组织模型都可以是药物发现中的重要模型：为了加速药物发现过程需要一个比较优质的创新工具—BIO ONE 生物打印机正是这样的利器。 接下来介绍一下这款仪器吧：那么这款就是我们新推出的一款可温控、高精度的生物分配打印机。 BIO ONE 能够高效地在96孔板或384孔板上打印液滴，帮助研究者轻松增加实验重复次数，获得更准确的化合物活性数据。 为了展示BIO ONE打印高活力细胞的能力，我们进行了一个实验，在96孔板中打印1 μL的TeloCol-10（中和并稀释至6 mg/mL），混合脂肪来源的间充质干细胞（MSCs）。图1-1：A) 生物打印后第1天、第4天和第7天液滴中细胞的存活率和  B) 活细胞与死细胞的数量。图1-2：生物打印后第1天、第4天和第7天MSC在TeloCol液滴中的细胞活力（绿色=活细胞，红色=死细胞）。比例尺对应500 μm。为了延申之前的工作并验证多种细胞类型的活力，使用BIO ONE分配了浓度为8 mg/mL的Coll 1和标记有mCherry的MDA-MB-231细胞（细胞浓度为100万个细胞/mL）的10 µL液滴。打印后，连续7天对活细胞图像进行成像。从图2-1和图2-2可以看出：图2-1：使用CELLCYTE X成像的含有mCherry标记的MDA-MB-231细胞的10 µL、5 µL和2 µL胶原液滴，红色和绿色分别检测活细胞和死细胞，成像持续五天。图2-2：使用CELLCYTE X测量的七天内mCherry标记的MDA-MB-231细胞在10 µL胶原液滴中的增殖曲线。其高精度和一致性确保每个液滴的体积精确可控，CV值低于10%，细胞存活率在7天内保持在93%以上。这些特性使BIO ONE成为药物筛选过程中的理BIO ONE致力于助力科学家更快、更准确地选出最佳候选药物，从而显著加速新药的研发进程。通过BIO ONE 3D打印技术生成的结构，不仅能够显著提高细胞的活力，还能在使用更少材料的情况下，实现更高的实验吞吐量。与传统方法相比，这种技术减少了多达800%的胶原蛋白消耗。因此，BIO ONE将成为您在药物研发过程中事半功倍的得力助手！ BIO ONE的技术通过确保将最佳候选药物快速推进至临床试验阶段，极大地加速了药物发现的整个过程。仅需打印一个液滴阵列，便可以在可重复的体外模型中高效研究药物的传递机制。这种方法不仅提高了研究效率，还确保了实验结果的可重复性和可靠性，使得药物开发过程更加顺畅和高效。BIO ONE为您提供强大的技术支持，助您在药物研发的道路上取得更加辉煌的成果。

什么是空间生物学 Targeted Bioscience 空间生物学分析是一种用于研究生物样本中分子在空间上的分布和相互作用的技术和软件组合。这些工具能够在单细胞或亚细胞分辨率下，全面表征组织结构和功能，从而揭示细胞在其微环境中的行为和状态。图1. 空间选择和剖析方法 近年来，生物学研究逐渐深入到三维空间中，意识到细胞在组织内相互作用和排列对于功能和疾病的重要性。空间组学技术的兴起填补了单细胞测序技术无法获取细胞空间分布信息的不足，通过研究细胞在组织中的相对位置关系，揭示了细胞空间分布对疾病的影响。近期英国癌症研究中心（CRUK）剑桥研究所在Science上发表了名为“The dawn of spatial omics” 的综述文章，系统地介绍了空间组学技术的种类、原理、优势和局限性，提供了面对当前挑战的观点和建议。这些技术的发展不仅为细胞和组织的空间分布提供了新的认识，也为生物学研究开辟了更广阔的视野，有助于解决许多生物学和医学领域的挑战。图2. Science文章Targeted Bioscience——AccuLift™ Spatial Profiler System在空间生物学这个快速发展的领域中，AccuLift™ Spatial Profiler System作为研究者的强大工具脱颖而出。这个开创性的系统将灵活的云计算平台的能力与独特的数字病理生态系统相结合，深入探索复杂的组织微环境。AccuLift™系统经过精心设计，旨在提高组织图像质量，同时保护分子完整性，使其成为任何实验室的必备资源。配备了一套试剂和软件，它为激光捕获微切割提供了流畅的工作流程，开辟了空间分析的新领域。该系统还能与其他分析技术无缝合作，进一步扩大了其实用性。总的来说，AccuLift™ Spatial Profiler System在空间生物学领域是一个充满希望的发展，为组织样本提供了无与伦比的洞察力。AccuLift™ Spatial Profiler System特点 Targeted Bioscience 精确，准确到单个细胞水平的空间分子分析。灵活，对组织微环境中的目标区域（ROIs）或整个部分进行分析。无缝集成，与标准组织学分析方法一起使用，设置时间最短。全面，多组学分析（全基因组测序、RNA测序、液相色谱质谱、蛋白质芯片阵列），了解这些数据在空间上的分布和关系。 主要内容  Targeted Bioscience 技术和方法：演讲中介绍了几种技术和方法，包括激光显微切割技术（LCM）、蛋白质组学、基因组学分析、环路构建等，这些技术用于研究肿瘤的分子层面特征，并为个性化治疗提供基础。（1）LCM技术可以用于分离癌前病变中的单个细胞，这些细胞显示出侵袭和转移的迹象。（2）LCM技术可以用于研究激酶抑制剂如何影响癌细胞的信号传导通路。临床试验和实验室成果：演讲中提到了多个临床试验的结果，如I-SPY试验、Side Out试验等，以及实验室中的研究成果，如利用激光显微切割等技术获得的关键信息。技术发展和未来展望：演讲还探讨了激光显微切割等技术的发展趋势，包括液体匹配折射率、激光波长选择、自动化系统等，以及人工智能在个性化疗法设计中的应用前景。结果和影响：演讲介绍了技术和方法在肿瘤研究和治疗中的应用，以及它们对未来个性化治疗的潜在影响。（1）组织分子分析是一种强大的工具，可用于研究癌症的复杂性。（2）LCM、蛋白质组学和基因组学可以用来生成有关癌症的新信息。（3）这些信息可用于开发更有效的癌症治疗方法。

BIO ONEBIO ONE在生物打印领域实现了重大突破：相比于其它品牌打印机的注射泵打印头精度为10μl，BIO ONE的打印精度达到了0.1μl，提升了整整100倍。精准度和高重复性：其基于注射器的打印机制， 0.1μL的步进体积使得打印更加精确，完全控制您的打印，实现高度可重复的结构，减少打印之间的变化和人为错误自动校准功能提升了工作流程效率，实现无人值守操作。温控打印头的温度控制低至0℃，为科学研究提供了前所未有的精准保障说了这么多优点，那来点干货吧：01在细胞研究领域，精准度是取得成功的关键。我们对BIO ONE的精度进行了评估，使用TeloCol-10作为材料，打印了10 μL和25 μL的液滴，并通过分析天平评估了其重量。1.1 实验中的设置和参数：表1：使用BIO ONE来分别分配10 μl(图1A)和25 µl（图1B）胶原蛋白1.2 结果：10 µL液滴：分配液滴的变异系数（CV）为7.63%，平均重量为9.55±0.73 mg，准确度为99.2%。25 µL液滴：CV为2.08%，平均重量为24.89±0.52 mg，准确度为96.47%。对照结果：⼿动移液对照液滴的重量分别为9.48±0.32 mg（10 µL）和24.04±0.92 mg（25 µL）。1.3 结论：BIO ONE⽣物打印机在分配胶原蛋⽩液滴时展⽰了⾼精度和准确度。10 µL胶原蛋⽩液滴的CV低于8%，25 µL液滴的CV约为2.1%。这些结果证实BIO ONE可⽤于可重复分配温度敏感的⽣物材料如TeloCol®-10和其他胶原蛋⽩材料。图1：A) 84个10 μL样品和B) 46个25 μL样品的分配胶原蛋白液滴的重量结果显示出其高精度和准确性，进一步证实了BIO ONE在打印胶原蛋白等温度敏感材料时的优异性能。BIO ONE 通过其高精度机械挤出技术，实现了令人难以置信的0.1 μL分辨率，确保打印材料体积的绝对准确。无论是打印温度敏感的胶原蛋白和Matrigel，还是其他复杂的生物材料，BIO ONE 都能保持一致的质量和高重复性。02我们也对10μL的液滴进行了分配和测量图2：使用四个不同的BIO ONE生物分配器分配10μL水滴的重量。虚线显示目标重量0.01g。分配时使用了27G塑料喷嘴。从图2可以看出，BIO ONE能够一致地分配10 μL的水滴，CV值最低为7.6%。系统的可重复性确保了：实验运行的一致性生成数据的信心完全的实验控制其开放材料平台和冷却、加热功能，让研究者能够自由选择并精准控制打印参数，大幅提高实验的可靠性和效率。BIO ONE不仅价格更实惠，您用国产的价格买到欧洲的品质，更为科学研究提供前所未有的精度保障。BIO ONE生物打印机，卓越精准！

器官芯片（Organ-on-a-Chip）是一种结合微流控技术和生物材料学的创新技术，通过在微流控芯片上模拟人体器官的微环境和生理功能，以替代传统的动物实验和二维细胞培养模型。以下是器官芯片的详细介绍：1 设计和结构NETRI器官芯片器官芯片通常由多个微通道和室组成，这些微通道和室以柔性聚二甲基硅氧烷（PDMS）为主要材料制成，具有高透明性和良好的生物相容性 。这些微通道通过细胞外基质（ECM）相互连接，可以精确控制液体流动和营养物质的供给，从而模拟人体器官的微环境 。2 主要应用NETRI器官芯片药物筛选和毒性测试：器官芯片可以用于高通量药物筛选，评估药物的代谢和毒性作用 。疾病模型：通过将病变细胞植入器官芯片中，可以模拟疾病的发生和发展过程，为疾病研究和新药开发提供有效工具 。个性化医疗：结合患者的细胞，器官芯片可以用于预测个体对药物的反应，推动个性化治疗的发展 。视频链接：https://www.bilibili.com/video/BV1sSTreKE7e/?spm_id_from=333.999.0.0&vd_source=69a3583cf2b6ca1053ac337cca967874皮肤培养应用介绍NETRI公司专注于先进的NeuroFluidics技术，创建体外皮肤模型，这些模型模拟神经或血管整合的皮肤环境，采用微流控和膜技术。公司主要产品包括：神经皮肤模型：将初级角质形成细胞与hiPSC衍生的感觉神经元共同培养，具有电生理和成像读数功能。灌注皮肤模型：将初级角质形成细胞与内皮细胞共同培养，具有成像和生化分析读数功能。视频链接：https://www.bilibili.com/video/BV18eGPeJEJp/?spm_id_from=333.999.0.01演讲者介绍NETRI器官芯片 Alexandre Bichat是药剂师和博士，研究方向为皮肤药理学，包括临床和体外研究。目前在Daitree公司负责开发神经科学化妆品和皮肤病领域的新应用和新产品。2皮肤神经与功能NETRI器官芯片 Bichat博士强调皮肤是人体最大的器官，具备保护功能和感知多种刺激的能力，如触觉、温度和痛觉。这些功能是通过角质形成细胞和神经元的相互作用实现的。这些细胞在多种正常或病理性皮肤条件下，如瘙痒、敏感皮肤、银屑病、特应性皮炎和湿疹等，都有重要作用。3现有研究模型的局限性NETRI器官芯片 目前的临床前研究主要依赖体外模型，但这些模型在皮肤病和化妆品研究中并不总是相关，因为它们使用啮齿类动物的神经细胞，而这种方法在化妆品研究中不被允许。此外，这些共同培养模型并不能真实模拟皮肤的解剖和生理结构。4体外设备的改进NETRI器官芯片 Bichat博士介绍了他们正在开发的体外设备，旨在模拟皮肤和神经的生理结构，通过不同的培养室实现细胞的特定培养环境和分泌物分析，从而提高实验结果的相关性和准确性。5体外设备的具体优点NETRI器官芯片 6电生理学评估NETRI器官芯片 Bichat博士进一步介绍了MEA电生理学技术，通过在设备中植入电极，可以实时评估细胞的电活动。这种技术可以用于各种应用，如神经化妆品、PNS疾病、免疫学、微生物组学、肿瘤学等。7多种检测技术的应用NETRI器官芯片 设备兼容多种读出方法，如ELISA、免疫荧光、显微镜、液相色谱、活细胞染色、钙成像和质谱等。这种多样性允许在一个设备上进行多种测量，提高实验效率和数据质量。8实验示例和应用前景NETRI器官芯片 Bichat博士展示了一些实验数据，证明了这些设备在皮肤和神经共培养实验中的应用效果。这些实验包括神经和角质形成细胞的共培养、药物刺激下的电活动变化等。设备的应用前景广泛，包括评估药物的机制、药效筛选、毒性测试等。9皮肤病和化妆品的应用NETRI器官芯片 Alexandre博士讨论了如何利用创新的皮肤模型来模拟炎症性疼痛信号，通过在皮肤中引入炎症介质，并通过电活动信号来验证神经元的疼痛反应。此外，还展示了预血管化皮肤模型的应用前景，通过控制流体流动和细胞培养，模拟血管和皮肤的相互作用，为皮肤再生和药物测试提供了新的方法。10结论NETRI器官芯片 讲演详细介绍了Bichat博士团队在神经化妆品和皮肤学领域的创新研究，通过先进的体外设备和多种读出技术，为皮肤病和化妆品研究提供了新的工具和方法，具有广泛的应用前景。使用特定培养基：不同培养室可以使用每种细胞特定的培养基，避免培养基成分对其他细胞的负面影响。上清液分析：通过采集特定细胞培养室的上清液，可以更准确地分析细胞分泌物。治疗效果评估：将治疗剂直接应用于皮肤培养室，模拟现实中的外用化妆品的应用场景。

摘要减少固相多肽合成（SPPS）过程产生的杂质，对于可靠的结果分析来说非常重要。然而，因为色谱纯化的方式无法进行多肽平行纯化，所以在进行多肽药物筛查（N＞24）的过程中，经常会使用一些低纯度的粗肽，这对最终的结果分析非常不友好。但是，目前我们使用PurePep EasyClean(PEC)技术在96孔板里进行多肽的平行纯化，成功突破了这一瓶颈。引言在多肽药物筛查过程中，需要测试数百种不同的多肽，这对多肽药物的验证或进行构效关系的研究至关重要。目前利用基于Fmoc策略的固相多肽合成（SPPS）方法可以快速合成大量多肽样品。但是在合成过程中，由于多肽链的截断或氨基酸的缺失等原因，氨基酸的偶联效率无法达到100%，因此不可避免的会产生一些杂质，通常这些杂质我们会通过反向高效液相色谱（RP-HPLC）的方法去除。然而，反向高效液相色谱（RP-HPLC）受到通量的限制，即每个纯化柱一次只能纯化一个多肽。因此多肽药物筛选主要是基于粗肽来进行，会导致分析结果假阳性或假阴性的风险大大增加，极大阻碍了多肽药物开发的进展。1在此项案例研究中，我们介绍一种可以高效平行纯化多肽的方法，利用Purepep EasyClean(PEC)技术，使用多孔板和真空歧管，实现一次快速平行纯化96个多肽（每个多肽最大10μmol），以此来推动高效可靠的多肽药物开发工作。方法合成在Ramage-Amide-DP-树脂上以10μmol规模在96孔板中（1×45分钟，5倍过量氨基酸）平行合成2×96个肽，然后进行常规封端反应（2M Ac2O，2M pyridine，1×5分钟）。封端步骤可以确保PEC Linker连接子RC+（4倍当量）选择性偶联到目标肽上，偶联时间2个小时（6倍当量DIPEA，6倍当量Oxyma），序列由英国Durham大学化学系Steven Cobb提供。使用TFA/H2O/EDT/PhSMe/TIS（83:5:5:5:2，每10 μmol肽0.5 mL裂解液）进行TFA裂解2h。收集粗肽，沉淀，离心并在96孔板中干燥。图1显示了96个序列中氨基酸的加权分布。图 1 肽库序列示意图PEC纯化为了进行肽库序列的高通量平行纯化，PEC纯化的操作程序适应了96孔板的使用设计。因此，在连接有Linker连接子的修饰肽溶解后，所有后续的步骤借助真空歧管在96孔板上进行，可实现连接子从开始偶联到最终无痕释放的全过程。第一个96孔板上合成的粗肽利用PEC纯化技术纯化，最终收集在深孔板上并直接冻干；第二个96孔板的合成的粗肽不进行PEC纯化，而是裂解、沉淀、溶解在 H2O/MeCN (7:3) + 0.1% TFA 溶液中进行分析并冻干，以确定粗纯度和产量。分析在 Waters 的 Acquity H-Class UPLC-ESI-MS 系统上，利用C-18 柱（1.7 μm，2.1 x 500 mm）进行纯度分析和质谱鉴定；流动相为含有 0.1% TFA 的H2O（A）和 MeCN（B）混合液；使用已知 210 nm 处消光系数的试剂（0.1 mg/mL Fmoc-L Glutamic acid (OtBu) monohydrate solution）作为内标计算回收率。²图 2 粗品和 PEC 级 SCP12 和 SCP31 在 210 nm 处的 UPLC-UV/VIS 色谱图结果和讨论使用 PEC 技术可使 96 种肽的平均纯度提高 19%（表 1）。表 1 粗肽和 PEC 级肽的平均结果 利用PEC技术纯化后的肽库没有检测到截短序列，并且只有一种肽的纯度低于 70%（图 3）。与未纯化的粗肽相比，这是一个明显的改进，在未纯化的粗肽肽库中，只有18种肽的纯度高于80%（图3）。PEC级肽的总体回收率为48%。图 3  96种肽的粗品纯度和 PEC 级纯度分析图2显示了两种代表性肽的粗肽和PEC级纯化肽的比较色谱图。例如SCP31肽（图2，左）体现了PEC纯化技术的优势：可以有效去除截短序列。这个特点在未优化的合成过程中至关重要。在肽库的制备中，由于96条肽中有76条在其序列中具有一个 Asp-Gly 片段，杂质大部分是由天冬酰亚胺的形成而产生的，如图 2（右）所示。平均而言，由天冬酰亚胺的形成引起的杂质占总杂质的7%。尽管 PEC 无法完全去除这些杂质，但PEC技术纯化的结果也已经表现了相当的潜力：例如使用 Asp(Dmb/Hmb)Gly 构建块，将使96条肽的平行纯化平均纯度达到87%。结果一览使用 96 孔板形式的PEC纯化可以实现大规模并行多肽纯化一种方法适用于所有的程序，PEC级的肽平均纯度为87%通过消除多肽相关杂质来提高检测可信度高通量多肽纯化试剂盒PTI（Protein Technologies, Inc.）公司的高通量多肽纯化试剂盒采用独特的PEC纯化技术，进行大规模多肽快速平行纯化以保证高度可靠的分析结果。一种纯化方法适用于所有种类多肽纯化，并且一次可平行纯化48或96个多肽，平均纯度高达85%以上；还可降低95%的溶剂消耗量和有机废液的产生，极大降低纯化成本，非常适合PEC级肽库的构建，大大提高筛选和分析结果的可靠性。多肽合成、切割、纯化——三位一体多肽合成仪PurePep®Chorus多肽合成仪结合了稳定自动化的多肽合成、多肽切割及多肽纯化；可先平行合成6条不同肽序，并原位切肽，然后在同一台仪器上，平行纯化6条多肽；使用感应加热能快速合成多肽，同时正交捕获-释放PurePep EasyClean (PEC)技术可实现高效多肽纯化；可有效应用于疏水肽(hydrophobic peptides)及聚集肽(aggregating peptides)的合成与纯化。参考文献[1] J. R. Currier et al. Clin Vaccine Immunol 2008,15, 267-276[2] B. J. H. Kuipers; H. J. Gruppen Agr. Food Chem. 2007, 55, 5445-5451

循环肿瘤细胞（Circulating Tumor Cells, CTCs）是从实体肿瘤或转移病灶中释放到外周血中的肿瘤细胞。这些细胞在癌症的诊断、治疗和预后评估中具有重要意义。这些细胞在癌症的诊断、治疗和预后评估以及生物学研究中具有重要意义。 癌症早期检测：CTCs可以作为早期检测癌症的生物标志物，帮助医生在癌症早期阶段发现疾病。病情监测和治疗效果评估：通过检测CTCs的数量和特性，可以监测患者的病情进展和评估治疗效果。例如，乳腺癌和结直肠癌患者的CTC检测已被证明在治疗监控中具有重要作用。预后评估：CTCs的存在和数量与患者预后的相关性已被广泛研究。较高的CTC计数通常与较差的预后相关，反之亦然。个性化治疗：CTCs的基因分析可以帮助医生了解肿瘤的特性，从而制定个性化的治疗方案。这种方法不仅可以提高治疗效果，还可以减少不必要的治疗副作用。转移机制的研究：CTCs是肿瘤转移过程中的关键环节，通过研究CTCs的分子机制，科学家可以更好地了解肿瘤转移的生物学过程，从而为预防和治疗转移提供新的策略。药物开发和疗效评估：CTCs可用于新药的筛选和疗效评估，通过监测CTCs对药物的反应，可以加速新药的研发过程，并优化现有治疗方案。视频链接：https://www.bilibili.com/video/BV1UfMGe8EHq/?spm_id_from=333.999.0.0内容总结Anne首先解释了为什么研究液体活检如此重要，液体活检是一种非侵入性技术，允许重复取样，并从血液样本中获得大量信息，例如游离DNA、循环肿瘤细胞（CTCs）、其他免疫细胞、细胞外囊泡或可溶性蛋白。她强调了液体活检揭示和诊断肿瘤异质性的重要性，特别是对于循环肿瘤细胞（CTCs）的研究，因为CTCs反映了转移性肿瘤。Anne介绍了Angle公司商业化的 Parsortix 技术，这是一种能够从液体活检样本中收集稀有细胞的仪器。她重点讲述了从血样中提取循环肿瘤细胞(CTCs)的工作流程和Parsortix技术的工作原理，以及该技术如何通过微流控系统富集细胞。Anne详细阐述了使用 Parsortix 技术进行免疫荧光检测的开发过程，特别是对 PD-L1 的关注，因为 PD-L1 的上调允许癌细胞逃避宿主免疫反应。她强调了循环肿瘤细胞中 PD-L1 表达的重要性，以及如何评估一种检测方法的性能，该方法用于使用病理系统表征上皮和间质CTC的PD-L1表达。视频链接：https://www.bilibili.com/video/BV15uTQe5Euy/?spm_id_from=333.999.0.0 内容总结癌症研究之血液中癌症细胞簇与细胞缺氧的相关性：讲演稿指出，研究发现，血液中的癌症细胞簇（Circulating Tumor Cell clusters，CTC clusters）与细胞缺氧（hypoxia）有着密切关系。研究记录表明，在缺氧条件下，癌细胞更易形成细胞簇，而不是独立存在。癌症细胞簇转移问题的观察：此项研究观察发现，虽然单个癌细胞在缺氧状态下也有可能进行转移，但与细胞簇相比，其转移的能力明显不足。而处于缺氧状态的癌细胞簇则更具转移潜力，可在身体各处形成转移病灶。反血管生成疗法（Bevacizumab）对癌症转移的影响：在对抗血管生成疗法进行分析后，研究人员发现这种疗法虽然能縮小肿瘤体积，但会导致肿瘤更加缺氧，从而释放出更多的CTC簇，增加转移的概率，进而缩短了患者的生存期。通过提高血管密度实现对癌症的良性控制：为了应对上述反血管生成疗法的问题，研究者反其道而行之，尝试通过向肿瘤提供更多血供，提高血管密度。通过使用EfrinB2处理，虽然肿瘤体积变大，但肿瘤的缺氧程度降低，降低了CTC簇的分泌，从而降低了转移的可能性。临床试验探索新的治疗方法：研究团队正在开展针对CTC簇的临床试验，试图使用已得到FDA批准的Digoxin药物进行治疗，观察该药物是否能有效地分解CTC簇，从而实现对癌症的更有效治疗。

Cell Dynamics公司发布的“3D细胞、球状体、类器官分析仪”，一种用于测量3D细胞培养物大小、重量和质量密度的设备。该设备工作原理类似于流式细胞仪，通过微流体处理技术实现样品的分类和回收，并保证无菌性和细胞活力。3D细胞、球状体、类器官培养难点结构一致性和稳定性3D细胞培养需要确保每个球状体或类器官的形状、大小和细胞组成的一致性，以便获得可重复和可靠的实验结果。培养条件的优化不同类型的3D细胞模型需要特定的培养基和物理条件（如剪切力、压力和张力）来维持其生理特性。确保这些条件的稳定性和优化是质控的重要部分。细胞活力和功能的评估质控过程中需要监测细胞的存活率、代谢活性和功能表现。例如，使用Alamar Blue测定法评估细胞的代谢活性，并确保其在整个实验期间保持活力。无菌操作和污染控制确保在培养和处理过程中不引入污染物是质控的关键。微流控系统和生物安全柜的使用有助于减少污染风险，但仍需严格监控和验证。数据的重复性和统计学意义需要对实验数据进行统计分析，以验证结果的重复性和可靠性。这包括多次测量和对照实验，以确保数据的统计学显著性。3D细胞、球状体、类器官分析仪技术优势重量物理细胞计可在不影响样本无菌性和存活率的情况下进行分析和回收样品这种非侵入性方法相比其他终点分析技术（如超分辨显微镜、流式细胞术、免疫组织化学）具有显著优势该系统能够精确控制培养基的流动，利用微流控技术对球状体和类器官进行物理特征的测量和分选。确保每个球状体或类器官的大小和形状一致。这提高了实验的可重复性和数据的可靠性自动化处理和数据采集系统能够减少人为误差，并通过标准化的操作流程确保每次实验的数据具有较高的可重复性。内置的统计分析软件可以实时分析数据，确保其统计学显著性视频：https://www.bilibili.com/video/BV1W6Koe1EyD/?spm_id_from=333.999.0.0&vd_source=69a3583cf2b6ca1053ac337cca967874 视频中网络研讨会内容1患者和小鼠源类器官模型在癌症研究中的应用和优势主要内容癌症背景介绍：前列腺癌和膀胱癌是主要研究对象，前者是男性中第二大死亡原因，后者是全球第九常见的癌症。这些癌症表现出高度异质性，从局部的、缓慢发展的癌症到转移性和侵袭性的癌症。     2. 研究模型的演变：常用的癌细胞系和iPS细胞只能模拟疾病的某个特定阶段或状态，无法全面反映疾病的所有动态变化。类器官模型在过去十年中证明了其更好地模拟疾病的能力，但并不完全取代传统模型。     3.类器官模型的优点：能够复制癌症的生物标记表达的异质性。从原发性和转移性前列腺癌中产生的类器官样本，优化了培养条件，不需要额外的健康需求。悬浮培养方式方便中途筛选和测量。     4. 研究方法：使用Krugelmeyer盘子在24孔盘中培养大小相似的类器官样本。通过3D重建和表征，观察类器官的形态和大小，以便更好地进行药物筛选。     5. 药物筛选和临床应用：类器官样本用于药物筛选，观察到不同大小的类器官对药物的吸收速率不同。使用特定药物对膀胱癌类器官样本进行处理，测量其物理参数变化。临床适用性：从患者肿瘤中衍生类器官样本，进行基因组定位、病理学评估和药物敏感性剖析。     6. 结果和发现：类器官样本能够重现原始肿瘤的基因组景观。通过测量类器官的物理参数，发现侵袭性较低的类器官表现出空心形态，而侵袭性较高的类器官表现出实心形态。      7. 未来方向：开发预测药物敏感性标记的算法，以提供更精准的治疗。继续研究不同患者的类器官样本对药物的敏感性，以找到最有效的治疗方案。视频中网络研讨会内容2基于3D细胞培养模型的药物发现研究，聚焦类球体演讲人：博洛尼亚大学教授 Sparta Tossanti主要内容演讲者介绍了W8物理细胞仪在3D培养系统中的新应用，并以Lobo细胞为模型进行了研究。研究人员探究了奇赛替尼对细胞形态、蛋白质含量和核密度的影响。为了改善共聚焦显微镜分析的图像质量，使用了样品清除方法。结果表明，奇赛替尼处理可降低细胞大小、重量和蛋白质含量，同时增加细胞核密度和类球体紧密性。研究发现，W8物理细胞仪是研究3D细胞培养模型生物物理性质的宝贵工具。以下是对演讲内容的详细整理：引言演讲者首先介绍了3D细胞培养模型在药物发现研究中的重要性。3D细胞培养模型可以更真实地模拟体内细胞的微环境，因此比传统的2D细胞培养模型更具优势。类球体是一种常见的三维细胞培养模型，由细胞聚集形成的球形结构组成。     2. W8物理细胞仪演讲者介绍了W8物理细胞仪是一种用于测量细胞生物物理参数的仪器。该仪器可以测量细胞的大小、重量、密度、压缩性等参数。W8物理细胞仪具有快速、准确、非破坏性等特点。     3. 研究方法演讲者介绍了研究中使用的细胞系和处理方法。使用的细胞系为Lobo细胞，一种来源于人肠癌淋巴结转移的人源细胞系。细胞用奇赛替尼处理，奇赛替尼是一种酪氨酸激酶抑制剂，可抑制细胞增殖。     4. 研究结果演讲者介绍了研究结果，分为以下几个方面：奇赛替尼处理可降低细胞大小和重量。奇赛替尼处理可降低细胞蛋白质含量。奇赛替尼处理可增加细胞核密度。奇赛替尼处理可增加类球体紧密性。     5. 结论演讲者总结了研究结论，认为W8物理细胞仪是研究3D细胞培养模型生物物理性质的宝贵工具。奇赛替尼可通过影响细胞形态、蛋白质含量和核密度来抑制细胞增殖。

CRISPR基因编辑池式筛选是一种使用CRISPR基因编辑技术进行高通量基因筛选的方法。该方法灵活且高效，能够在单次实验中同时对成千上万的基因进行编辑，为研究者在生物医学研究领域提供了强大的工具。 CRISPR（Clustered Regularly Interspaced Short Palindromic Repeats），是细菌或古菌的一种免疫机制，能够帮助它们抵抗病毒等外源遗传物质的入侵。在2012年，科学家发现了其在基因编辑上的潜力，他们利用CRISPR关联蛋白（Cas）能够被引导至任何DNA序列并精确剪切，实现了目标基因的定向编辑。 池式筛选，即在一个大的“池子”里，每个细胞携带一个不同的基因编辑工具-指导RNA（gRNA）。这种编辑工具可以引导Cas蛋白至特定的基因进行编辑。在CRISPR池式筛选中，研究者可以使用含有数以千计不同gRNA的质粒库对大量细胞进行转染，使每个细胞内接收到一个随机的gRNA。 传统的基因筛选方法通常会对单个基因或一小组基因进行逐个测试，这种做法比较耗时且效率较低。某些筛选方法，例如通过微生物菌落挑选或表达差异分析等，虽然可以同时处理多个样品，但是每个基因通常都需要单独处理和分析。而“池式筛选”方法则是一种高通量筛选技术。在一个“池子”中，每个细胞被赋予一个特定的基因编辑工具，比如CRISPR的gRNA，就形成了一个大规模基因编辑池。然后，通过对整个细胞池进行外部压力处理，可以一次性筛选出许多对生存或生长有影响的基因。这样就可以在单个实验中对全基因组进行筛选，大大提高了筛选效率。文章的介绍部分详述了基于CRISPR的池式筛选方法的几个优势，包括提高通量，降低成本，减少了不同筛选中出现的批次效应。在池式的表型筛选中，细胞和细胞内分子被标记为荧光染料、报告基因或荧光免疫抗体。因为需要量化明确定义的特征，所以基于荧光的标记由于其对目标分子的高特异性和高灵敏度具有明显的优势。例如，在荧光激活细胞分类（FACS）中，从时间信号中测量的代表性值，如总荧光，或从光学显微图像中评估的更详细的特性，如分子定位和形态参数。 然而，当适用的生物标志物或染色方法不可用，能否在用识别特征的图像分析评估细胞表型变得具有挑战性。为了解决这个挑战，基于机器学习的无标记高内容细胞表型分析成为一个有希望的替代方案。 在这项研究中，作者展示了一种用于大规模池化CRISPR筛选的多功能方法，包括荧光和无标记高内容细胞表型，利用基于荧光和无标签Ghost Cytometry（GC）技术的细胞分类器。 首先，细胞表达Cas9蛋白被用池化CRISPR逆转录病毒库转导以实现功能丧失基因集，并选出稳定病毒整合。随后，经化合物或试剂处理的池化敲除细胞库显示出多种表型。如有必要，可以进行额外的试验，例如免疫染色。在GC-based的细胞分选中，预训练的机器学习模型可以选择性地丰富显示目标高内容表型的细胞。最后，可以将筛选的细胞进行各种生物学试验，包括基因分析如基因组测序，蛋白质试验以及基于细胞的功能性分析。在标准CRISPR扰动筛选中，从筛选细胞中提取基因组DNA，并由PCR扩增sgRNA区域，然后利用商业上可得的下一代测序平台阅读，以确定导致目标表型的基因。当筛选活细胞时，单细胞RNA测序的转录组学分析和基于细胞的功能试验是广泛适用的。 所以，整体来看，这种方法结合了CRISPR基因编辑技术，无标签高内容筛选和机器学习，进一步提高了我们对基因功能和表型的理解，以及我们在生物医学研究中的筛选能力。

应用案例一：Binaree组织透明化技术结合三维重建血管在研究低氧条件下脑血管重塑The Role of PRRC2B in Cerebral Vascular Remodeling Under Acute Hypoxia in Mice高原暴露可导致多种认知功能障碍。脑血管系统通过减少对大脑的氧和营养供应在缺氧诱导的认知缺陷中起着不可或缺的作用。RNA N6‐甲基腺苷(m6A)易受修饰并调节基因表达以应对环境变化，包括缺氧。采用Binaree组织透明化与共聚焦成像分析发现在内皮细胞中，条件敲除PRRC2B可促进缺氧诱导的血管重塑和脑血流再分布，从而减轻缺氧诱导的认知功能下降。因此，PRRC2B作为一种新型RNA结合蛋白在缺氧诱导的血管重构过程中发挥重要作用。这些发现为缺氧诱导的认知功能下降提供了新的潜在治疗靶点。研究亮点 组织透明化技术结合血管三维重建与高分辨率血管成像Binaree技术结合三维重建，使得血管成像的分辨率大大提高，能够清晰地展示低氧条件下血管的微细结构变化，如新生血管的形成、血管分支的变化等。 动态与定量分析低氧条件下的血管反应使用透明化和三维重建技术，能够动态观察并记录低氧环境下脑血管的重塑过程。这包括详细追踪低氧引起的血管生成、扩展、重塑和功能性改变，帮助理解这些过程的时间动态特征。通过三维重建获得的数据，可以进行精确的定量分析，评估血管长度、分支点数量、血管密度、直径等参数的变化。这些量化数据有助于深入理解低氧条件对血管结构的具体影响。 验证PRRC2B在内皮细胞中的关键作用验证了PRRC2B在内皮细胞迁移、血管生成和结构重塑中的关键作用。这些技术提供了直观的证据，支持PRRC2B作为潜在治疗靶点在低氧诱导认知障碍中的应用前景。 应用案例二：Binaree快速组织透明化结合大鼠MACO缺血模型组织透明化MCAO模型大鼠脑内血管三维可视化流程MCAO模型组织透明化大鼠脑内血管三维可视化血管重建(A)凝集素染色的3mm厚大鼠脑切片血管三维重建图。图像由配备4倍物镜的LSMS获得。(B)最大投影(z-stack)脑冠状切片标记线三维图像为正交视图所见xz平面。(C-F)为(A)框状区域XY平面(成像体积为1000 μm ×1000 μm ×1000 μm)的高倍视图。(D, F)示踪剂(C, E)示踪剂模型。(G, J)为(A)中框框区域的三维重构图。(H, I)显示了(G, J)随机深度的脑切片图像(相对于顶部成像面Z= 640 um)。(K)每片3 - 4个视场的长度和血管直径量化(n=3)。比例尺= 2mm in (A-B)， 100 μ in (G- f, H-I)， 300 μ in (G, J)。 MCAO后24小时组织透明化样本gfap相关免疫荧光强度的三维可视化和定量分析(A-B)大鼠0.5 mm厚的脑切片经凝集素(A)和GFAP(B)染色后的三维重建。(C-J)显示(A和B)中框区域的高倍放大视图。损伤侧皮质血管密度较对侧减少，gfap阳性荧光强度较对侧增加。(E-F)损伤侧皮质和纹状体gfap阳性细胞的形态学变化。(G) GFAP比值图。MCAo损伤后24 h同侧与对侧皮质相关荧光强度。梗死区gfap相关荧光强度明显增加。数据以平均值表示:误差条表示平均值的标准误差。“pc0.05。比例尺A-B为1 mm, C-J为100 μm, K-N为50 μm。

试用装活动试用装申请方式 拨打热线：400-6813-863，即可申请！ 产品信息名称:FGF-2 G3, bFGF STAB, Thermostable FGF-2。分子量:约19.0kDA来源:亚麻荠属植物种子纯度：≥ 95% measured by SDS page活性：比活性为EC50 0.5 ~ 1.0ng/ml。内毒素水平：低内毒素水平≤0.005ng/µg(≤0.005EU/ug蛋白)，采用鲎试剂测定Similarity:人类(99%)，牛(99%)，猪(99%)，小鼠(94%)。 产品优势* 热稳定性高：持续高活性，细胞培养更稳定* 周末无需更换培养基：减少污染，降低50%人工与试剂成本* 活性稳定：长达20天的半衰期，活性长期保持稳定 * 纯度高：有植物系统生产，纯度高达95%-99% 产品热点应用 试用小贴士活动对象：终端客户试用装数量有限，先到先得为保证更多单位可以尽快用上产品进行相关研究，同一课题组的多人参加活动或重复提交表单，将不予累计赠送，敬请谅解需在收到试用装1-3个月内反馈试用结果本活动最终解释权归普瑞麦迪（北京）实验室有限公司所有

产品介绍无糖皮质激素原代上皮培养基是一种完全定义的培养基配方是CnT-PR培养基的改良版本，用于从皮肤、角膜、牙龈、乳腺和膀胱组织中分离和扩增上皮细胞。它含有PCT因子，可最大限度地保留增殖祖细胞，延长寿命，并最大限度地减少分化造成的损失。也不含酚红或抗生素/抗真菌药。CnT-PR-CSF是专为不使用皮质类固醇的环境。根据应用情况，可以自行补充皮质类固醇产品应用1 在无皮质类固醇的环境下工作:消除皮质类固醇的抗炎和免疫抑制作用，使您能够观察自然细胞行为筛选药物并检测免疫反应研究细胞信号传导途径、基因表达模式和对刺激的反应评估特定细胞的活力、增殖和分化类型2 享受改变皮质类固醇水平的自由:在CnT-PR-CSF培养基中补充皮质类固醇，以模拟细胞中CS水平升高的条件免疫和炎症系统的抑制研究产品优势 CnT培养基建立模型的特异性细胞行为与体内样试验的反应性和敏感性一致所有产品均基于通用的基础配方，实现跨多个应用的无缝过渡批次间一致且不含动物源成分的培养基提供准确和高度可复制的2D/3D细胞模型高质量培养基支持临床级应用的建立更多产品选购指南

FIDA Biosystems是一家创新的生物技术公司，其专利的流体动力分散技术（FIDA）通过第一性物理原理直接获取绝对的流体动力学半径（Rh）的变化来表征生物分子的行为和特征。FIDA Biosystems公司推出的最新款产品Fida Neo涵盖亲和力表征、亲和动力学表征、分子质量表征三大功能，是全球唯一一款集多种分子结构、功能、质控表征于一体的生物物理分析平台，一次实验即可获得互作与分子质控的数据，让互作的数据有“法”可依。FIDA技术无需固定、无需加热，甚至无需标记，可兼容所有缓冲液，由于采用第一性原理进行表征，对现有分子互作技术是一次升级。FIDA技术无论在传统的生物大分子、小分子互作分析，还是三元复合物，血清、血浆、粗提物中互作分析都有很好的适用性，而且在一些传统互作技术具有挑战性的领域，例如免纯化样本、脂质体、外泌体、GPCR互作分析领域具有独特的优势，FIDA技术扩展了互作方法的应用领域，非常有利于实验平台进行分子互作仪器技术升级。FIDA技术在分子质量表征方面同样优秀，一次运行只需4微升样品4分钟的时间即可获取多达8个质量参数，其中流体力学半径(Rh)和粘度（Viscosity）为绝对数值，黏性（Stickiness）是FIDA的独家指标，聚集和多分散系数（PDI）为量化参数。FIDA可以用在任何蛋白相关的实验，包括蛋白质控，蛋白稳定性筛选、制剂筛选等常规方向，还可在液-液相分离（LLPS），冷冻电镜样本制备质控、蛋白表达体系筛选等领域有很好的解决方案。FIDA自2019年发布以来全球已有近百家客户，分布在全球高水平的研究院、大学、以及领先的生物制药公司。普瑞麦迪（北京）实验室技术有限公司于2024年5月与FIDA Biosystems公司确立了合作关系，正式成为其公司全线产品的中国区总代理，后续将为中国的用户提供FIDA产品和服务，普瑞麦迪携手中国分子互作和分子稳定性相关研究用户，为中国高水平科研助力。一台FIDA仪器可获得* 亲和力 (KD)* 动力学 (kon & koff)* 量化（聚集体，轻相浓度，颗粒大小分布等）* 8 个质量参数/每个数据点：Size, Aggregation, Viscosity, Stickiness, PDI, Labelling Quality, PDB Correlator & Sample Loss* 高通量（2x96孔板或50x1.5ml瓶产品特点无固定相：溶液中直接检测分子相互作用无标记或荧光标记灵敏度：Rh范围0.5-500nm分辨率：检测到＜5%Rh变化亲和力范围：pM-mM分析物上样体积：≤4μL每个数据点8个质控参数适用于各种样本类型，包括免纯化蛋白、无缓冲液限制

大多数商业SPR仪器使用的是一种常见的SPR相关棱镜耦合器的光学装置。这种组件将光耦合到金属表面，产生表面等离子体现象。在传统的SPR实验装置中，用户必须使用折射率匹配的流体将涂有薄层金的玻璃芯片粘附到棱镜上。镀金玻璃芯片通过位于芯片基板下方的棱镜进行照明。棱镜和芯片之间的空间填充有折射率匹配的流体，通常是浸渍油或弹性流体，其具有适当的折射率以促进光与传感器芯片的相互作用，从而产生表面等离子体激元。图 1 传统的SPR设置使用浸油粘附在棱镜上的镀金载玻片然而，这种流体的使用可能会带来一些挑战。首先，它作为浸油的性质意味着它可以流到芯片的侧面，这可能会影响镀金芯片在棱镜上的定位，并使其在流动池中的安装变得复杂化。此外，流体的滑溜特性会导致芯片在棱镜上移动，可能影响光学对准，从而影响信号。最后，由于流体在接触时会发生扩散，所以需要在安装下一个金芯片之前仔细清洁流动池，这也显著增加了系统设置和清洁的时间。 Affinité's SPR的优势相比之下，Affinité的无透镜SPR系统提供了更有效的解决方案。该系统采用镀金传感器，将金层直接结合到微型棱镜基板上，从而消除了对折射率匹配物质的需求。传感器的这一特征大大减少了安装传感器所需的时间，并消除了添加浸油的需要。图 2 Affinité的金传感器将金层与微型棱镜相结合Affinité的任何分子互作仪的传感器安装过程都非常简单且用户友好。安装我们的传感器只需打开旋臂，将传感器面朝下放入腔室中，关闭旋臂，然后使微流控通道中充满缓冲液。该过程不需要额外的步骤或光学对准。结论Affinité的无透镜SPR系统旨在通过简化传感器安装、减少设置时间和解决传统设置中常见的问题来改进SPR实验。我们努力为SPR分析在各个应用领域的发展做出贡献，希望使其对研究人员和科学家更容易使用。Affinité 个人型SPR分子互作仪Affinité Instruments个人型SPR分子互作仪系列产品主要包括P4SPR 2.0、P4PRO & Affipump和P4PRO +，新一代SPR设备不仅兼具强大的分子互作检测和分析的能力，而且极具性价比，是百万元以内即可拥有的四通道分子互作仪。特点基于SPR原理，实时、无标记、检测相互作用搭配先进的微流控技术，实现高性能和高准确性10分钟内完成1个样本测试一组实验可获得结合特异性、亲和力、动力学等数据四通道检测，结合参照通道信号，可进行背景扣除，获得可信数据仪器稳定，操作简单，维护简便采用注射泵组件，控制精准，信号稳定仪器性价比高，单个实验室即可负担AfficoatTM芯片可减少SPR试验中的非特异性结合芯片耗材成本低，大大降低仪器运行成本 普瑞麦迪（北京）实验室技术公司作为加拿大Affinité Instruments在中国的总代理，欢迎各位专家老师前来咨询了解个人型SPR分子互作仪系列产品。我们拥有专业的技术服务团队，可以随时交流分子互作实验设计与方案的选择。同时，我们还提供完备的亲和力检测服务，收到样品最快不到一周即可出具SPR分析结果。我们不仅有先进的仪器，还拥有有专业的技术团队，全面助力您的分子互作研究。

在医学领域，技术的进步常常意味着更快、更准确的诊断和治疗方法。而今，我们引领医学进步的道路，带来了一项技术——TIGR组织研磨分离仪，以下简称TG。这项技术将彻底改变我们对于细胞诊断的认识，让医学界迈入了一个全新的时代。 TG，是一种基于反向旋转的机械解离装置。通过预先编程的交替切割和研磨步骤，它能够快速、高效地从固体组织中分离出单个活性细胞，无需使用酶类试剂。这项技术的优势不仅在于快速，更在于保留了细胞的生物活性和形态完整性，为后续的诊断和治疗提供了可靠的基础。手术期间快速准确的组织病理诊断对临床决策至关重要。目前常用的术中咨询病理学方法耗时、劳动力成本高，并需要受过训练的病理学家的专业知识。 在这里，研究团队引入了一种替代技术（快速、无标记的固体组织活检诊断方法），通过依次评估悬浮的单个细胞的物理表型，实现了对活检样本进行快速、无标记的分析。该方法结合了使用TIGR组织研磨分离仪进行无酶机械解离组织，快速简便地分离出活性单个细胞，以及使用RT–FDC对成千上万个单个细胞的细胞物理表型进行顺序评估。 这种新的诊断流程将组织的无酶机械解离与测量速率为100-1,000个细胞/秒的实时可变形细胞计数仪和基于机器学习的分析相结合。从单个细胞的明场图像中提取的物理表型参数可以用于区分各种组织中的细胞亚群，而无需先验知识或分子标记。此外，我们展示了我们的方法在炎症性肠病诊断中的潜力。通过无监督的维度降低和逻辑回归，我们准确区分了小鼠和人类活检样本中的健康和肿瘤组织。该方法在30 min内提供结果，为快速、无标记的诊断流程奠定了基础，以检测固体活检中的病理变化，适用于术中诊断和病理变化。这项技术的应用范围广泛，不仅可以用于研究领域的细胞分析，也可以在临床诊断中大显身手。优势1TG配合RT-FDC技术先进的微流控芯片，有高速相机和智能数据处理软件，实现实时形态学、机械和荧光参数的获取和分析。RT-FDC技术通过实时监测细胞形态和变形，还可以通过分析细胞的变形、大小等参数,为科研人员提供了更加丰富的数据维度, 进行更加精准的诊断，甚至可以用于癌症的早期检测和疾病的预后评估。优势2除此之外，TG还具有无酶、高通量的特点，使其在临床应用中具备了巨大的优势。它不仅可以用于术中诊断，还可以用于实时监测疾病的进展和治疗效果，为临床医生提供了更加及时、精准的诊断和治疗方案。首先，我们筛选了不同的小鼠组织，并评估了机械解离组织后的细胞产量、存活率以及RT–FDC测量的可行性。我们展示了仅基于图像提取的物理参数就可以区分组织细胞的亚群，而无需先验知识或额外的分子标记，这可以增强传统的流式细胞术。我们还展示了我们的方法可以通过在微流控系统中测量细胞变形来确定结肠组织中的炎症变化。此外，我们还检查了来自小鼠和人类结肠的冷冻和新鲜活检样本，并通过主成分分析（PCA）和机器学习对多维数据进行分析，展示了RT–FDC可以区分健康和癌变组织。这些发现表明，使用RT–FDC评估组织来源的单个细胞的物理表型是一种检测炎症或恶性状态的替代策略。我们的流程可以在30 min内提供结果，并可以在不偏见和无标记的情况下识别和表征组织中的细胞群体的潜力。结果机械解离组织的物理表型在评估细胞的物理表型之前，面临的第一个挑战是在几分钟的时间内快速从固体组织中提取单个细胞，同时旨在最大程度准确地代表细胞亚群的异质性。为此，我们使用了TG，这是一种基于反向旋转的研磨齿的机械解离装置（图1），装在锥形底离心管中。该装置自动执行预定义的交替切割和研磨步骤，以从固体组织中分离出单个细胞。使用TG或常规酶解方案处理了十种不同的小鼠组织进行比较。大多数组织的存活率为70–90％；细胞产量与酶解离相似且取决于组织种类。机械解离的关键优势在于处理时间不到5 min/样本，而不是酶解方法的数十分钟甚至几个小时。处理速度可能有助于接近原位条件以此来保留生化和生物物理表型。图1| 物理表型分析过程示意图组织样品被切割成小块并放入含有培养基的组织研磨器内转子中。通过预先编程的自动执行的顺时针和逆时针旋转序列进行机械解离。解离的细胞被离心并悬浮在测量缓冲液中。样品被加载到微流控芯片上，并使用RT-FDC进行分析。对典型的大约10,000个细胞的每个单个的亮场图像进行捕获。从图像中提取各种特征，用于多维分析。总的来说，从组织到结果的整个过程不到30 min。 使用组织的机械解离和基于物理表型的无标记分析时，对于肝脏这样的特定组织，这种方法是否能够真实地代表组织中存在的细胞类型的分布进行了仔细研究。在小鼠肝组织解离后，通过细胞形态和大小测量，确定横截面细胞面积大于150平方微米的细胞为肝细胞。肝细胞是肝脏的主要实质细胞，占肝细胞总数的70％，近80％的肝脏体积。使用TG获得的细胞悬液中，肝细胞占总细胞的平均比例为52.5％，通过机械解离获得的细胞悬液中与酶解消化相比更接近组织中的真实比例。利用细胞大小识别不同的肝细胞亚群，这些亚群与不同倍性的肝细胞相关联。 在RT-FDC测量中，数百个单个细胞悬浮在高粘度的甲基纤维素缓冲液中，经过微流控通道狭缩。在这个过程中，细胞受到剪切应力和压力梯度的影响，导致其变形，并且每个细胞的图像被获取。通过实时计算图像中的几个物理参数，包括细胞的变形、大小、亮度、亮度标准差、长宽比和面积比。此外，通过荧光模块检测细胞表面标记的表达情况。 图2展示了从肝脏、结肠和肾脏中提取的细胞的物理参数分布示例。每个聚类代表具有相似物理表型和表面标记表达的细胞组成的群体。通过图像派生的物理参数，例如细胞大小和平均亮度，可以纯粹地区分出上皮细胞群体，而无需使用额外的荧光抗体面板。在结肠上皮细胞中，可以根据亮度和大小确定多个细胞聚类。在肾脏的白细胞群体中，也可以基于细胞大小和变形参数找到不同的聚类。图2| 小鼠肝脏、结肠和肾脏样本细胞物理参数的说明性散点图a，从肝脏分离的细胞的平均亮度与细胞大小的代表性散点图，显示大量细胞簇。标记的细胞群（形成细胞大小为 25-50 μm2 且亮度平均值在 100-115形成了一个明显的簇）富含 EpCAM 阳性（上皮）细胞，但不含 CD31 阳性（内皮）细胞或 CD45 阳性细胞（白细胞））。FITC，异硫氰酸荧光素；PE、藻红蛋白；APC，别藻蓝蛋白。b，EpCAM 和 CD45 细胞表面标记染色的结肠细胞的说明性散点图。在 EpCAM 阳性群体中，可以根据物理参数（例如亮度和细胞大小）的密度图可以区分7个细胞亚群。c，EpCAM 和 CD45 染色的肾细胞的说明性散点图。在 CD45 群体中，根据细胞大小和变形的相似性确定了4个亚群。散点图中的颜色图表示事件密度。 RT–FDC还可用于捕获细胞相互作用。使用长宽比和细胞大小参数，我们在胸腺、脾脏和肾脏样本中确定了细胞双体。许多双体由两种不同的细胞类型组成，根据细胞表面标记来判断（图3）。通道内的细胞位置与荧光峰的位置相结合，使我们能够确定，例如，双体由白细胞（CD45+）和内皮细胞（CD31+）组成。使用RT–FDC排序模块，可以无标记地分离细胞双体进行进一步的分子分析和下游应用，包括对组织中相互作用的免疫细胞进行研究。图3| 使用RT-FDC检测细胞二聚体代表性的细胞从小鼠a胸腺，c脾脏和e肾脏 分离的细胞大小与纵横比的散点图，显示了识别细胞二聚体的门控策略。在b胸腺和d脾脏中鉴定的细胞二聚体及f肾脏中的对应荧光迹线（b、d），显示了白细胞（CD45）与内皮细胞（CD31）相连接，或（f）两个白细胞的相互作用。 人组织制备从埃尔兰根病理学研究所获得的肿瘤或健康组织手术切除的人类活检样本，立即置于含有10% 胎牛血清（FBS）、1% GlutMAXTM、1% HEPES和1% 青霉素/链霉素的DMEM Advanced培养基中，并存放在4 °C下，立即处理或在液氮中冷冻以备后用。组织解离和单细胞制备使用TissueGrinder（TG）进行组织解离。简单地说，将组织样本切成约1-2 mm大小的小块，并放入800μL含有2% FBS的DMEM于TG的转子中。将转子单元放置在一个50 ml离心管的盖子中，带有100 μm细胞筛的定子插入到转子的顶部。将50 ml离心管放置在盖子上，旋紧并放置在TissueGrinder设备上（见图1）。每种组织类型的研磨过程参数总结在表1中。在研磨过程之后，将离心管倒置到架子上，打开，并用5 ml DMEM，2% FBS冲洗细胞过滤器。流过物被转移到15 ml离心管中，并在300 g离心8 min。然后抽取上清液，将细胞沉淀用2 ml PBS(含2% FBS)洗涤，通过带有细胞过滤器盖的FACS管，并在300 g离心5 min。将细胞沉淀悬浮在高粘度测量缓冲液中，该缓冲液由稀释在无钙镁磷酸盐缓冲液（PBS）中的0.6%（w/w）甲基纤维素（4,000 cPs; Alfa Aesar）制备而成。表1：用于机械解离的小鼠器官和相应的TG方案流程，以及用于RT-FDC测量的微流控芯片大小通过细胞的物理表型来鉴定组织炎症炎症性肠病（IBD），如克罗恩病和溃疡性结肠炎，是与受损的上皮/黏膜屏障以及免疫细胞的激活/招募相关的肠道慢性炎症性疾病。尽管IBD的病因尚未完全理解，但我们对IBD的理解很大程度上来自实验动物模型的研究。其中一种模型是将原始T细胞转移入Rag1缺陷小鼠中诱导实验性结肠炎（慢性结肠炎的T细胞转移模型，以下简称转移性结肠炎）。然后通常通过来自结肠组织的用伊红染和伊妥珠染的切片生成的组织病理学评分来量化其严重程度。 在转移性结肠炎动物模型中对结肠细胞的物理表型变化进行的调查。通过细胞的变形与大小的散点图（见图4），发现疾病组织中的细胞似乎比健康组织中的细胞变形较小。在检查CD45+细胞后，发现转移性结肠炎样本中存在大量变形较小的白细胞，可能是淋巴细胞。总体上，转移性结肠炎样本的中位数变形显著减少，并且伴随着白细胞百分比的显著增加，符合淋巴细胞的浸润。细胞的中位数变形与白细胞百分比呈强烈的负相关。此外，细胞大小和变形的中位数值与专家的组织病理学评分相关。值得注意的是，健康组织比患病组织更难机械分离成单个细胞，患病组织产生了更多的分析事件。 我们观察到，在炎症期间细胞的物理表型发生变化，加上越来越多的证据表明慢性炎症与恶性肿瘤相关，这导致我们推测我们的方法可能会检测到肿瘤活检样本的变化。我们证实了这种可能性，对于小鼠和人类样本都是如此。图4| 通过 RT-FDC 进行的细胞物理表型反映了组织炎症a，与健康小鼠结肠组织（对照）相比，从转移结肠炎组织样本（TC）分离的细胞的细胞大小与形变散点图；具有相应的细胞大小和变形直方图。b，对相同的两个结肠样本进行CD45阳性细胞门控，显示转移结肠炎样本中白细胞的富集，并伴随着物理表型参数的变化。散点图中的颜色图表示事件密度。c，a 和 b 中所示样本的核密度估计图，其中等高线标记为 0.5（浅色阴影，外轮廓）和 0.95（深色阴影，内轮廓）水平。d， 中值变形和CD45阳性细胞百分比的量化（三个独立实验中n = 14只生物学独立的动物）。方框从第 25 个百分位延伸到第 75 个百分位，中间有一条线；晶须跨越 1.5 倍四分位距。使用双边Mann-Whitney U检验进行统计比较。e，所有细胞变形中值与白细胞（CD45+细胞）比例的双边Pearson相关性；P = 0.0065和r = −0.69。区分小鼠结肠中的肿瘤组织与健康组织我们的研究发现，肿瘤组织中的细胞的机械特性与对照样本显著不同，表明我们的方法在检测结直肠癌方面具有潜力。图5a-c中单个小鼠的代表性图表显示，肿瘤中的细胞与其健康对应物相比，细胞大小更大，变形更高。对所有32个样本的分析表明，肿瘤中的细胞具有显著较高的平均细胞大小、变形和面积比，效应大小从中等到强（图5d、e和g）。肿瘤样本还表现出更大的异质性，如图5c中广泛的分布以及细胞大小和面积比的标准偏差显著增加（图5d和g）。图5 | 小鼠结肠组织中肿瘤和健康组织细胞的物理表型分析研究团队在验证他们的方法在不同器官组织上的有效性时所采取的步骤和结果。他们将方法应用于来自9名癌症患者的新鲜切除的肺活检样本，并使用主成分分析（PCA）结合逻辑回归来区分健康样本和肿瘤样本。结果显示，他们的方法能够很容易地将7个健康样本与7个肿瘤样本分开，并且进一步正确分类了4个盲样本。在PCA中，PC1和PC2解释了46.9%的方差，其中变形参数对PC1有很大的贡献，表明细胞可变形性测量所带来的独特信息对于区分肿瘤和健康组织是有用的。此外，研究团队还测试了他们的方法对于只存在少量癌细胞的情况的敏感性，如低肿瘤细胞度和广泛的成纤维性肿瘤基质含量的肿瘤，或者经过化学或放射化疗后几乎完全缓解的肿瘤。他们的方法成功地将一个由50%健康和50%肿瘤组织组成的样本分类为肿瘤样本，即使在存在极少量癌细胞的情况下，也能正确地分类样本为肿瘤。 参考文献：Rapid single-cell physical phenotyping of mechanically dissociated tissue biopsies | Nature Biomedical Engineering我司将致力于将这项技术带给更多的医疗机构和患者。我们相信，组织研磨分离仪将成为未来医学领域的重要工具，为人类健康事业作出更大的贡献。让我们携手迈入医学技术的新时代，让组织研磨分离仪成为医学界的强大助力！ 

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CASY，不仅是细胞计数的利器，还在细胞存活率和毒性测量方面大显身手。最新研究揭示了它在评估抗癌药物的细胞毒性方面的潜力，为设计更有效的多药治疗方案带来了新思路。在最近的一项名为“CASY在癌细毒性和化疗敏感性中的应用——抗癌药物组合治疗癌症”的研究中，CASY被用于评估抗癌药物结合化疗的细胞毒性，旨在设计具有更宽治疗窗口的新型多药治疗方案。研究案例：新药物组合的细胞毒性评估在Weinreich等人最近的一项研究中（1）。作者检查了接受胃癌标准三联药物方案（ECF）以及新型双联药物（D-D）多化疗方案治疗胃腺癌细胞系和非恶性细胞系。使用CASY生长抑制测定评估了药物组合的效果：400 μL稀释后的细胞悬液重复测量三次，药物的细胞毒性效应被计算为实验开始时活细胞数量与经过各种药物组合孵育5、10和14天后的细胞计数之间的相对比例。CASY评估窗口设置为仅包括活细胞，并且排除死细胞。来自德国图宾根大学医院实验肿瘤学的 J. Weinreich 博士：使用CASY进行细胞毒性测定能够快速、简单且可靠地评估抗癌药物疗法及其后续癌细胞系的化疗敏感性。CASY的一个主要优势是通过简单的细胞系特异性设置可以屏蔽分析中的碎片和死细胞，仅考虑活细胞及其聚集体。然而，由于记录了细胞的完整状态，所以死细胞和细胞碎片的数据在任何时候都是可用的。1.体外生长曲线图1：ECF对于胃癌细胞系(MKN-45和23132/87)与非恶性细胞系(NHDF和23132/87)的生长抑制是剂量依赖型的,抑制效果不显著2.使用多种组合化疗方案处理细胞14天后的增长率图2：单独使用D-D来作用于胃癌细胞系MKN-45和23132/87，其抑制效果不显著，而且对于非胃癌细胞系的NHDF和CCL-241作用不抑制反而促进。EC D-D对于胃癌细胞系MKN-45的抑制效果显著，对于非胃癌细胞系的抑制效果不显著3.MKN45的细胞计数图3：Day 0，实验开始。存活率=95.6%，活细胞浓度为2.7×106/mL。图解：LML:活细胞数/mL；VIA:%存活率；AGG:聚集；CL，CR：评估游标；NL，NR：标准化游标图4：Day 7,PBS对照组。活率=90.3%；活细胞浓度为7.6×106 /mL图5：MKN45细胞计数的CASY截图。Day 7，0.86 μmol/L D-D。活率=92.4%；活细胞浓度9.5×105 /mL图6：使用EC D-D处理后的MKN-45细胞的细胞增长曲线。red: E=0,37; C=0,45; D-D=0,41 μmol/Lpink: E=0,15; C=0,18; D-D=0,16 μmol/Lblue: E=0,075;C=0,09; D-D=0,082 μmol/Lyellow: PBS control结果评估新药物组合。大体上，通过CASY分析能够监控细胞系对联合药物方案的类型和数量的特异性化学敏感性。一种新的双联药物（D-D）（替代标准ECF组合中的5-FU）已显示出对恶性胃腺癌细胞系的效果比对非恶性细胞系的效果更好，有望成为胃腺癌治疗的前沿替代方案。结论CASY细胞计数和细胞毒性分析显示，一种新的EC D-D抗癌药物疗法有望成为胃腺癌治疗的前景替代方案，取代了标准的ECF三联药物组合。通过CASY分析，我们揭示了胃癌和非恶性细胞系对各种药物组合的敏感性差异，从而评估了药物混合物的抗癌潜力。启示CASY分析的高度特异性化学敏感性为研究人员提供了深入了解药物组合对不同细胞系影响的机会，为精准治疗的发展贡献力量。参考文献✦1. Weinreich J, Archid R, Bajaeifer K, Hack A, Königsrainer A, Schott TC.Growth and Chemosensitivity of Gastric Adenocarcinoma and Non-Malignant Cell Lines in Response to Novel Anti-Cancer Drug Combinations. Chemotherapy. 2014; 60(5-6):346-352.NCBI中的文献索引号：DOI: 10.1159/000438943.

加拿大Affinité Instruments是一家专注于分子互作研究的公司，基于无标记、高灵敏、表面等离子共振技术（SRP技术）开发了性价比极高的个人型分子互作仪，旨在让每位科研工作者和实验室都能够顺利的把分子互作相关实验开展起来，助力生物科学发展。现在，Affinité Instruments对个人型SPR分子互作仪系列产品（P4SPR 2.0、P4PRO & Affipump、P4PRO +）进行了全面升级，新一代SPR设备不仅兼具强大的分子互作检测和分析的能力，而且极具性价比，是百万元以内即可拥有的四通道分子互作仪。特点* 基于SPR原理，实时、无标记、检测相互作用* 搭配先进的微流控技术，实现高性能和高准确性* 10分钟内完成1个样本测试* 一组实验可获得结合特异性、亲和力、动力学等数据* 四通道检测，结合参照通道信号，可进行背景扣除，获得可信数据* 仪器稳定，操作简单，维护简便* 采用注射泵组件，控制精准，信号稳定* 仪器性价比高，单个实验室即可负担* AfficoatTM芯片可减少SPR试验中的非特异性结合* 芯片耗材成本低，大大降低仪器运行成本应用兼容目标小分子、寡核苷酸、核酸适配体、核酸、肽、蛋白质、抗原、抗体、多糖、细胞裂解液、血清……软件①　仪器搭配ezControl软件，可以极大简化SPR实验所产生数据的分析工作；②　通过直观的界面，5分钟即可完成设置，并且进行实时数据处理；③　记录跟踪，带有时间戳详细信息，确保准确性；④　可在方法开发过程中快速决策；⑤　KD测定和浓度分析；⑥　CSV导出，可灵活处理数据，包括TraceDrawer；⑦　灵活的仪器控制，适用于各种实验。传感器我们还提供各种传感器，其量身定制的表面化学成分，以适应各种应用。无论您是要深入研究蛋白质之间的相互作用、研究小分子结合还是探索核酸之间的相互作用，我们的传感器都能满足您的特定研究需求。 传感器表面化学金硫醇化配体羧基利用EDC/NHS偶联在配体上形成胺基NTA组氨酸标记配体链霉亲和素生物素标记配体Afficoat使用EDC/NHS偶联的胺基配体玻璃定制金属表面 普瑞麦迪（北京）实验室技术有限公司作为加拿大Affinité Instruments在中国的总代理，欢迎各位专家老师前来咨询了解个人型SPR分子互作仪系列产品。我们拥有专业的技术服务团队，可以随时交流分子互作实验设计与方案的选择。同时，我们还提供完善的亲和力检测服务，收到样品最快不到一周即可出具SPR分析结果。我们不仅有先进的仪器，还拥有有专业的技术团队，全面助力您的分子互作研究。

未来，个性化医疗将成为医学发展的主旋律，而实现单个细胞水平的精准分析将是这一趋势的关键。一种名为TIGR组织研磨分离仪的技术正在引领这场变革。这项创新技术不仅能够快速、高效地从肿瘤组织中提取细胞，还能够保持细胞的完整性和纯度，为个性化医疗开启了新的篇章。TIGR组织研磨分离仪核心部件是该系统的重要组成部分图1：TIGR组织研磨分离仪的核心单元。(a) 组织研磨器的核心单元利用装有转动磨牙的转子和定子插件。(b) 制造的磨牙插件图片。顺时针是剪切（剪切）过程，逆时针是研磨/摩擦（研磨）运动。由于鳍状几何形状，通过改变旋转方向，可以施加不同的力，从而可以处理各种各样的组织结构。(c) 示意图显示了磨牙之间空间的尺寸。TIGR组织研磨分离仪的工作流程图2展示了组织解离工作流程和台式仪器。(a) 转子插件位于离心管的盖子中。(b) 组织样品放置在转子磨牙之间的自由空间中。(c) 磨牙单元的定子插件插入标准尼龙细胞过滤器中。(d)在接下来的准备步骤中，将离心管放在盖子上并旋紧。(e) 通过形状匹配连接，研磨管和台式仪器相结合。齿轮电机旋转与转子插件连接的轴。旋转方向可以设置为顺时针或逆时针。表格1：TIGR组织研磨分离仪的技术参数的概览技术参数通量4管并行运行细胞筛（尼龙）40、70、100μm网格大小一次性平台标准50 mL的锥形离心管载量/管50-300 mg组织加500 μL缓冲液电机额定功率2.5 W扭矩0.6 Nm研磨速度30~100 rpm旋转模式剪切/研磨和两者组合作为概念验证，我们使用新鲜切除的小鼠肝脏样本验证了组织研磨器的性能。与传统的gentleMACS®标准酶处理相比，TIGR组织研磨分离仪展现了非酶解离的优势。在进行了细胞计数、细胞存活率和解离等级的测定后，结果显示组织研磨分离仪在较短的处理时间内，大部分情况下能够达到或超过活细胞数量和产量。尽管酶预处理在组织样本的解离等级上表现出一定优势，但明显可见，酶处理导致了组织结构的松弛，使得解离更加完全。在这项研究中，组织研磨分离仪的解离时间不到两分钟，而gentleMACS®方法需要约60分钟，因此可以显著节省时间，尤其是考虑到多个样本的并行处理。这些结果表明，组织研磨分离仪在解离实验中具有高效性和可行性，为未来个性化医疗领域提供了一种快速而有效的肿瘤样本处理方法。图3：TIGR组织研磨分离仪和gentleMACS®分离肝组织后的细胞产量和分离等级。A) 与GM-、GM+和TG相比，肝组织分离后的细胞产量。B) 从剩余组织中量化的分离等级，对比了GM-、GM+和TG。传统的组织解离方法存在诸多限制，而无酶机械分离技术通过一种快速、可重复的方式，将细胞从组织基质中温和地移除，大大提高了分析的效率和准确性。这一技术不仅适用于肿瘤细胞等纯净的单个细胞群体，还可以应用于多种组织类型，为未来的个性化医学方法提供了广阔的应用前景。随着技术的不断进步和优化，无酶机械分离技术将成为个性化诊断领域的重要突破口。通过结合高通量的分析技术，我们可以实现对肿瘤的异质性等复杂问题的深入研究，为个性化治疗提供更精准的指导。让我们共同期待无酶机械分离技术为个性化医疗带来的变革！

降低50% iPSC细胞培养成本,干细胞研究与细胞治疗的新金标准解决方案 干细胞生产的巨大挑战iPSC培养的最大障碍之一是需要每天更换培养基，这主要是由成纤维细胞生长因子-2 (FGF-2)的不稳定性驱动的，FGF-2是维持多能性的关键成分。FGF-2容易发生蛋白水解降解，从而影响其调节生物过程的有效性。而FGF-2的半衰期很短(大约10小时)造成维持多能性信号提示的困难，影响细胞健康和同质性。无动物标记的热稳定性重组蛋白细胞因子——FGF-2 STAB®Core Biogenesis的FGF-2 STAB®是现有唯一的植物源性版本，可实现无内毒素表达系统，并产生无动物标记的热稳定性重组蛋白细胞因子。这些独特的优势为iPSCs培养提供了一种稳定、经济的替代方案。研究的结果和在细胞治疗应用的干细胞生产结果表明，FGF-2 STAB®可以作为先进干细胞研究的新金标准解决方案，以及未来基于细胞的药物研究的新原料。产品优势* 100%生物活性保存* 半衰期延长10倍——37℃培养条件下FGF-2稳定活性表达长达20天以上* 降低50%的细胞培养成本100%生物活性保存使用FGF-2 STAB®，FGF-2的全部生物活性以稳定的蛋白质构象保存。与野生型FGF-2相比，细胞应答改善。半衰期延长10倍——37℃培养条件下FGF-2稳定活性表达长达20天以上与野生型FGF-2相比，新的9个氨基酸取代提高了FGF-2 STAB®的热稳定性和半衰期。FGF-2 STAB®提供稳定的生长因子持续暴露于细胞，为开发人员提供更精简的细胞培养计划，并最终在最终干细胞群体中获得更均匀的所需表型。条形图显示了在StemFit中培养的(A) iPSCs，在浓度为50ng/mL和100ng/mL的情况下，(A)重组FGF-2 STAB®(Core Biogenesis)或重组FGF-2 STAB®(Core Biogenesis)中，在5天内的平均扩增率，遵循每天更换培养基的饲喂方案(人重组FGF-2和FGF2 STAB®)，每隔一天更换培养基(EOD)的FGF-2 STAB®，并保持指定的浓度。降低50%的细胞培养成本FGF-2 STAB®蛋白质稳定性的提高导致所需培养基量和喂养次数的显著减少，节省了劳动力成本并避免了不方便的周末喂养。更多产品

化学引诱受体及其同源配体是破坏肿瘤进展级联反应的有前途的药物靶点。大多数化学引诱受体是传统的七次跨膜（7TM）G偶联蛋白受体（GPCRs）1,2。ACKRs（非典型趋化因子受体）与传统的GPCR不同，它不激活引导细胞迁移所需的依赖于 G 蛋白的信号传导3,4。相反，它们通过充当清道夫受体、促进趋化因子内吞作用或产生趋化因子梯度来调节趋化因子的可用性。C-C基序趋化因子受体样2(CCRL2)是一种与 ACKR 家族相关的非信号转导7TM 受体5。然而，CCRL2与ACKRs不同，因为它缺乏配体清除功能，也缺乏与经典趋化因子结合确认的能力。CCRL2 是一种非信号转导受体，它能与趋化配体结合，使白细胞被招募到炎症部位。然而，人们对直接与 CCRL2 结合的配体类型和功能影响还缺乏了解。最近在表面等离子体共振领域技术的进步促进了在自然表达条件下配体-受体相互作用的表征。表面等离子体共振（SPR）显微镜结合了SPR和明场显微镜（图1A）来检测未标记分子与细胞表面目标的结合。6-8图 1 (A)SPRM 仪器的示意图，描绘了 SPR 和明场输入、细胞室和样品流。9（B） Chemerin 与跨膜 CCRL2 受体结合。SPRM 测量整个细胞表面分子相互作用的动力学，对于确定配体与细胞表面表达受体的结合速率（ka）、解离速率（kd）和结合亲和力（KD）至关重要。利用BI的ImageSPR™ 分析软件，SPRM 传感器表面被均匀地划分为数百个兴趣区域（ROI）。在本研究中，使用BI SPRm200仪器证实，在亲代 HEK 293T 细胞和变异型 HEK-huCCRL2 细胞上9，一种非趋化因子趋化蛋白--Chemerin与CCRL2 结合（图 1B）。当Chemerin暴露于HEK-huCCRL2 细胞时，在细胞上观察到大量的ROI（图 2A），但当Chemerin暴露于亲代HEK细胞时，只有少量的ROI出现（图 2B），这表明Chemerin能特异性地结合表达CCRL2 的细胞。采用 1:1 结合模型评估Chemerin与表达 HEK-huCCRL2 细胞结合的动力学数据，显示计算的结合速率、解离速率和结合亲和力（图 2C、D 和 E）直方图趋于稳健高斯分布，其中检测到Chemerin在亲代HEK细胞中的结合率极低，KD 值无法计算。本研究报告了实验中Chemerin与HEK-huCCRL2细胞结合的平均值，包括结合速率（ka = 3.11E+05 M-1 s -1 ）、解离速率（kd = 1.16E-03 s -1 ）和结合亲和力（KD = 5.49 nM）。重要的是，通过 SPRM 测定的Chemerin与 huCCRL2 结合的平均 KD 与之前报道的通过放射性标记的Chemerin与过表达 huCCRL210 的细胞结合而测定的结合亲和力（2.35 nM）相当10。图 2 （A）Chemerin与HEK-huCCRL2细胞结合或（B）Chemerin与HEK细胞结合的SPRM200明场图像；方格表示检测到结合事件的ROI，N=3。根据Chemerin与HEK-huCCRL2细胞结合的ROI传感器图的动力学和数据，产生（C）结合率（ka）、（D）解离率（kd）和（E）结合亲和力（kd）的代表性直方图分布曲线。为了研究生物素标记是否会干扰配体与 HEK-huCCLR2 细胞的结合，使用 SPRm200 仪器评估了一部分无标记的 C-C 趋化因子。当 CCL2 和 CCL5 等无标记趋化因子与 HEK-huCCRL2 细胞孵育时，几乎没有出现 ROI，因此无法计算 KD 值。然而，Biotin-Chemerin与 HEK-huCCRL2 细胞结合的动力学与无标记的Chemerin一致，如表 1 所示。生物素化可以发生在任何活性伯胺上，SPRM 评估Chemerin与 HEKhuCCRL2 细胞结合的结果显示，生物素化对结合的影响可以忽略不计。表 1 Chemerin与 HEK-huCCRL2 的结合概况通过 SPRM，可以对一种以前未报道过的 C-C 趋化因子进行直接结合和动力学分析。研究人员测定了 Chemerin 与 HEK 293T 亲本细胞以及 HEKhuCCRL2 变体细胞上的 CCRL2 的结合动力学。CCRL2 不激活细胞内的 G 蛋白，而是将配体集中在质膜上11 。该受体的下游信号传导机制尚不清楚，因此鉴定能中和 CCRL2 与配体结合的工具是研究其功能的主要途径。为此，我们使用 SPRM 作为一种确证抗体结合的方法，研究两种抗 huCCRL2 单克隆抗体（K097F7 和 152254）与 HEK-huCCRL2 细胞和亲代 HEK 293T 细胞的结合动力学。在 HEK-huCCRL2 细胞上检测到了大量的 ROI（图 3A 和 3B），但在亲代 HEK 细胞上没有检测到。图 3 （A）K097F7与HEK-huCCRL2细胞结合，（B）152254与HEK-huccRL2细胞结合和（C）同型对照抗体与HEK-huCCRL1细胞结合的SPRM200明场图像；方格表示检测到抗体结合事件的ROI。表 2 与 HEK-huCCRL2 结合的中和抗体概况K097F7 和 152254 与 HEK-huCCRL2 细胞的结合亲和力（KD）分别为 2.48 nM 和 4.75 nM（表 2），重要的是，K097F7 和 152254 与亲代 HEK 细胞的最小结合导致 KD 值无法计算。此外，观察到同型对照抗体与 HEK-huCCRL2 细胞的结合极少（图 3C），这表明 K097F7 和 152254 与 CCRL2 是特异性结合。SPRm200系统将光学显微镜与分子互作技术相结合，专为观察和测量细胞膜表面蛋白和其他目标分子结合亲和力及动力学常数设计，为分子相互作用的研究开辟了新的方法。(1)SPRm200系统无需对观察目标进行标记，可以实时定量的进行检测；(2)可同时可视化观察细胞结构和局部结合活性；(3)无需提取细胞膜蛋白，即可在正常活细胞状态下观察和测量药物和膜蛋白的实时相互作用；(4)探测器测量每个像素点的SPR响应，并将其映射到SPR图像中，在每个像素处，记录一个传感图，从而提供更多的局部信息。SPRM技术使在自然条件下研究细胞表面膜蛋白与其他目标分子结合和相互作用成为可能。SPRm200细胞原位分子互作动态分析系统凭借其卓越的灵敏度和稳定性，助力科学研究新发现，推动药物开发新高度。 参考文献1) Zlotnik A, Yoshie O. Chemokines: a new classification system and their role in immunity. Immunity.2000;12(2):121–7. Pmid:107146782) Zlotnik A, Yoshie O. The chemokine superfamily revisited. Immunity. 2012;36(5):705–16. Pmid:226334583) Nibbs RJB, Graham GJ. Immune regulation by atypical chemokine receptors. Nat Rev Immunol.2013;13(11):815–29. Pmid:243197794) Bonecchi R, Graham GJ. Atypical chemokine receptors and their roles in the resolution of the inflammatory response. Front Immunol. 2016;7:224. Pmid:273756225) Schioppa T, Sozio F, Barbazza I, Scutera S, Bosisio D, Sozzani S, et al. Molecular basis for CCRL2 regulation of leukocyte migration. Front Cell Dev Biol. 2020;8:615031. Pmid:333631776) Wang W, Yang Y, Wang S, Nagaraj VJ, Liu Q, Wu J, et al. Label-free measuring and mapping of binding kinetics of membrane proteins in single living cells. Nat Chem. 2012;4(10):846–53. Pmid:230009997) Wang W, Yin L, Gonzalez-Malerva L, Wang S, Yu X, Eaton S, et al. In situ drug-receptor binding kinetics in single cells: a quantitative label-free study of anti-tumor drug resistance. Sci Rep. 2014;4:6609. Pmid:253120298) Zhang F, Wang S, Yin L, Yang Y, Guan Y, Wang W, et al. Quantification of epidermal growth factor receptor expression level and binding kinetics on cell surfaces by surface plasmon resonance imaging. Anal Chem. 2015;87(19):9960–5. Pmid:26368339) Su, Z., Brooks, J., Pelker, J., Andreyeva, T., Sobon, H., Gifford, R., Powers, M., Wang, J., Dower, C., Hegen, M. and Messing, D., 2023. Studies with neutralizing antibodies suggest CXCL8-mediated neutrophil activation is independent of CC motif chemokine receptor-like 2 (CCRL2) ligand binding function. PloS one, 18(1), p.e0280590.10) De Henau O, Degroot GN, Imbault V, Robert V, De Poorter C, McHeik S, et al. Signaling properties of chemerin receptors CMKLR1, GPR1 and CCRL2. PLOS One. 2016;11(10):e0164179. pmid:27716822.11) Del Prete A, Bonecchi R, Vecchi A, Mantovani A, Sozzani S. CCRL2, a fringe member of the atypical chemoattractant receptor family. Eur J Immunol. 2013;43(6):1418–22. pmid:23580473

在药物筛选和发现中的肽纯化实验室必须使用高质量的产物才能在多肽药物的早期研发中取得成功。然而，合成后获得的多肽纯度往往不够，因此，多肽纯化成为多肽实验室工作流程中的必要步骤，通过多肽纯化提高产物的纯度。但是在处理多肽或多肽文库时，这是一项极具挑战性的任务。本文将讨论纯化多肽和构建多肽文库在药物发现和筛选中的重要性。什么是合成肽肽是长度超过两个氨基酸的短蛋白质片段。肽在各种研究应用和药物开发过程中，尤其是在生物制药行业中至关重要。目前市场上已有 100 多种基于多肽的药物或诊断方法获得批准。1多肽可以通过化学方法合成。主要的方法是固相肽合成（SPPS），通过一个氨基酸的羰基碳与另一个氨基酸的氮原子之间形成的酰胺键，在形式上失去水分子的情况下，将相应的氨基酸依次偶联。然而，合成过程会产生含有截断、缺失、溶剂、盐和其他有机碎屑等杂质的粗肽。随着多肽长度的增加，截短和缺失会成为更重要的杂质来源。例如，如果 30 个单链肽的耦合效率为 99%，则会形成超过 25% 的截断。早期筛查中的多肽纯化的5个必要性01分析可靠性截断肽和其他副产品（溶剂、盐、有机残留物）等杂质会干扰测试系统，导致结果偏差，从而难以得出有意义的结论。2  肽纯化可消除这些污染物，确保更高水平的可靠性。02实验的高精确度高准确度在药物发现和筛选过程中，精确度对于理解多肽与靶分子的相互作用及其在各种生物系统中的作用至关重要。因此，研究人员必须使用能准确代表他们打算研究的序列的材料。3  03不同实验之间的一致性保持研究的一致性对于可重复性和比较分析至关重要。具有明确纯度水平的多肽可确保您的实验以统一的序列进行，从而减少批间数据的变异系数。这种一致性简化了在不同研究项目和实验室之间复制实验和比较结果的过程，使您的工作更加高效可靠。404长期成本效益虽然纯化过程可能会给您的研究增加一些初始步骤，但从长远来看，它可以为您节省时间和资源。纯化多肽可降低重复实验或因结果不准确而进行代价高昂的调整的风险。在纯化方面的投资最终可以确保您的研究高效进行。05符合期刊标准研究人员往往面临严格的发表要求。同行评审期刊需要高质量的多肽来满足其质量标准。通过在研究中采用纯化多肽，您可以确保数据的完整性，并满足这些合规要求。这将提高您研究的可信度，并确保其符合行业最佳实践。一种新的多肽纯化技术，无需HPLCPurePep EasyClean (PEC) 技术目前是一种全新的可以高效进行多肽纯化的技术，利用这项技术无需HPLC即可获得平均纯度高达85%的多肽，并且从研究到生产，可以适应各种规模下进行快速、持续的多肽纯化。该技术的核心是使用了一种新开发的可裂解连接分子（PEC Linker RC+）以及修饰琼脂糖珠（Agarose100），基于捕捉和释放（Catch-and-release）的方法来进行多肽纯化。它打破了传统多肽生产的障碍，基于化学选择性分离的方法，可以轻松分离杂质，还可以进行平行纯化，一次并行纯化甚至96个多肽。并且该技术相较于传统的色谱法纯化多肽，它可以有效纯化困难的肽（长肽、聚集肽和疏水性肽），有机溶剂的消耗也极大减少。值得一提的是，PEC纯化技术还可以和多肽合成仪联用，无需购置额外的多肽纯化设备即可在一台仪器上实现多肽高效合成与纯化。 结语在竞争激烈、要求苛刻的多肽筛选和药物发现领域，纯化多肽的重要性怎么强调都不为过。足够的多肽纯度可确保准确性和一致性，使科学家和研究人员能够放心地进行实验。从长远来看，使用纯化多肽不仅能保证数据的完整性，还能节省时间和资源。这就是为什么选择合适的多肽合成和纯化解决方案能使您的研究工作与众不同。让纯化多肽成为您药物发现和筛选工作的关键，从而达到新的高度。您的突破性发现之路将始于纯化多肽的纯度和精度。参考文献1. Vera D'Aloisio et al., Drug Discov. Today 2021, 26, 1409-14192. J. W. de Beukelaar et al., Rapid Commun. Mass Spectrom. 2007, 21, 1282-12883. J. R. Currier et al., Clin. Vaccine Immunol. 2008, 15, 267-2764. A. N. Hofnagel et al., Clin Chem. 2016, 62, 48-69

Chorus助力绿色多肽合成新方向直到现在，DMF一直被认为是固相多肽合成（SPPS）的金标准。但是因为其毒性强，危险系数高，被列为CMR剂（致癌、致突变或对生殖有毒的溶剂）。在2021年11月22日，欧盟在其官方公报上发布法规(EU) 2021/2030，增加第76项关于N,N-二甲基甲酰胺（简称DMF或DMFA）的限制条款，正式将DMF纳入REACH法规限制清单。1  规定从2023年12月12日起，该物质本身及含有该物质浓度≥0.3% 的物质或混合物不得投放市场。正是因为这样，所以亟需找到一种合适的可以替代DMF的方案。世界范围内的多肽相关研究课题组对多种替代性强、更加环保的溶剂或混合物进行了广泛研究，并且对其在SPPS中的潜力进行了评估。2-5结果发现，有两种替代品具有非常好的应用前景，分别是N-甲基-2-吡咯烷酮（NBP）和二甲基亚砜（DMSO）与乙酸乙酯（EtOAc）的混合物。3-5 下面，就让我们一起来看一下它们在SPPS中的实际应用情况吧。我们在寻找替代DMF的溶液时，通常溶剂的极性和粘度是需要考虑的关键因素。2DMSO/EtOAc混合物的危险性比较小，并且可以通过改变各组分的比例来调整溶剂的极性，以获得最佳的反应条件，例如Fmoc去除和偶联。不过，使用二元混合物也会带来一定的挑战，例如在SPPS过程中，针对不同反应需要使用不同的溶剂比例进行溶剂输送。另一种替代品NBP，这是一种极性钝化绿色溶剂，在SPPS中具有良好的性能。不过，NBP的粘度较高，难以准确的输送氨基酸和试剂。利用自带的专利矩阵式液体传输技术（PurePep Pathway）和感应加热功能，PurePep Chorus多肽合成仪可以精确可靠地处理各种溶剂并且自由的调整合适的温度。因此，我们利用它研究了三种不同溶剂系统（DMF、NBP和DMSO/EtOAc）在两种温度下（室温和感应加热到50℃）对三种模型多肽的粗产率和纯度的影响（表1）。方法合成合成三种不同的多肽，分别是Poly-Ala (H-A10K-NH2)、酰基载体蛋白(65-74, ACP, H-VQAAIDYING-OH) 和促性腺激素释放激素(pyroGlu1→Gly, G-LHRH, H-GHWSYGLRPG-NH2)6,7三种肽在常温和高温（50℃）条件下，使用不同的偶联剂二异丙基碳二亚胺/氰基羟基亚胺乙酸乙酯（DIC/Oxyma）和 O-(6-氯苯并三唑-1-基)-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸盐/N-甲基吗啉（HCTU/NMM），以 0. 1 毫摩尔合成规模在三种不同溶剂（DMF、NBP 和 DMSO/EtOAc）中进行合成。以 0.1 mmol 的比例在 Fmoc-Lys(Boc)-Wang树脂 上合成了 PolyAla，在 Fmoc-Gly-Wang 树脂上合成了 ACP，在 Rink Amide MBHA 树脂上合成了 G-LHRH。在 DIC/Oxyma 偶联过程中8使用 0.3 M 氨基酸（6 个当量）、0.4 M Oxyma（8 个当量）和 0.3 M（DIC，6 个当量），持续 2 x 15 分钟。在 HCTU/NMM 反应体系中，使用 0.3 M 氨基酸（6 当量）、0.3 M HCTU（6 当量）和 0.6 M NMM（12 当量）反应 2 x 1 分钟。Fmoc脱保护使用20% PIP在室温或感应加热到50°C下进行2 x 2分钟。无论使用哪种合成溶剂，用TFA:TIS：水（95:2.5:2.5）在室温下从树脂中切割肽2小时，然后在冷 Et2O 中沉淀，离心并倾倒Et2O。 分析使用配备 SPD-M20A 检测器的 Shimadzu LCMS-2020 分析粗肽，色谱柱为 ACE Excel 3 C18-PFP，100 x 3.0 mm。流动相为水（A）和含 0.1% 反式脂肪酸的 MeCN（B）混合物。将 ACP 和 G-LHRH 溶于水/乙腈（1:1）中，在 5 分钟内以 5 70% B 的梯度进行分析。PolyAla 肽溶解在纯水中，用 0-60%B 的梯度在 9 分钟内进行分析，流速均为 1 mL/min。结果和讨论我们的研究重点是三种肽，它们在合成方面存在独特的挑战。第一种是ACP，一种活性酰基载体蛋白片段，由于在合成过程中容易形成内部二级结构，因此被公认为SPPS的评判标准。6,7 第二种肽是Poly Ala，以其自组装特性而闻名。最后，我们研究了G-LHRH，这是一种因其与促黄体生成激素释放激素（LHRH）的关系而备受关注的多肽。7这些肽的选择有利于使用不同的合成溶剂对SPPS中的各种肽的合成过程进行全面研究。在改变溶剂系统和温度之后，我们还测试了两种不同的耦合条件：基于碳二亚胺的金标准耦合系统——DIC/Oxyma与安全高效的试剂—— HCTU/NMM。8,9 在DMF中合成作为参考，使用 DIC/Oxyma 或 HCTU/NMM 偶联试剂在 DMF 中合成 ACP、G-LHRH 和 Poly-Ala，分别在常温和感应加热到50°C。表 2 中显示的结果表明，在50°C下进行DIC/Oxyma偶联比在常温条件下产生的肽纯度更高，这表明温度升高增强了偶联反应并减少了副产物的形成。HCTU/NMM 偶联可实现极快的偶联（2 x 1 分钟）和 Fmoc 去保护（2 x 2 分钟）步骤，从而快速合成所需的多肽。在NBP中合成NBP是一种沸点和闪点都很高的双极性非质子溶剂，经常被用作微波辅助多肽合成的溶剂。NBP具有无生产毒性的优点，可获得与DMF相媲美纯度的粗肽。不过，NBP也有缺点，那就是与DMF（25°C 时为 0.8 cP）相比，NBP 的粘度较高（25°C 时为 4.0 cP），这给自动多肽合成仪中试剂的准确传输带来了挑战。PurePep Chorus多肽合成仪包括一个溶剂校准选项，这对于克服NBP的高粘度带来的输送难题至关重要。通过溶剂校准，用户可以根据需要测量和调整输送到反应容器 (RV) 的液体量。校准后，如表 1 所示，在NBP中于恒温室进行合成时，所有三种肽都顺利进行，没有出现任何错误。4  然而，由于NBP（高粘度）中的偶联率较低，导致肽的粗纯度略低（27.4% - 52.4%，表2）。在DMSO/EtOAc中合成最近的研究表明，DMSO/EtOAc 等非危险性二元溶剂混合物的极性和粘度曲线与DMF相似，可以成为 SPPS 中替代 DMF 的一种可行且危害较小的溶剂。2,3  由于极性对 SPPS 中粗纯度的结果起着至关重要的作用，因此本研究调整了 DMSO/EtOAc 的比例。氨基酸储备溶液（0.3M）以中低极性（DMSO/EtOAc 4:6）配制，DIC溶于EtOAc。另一方面，FMOC的去保护作用是在极性相对较高的溶剂（DMSO/EtOAc 6:4）中进行的。纯 EtOAc 用作封端溶液，后循环洗涤使用DMSO/EtOAc 2:8，详见表3。与微波辅助多肽合成不同，Chorus多肽合成仪允许在 SPPS 合成过程中灵活使用各种二元溶剂系统。如表2所示，在DMSO/EtOAc 溶液中，所有三种肽的合成都在恒温条件下顺利进行，得到的粗肽纯度从68.8%到85.4%不等。在 50°C 进行合成时，平均粗纯度从77.9% 提高到82.4%。图1显示了在 DMF 和 DMSO/EtOAc 中分别获得的粗肽紫外色谱图，证明这两种溶剂系统之间具有良好的转移性。注：众所周知，二甲基亚砜（DMSO）会在 SPPS 过程中导致蛋氨酸残基氧化。然而，我们在氮气环境下使用 DMSO/EtOAc 混合物成功合成了淀粉样β肽，分析方法证实没有发生任何蛋氨酸氧化（数据未显示）。PurePep Chorus多肽合成仪的适用性溶液校准PurePep Chorus 多肽合成仪（图2）是一种功能强大的固相肽合成（SPPS）设备，可以轻松处理高粘度溶剂和溶剂混合物。该系统的溶剂校准选项可确保精确的溶剂输送，而不论其粘度或成分如何，这对SPPS的成功至关重要。比较所有三种溶剂中的SPPS，DMSO/EtOAc 在恒温条件下的粗纯度优于NBP和DMF。感应加热PurePep Chorus 多肽合成仪利用精确的感应加热和振荡功能，在不过热的情况下迅速达到所需的温度。利用这一特点，可以在50℃温度下使用DMSO/EtOAc低沸点二元混合物作为溶剂，进行高效的固相多肽合成 (SPPS)。提高温度可使三种溶剂的平均纯度更高。 结果一览*在PurePep Chorus多肽合成仪上使用NBP和DMSO/EtOAc代替危险的DMF进行多肽自动合成，可获得高质量的多肽*在PurePep Chorus多肽合成仪上切换到绿色溶剂的过程可以顺利而快速地完成*由于可以对二元溶剂混合物进行感应加热，因此可以在高温下使用DMSO/EtOAc*与DMF和NMP相比，DMSO/EtOAc 在恒温条件下显示出更高的粗纯度，而在50°C条件下显示出与DMF相似的纯度 参考文献[1] COMMISSION REGULATION (EU) 2021/2030 of 19 November 2021[2] V. Martin et al., Green Chem 2021, 23, p. 3295[3] S. Jadhav et al., Green Chem 2021, 23, p. 3312[4] J. Lopez et al., Org Process Res. Dev. 2018, 22, p. 494[5] A. Kumar et al., ChemSusChem 2020, 13, p. 5288[6] D.M. M. Jaradat et.al., Green Chem 2022, 24, p. 6360[7] V. Martin et.al., RSC Adv. 2020, 10, p. 42457[8] R. Subirós-Funosas et.al., Eur J Org Chem 2009, 21, p. 9394[9] C. Hood et.al., Am Biotechnol Lab 2008, 26, p. 22

介绍来自动物的肽毒素是离子通道的有效抑制剂，无论是作为治疗一系列疾病的药物还是作为药物研究的宝贵工具，都显示出巨大的前景。法国的一个研究小组已经探索了一种蝎子肽BeKm-1的荧光标记方法，这种肽可以抑制hERG离子通道。hERG离子通道与心脏活动有关，在开发新药时必须避免阻断它。研究小组的方法包括蛋白质-蛋白质对接研究，使他们能够识别肽链中适合标记的溶剂暴露残基。这使他们能够设计和测试保持天然肽的特异性和作用方式的类似物。肽毒素——药物先导化合物和药物研发工具的金矿来自陆地和海洋动物的肽毒素是研究离子通道在生理和病理条件下所起作用的宝贵工具。仅蝎子毒液就含有多达320种肽毒素，这些肽毒素作用于41种不同的离子通道(1)。几种毒素衍生的肽也已成为治疗糖尿病、高血压、慢性疼痛和其他疾病的药物，同时有数十种处于临床前开发或正在进行临床试验(2)。一个例子是FDA批准的多肽药物Prialt®或Ziconotide，这是一种合成的25个氨基酸的肽，发现于海蜗牛的毒液中，可以阻断N型电压门控钙离子通道。Ziconotide作为全身镇痛药，适用于鞘内吗啡不耐受或难治性慢性严重疼痛的患者(3)。成千上万的多肽仍有待研究，作为可能的药理工具或药物先导化合物(4)。设计毒素靶向hERG离子通道该领域的关键驱动因素是目标通道晶体结构的可用性和对毒素结合的研究，这为设计毒素类似物开辟了可能性。一个例子是hERG通道，它与EAG -1通道同属于EAG(ether-go-go)电压门控K+通道家族。编码hERG通道的基因KCNH2突变可导致长QT间期延长综合征(LQT)， LQT综合征涉及心室复极延长，可导致心脏骤停。LQT也可由阻断hERG的药物引起，包括抗生素、抗精神病药物和抗组胺药。这种相互作用是药物开发的主要挑战，必须在开发过程的早期进行研究。评估hERG的一个有力工具是以毒素肽BeKm-1 (IC50 =3.3 nM)形式存在的有效阻断剂，该毒素肽是从蝎子Buthus eupeus的毒液中分离出来的。法国Molsamcules Max Mousseron研究所、Pole d'expertise Biotechnology公司和Smartox Biotechnology公司合作设计了BeKm-1的荧光类似物，专门结合hERG通道，目的是开发能够保持正确结合和抑制该通道的荧光类似物(5)。支持残基选择的模型该团队开发了一个试验模型，使用四聚体hERG通道结构来预测BeKm-1与hERG外部部分的结合，以帮助识别肽毒素上暴露于溶剂中的残基，可用于连接化学基团。分子模拟研究表明，肽毒素的α-螺旋与hERG结合位点底部的疏水表面接触，并且N端 Arg-1和Arg-27的侧链在所有结合模式下都暴露于溶剂，因此决定选择这些残基进行化学标记。BeKm-1类似物的设计与合成该团队设计并合成了四种荧光BeKm-1类似物(图1)。BeKm-1的N端用于将连接物连接到三种类似物上:4-戊酸(+ 4个碳原子; linker 4)，6-叠氮己酸(+6个碳原子; linker 6)，或10-十一烷酸(+ 10个碳原子;linker 10)。所有这些连接子都兼容点击化学(linker 4和linker 10的炔功能，linker 6的叠氮化物功能)。第四个BeKm-1类似物是基于Arg-27的溶剂可及性，但由于Arg-27不参与hERG通道识别，残基被含有炔功能的点击化学兼容的Lys残基所取代。然后将带有额外间隔的Cy5染料基团连接到肽上。在连接子偶联到36-mer BeKm-1序列的N端之前，在Symphony®X全自动多肽合成仪上使用Fmoc固相化学逐步合成多肽链。在BeKm-1 Lys-27中，野生型L-Arg-27残基被L-Lys(pentynoyl)-OH取代。间隔物GS在C端包含左丙炔甘氨酸(Pra)，在侧链上具有炔基功能，Cy5在N端通过肽键偶联。所有多肽合成采用2-氯三甲基氯树脂。经过树脂裂解和脱保护，粗毒素类似物被折叠/氧化，并通过C18反相色谱(RP-HPLC)纯化。利用点击化学方法将Cy5 与连接子偶联得到Cy5- PEG3 -linker4- BeKm-1、Cy5- PEG5 -linker10- BeKm -1、Cy5-spacer- GS -linker6- BeKm -1和Cy5- PEG5 - BeKm -1 Lys275。所有产物均经反相高效液相色谱纯化。类似物保留特异性和作用方式，但亲和力降低利用非洲爪蟾卵母细胞中表达的hERG通道，对荧光标记BeKm-1的效果进行了评价。所有类似物均表现出剂量依赖性的外向电流抑制作用，但IC50值(60-80 nM)高于天然毒素肽(12 nM;图2). BeKm-1和四个类似物的Hill系数都接近于1，表明它们具有相同的作用模式。天然BeKm-1及其类似物对hERG的特异性可以通过对密切相关的K+通道hEAG1缺乏影响来证实，而对一种抗BeKm-1抑制的突变形式的hERG进行的实验显示，天然肽及其类似物对hERG的特异性相似。总的结论是，这些类似物具有与天然肽相同的特异性和作用方式，但对hERG离子通道的亲和力较低。一种开发设计毒素肽的有前景的方法这项研究说明了蛋白质-蛋白质对接工具如何用于修饰毒素肽的设计，这些修饰毒素肽可以用作离子通道成像或生物化学纯化/表征中的报告分子。这样的方法也可以提供有价值的工具来研究新的候选药物对离子通道的不良副作用，表征肽毒素的作用模式，并为药物开发开辟新的可能性。正如Smartox Biotechnology CSO和INSERM高级研究主任Michel De Waard博士所指出的那样，Symphony® X全自动多肽合成仪在这项工作中发挥了关键作用。“Symphony® X是我们在Smartox合成能力的宝贵补充。作为GPT产品的长期用户，我们不仅依赖于该仪器的坚固结构和可靠性能，而且在生产含非天然氨基酸和特殊化学物质的多肽时，该仪器提供了更大的灵活性。能够同时合成多种肽类似物是一个巨大的优势，使我们能够提高我们实验室多肽合成的效率和生产力。” 高通量多肽合成仪Symphony® X介绍Symphony® X是由美国多肽合成仪领军品牌PTI（GPT）推出的经典产品，仪器24通道设计，采用固相合成的原理，可以同时合成24条不同序列的多肽。仪器具有40个氨基酸位、8个试剂瓶位，为客户的研究、优化和生产提供最大的灵活性。*24个平行的独立反应通道，可同时在多个RV上运行不同的合成规模、多肽序列和反应条件，或在运行其他项目时按需使用*12个通道可作预活化*反应溶液的实时紫外线监测，而不是混合过程中的废液检测，以控制脱保护时间，并尽量减少多余的废物，以获得更好的纯度和产量*快速红外加热*Single ShotTM单次添加技术，几乎没有死体积 References1.  Scorpion toxin peptide action at the ion channel subunit level. Housley, D.M et al. 2017.Neuropharmacology 127, 46–78.2.  Pharmacokinetics of Toxin-Derived Peptide Drugs. Stepensky, D. Toxins 2018, 10, 483;doi:10.3390/toxins10110483.3.  Toxins in Drug Discovery and Pharmacology. Peigneur S & Tytgat J. Toxins (Basel). 2018 Mar 16;10(3). pii: E126. doi: 10.3390/toxins10030126.4.  de Souza, J.M., et al, 2018. Animal toxins as therapeutic tools to treat neurodegenerativediseases. Front. Pharmacol. 9, 145.5.  Fluorescent analogues of BeKm-1 with high and specific activity against the hERG channel.Vasseur, L et al Toxicon: X, Volume 2, April 2019, 100010

介绍肽核酸(PNA)是DNA和/或RNA的合成类似物，因为整个磷酸二酯键主链被拟肽主链取代，核酸碱基通过甲基羰基连接，具有几种独特的物理化学性质 (图1)。[1] PNAs是一种非离子核酸类似物，其中性聚酰胺骨架设计可最小化DNA寡核苷酸中经常观察到的非特异性静电效应。因此，短至12个碱基的序列即允许强的特异性杂交，具有改进的序列错配分辨率，比天然寡核苷酸对单点突变更敏感。此外，与天然肽或核酸相比，PNAs对核酸酶和蛋白酶的抗性更强。[2] PNAs能够通过与互补RNA结合抑制基因表达；在一定条件下，PNAs还可以通过链入侵机制与DNA双链序列结合促进基因表达，从而促进D-loop的形成和相应基因的表达。它们的高亲和力和特异性使它们不仅可以作为治疗药物，而且可以用于诊断。[3,4] PNAs的合成通常被认为是一个挑战，因为它们容易聚集，并且脱保护步骤通常伴随着副反应。[5]克服第一个问题的策略之一是在耦合步骤中使用大量过量的试剂；然而，合成所需的受N端保护的PNA单体相对昂贵，使得这种方法经济成本偏高。 在本应用笔记中，我们报告了使用全自动多肽合成仪PurePep®Chorus合成PNA的方法优化。以PNA1作为参考序列，评估不同的合成条件：偶联次数、PNA单体过量倍数、反应时间和温度。得到粗品纯度最高的PNA1的最佳条件，然后用于合成其他五个长度和嘌呤(腺嘌呤和鸟嘌呤)含量不同的序列(表1)。后者构成了合成的一个相关因素，因为它们的偶联通常由于偶联单体的位阻困难而导致低产率。 结果与讨论采用低负荷Rink Amide MBHA树脂(0.27 mmol.g-1)，采用Fmoc/tBu正交保护方案，采用PurePep®Chorus (Gyros Protein Technologies)以25 μmol的浓度规模合成PNA1。在室温下，用20%Pip/DMF进行2 × 5分钟的树脂脱保护。偶联步骤是在HCTU和NMM存在的情况下进行的，在所有的合成过程中，条件都有很大的不同(表2)。偶联步骤之后是一个封端步骤，在室温下，用10%的Acetic Anhydride/DMF溶液，反应5分钟。最终脱保护后，用TFA/ TIS/H2O(95:2.5:2.5)溶液在室温下裂解4小时。 通过分析表2可以看出，使用10倍当量的PNA单体可以得到非常好的粗纯度(81%);然而，这种合成方法经济成本高，因为Fmoc保护的PNA单体是昂贵的。通过将PNA的过量倍数降至4 倍当量，粗品纯度会降至72%。在保持低过量PNA单体的条件下，将反应温度提高到45℃，反应时间缩短到5 min，会进一步降低粗品纯度(61%)。由于反应时间5分钟可能太短而无法完成偶联，因此采用相同的条件，但反应时间增加到10分钟(实验D)，得到的粗纯度(82%)与实验A相似，实验A使用了两倍多的PNA单体。E方法采用双偶联的方法，对反应作进一步优化。使用相同数量的原料总当量和相同的时间，粗品纯度进一步提高了5%。 当确定了产生最佳粗纯度PNA1的耦合方案，使用相同的策略(方法E)合成其余序列。结果如表3所示。 合成的PNA序列的粗纯度在66-91%之间，可以认为是很好的粗品收率，特别是对于肽核酸。有趣的是，嘌呤含量较高的PNA序列具有较好的粗品纯度。 结论在本应用笔记中，我们描述了使用全自动多肽合成仪PurePep® Chorus合成PNA的耦合策略的优化。我们首先在室温下使用10倍当量的PNA单体进行1小时的偶联反应，该策略产生了非常好的粗品PNA(81%)。我们希望减少单体原料的过量倍数，同时尽量减少粗品纯度的损失，使这种反应在经济上更具可持续性和“绿色”。最终，我们开发了一种耦合策略，不仅减少了当量的数量和反应时间，而且产生了比原始策略更好的粗品PNA。通过在45℃下进行双耦合，每次2 倍当量，持续5分钟，我们能够将PNA1的粗纯度从81%提高到87%。最后，将该耦合策略应用于其他序列的合成。该方案应用于具有不同的长度和嘌呤含量的序列，产生了非常好的粗肽核酸。PurePep® Chorus被证明是这项工作的关键工具，因为在PurePep® Chorus全自动多肽合成仪上，从当量、重复次数、反应温度、耦合时间等合成程序均可以很容易地调整。 参考文献[1]   P. E. Nielsen, R. H. Berg, Sci 1991, 6, 254(5037), 1497-1500.[2]   A. Gupta et al., J Biotechnol 2017, 259, 148–159.[3]   P. E. Nielsen, Chem Biodivers 2010, 7(4), 786-804.[4]   C. Cordier et al., PLoS One 2014, 9, e104999.[5]   C. Li, ACS Cent Sci 2022, 8, 2, 205–213.[6]   D. Al Sulaiman et al., Angew Chem Int Ed 2017, 56, 5247–5251.[7]   “Low-Scale Automated Synthesis of a PNA-Peptide Conjugate on the Prelude®” (Application Note 12; D0029149/B).[8]   L. Goltermann et al., Front Microbiol 2019, 10, 1032.[9]   C. Avitabile et al., Tetrahedron Lett 2010, 51, 3716–3718

选择一台能满足您特定需求的多肽合成仪可能是一项艰巨的任务。以下是一些需要考虑的关键因素，以便能够合成高质量的多肽，并使其数量和规模与您的应用相匹配。01 产量和平行合成问题不同的应用和研究阶段需要不同数量的多肽。肽类药物发现项目可能需要筛选数百（甚至数千）种肽来寻找目标肽，然后利用构效关系(SAR)，最终确定一种可用于临床的候选药物。因此，成功的关键在于选择一种合成仪，它的反应容器要能提供与您的应用相匹配的并行合成水平1。 02 合成规模研发过程的不同阶段也需要不同数量的多肽。例如，随着多肽疗法从早期筛选到先导化合物的优化和临床前开发，所需数量也会增加。合适的多肽合成器可以满足当前的规模需求，甚至可以灵活地进行扩展升级以扩大规模，可以满足下一步的需求1。03 序列难度和多肽长度合成多肽可能会遇到许多基于序列的难题，例如某些残基组合导致的聚集或二级结构形成。要克服这些难题，就必须选择一款能帮助您优化合成的多肽合成仪。追求尽可能高的纯度包括优化许多参数，如反应时间、偶联试剂的选择、浓度、树脂类型、温度和结构破坏残基的位置2,3。多通道合成仪仪器是并行测试不同参数的理想选择。加热可加速化学反应并提高许多困难序列的纯度，这意味着具有可选加热功能的仪器可成为首选系统。例如，感应加热可以独立设置多个反应容器的温度，从而在寻找最佳合成条件时提供最大的灵活性 4,5。在合成高难度多肽时，尽量减少试错的一种方法是使用实时紫外监测，而不是像大多数市售仪器那样监测废液流。在反应溶液混合时对其进行监测的合成器可对反应时间进行过程控制，从而大大提高产量和纯度6。如果您合成的是长肽，那么最大限度地提高每个步骤的反应效率至关重要，因为即使是微小的低效和副反应也会导致纯度和产量的急剧下降。为了提高合成效率，一些仪器配备了流体系统，可确保反应步骤之间无死体积和无交叉污染，从而最大限度地减少固相多肽合成中的添加、删除和其他常见副反应。04 对特殊化学的需求您是要合成标准线性肽，还是要合成环肽、拟肽或其他拟肽化合物？您是否要使用 PNA、PMO 或寡聚物？环肽的合成通常需要使用特殊保护的氨基酸衍生物以及正交脱保护和环化反应步骤。合成拟肽和其他类型的拟肽物以及 PNA、寡聚物和寡聚拟物都需要独特的单体和试剂。制备这些类型的分子需要一台在合成方案和氨基酸瓶位置方面具有最大灵活性的仪器。这就是为什么有些仪器在合成过程中使用多达 40 种氨基酸或其他单体，而不是将天然氨基酸限制在 20 个位置的原因。用于这些特殊化学反应的许多单体和试剂可能非常昂贵或珍贵，因此有些合成仪还提供从任何氨基酸/单体瓶位进行"Single-Shot"的功能，以确保不造成任何浪费。在某些情况下，特殊步骤可能会使用对空气或湿气敏感的催化剂，因此必须在惰性氮气或氩气环境下的封闭系统中进行化学反应。虽然目前大多数 SPPS 都使用 Fmoc 保护氨基酸，但有些研究小组仍在使用 Boc 化学，而在这种环境下使用的仪器必须与浓三氟乙酸 (TFA) 溶液兼容。因此，关键还在于选择一款能灵活处理实验室所用特殊化学成分的多肽合成仪。05 寻找能提供经济高效、面向未来的解决方案的合作伙伴，以满足您的多肽合成需求对于大多数实验室和生产设施来说，购买一台多肽合成仪是一笔不小的开支，需要根据投资回报率来进行评估。该仪器预计可无忧运行多年，并能提高团队的生产率。理想情况下，仪器应具有满足当前和未来预期需求的灵活性。如果目前的预算有限，或者团队的需求发生了变化，应该可以升级或提供以旧换新的价值，以换取功能或容量更强的系统。自始至终，您的仪器合作伙伴都应为您提供支持，确保您能实现目标。自 20 世纪 80 年代以来，Gyros Protein Technologies公司一直是自动化 固相多肽合成（SPPS）领域的创新者，如今已成为世界领先的多肽合成仪器供应商。所有仪器均采用专有的 PurePepTM Pathway 专利矩阵式液体传输技术，以最大限度地提高纯度并提供行业领先的可靠性。为了满足不同用户的需求，Gyros Protein Technologies公司的合成仪提供不同级别的通量。例如，PurePep® Chorus一次可以合成1到6条多肽，而 Symphony® X 可以同时合成多达 24 条多肽。使用Symphony® X 采用快速方案合成的短肽甚至长肽肽库可在一夜之间制备完成，一周内可生产多达 120 条肽。PurePep® Chorus和 Symphony® X均可使用 IntellisynthTM 系统进行实时紫外监测，并提供加热选项。Gyros Protein Technologies公司的所有合成仪都可用于高效合成微摩尔级的多肽，根据序列的长度，合成量可从几毫克到 50 毫克左右不等。在这些系统中，每个反应容器的最大刻度约为 1 mmol，这意味着在PurePep® Chorus和 Symphony® X上合成中等长度的多肽，刻度分别超过 25 g和 100 g。如果您需要数百克的肽用于动物实验，那么 Sonata® + 的最大合成量可达 200 mmol左右。 普瑞麦迪（北京）实验室技术有限公司是Gyros Protein Technologies公司中国区总代理，普瑞麦迪的员工在多肽化学领域拥有数十年的经验，可提供高水平的客户服务和技术支持。普瑞麦迪一定是您值得信赖的多肽合成解决方案合作伙伴。 References1.    Cyf Ramos-Colón, Daniel Martinez, Andrew Kennedy and James Cain. High-throughput parallel synthesis optimization of Glucagon-like Peptide 1 receptor agonists. Poster presented at EPS 20182.    Cyf Ramos-Colón, Daniel Martinez, Andrew Kennedy and James Cain. Turning up the heat on peptide purity. Chemistry Today – vol. 36(4) July/August 20183.    Daniel Martinez, Cyf Ramos-Colón, and James P Cain. Efficient synthesis of 84-mer human parathyroid hormone for the study of osteoporosis and hypoparathyroidism. Poster presented at APS 2017.4.    James P. Cain, Daniel Martinez, and Cyf Ramos-Colón. Optimized crude purity of cyclic melanocortin receptor agonist Melanotan II using induction heating. Poster presented at German Peptide Symposium 20185.    Andrew Kennedy, Daniel Martinez, James Cain and Cyf Ramos-Colón. Fast solid phase peptide synthesis method development for the synthesis of complex peptides. Poster presented at German Peptide Symposium 20196.    Comparison of Alternative Deprotection Reagents to Piperidine for the Synthesis of a Poly-Alanine Peptide. Application Note #207.    Paramjit Arora and Ganesh Jedhe. Fully Automated Synthesis of Oxopiperazine Helix Mimics on Prelude® X. Application note #258.    Cyf Ramos-Colón, Daniel Martinez, and James P. Cain. Synthesis of [des-Arg7]-Dynorphin A peptoid analogue: faster methods using parallel automated synthesis and induction heat. Poster presented at Foldamers 20189.    James Cain, Daniel Martinez, Andrew Kennedy, and Cyf Ramos-Colón. Synthesis of therapeutic stapled peptides: Fully automated peptide cyclization via olefin metathesis, Poster presented at EPS 201810.  Cyf Ramos-Colón, Daniel Martinez, Andrew Kennedy, and James Cain. Parallel automated solid phase synthesis: efficient high-throughput optimization for therapeutic discovery and development of peptide nucleic acids. Poster presented at TIDES 2018

植物源重组蛋白系列产品 “生长因子控制细胞的维持、增殖和分化，是干细胞研究和再生医学的关键工具“内毒素污染的微小差异会对细胞培养产生巨大影响“无动物成分和无内毒素生长因子可提高细胞培养物的一致性，这是获得可重复结果和过渡到临床应用的关键 公司介绍 Core Biogenesis是一家来自法国的以细胞因子产品线闻名业内的厂家，致力于为干细胞研究和细胞制造工业提供下一代重组蛋白。其独家研发的植物来源细胞因子，打破了传统细胞因子局限性，以无动物、无抗生素、无内毒素、无致热性，无细菌、病毒和朊病毒等优势，迅速占领国际细胞因子市场。 植物系统-生产平台 CORE BIOGENSIS研发了专有的植物系统生产平台-亚麻荠，用来进行重组蛋白的表达和生产。其生产的多个物种(如人，牛)的重组生长因子和细胞因子，广泛应用于iPSCs, MSCs，免疫细胞等领域。 FGF-2 STAB®专为干细胞生产设计   FGF-2 STAB®   FGF-2 STAB®是一种  新型的热稳定生长因   子，可让您以更少的培养基更换更高效地生长FGF-2依赖性细胞培养物。 应用场景 干细胞培养（iPSCs、NSCs、MSC）类器官培养与生产细胞治疗生产 产品特点 “高纯度：均大于95%的纯度“不含动物成分与内毒素：无动物成分和无内毒素生长因子可提高细胞培养物的一致性，这是获得可重复结果和过渡到临床应用的关键。“半衰期长：较传统FGF-2生长因子半衰期延长10倍，长达20天“生物活性高且稳定：全部生物活性保持在稳定的蛋白质构象中“周末无需进行换液操作“降低至少50%培养成本 热稳定性=长达20天半衰期+稳定的蛋白质结果+生物活性 由于FGF-2 STAB中9个氨基酸，FGF-2 STAB®的热稳定性有所提高。这导致细胞培养条件下的半衰期延长至 37°C，与野生型相比，蛋白质稳定性提高了 10 倍。 50%成本降低+周末无需换液工作 研究人员和制造商在多能干细胞培养过程中必须保持非常严格的每日计划，以避免自发分化会降低培养质量。FGF-2 STAB®具有增加半衰期和蛋白质稳定性的性质，可将稳定的生长因子持续暴露于细胞中，从而为显影剂提供更简化的喂养计划，并最终在最终干细胞群中实现所需表型的更均匀的组成。实现FGF-2 STAB®蛋白稳定性的切实好处：显著减少补料细胞所需的培养基量，并减少补料次数，节省人工成本，避免不方便的周末补料。 产品规格  产品规格FGF-2 STAB®（RUO）FGF-2 STAB®（cGMP）身份分子量质谱分析生物 活性EC50系列EC50 +  - 国际单位 （IU）纯度SDS-PAGE 的 >95%UPLC>95-97%无菌无菌过滤 0.2 μm + 生物负荷测试无菌 USP 和欧洲药典 2.6.7内毒素低于检测水平的鲎试剂测定USP 欧洲药典2.6.14支原体不适用阴性宿主细胞DNA/蛋白质含量不适用附件测试自主批次不含动物成分不含不含批次间一致性不适用是的法规遵从性ISO9001ISO9001， USP ， 欧洲药典 5.2.12

多肽是一种具有生物活性的物质，和蛋白质雷同，由氨基酸通过酰胺键连接形成，在多种生物学过程中发挥调控。随着生物学研究的深入以及医药学的不断发展，多肽在基础研究、医学诊断、治疗药物以及组织材料等领域应用越来越广泛。近年来，细胞穿膜肽、肿瘤新抗原、多肽疫苗、减肥药、化妆品肽相关研究方兴未艾；医药大厂也都在加码布局多肽研发管线。多肽作为一个新的风口，热度逐年上升。现在正是投入多肽研究的好时机，使用我们最新的双通道全自动多肽合成仪PurePep® Chorus或带感应加热功能的双通道 PurePep® Chorus ，帮助您推进实验进度，提升多肽研究工作的效率。使用PTI多肽合成仪的优势发现新技术并将其应用于多肽合成工作流程的可能性可进一步升级为 4 或 6 通道仪器的模块化系统确保业务的连续性和合成能力的持续性 PurePep Chorus 的特点和优势 模块化多肽合成器，可在实验室内从 2 个反应通道升级到 4 或 6 个反应通道，轻松提高合成产量实时紫外线监测，可在多个反应通道同时进行配置，以监控和优化脱保护步骤独立感应加热，温度范围高达 90˚C，便于方法优化 PurePep® Pathway实现高纯度和高产率符合 21 CFR Part11的图形化直观软件平台，带有预编程方法和试剂配置计算器，可实现快速无障碍的工作流程“在明尼苏达大学化学系，我们使用 PTI公司的 PS3 多肽合成仪已经成功工作了多年。目前，我们需要用更新的系统来取代它，于是我们决定购买PTI公司的 PurePep® Chorus。说服我们做出这一决定的原因之一是它的模块化系统。对于每个预算有限的研究者来说，随时升级系统以提高合成能力是一个非常有意义的选择。内置的切割系统也非常吸引人，该系统可在对我们有用的范围内运行，与其他仪器相比也相对简单。鉴于很多人都在使用它，我们认为这是一个优势。与 PS3 相比， Chorus 的新软件和方法编辑是一项重大改进，同时合成两种肽的能力也是如此。” ——明尼苏达大学化学系 Mark Distefano 教授