多功能酶标仪 SpectraMax i3x

一种快速、高通量的病毒中和抗体检测方法

新冠病毒的出现导致了世界范围内的新冠大流行，为了理解病毒的发病机理并开发疫苗，亟需快速开发多种研究工具。检测病毒感染和疫苗接种后的免疫反应对新冠病毒的研究十分重要。由于中和抗体是免疫反应和疫苗效价的关键生物标志物，患者血清样本中的中和性抗体水平是用于监测有效性的重要参数。人体血清中和抗体的鉴定常使用传统方法例如蚀斑减少中和试验 (PRNT) 来检测。然而，该方法使用活的、具备感染性的病毒加入到靶细胞中，所以需要生物安全三级实验室以及耗时费力的细胞培养。数据结果的分析耗费时间并且不能自动化。此外，假病毒中和试验 (pVNT) 方法使用改良型的病毒，可以在生物安全二级实验室完成，但此方法需要细胞培养和荧光成像来测得中和抗体活性，因此，也不适用于样品的高通量筛选。 此 GeneScript cPass 新冠病毒中和抗体检测试剂盒采用免病毒中和测试法 (sVNT) 来克服传统的病毒中和实验的缺点。它采用酶联免疫吸附试验 (ELISA) 的模式，如图 1 和图 2 所示。

使用 ScanLater Western Blot protein Ladder 估算蛋白分子量

简介 ScanLater Western Blot Protein Ladder 是 ScanLaterWestern Blot 检测系统的重要组成部分。该 protein ladder的主要应用包括蛋白质分子量的估计，凝胶电泳的可视化，以及从凝胶到印迹转移过程的评价。ScanLater Western Blot Protein Ladder 由 7 个生物素化的重组蛋白以及 3 个预先染色的标记蛋白组成。生物素化蛋白的检测是通过在二抗步骤的印迹中加入铕标记的链霉亲和素来实现的。 在 SpectraMax i3 或 SpectraMax Paradigm 多功能微孔板读板机上，使用ScanLaterWestern Blot 检测卡盒读取印迹。 ScanLater Western Blot Protein Ladder ScanLater Western Blot Protein Ladder 由 7 个 生物素化的重组蛋白组成，分别为 10、20、40、50、80、100 和 140 kD。用铕标记的链霉亲和素孵育的印迹检测它们，当用 ScanLaterWestern blot 检测盒读取时，它们显示为浅色条带 ( 图 1, 左 )。此外，在 18、31 和 70 kD 处有三个可见的预染色标记蛋白 ( 图1，右 )。这些蓝色条带在电泳凝胶和转移后的印迹上可见。当用扫描 Western Blot 检测系统读取ladder 时，它们也被视为暗条带。生物素化 ladder 蛋白的分子量与其在凝胶上的迁移距离之间的线性关系在图 2 中与参考标准进行了比较。

教你两步完成肝素效价的测定

肝素首先从肝脏发现而得名，它也存在于肺、血管壁、肠粘膜等组织中，是一种由动物结缔组织的肥大细胞合成的粘多糖，是由二种多糖交替连接而成的多聚体。它是一种天然的抗凝血物质，在体内外都有抗凝血作用，临床上常用其钠盐或钙盐。肝素钠或肝素钙注射液主要是从猪或牛的肠粘膜中提取 的硫酸氨基葡聚糖的钠盐或钙盐，作为迅速达到抗凝作用的首选药物，被广泛用于血栓栓塞性疾病、心肌梗死、心血管手术、心脏导管检查、体外循环、血液透析等。随着药理学及临床医学的进展，肝素的应用不断扩大。 肝素类产品的效价不能用化学或物理的方法进行确切测定，只能采用生物检定法测定，即利用药物对生物体的作用并与标准品加以比较以测定其效价和生物活性的一种方法。目前体外的抗凝活性实验主要有血浆法和生色底法，血浆法虽然可以全面衡量肝素的抗凝活性，却很难标准化；生色底物法测定 肝素钠的抗 IIa 因子和 Xa 因子活性虽然不能完全反映肝素钠的活性，但国际上通常采用这种方法来确定肝素钠的效价。欧洲药典 5.0 版和我国药典均采用该方法，美国药典从 2009 年开始采用生色抗 IIa 因子测定法代替此前药典中的羊血浆法测定肝素效价。生色底物法最大的优点是它在效价测定中的高度专一性，能够识别出此前药典中血浆法不能识别的肝素相似性潜在药物，并且酶标仪的使用使常规测定自动化和标准化。 生色底物法的原理是通过微量显色法比较肝素钠标准品 S 与供试品T抗 IIa 因子和 Xa 因子的活性，以测定供试品的效价。效价是某种药物达到一定效应时所需的剂量，产生相同效应药物的剂量比较时，所需剂量越小，药物的效价就越高，反之效价就低。在人或动物体内，发生凝血作用的主要是凝血酶，低分子肝素在人体内与抗凝血酶形成络合物，然后抑制凝血酶 ( IIa 因子或 Xa 因子 ) 的活性，达到抗凝血的作用，剩余未被抑制的 IIa 因子或 Xa 因子与生色底物作用显色，使用酶标仪在 405nm 波长处读取吸光度，终溶液的吸光度值与低分子肝素的效价成反比。以吸光度为纵坐标，标准品系列溶液 ( 或供试品系列溶液 ) 浓度的对数值为横坐标分别作线性回归，按生物检定统计法 ( 通则 1431 ) 中的量反应平行线原理 4.4 法实验设计，计算效价及实验误差，药典要求可信限率(FL%) 不得大于 10 %。

【应用文章下载】利用基于 HTRF 的 Tag-lite 技术检测胰高血糖 素 GLP-1 受体的 Kd 值

Cisbio 的 Tag-lite HTRF 平台能 够 有效 地 用 HTRF 荧 光 团标记目标位点上感兴趣的蛋白。细胞表面受体可以插 入 SNAP-tag 质粒中，然后用这种结构转染细胞并表达 标记的受体。通过添加 snap -lumi4-Tb 底物，用铽 (Tb) 穴状化合物标记受体。为了进行结合试验，受体的配体 用 HTRF 受体荧光团标记，例如 d2。当 d2 配体与铽标 记的受体结合时，可以使用具备 HTRF 功能的微孔板读 板机检测受体到配体的时间分辨荧光共振能量转移 (TRFRET) ( 图 1)。 Cisbio 提供了多种标签和兴趣蛋白标记编码的质粒，以 及已经用这些结构物转染的冷冻细胞。该结构体能够表 达标记蛋白，如受体，可以用铽标记，同时其受体配体 ( 激动剂或拮抗剂 ) 用受体荧光团标记。Tag-lite 平台适 用于广泛的应用，如受体二聚化、配体结合分析和第二信 使评估。结合动力学可以研究药物 - 蛋白质复合物的结 合和解离速率，是优化候选药物体内疗效的必要步骤 。

【应用文章下载】布鲁氏菌病诊断的新方法—荧光偏振技术

荧光偏振试验 (FPA) 是一种抗原 / 抗体相互作用的简单 技术，该试验基于物理原理：在溶液中，分子的旋转的 速度与其质量有关。小分子的自旋速度较快，从而使光 快速去极化，测得的偏振值较低，而大分子的旋转速度 较慢，因此对光的去极化更少，测得的偏振值较高。FPA 以毫偏振单位 (mP) 来衡量去极化的程度。在测试期间， 将血清样品与被荧光染料标记的抗原小分子孵育，在布 鲁氏菌属的抗体的存在下，形成了大的荧光复合物。在阴 性样品中，抗原是未结合的状态，与布鲁氏菌属阳性样 本相比，这些较小的抗原分子旋转得更快，因此引起光 的更大去极化。

【应用文章下载】利用SwordELISABoosters在皮克水平下检测炎性细胞因子MolecularDevices

传统的 ELISA ( 酶联免疫吸附实验 ) 方法使用辣根过氧化物酶 (HRP) 底物3, 3’, 5, 5’-四甲基联苯胺 (TMB) 通常无法检测低丰度分析物， 例如炎性细胞因子。S w o r d Diagnostics 公司开发出新一代 ELISA 检 测技术-Sword ELISA Booster，可直接替代作为金标准的传统 ELISA 检测试剂，将灵敏度提升 30 倍。

【酶标仪应用】酶标仪在植物研究领域中的应用实例MolecularDevices

在基于哺乳动物细胞的研究中，酶标仪主要应用于: (1) 常规分子检测，如核酸、蛋白浓度及酶活性分析等；(2) 信号转导研究， 如一些细胞信号事件如 ROS，修饰的检测；(3) 整体细胞水平的分析，如细胞的活力、凋亡和杀伤等。然而在植物领域中，酶标 仪的应用则偏向前两个方向，此外，植物领域的酶标仪应用普遍度也不及动物，但这并不限制酶标仪在该领域的应用前景。在此， 我们结合常见的应用案例介绍酶标仪在植物领域中的应用，提升酶标仪在植物研究中的应用价值，并进一步协助植物的科研发展。

【应用文章下载】产品应用（28）利用SpectraMaxMiniMax细胞计数仪检测细胞周期Molecular Devices

球体是小型的 3D 细胞培养微环境，可以用于 诸如低吸附微孔板等特殊的方法进行细胞培 养。这种体外 3D 细胞培养模型具有高度的临 床及生物可靠性，并且已经被广泛应用于高 通量筛选 (HTS) 和高级细胞培养，从而方便对 诸如化合物毒性和癌症等重大疾病进行研 究。

【应用文章下载】黄曲霉毒素定量检测手册Molecular Devices

黄曲霉毒素（AFT）是一类化学结构类似的化合物，均为二氢呋喃香豆素的衍生物。黄曲霉毒素是主要是由黄曲霉(Aspergillus flaw)、寄生曲霉(Aspergillus parasitwus)和集峰曲霉(Aspergillusnomius)产生的次生代谢产物，在中国，目前产生黄曲 霉毒素的产毒菌种主要为黄曲霉。 黄曲霉毒素广泛存在于自然界中，在湿热地区食品和饲料中出现黄曲霉毒素的机率最高。它们存在于土壤、动植物、各种坚 果中，特别是容易污染花生、玉米、稻米、大豆、小麦等粮油产品，是霉菌毒素中毒性最大、对人类健康危害极为突出的一类霉 菌毒素。按照目前毒性分级，动物半数致死量＜10mg/kg体重的物质为剧毒，而黄曲霉毒素B1的半数致死量仅为0.36mg/kg体 重，属特剧毒的毒物范围。

【应用文章下载】表面功能化纳米颗粒的特征光谱分析

通过使用SpectraMax® i3x多功能 微孔板读板机并结合SoftMax® Pro自带的 光谱优化向导，我们在此展示了如何分析 纳米颗粒的特征光谱。

【应用文章下载】利用EarlyTox细胞活力检测试剂盒评估GM-CSF和TNFα 诱导的细胞凋亡

在这一基于细胞的实验中，荧光信号通过 SpectraMax® i3x微孔读板机上底读孔域扫 描功能进行检测，可获得孔底12个位置的 平均信号以避免因为潜在的细胞生长不均 所造成的孔与孔之间的差异。

【应用文章下载】加强单抗研究 抢占发展先机-Molecular Devices

单克隆抗体(mAbs)作为潜在的治疗药物，持续受到广泛关注和期 待。随着抗体偶联药物(antibody-drug conjugate)和双特异性抗 体产品陆续进入市场，单克隆抗体的应用仍然是治疗发展的关键 部分。虽然在抗体开发和放大过程中的一些关键步骤依然是一个 重要挑战，但是高质量的单克隆抗体工程细胞株的获取已触手可 及。我们的系列产品方案采用专属技术设计来缩短稳定细胞株的 开发时间，并获得稳定的高亲和力和高表达水平的细胞克隆，以 加速您的抗体开发。

Molecular Devices核酸及蛋白质检测方法集锦（下）

如何能够准确和灵敏对核酸及蛋白质进行定量检测是许多实验成败与否的重要环节。Molecular Devices® 酶标仪为核酸及蛋白质检测提供了多种可靠方案。结合SoftMax Pro® 软件强大的数据处理功能，可一键生成定量结果，并可根据用户需求定制格式并导出数据。 基于SpectraDrop 微量检测板的直接蛋白量 基于SpectraDrop微量检测板的低体积荧光核酸定量 如何利用SpectraDrop超微量微孔板进行DNA定量检测

Molecular Devices核酸及蛋白质检测方法集锦（上）

如何能够准确和灵敏对核酸及蛋白质进行定量检测是许多实验成败与否的重要环节。Molecular Devices. 酶标仪为核酸及蛋白质检测提供了多种可靠方案。结合SoftMax Pro. 软件强大的数据处理功能，可一键生成定量结果，并可根据用户需求定制格式并导出数据。 使用SpectraMax 酶标仪和Quant-iT PicoGreen荧光试剂测定双链DNA 使用具有紫外光吸收功能的SpectraMax酶标仪测定DNA和RNA含量 使用CyQUANT 细胞增殖试剂盒测定细胞增殖情况 专利的光径自动校正技术可将检测OD值校正至标准1 cm比色皿光径的读值 使用NanoOrange 荧光法测定蛋白质含量 使用Bradford 和 ELISA 法测定蛋白质含量 使用荧光法对微量DNA样品进行定量检测

MolecularDevicesSoftMaxPro7数据获取和分析软件

主要特点 ? 超过160种预设模板 ? 支持传统常和非常规的酶标试剂，其中包括成像和western blots ? 强大、便捷的用户模板共享社区 ? 光谱优化设置可最大程度增加实验信号窗口(SpectraMax i3x 和Paradigm

具有WB与成像功能的酶标仪全新应用手册——Molecular Devices I3

SpectraMax? i3 多功能微孔板读板仪兼容强大的 MiniMax? 300 成像操作平台，具有独一无二的无标记专利分析技术。可以使用户在不 使用核酸染料(如DAPI，嵌入式结合DNA)或活细胞染料的情况下进行 细胞增殖和细胞毒性等实验，避免这些染料对细胞产生一个长期的毒性 作用。