酮洛芬是一种化学物质，呈白色结晶性粉末状；无臭或几乎无臭。在甲醇中极易溶，在乙醇、丙酮或乙醚中易溶，在水中几乎不溶。熔点约93—96℃。为芳基烷酸类化合物。具有镇痛、消炎及解热作用。上海汉尧实验室（上海星瀚耀生物医药科技有限公司）选用YMC CHIRAL ART Amylose-C Neo手性色谱柱对酮洛芬进行HPLC测定，检测需求。方法来源：2020版中国药典二部–右酮洛芬氨丁三醇-左酮洛芬样品信息中文名：酮洛芬英文名：KetoprofenCAS号：22071-15-4色谱条件色谱柱：YMC CHIRAL ART Amylose-C Neo, 250*4.6mm, 5um, P/N: KBN99S05-2546WT;流动相：正己烷: 甲基叔丁基醚：冰醋酸=65:35:0.1;洗脱梯度：等度；检测波长：254nm;柱温：35℃;流速：1.0mL/min;进样浓度：1.0mg/ml;稀释剂：流动相;进样量：20μL;运行时间：20min。谱图和数据样品检测谱图检测数据结论参照2020版中国药典，采用YMC CHIRAL ART Amylose-C Neo手性色谱柱对酮洛芬进行HPLC 测定。两组目标峰达到基线分离，分离度大于2.5，峰理论塔板数均大于2000，且两个对映体峰面积之比为1：1，满足中国药典2020版的要求。

“第十七届（2024秋季）药品质量安全大会”于2024年9月6-7日在北京朗丽兹西山花园酒店圆满举办。上海汉尧携白小白实验室全自动清洗机、Advion Interchim Scientific（AIS）纯化制备及有机合成质谱系统、洁维生物自主研发的无菌薄膜蒸发器，以及多样的液相色谱耗材，如YMC色谱柱，埃赛力达（原“贺利氏特种光源“）氘灯、空心阴极灯等特种光源，DWK试剂瓶，鬼峰捕集小柱，汉尧管线接头组件，单向阀等配件/耗材亮相51展位，展位人头攒动，不少观众前来咨询交流。展品介绍白小白实验室清洗机采用低压高循环喷淋方式对实验室的各类玻璃、塑料或橡胶材质器皿进行全流程的自动化清洗，可针对不同清洗需求，优化六大清洗要素，通过定制化的精准清洗流程实现器皿的ppb分析级洁净度，集清洗、消毒、烘干、检测、存放功能于一体，解放双手，便捷高效。Advion成立于1993年，总部位于美国纽约；Interchim成立于1970年，总部位于法国蒙吕松。2019年，合并成立Advion Interchim Scientific。 AIS致力于分离鉴定、纯化制备技术的开发应用，Interchim puriFlash®纯化制备系统实现智能纯化，多种检测方式可供选择，色谱柱齐全，性能优越。Advion expression® CMS质谱系统拥有的技术，兼顾灵活性、易用性、可靠性，可快速准确提供高质量数据。洁维生物自主研发的无菌薄膜蒸发器，是一种通过一体式桨叶高速旋转形成的“气刀”强制成膜，可在一定的真空条件下进行降膜蒸发的新型高效蒸发器，传热系数大、蒸发强度高、过流时间较短且可调节。适用于脂质体、微球、多肽中间体及其它热敏性产品中有机溶剂的去除和产品的浓缩。UPLC / HPLC 配件及耗材全覆盖

布洛芬（ibuprofen）商品名：芬必得（Fenbid）、诺罗芬（Nurofen）、美林（Motrin）等，是一种非甾体抗炎药（NSAID），化学式为C13H18O2，布洛芬主要用于缓解轻至中度疼痛，包括头痛、牙痛、肌肉痛和关节痛。此外，它也常用于缓解发热和消炎。布洛芬常见的剂型包括片剂、胶囊剂、颗粒剂、注射剂等。上海汉尧选用YMC CHIRAL ART Cellulose-C色谱柱对布洛芬进行正相色谱分离，检测分离效果满足需求。样品信息中文名：布洛芬英文名：IbuprofenCAS号：15687-27-1色谱条件色谱柱：YMC CHIRAL ART Cellulose-C,  250*4.6mm，5um ，P/N: KCN99S05-2546WT;流动相： 正己烷:甲基叔丁基醚:醋酸=85:15:0.1；洗脱梯度：等度;检测波长：220nm;柱温：35℃;流速：2.0mL/min;进样浓度：0.2mg/ml;稀释剂：流动相;进样量：20μL;运行时间：15min。谱图和数据样品检测谱图检测数据结论参照2020版中国药典，采用YMC CHIRAL ART Cellulose-C手性色谱柱对布洛芬进行HPLC 测定。两组目标峰达到基线分离，分离度大于3.0，且峰理论塔板数均大于2000，满足中国药典2020版的要求。

一、摘要：1型糖尿病是一种会导致胰腺β细胞破坏的自身免疫性疾病，需要终身胰岛素治疗。胰岛移植提供了一个很有前途的解决方案，但也面临着诸如可用性有限和需要免疫抑制等挑战。诱导多能干细胞（iPSCs）为功能性β细胞提供了一个潜在的替代来源，并具有大规模生产的能力。然而，目前的分化方案，主要是在混合或2D环境中进行的，缺乏可延展性和悬浮培养的最佳条件。我们研究了一系列可能影响分化过程的生物反应器放大过程参数。该研究采用了一种优化的HD-DoE协议，该协议设计具有可扩展性，并在0.5L（PBS-0.5 Mini）垂直轮式生物反应器中实现。我们开发了一种三阶段的悬浮生长过程，从贴壁培养过渡到悬浮培养，TB2培养基在规模化过程中支持iPSC的生长。阶段性优化方法和延长分化时间用于增强iPSC衍生的胰岛样簇的标记物表达和成熟。连续的生物反应器运行被用于研究营养和生长的限制以及对分化的影响。将连续生物反应器与对照培养基变化生物反应器进行比较，显示出代谢变化和更类似b细胞的分化谱。从试验中收集的低温保存的聚集物被恢复，恢复后显示出活力和胰岛素分泌能力得到维持，这表明它们具有存储和未来移植治疗的潜力。本研究表明，阶段时间的增加或限制培养基补充以减少乳酸积累可以增加在大规模悬浮环境中培养的胰岛素合成细胞的分化能力。二、实验内容节选：营养消耗和代谢物的分析       为了检测细胞潜在的替代碳源和氮源，我们分析了对照组和连续生物反应器在整个培养过程中的氨基酸代谢（图S5A-B）。使用快速培养基氨基酸维生素分析仪Rebel（908 Devices）来分析氨基酸浓度。必需氨基酸，如组氨酸、异亮氨酸、亮氨酸、赖氨酸、蛋氨酸、苯丙氨酸、苏氨酸、色氨酸和缬氨酸在整个培养期间都保持不变。然而，一些氨基酸在两种培养基中都完全耗尽，包括5天后的L-天冬氨酸和16天后的L-谷氨酸。氨基酸代谢对正常的胰腺β细胞功能至关重要，丙氨酸和谷氨酰胺以其调节β细胞功能和胰岛素分泌的作用而闻名。在培养结束时，谷氨酰胺和丙氨酸的浓度高于新鲜培养基，表明它们不限制生长（图S5A-B）。然而，它们增加的来源仍然未知，不像之前的观察而将它们的增加归因于GlutaMAX™添加剂。与起始培养基相比，丙氨酸和谷氨酰胺水平的升高在对照组生物反应器中没有观察到，后者在不同阶段之间和整个延长的内分泌诱导阶段都有频繁的培养基变化。两种生物反应器之间无其他显著性差异。如前所述，限制培养基补充的生物反应器比对照培养基变化的生物反应器具有更好的分化能力。氨基酸浓度调节和血清缺乏与促进来自人类干细胞的胰腺β细胞的发育有关。       此外，使用FLEX2（Nova Biomedical）对两种培养结果进行评估，分析两种反应器的整个培养期间Gln、Glu、NH4+、Na+、K+、Ca++、pH、PCO2和PO2（图S6A-B）。在连续生物反应器中，培养基的渗透压稳定增加，但保持在280-320mOsm/kg范围内。这种增加可以归因于由营养物质代谢和其他废物产生的溶质的积累。相比之下，对照培养基的渗透压变化的生物反应器随着培养基在细胞分化过程的不同阶段被补充而波动。谷氨酰胺和谷氨酸水平也进行了评估，两者都显示随着时间的推移而消耗。这与使用Rebel分析仪进行的测量结果一致。两种生物反应器在生物分化上具有可比性，除了在连续生物反应器中pH的持续下降和预期的耗氧速率方面的主要差异。在反应液中测量的气体可能会受到收集和测量之间时间的影响，但是，对所有样品的总体影响是相同的。总体数据显示，在培养10天或PP诱导分化阶段后，PO2水平开始稳步下降。尽管反应液与两个生物反应器顶空内的气体体积相同(500毫升），但与控制培养基补充变化生物反应器相比，进入反应液的氧气通量可能不足以补充0.5L连续容器中增加的耗氧量。文献来源：doi.org/10.21203

一、 摘要：随着Car-T细胞治疗的发展，测试不同的Car-T细胞，并将代谢特征与表现良好且符合预期的Car-T细胞表型联系起来，使CAR构建和制造过程最优化。Vasoactive intestinal peptide（VIP）是一种新兴的T细胞功能的检查通路。VIP在T细胞和肿瘤细胞中均有表达，并在TCR激活过程中大量表达。在原代人类T细胞的扩增过程中，VIP/VIPR轴的增强了分化程度较低的T细胞表型、抗肿瘤细胞毒性和体内持久性。通过工程改造Car-T细胞分泌新的、有效的VIPR拮抗肽，这些细胞可以克服对富含VIP的肿瘤微环境的免疫抑制（图1）。拮抗T细胞中的VIP/VIPR轴可增强T细胞介导的抗肿瘤能力。在项目的这一部分，我们研究通过培养基氨基酸分析来表征增强型Car-T细胞制造过程-将代谢特性与期望的、低分化和非耗竭型Car-T细胞族相关联。二、 实验方法为了研究VIPR拮抗剂是否影响代谢通路，我们使用快速培养基氨基酸维生素分析仪Rebel（908 Devices）进行了反应液分析，以确定CAR和CAR/VIPRa T细胞之间的氨基酸使用差异。培养基分析提供了在细胞胞外环境中化合物的消耗和积累的数据。新鲜培养基和反应液分析显示了，丙氨酸、谷氨酸和丝氨酸等氨基酸消耗的差异。这促使我们进一步研究这些Car-T细胞内代谢通路利用和代谢物改变的差异。利用LC/MS代谢组学和细胞生物能学来阐明CAR和CAR/VIPRa T细胞代谢状态之间的差异。完整的研究包括以下描述步骤：● 体内-Car-T细胞功能和效力，以及寿命          ⅰ、荧光标记物肿瘤成像● 显微镜法视觉评估细胞（数字形式、形状、表达生物标记）          ⅰ、评估T细胞的肽分泌● RNA测序● 海马线粒体应激测试代谢呼吸状态和应激● 抗原刺激          ⅰ、试验激活（如抗原刺激细胞因子和激活试验）          ⅱ、细胞毒性          ⅲ、增殖● 流式细胞仪-具有特异性标记物的细胞数量和比例● Rebel-新鲜培养基和反应液的氨基酸分析● 蛋白质结合分析-效力和活性测定，与抗原、抗体和底物等三、 快速培养基氨基酸维生素分析仪Rebel：随时为您的生物过程调整提供参数指引● 氨基酸、维生素和生物胺的快速分析● 最小所需样品：低至10µL● 简单样品准备：离心或过滤后稀释● 集成式自动分析仪：自动进样器、分离、检测、分析和报告显示● 分析运行时间：~10分钟每个样品● 试剂盒耗材：200次分析四、 结果图3. A：用新鲜培养基（RPMI+10%胎牛血清）分析了细胞培养基中氨基酸的起始浓度。值得注意的是高浓度的精氨酸，而缺少丙氨酸。图3.B和3.C：来自不同供体（3.B-样品29和3）（3.C-样品51）的反应液分析，显示在培养终点非常相似的AA浓度水平。值得注意的是，反应液中丙氨酸的产生/分泌和精氨酸的显著消耗，以及应激细胞和对照细胞样本之间的差异。图3.D对含VIP受体拮抗肽结构的氨基酸的进一步分析显示，培养终点的丙氨酸、谷氨酸和丝氨酸等氨基酸水平存在差异。图4. A采用LCMS分析来研究细胞内代谢，通过测定细胞内代谢物的丰度来确定不同代谢通路（糖酵解、TCA、PPP、AMP/ATP）的利用。图4.B线粒体应激实验通过功能测定抗原刺激和对照细胞的糖酵解和氧化磷酸化利用。五、 总结我们发现，当细胞受到抗原刺激时，CAR/VIPRa T细胞的能量明显增加。相比之下，Car-T细胞变得能量更少，糖酵解作用更多，这是T细胞衰竭的已知特征。此外，用多种方法进行的代谢评估产生了与此评估相关的结果，如耗氧量和反应液中的某些氨基酸水平。最后，Car-T细胞活性、效力和细胞毒性评估显示与抗肿瘤活性相关。总之，这项工作表明，不同的代谢特征证明CAR/VIPRa T细胞在抗原刺激时增强对肿瘤的作用。

白小白实验室清洗机采用低压高循环喷淋方式对实验室的各类玻璃、塑料或橡胶材质器皿进行全流程的自动化清洗，可针对不同清洗需求，优化六大清洗要素，通过定制化的精准清洗流程实现器皿的ppb分析级洁净度，集清洗、消毒、烘干、检测、存放功能于一体，解放双手，便捷高效。BS280/280CD全自动清洗机适用于各种实验室玻璃器皿（烧杯、容量瓶、试管、移液管、进样瓶等）以及塑料或橡胶材质器皿的清洗、消毒及烘干；内腔容积180L，可装载两层篮架，一次可清洗250ml 容量瓶 72 个或100ml 容量瓶 64 个；耀黑镜面搭配拉丝钢面，提升空间质感；清洗结果可达ppb分析级洁净，满足您痕量分析要求；可广泛应用于各行业实验室，如制药、科研、食品、医学、化工、能源、材料、生物、高校、政府及第三方检测等。BS580D全自动清洗机适用于各种实验室玻璃器皿（烧杯、容量瓶、试管、移液管、进样瓶等）以及塑料或橡胶材质器皿的清洗、消毒及烘干；内腔容积360L，可装载3层（至多4层）篮架，一次可清洗250ml 容量瓶 72 个+100ml 容量瓶 64 个；耀黑镜面搭配拉丝钢面，提升空间质感；清洗结果可达ppb分析级洁净，满足您痕量分析要求；可广泛应用于各行业实验室，如制药、科研、食品、医学、化工、能源、材料、生物、高校、政府及第三方检测等。H1 台面放置，节省空间全自动清洗机适用于各种实验室玻璃器皿（烧杯、容量瓶、试管、移液管、进样瓶等）以及塑料或橡胶材质器皿的清洗；内腔容积110L，可放置单层篮架，一次可清洗100ml容量瓶36个或进样小瓶112个；预制清洗程序，旋钮选择一键启动，45分钟清洗完成，简单高效；腔体一体成型密封好，可有效防止泄漏，更安全；腔体一体冲压无接缝，可有效减少残留，更洁净；可广泛应用于食品、化妆品、第三方检测、高校等行业实验室。H2 双层篮架，鲸量级空间全自动清洗机适用于各种实验室玻璃器皿（烧杯、容量瓶、试管、移液管、进样瓶等）以及塑料或橡胶材质器皿的清洗；内腔容积164L，可放置双层篮架，一次可清洗100ml容量瓶72个或进样小瓶112个；预制清洗程序，旋钮选择一键启动，操作更简单；内置软化水系统，清洗更温和；内部舱体一体成型，无泄露更安全，坚固耐用；可广泛应用于食品、化妆品、第三方检测、高校等行业实验室。

吲达帕胺，是一种有机化合物，化学式为C16H16O3N3ClS，吲达帕胺为磺胺类利尿药，具有利尿和钙通道阻滞作用，是一种强效、长效的降压药，用于治疗轻、中度高血压，也用于水肿(包括心力衰竭所致水肿)。上海汉尧实验室（上海星瀚耀生物医药科技有限公司）选用YMC CHIRAL ART Cellulose-SB与YMC CHIRAL ART Cellulose-SJ两款手性色谱柱对吲达帕胺进行反相色谱分离，检测需求。样品信息中文名：吲达帕胺英文名：IndapamideCAS号：26807-65-8色谱条件-1色谱柱：YMC CHIRAL ART Cellulose - SB, 250*4.6mm, 5um, P/N: KSB99S05-2546WT; 流动相A：水流动相B：乙腈洗脱梯度：T(min)MP-A%MP-B%0.0505010.05050检测波长：254nm;柱温：30℃;流速：1.0mL/min;进样浓度：1.0mg/ml;稀释剂：流动相;进样量：3μL;运行时间：10min。谱图和数据检测谱图检测数据色谱条件-2色谱柱：‍‍‍‍YMC CHIRAL ART Cellulose-SJ,  250*4.6mm，5um ，P/N: KSJ99S05-2546WT;‍‍‍‍其他液相条件与色谱条件-1保持一致。谱图和数据检测谱图检测数据结论根据实验谱图和检测数据，选用YMC CHIRAL ART Cellulose-SB与YMC CHIRAL ART Cellulose-SJ两款手性色谱柱对吲达帕胺进行反相色谱分离，分离度分别为4.45、2.67，均可到达基线分离，满足检测需求。

随着国内药政法规的日益健全以及严格执行的落实，进一步明确了我国制药行业质量监管的总体目标和重点任务；为了进一步提升药品质量人员的管理能力，建立与完善质量体系，深入了解新政下相关法规与监管趋势，掌握最新技术应用，搭建药品质量管理与控制专业技术人才学术交流和信息共享的桥梁，促进我国药品质量控制技术发展水平可持续创新，由中国社科院食品药品产业发展与监管研究中心指导，药安会主办的“第十七届（2024秋季）药品质量安全大会”将于2024年9月6-7日在北京朗丽兹西山花园酒店举办。上海汉尧将携白小白实验室全自动清洗机、Advion Interchim scientific（AIS）纯化制备及有机合成质谱系统、洁维生物自主研发的无菌薄膜蒸发器，以及还有多样的液相色谱耗材，如YMC色谱柱，埃赛力达（原“贺利氏特种光源“）氘灯、空心阴极灯等特种光源，DWK试剂瓶，鬼峰捕集小柱，汉尧管线接头组件，单向阀等配件/耗材亮相51展位，为您提供一站式服务，助力科研实验，让您省心又省力！- 欢迎莅临汉尧51展台 -展品介绍白小白实验室清洗机采用低压高循环喷淋方式对实验室的各类玻璃、塑料或橡胶材质器皿进行全流程的自动化清洗，可针对不同清洗需求，优化六大清洗要素，通过定制化的精准清洗流程实现器皿的ppb分析级洁净度，集清洗、消毒、烘干、检测、存放功能于一体，解放双手，便捷高效。Advion成立于1993年，总部位于美国纽约；Interchim成立于1970年，总部位于法国蒙吕松。2019年，合并成立Advion Interchim Scientific。AIS致力于分离鉴定、纯化制备技术的开发应用，Interchim puriFlash®纯化制备系统实现智能纯化，多种检测方式可供选择，色谱柱齐全，性能优越。Advion expression® CMS质谱系统拥有的技术，兼顾灵活性、易用性、可靠性，可快速准确提供高质量数据。洁维生物自主研发的无菌薄膜蒸发器，是一种通过一体式桨叶高速旋转形成的“气刀”强制成膜，可在一定的真空条件下进行降膜蒸发的新型高效蒸发器，传热系数大、蒸发强度高、过流时间较短且可调节。适用于脂质体、微球、多肽中间体及其它热敏性产品中有机溶剂的去除和产品的浓缩。UPLC / HPLC 配件及耗材全覆盖上海汉尧仪器设备有限公司欢迎莅临第十七届（2024秋季）药品质量安全大会展位「51」洽谈、合作

2024年8月9日-10日，为期两天的2024BPD第七届生物药工艺发展大会顺利闭幕！大会共邀请了150位演讲嘉宾，30场论坛，呈现了105场专业报告，行业同仁们共同深入互动、观点碰撞，推动生物医药发展与合作。上海汉尧作为受邀展商亮相现场，携带GETINGE和908 Devices品牌产品，共同打造2024BPD工艺大会，让我们一起来回顾下现场精彩吧！展品介绍908 Devices上游工艺开发辅助工具908 Devices是用于化学和生物分子分析的微流控芯片的先驱，于2022年收购德国酶膜传感器专家Trace公司，新增了产品线。新产品能对生物反应器中葡萄糖和乳酸浓度进行实时在线监测并辅助反馈补料，且整个过程不损耗样品体积。GETINGE（Applikon）BioBundles玻璃罐生物反应器‍Applikon Biobundle是一个完整的生物反应器系统，配备了所有必要的组件，可以做到“开箱即用”。该系统包含完整的硅胶管、样品瓶和“入门工具包”所包含备件。针对细胞培养和微生物发酵均有相应的配置解决方案，该装置易于安装、学习和操作。此次展会不仅为汉尧提供了一个展示自身实力和品牌形象的良好平台，也为公司与行业伙伴的交流与合作搭建了桥梁。通过与参会人员的深入交流和互动，汉尧收集了宝贵的市场信息和客户需求，在未来的发展中，汉尧人依然会不忘初心，勤奋进取，以创新的产品品质和技术服务标准，应对不断提高的行业规范要求和用户需求。与我们的客户和合作伙伴共同成长的同时，努力为社会 创造更多价值。

兰地洛尔，是一种化学药品，分子式是C25H40ClN3O8，用于治疗手术时心动过速性心律失常。化合物结构及信息CAS号：133242-30-5中文名称：兰地洛尔中文名称：兰地洛尔类似物杂质色谱条件色谱柱：YMC CHIRAL ART Cellulose-SB 250*4.6mm, 5um, P/N: KSB99S05-2546WT;流动相A：0.1% DEA;流动相B：ACN洗脱梯度：T(min)A%B%0.0901025.0604025.1901030.09010检测波长：220 nm; 柱温：30℃;流速：1.2mL/min;进样浓度：1.0mg/ml;稀释剂：初始流动相;进样量：5μL;运行时间：30min。谱图和数据 样品检测谱图样品检测数据结论选用YMC CHIRAL ART Cellulose-SB (250*4.6mm, 5um)，P/N: KSB99S05-2546WT手性色谱柱对兰地洛尔及其类似物使用反相分离模式，二者可达到基线分离。该款手性色谱柱属于耐溶剂系列，可兼容正相模式和反相模式。对于使用正相、反相流动相试剂均具有良好的耐受性，可为结构类似物提供更多的分离选择。

概述哺乳动物细胞培养对于生物技术行业的蛋白质生产具有重要意义[1]。制药行业中约70%的重组蛋白是使用中国仓鼠卵巢细胞（CHO）生产的。在灌流培养中，营养物质持续供应并去除副产物[2]。与批培养和流加补料技术相比，灌流为细胞提供了有利的环境和较短的产品停留时间。这对于不稳定产品的质量尤为重要。灌流模式的另一个优点是它允许使用较小的生物反应器并减少在位清洗操作[3]。灌流需要一种装置将细胞保留在培养基中。灌流中使用的大多数哺乳动物细胞保留系统都基于细胞尺寸差异，例如使用滤器。然而，由于滤器不可避免的污染，传统的过滤膜无法实现真正的稳态灌流培养。此外，频繁更换过滤器会增加成本和污染风险[4]。声学分离器是一种替代的细胞截留系统，利用超声波驻波场中产生的力将细胞与清液分离。细胞被困在驻波的压力平面中，并收集为松散的聚集体。这些细胞聚集体通过重力沉降返回生物反应器[4]。 在本研究中，使用了一种针对高密度细胞培养物灌流的Applikon Biosep 10 L声学细胞分离器的高级版本。生物反应器中，细胞密度在11~144*106 cells/mL之间的CHO细胞评估其性能。材料和方法01细胞声学截留装置 – BioSep·      BioSep 系统由声学腔室和控制器组成。·      控制器功能是自动产生声学腔室内的声场。·      来自生物反应器的细胞悬液被泵输入到安装在生物反应器头板上的声学腔室中。·      驻波迫使悬浮细胞进入平面，在那里它们形成松散的聚集体（图 1）。·      清液向上通过声场而收获，而浓缩的细胞则返回到生物反应器。·      随着细胞浓度和灌流速率的增加，声学腔室的功率输入被调整到更高水平，以保持高分离效率[5]。·      运行时间对应于细胞与清液分离的时间段。在运行时间结束时，声场暂时关闭，收获暂停，同时腔室中的细胞返回生物反应器。·      在这项研究中，功率水平和运行时间发生了变化，以获得最佳设置，使高密度CHO 细胞培养超过 125* 106 cells/mL。02实验装置·      为了评估在一系列高细胞浓度下的分离性能，将CHO 细胞在摇瓶中培养，浓缩、然后悬浮在使用my-Control 操作系统的Applikon 250 mL MiniBio 生物反应器中。·      BioSep 10 L的功率水平为2~7W。·      实验设置如图2所示。2丨A） 实验装置包括：进料罐、废液罐、收获泵、进料泵、声学室、MiniBio 250 mL、my-ControlB）典型的实验装置[5]3 | 分析方法•BioSep 的分离效率根据公式 1 计算:SE (%) = 1 - HX / BX *100  [1]  其中HX对应于收获管路的活细胞浓度，BX对应于生物反应器中的活细胞浓度[4]。为确保稳定和可重复的声学条件，在从收获管路和生物反应器取样之前，超声波功率输入、收获速率和运行/反冲洗定时器设置至少恒定 30 分钟。根据所选运行周期的持续时间，在时间点采集收获样本，以获得一致且可比较的数据(表1）。结果和讨论1| 循环流速·       在高细胞密度的灌流培养过程中，需要高循环速率，这会导致声学室内的湍流增加。·       这种湍流诱导会影响声学诱导的细胞聚集[6]。·       在目前的研究中观察到新的BioSep版本允许声学诱导的细胞聚集体不受干扰地沉降，最大流入速率高达7 mL/min（~10 L/天），允许保留超过100*106cells/mL的生物反应器浓度。2| 分离性能·       从收获管路和生物反应器中采集的70对样品中测定分离效率。·       CHO细胞总浓度范围为11~144*106 cells/mL。·       研究了1~15L/天的不同净收获率、2~7 W的功率水平和2至10分钟的运行时间（未显示值），结果总结在图3中。·       从图3中可以看出，当CHO细胞总浓度为100*106cells/mL时，可以实现高达3L/天的净收获率，同时保持98%的典型活细胞分离效率。超过4L/天的净收获率会影响最高密度下的效率，但分离仍保留了90%以上的细胞。·       在总浓度为125*106 cells/mL时，以2L/天的净收获率运行，细胞分离效率达到98%。·       在细胞浓度增加或收获率高的情况下，使用高功率水平和更短的运行周期是必要的[5]。·       优化功率（w）和运行时间（min）的配对，以实现高密度细胞。这些值的组合使得最高的分离效率是：2 w - 10 min;3 W - 5 min;5 W - 3 min;7 W - 2 min。这些结果是意料之中的，因为更高的功率水平允许在高浓度或高流量条件下增加细胞的保留，而更短的运行时间避免了细胞聚集体在声室中过度积聚，然后才有机会沉降回到生物反应器。Figure 3 分离效率以黑色方块表示，作为记录的流入管线的净收获率和CHO细胞总浓度的函数。功率水平矩阵表示在该特定净收获率下应用的最大HF功率。黄色虚线表示循环速率20L/天和10L/天之间的边界。实验结论目前的研究证明了Biosep作为CHO细胞浓度高达125*106cells/mL的细胞保留系统，增强了细胞的沉降效率。在该细胞浓度下，以2 L/天的净收获率下运行，分离效率高达98%。参考文献[1]S. M. Woodside, B. D. Bowen, and J. M. Piret, “Mammalian cell retention devices for stirred perfusion bioreactors,” Cytotechnology, vol. 28, pp. 163–175, 1998.[2]T. Kwon, N. Madziva, J. D. Oliveira, S. K. Chandramohan, L. Yin, H. Prentice, J. Han, ‘Long-term steady state perfusion culture of mammalian cells using a robust microfluidic cell retention device”. 19th International Conference on Miniaturized Systems for Chemistry and Life Sciences, 2015.[3]M. F. Clincke, C. lleryd, Y. Zhang, E. Lindskog, K. Walsh, and V. Chotteau, “Very high density of CHO cells in perfusion by ATF or TFF in WAVE bioreactor. Part I: Effect of the cell density on the process,” Biotechnol. Prog., 2013.[4]V. M. Gorenflo, J. B. Ritter, D. S. Aeschliman, H. Drouin, B. D. Bowen, and J. M. Piret, “Characterization and optimization of acoustic filter performance by experimental design methodology,” Biotechnol. Bioeng., 2005.[5]Biosep manual 10 and 50 L per day, Applikon Biotechnology.[6]I. Z. Shirgaonkar, S. Lanthier & A. Kamen, Acoustic cell filter: A proven cell retention technology for perfusion of animal cell cultures. Biotechnology Advances, 22(6), 433–444, 2004.

2024BPD第七届生物药工艺发展大会作为聚焦生物药从工艺开发到商业化生产全流程的行业标杆会议，将于8月8-10日在上海召开，预计参会观众5000，展商120家。2024BPD将继续携手战略主办方药明生物，联合主办方多宁生物、利穗科技，共同打造一场CMC工艺人专属的年度盛会！上海汉尧将亮相本次大会现场，为大家带来GETINGE和908 Devices品牌产品，诚邀大家莅临参观！ 大会信息时间：8月8-10日地点：上海张江科学会堂产品介绍【908 Devices上游工艺开发辅助工具】908 Devices是用于化学和生物分子分析的微流控芯片的先驱，于2022年收购德国酶膜传感器专家Trace公司，新增了产品线，对生物反应器中葡萄糖和乳酸浓度进行实时在线监测并辅助反馈补料整个过程不损耗样品体积。【GETINGE(Applikon) BioBundles玻璃罐生物反应器】Applikon Biobundle是一个完整的生物反应器系统，配备了所有必要的组件，可以做到“开箱即用”。该系统包含完整的硅胶管、样品瓶和“入门工具包”所包含备件。针对细胞培养和微生物发酵均有相应的配置解决方案，该装置易于安装、学习和操作。汉尧展位S048作为专业的产品和技术服务提供商，上海汉尧仪器设备有限公司一直专注于为中国的生物制药/食品/化工实验室行业用户提供高品质的产品和技术服务，依托合作伙伴的支持，我们从单一产品销售，逐步发展成为实验室消耗品/仪器/设备的综合服务商。已经合作的客户中，包括了众多国内顶级的制药/CRO/CMO/药检/大学/研究所/精细化工领域用户。我们专注于我们服务的专业领域和发展方向。我们注重我们提供的产品和技术解决方案为客户的实验室研究和工艺生产工作带来的便利和良好使用体验。部分专家委员及嘉宾关于2024BPD2024BPD第七届生物药工艺发展大会作为聚焦生物药从工艺开发到商业化生产全流程的行业标杆会议，将于8月8-10日在上海召开，预计参会观众5000人，展商120家。2024BPD将继续携手战略主办方药明生物、联合主办方多宁生物、利穗科技，支持单位张江集团共同打造一场CMC工艺人专属的年度盛会！ 2024BPD内容上深耕生物药工艺领域，聚焦创新发展，既有生物药工艺届意见领袖传递宝贵经验和前沿观点，又有中国生物医药产业新生代力量打造工艺实操干货论坛，将邀请产业技术代表和优质供应商共同交流、上下游联动，推进生物医药产品的开发与上市，提高产品质量，优化工艺流程，降低生产成本！期待更多全球CMC工艺伙伴来聚会~关于BIOWEEK由易贸医疗主办，张江集团作为支持单位，联合呈现的BIOWEEK2024将于8月4-10日在上海张江与大家见面，以创新和务实的态度，充分利用上海生物产业资源，和在国际交流中的重要桥梁作用，以技术为出发点，全力打造具有国际影响力的创新技术论坛和展览交流活动。 BIOWEEK是易贸医疗打造的专注于生物药开发全流程的学习型专业会展品牌。以易贸医疗旗下五大品牌2024IVDCHINA体外诊断创新展、2024IDC新药研发影响力大会、2024GCD创新药全球临床开发策略大会、2024BPD生物药工艺发展大会、2024BiOFUNDING易企融资路演为基础，聚焦研发、临床、工艺生产、投融资和BD等细分主题，在一周的会期中，每个职能独立开展技术论坛，为企业各部门中基层搭建线下学习交流平台，同时易企约见促进融资与项目合作洽谈，共同为中国生物产业发展蓄力。

西肽普兰(Citalopram)是一种选择性5-羟色胺再摄取抑制剂（SSRI），为外消旋体。可选择性地抑制5-HT转运体，阻断突触前膜对5-HT的再摄取，延长和增加5-HT的作用，从而产生抗抑郁作用。上海汉尧实验室（上海星瀚耀生物医药科技有限公司）选用YMC CHIRAL ART Cellulose-SB(250*4.6mm,5um)，P/N: KSB99S05-2546WT手性色谱柱及YMC CHIRAL ART Cellulose-SZ (250*4.6mm,5um)，P/N: KSZ99S05-2546WT手性色谱柱对西肽普兰两种异构体各自使用反相与正相的分离模式进行分离，检测分离效果满足需求。反相色谱条件（自研）色谱柱：YMC CHIRAL ART Cellulose-SB 250*4.6mm，5um ，P/N: KSB99S05-2546WT;流动相A：0.1% DEA；流动相B：乙腈(ACN)洗脱梯度：T(min)A%B%06535606535 检测波长：254 nm; 柱温：25℃;流速：1.5mL/min;进样浓度：1.0mg/ml;稀释剂：流动相;进样量：3μL;运行时间：60min。谱图和数据检测谱图检测数据正相色谱条件（YMC官方）色谱柱：YMC Chiral Art Cellulose-SZ 250*4.6mm，5um ，P/N: KSZ99S05-2546WT;流动相：正己烷/异丙醇/二乙胺(90/10/0.1)；洗脱梯度：等度；检测波长：270 nm; 柱温：25℃;流速：1.0mL/min;进样浓度：1.0mg/ml;进样量：7μL;运行时间：25min。谱图和数据检测谱图检测数据结论分别选用YMC CHIRAL ART Cellulose-SB(250*4.6mm, 5um), P/N: KSB99S05-2546WT手性色谱柱及YMC CHIRAL ART Cellulose-SZ (250*4.6mm, 5um), P/N: KSZ99S05-2546WT手性色谱柱对西肽普兰两种异构体各自使用反相与正相的分离模式进行分离，异构体分离度均大于1.5。且该两款手性色谱柱属于耐溶剂系列，可以兼容正相模式和反相模式，对于使用正相流动相试剂及反相流动相试剂均具有良好的耐受性，可为不同手性化合物的分离模式提供更多的选择性。

D-氨基酸在食品、农药、医药和有机合成等领域有着重要的应用价值。其中，D-组氨酸是人体和动物必需的氨基酸。D-组氨酸难以从天然产品中大量提取，要通过构型转化或拆分获得，价格高昂。因此关于制各D-组氨酸的研究具有应用价值。上海汉尧实验室（上海星瀚耀生物医药科技有限公司）选用YMC CHIRAL ART Cellulose-SB, 250*4.6mm, 5um，P/N: KSB99S05-2546WT色谱柱对N-芴甲氧羰基-组氨酸化合物进行反相色谱分离实验，检测分离效果满足需求。样品信息中文名：N-芴甲氧羰基-D-组氨酸中文名：N-芴甲氧羰基-L-组氨酸英文名：Fmoc-D-His-OH英文名：Fmoc-L-His-OHCAS:   157355-79-8CAS:   116611-64-4色谱条件色谱柱：YMC CHIRAL ART Cellulose –SB,  250*4.6mm，5um ，P/N: KSB99S05-2546WT;流动相：MP-A: 甲醇（MeOH）,MP-B: 水(H2O:HAC:TEA=100:2:1.6);洗脱梯度：T(min)MP-A%MP-B%0.0901025.09010检测波长：260nm;柱温：30℃;流速：1.0mL/min;进样浓度： 1.0mg/ml;稀释剂：90%MeOH;进样量：3μL;运行时间：25min。谱图和数据检测谱图样品检测数据结论根据实验谱图和检测数据，选用YMC CHIRAL ART Cellulose-SB, 250*4.6mm, 5um, P/N:KSB99S05-2546WT色谱柱对N-芴甲氧羰基-组氨酸化合物进行反相色谱分离实验，分离效果满足需求。

2024年6月19日至21日，第二十二届世界制药原料中国展（CPHI China 2024）在上海浦东新国际博览中心举行。恰逢上海梅雨季，阴雨连绵，空气湿润，对于任何大型活动来说都是一个不小的挑战。尽管天气不佳，但观众们对CPHI的热情并未减退。他们冒着雨水前来，参加各种论坛和研讨会，与业界专家进行深入交流。汉尧展区内，观众络绎不绝，他们对新技术、新产品的关注与兴趣丝毫未受天气影响。上海汉尧仪器设备有限公司一直专注于为中国的生物制药/食品/化工实验室行业用户提供高品质的产品和技术服务，依托合作伙伴的支持，我们从单一产品销售，逐步发展成为实验室消耗品/仪器/设备的综合服务商。已经合作的客户中，包括了众多国内顶级的制药/CRO/CMO/药检/大学/研究所/精细化工领域用户。我们专注于我们服务的专业领域和发展方向。展望未来，汉尧将继续努力，为制药行业的发展与创新发挥重要作用，期待明年再会！

上海汉尧作为行业内专业的实验室仪器、设备及消耗品综合服务商将携众多专业仪器设备亮相此次盛会，有实验室通用仪器/设备（全自动洗瓶机、水分测定仪、电位滴定仪，环境监测系统等）；合成反应与制备纯化设备（AIS纯化制备及有机质谱系统，伊睦多条件反应器等）；还有知名品牌如908devices，GETINGE，gelomics等生物相关产品；多样的液相色谱配件及耗材，如YMC色谱柱，埃赛力达(原“贺利氏特种光源”)氚灯、空心阴极灯等特种光源，色谱先生鬼峰捕集小柱，汉尧自主品牌管线接头组件，单向阀及其他配件和耗材等，诚邀您临，欢度这场制药人的盛寰!展品推荐我们在这里等你W5D16

N-芴甲氧羰基-D-别异亮氨酸是一款化学品，分子式为C21H23NO4，分子量为353.41，白色粉末，用于生化试剂，多肽合成，溶于甲醇（轻微浑浊），于2-8℃贮存。方法来源：实验室自研样品信息中文名：N-芴甲氧羰基-D-别异亮氨酸中文名：N-芴甲氧羰基-L-别异亮氨酸英文名：Fmoc-D-allo-lle-OH  英文名：Fmoc-allo-lle-OH CAS:   118904-37-3   CAS:   251316-98-0 色谱条件色谱柱：CHIRAL ART Cellulose –SC, 250*4.6mm，5um ，P/N: KSC99S05-2546WT;流动相： MP-A: 0.1%TFA,  MP-B：ACN;洗脱梯度：T(min)MP-A%MP-B%0.0703025.0455525.1703030.07030检测波长：254nm;柱温：35℃;流速：1.2mL/min;进样浓度： 1.0mg/ml；稀释剂：50%ACN;进样量：10μL;运行时间：30min。谱图和数据1. 异构体分离谱图2. 样品检测数据NO.目标化合物保留时间(min)理论塔板数(USP)拖尾因子(USP)分离度(USP)1Fmoc- L - allo-lle-OH 17.945477661.08-2Fmoc- D- allo-lle-OH 19.038487401.073.25结论根据实验谱图和检测数据，选用YMC CHIRAL ART Cellulose-SC, 250*4.6mm, 5um, P/N: KSC99S05-2546WT色谱柱对N-芴甲氧羰基-D/L-别异亮氨酸化合物进行反相色谱分离实验，分离效果满足需求。

摘要分析仪器对于评估产品质量和生物药产品开发过程控制至关重要，它在制药行业中应用于各种应用，如与产品质量相关的研究，如单克隆抗体中的糖基分析和细胞培养基中氨基酸和代谢物浓度。尽管液相质谱（LC-MS）具有灵活应用解决复杂问题的能力，但其实验开发通常比其他分析方法耗时更多。最近，如908 Devices的REBEL等新型分析设备采用了操作简化用户友好的方法，以替代传统劳动密集型LC-MS。REBEL是一种能够快速定量氨基酸和其他重要代谢物，实现全面分析和高通量样本测试的仪器，而我们的目的是比较这一代分析平台（908 Devices的REBEL）与经典LC-ToF MS方法，并评估数据质量。引言生物制药公司越来越关注培养基成分的理解和产品的质量，为了提高生产效率，他们必须面对的是耗时的传统方法。细胞系开发和优化是过程策略的重要组成部分。传统上，使用液相质谱（LC-MS）进行培养基营养和代谢组学研究，这需要高度的技术专长，且耗时较长。然而，优化实验需要对生物反应器参数的实时监测、过程分析和产品质量属性的结果来支持。908 Devices的全自动培养基组分分析仪系统，即REBEL，作为一种新型分析仪器，因其快速分析和简单操作而受到生物制药行业的广泛关注。本文介绍REBEL替代传统LC-MS方法，在生物反应器培养基监测方面的最新进展。REBEL进行培养基分析的主要优势包括无需衍生化即可分析、快速的分析时间和简单的操作。然而，由于该仪器是市场新秀，其分析技术描述尚不充分。因此，我们采用Waters的非衍生化和正相色谱方法，使用BioAccord RDa飞行时间（ToF）LC-MS进行培养基分析的比较。我们的目标是展示REBEL和RDa培养基分析结果的可比性，并探讨两种分析仪器方法的成本效益。此外，我们将在实验室中建立这两种分析方法，以便在未来代谢研究中评估过程变化、补料策略及其对产品质量的影响，从而深化我们对关键过程参数及其对药物产品质量特性影响的理解。结果与讨论图1. 生物反应器1（顶部）和2（底部）的68到227小时的氨基酸浓度趋势，pH 设定在7.1。样品由Waters BioAccord RDa LC-MS（蓝色）和REBEL培养基分析仪（红色）进行分析。图2. 生物反应器3（顶部）和4（底部）的68到227小时的氨基酸浓度趋势，pH设定在 7.3。样品由Waters BioAccord RDa LC-MS（蓝色）和REBEL培养基分析仪（红色）进行分析。表1：REBEL和LC-MS之间的比较，其中+代表所需的技术专业知识或需要的数量。我们能够成功地使用REBEL和BioAccord RDa LC-MS上的初步方法运行所有样品，从而在UNIFI上创建一种处理方法，以在我们的RDa LC-质谱分析中从标准校准曲线中识别、质量确认和量化所有氨基酸。Rebel导出了所有氨基酸的计算浓度，并创建了手动数据透视表来说明左侧显示的结果。生物反应器复制品1和2在pH 7.1设定值下运行，并在整个培养物中显示出相似的氨基酸趋势（图1）。类似地，生物反应器复制品3和4在pH 7.3设定值下运行时相互共享趋势（图2）。生物反应器1-4的氨基酸趋势以蓝色表示用于BioAccord RDa LC-MS分析，以红色表示用于REBEL分析。REBEL和RDa LC-MS数据显示所有反应器的氨基酸趋势相当。对于样品制备，与RDa LC-MS的1:500相比，REBEL方法的样品稀释比例为1:100，这表明RDa LC-MS的灵敏度至少是REBEL的五倍。然而，我们可以看到，RDa LC-MS中204和227小时氨基酸浓度的较晚时间点远高于REBEL。这很可能是因为这些值是在标准曲线之外发现的，因此，外推浓度会导致计算误差。REBEL只能分析33种分析物，包括22种氨基酸、5种维生素和6种生物胺，其中RDa是Tof LC-MS，可以分析这些和其他未知的分析物。表1列出了REBEL与传统LC-MS的比较，其中REBEL易于使用，不需要太多时间或精力来操作，但牺牲了在其范围之外进行分析的能力，并且相比于TOF质谱灵敏度略低。传统的LC-MS方法可以以更好的灵敏度进行专门优化，但这需要更高水平的技术技能。REBEL为自动化分析提供了包罗万象的试剂盒，但每个样本的试剂盒分析成本远高于LC-MS方法所需的材料。总体而言，REBEL在其分析范围内以更高的运行成本/表现相对较好，但其易用性和快速分析是推进实时过程优化的主要优势。材料与方法我们从Sartorius的AMBR250生物反应器（VRC01 CHO细胞培养）中采集每日样本，进行了一次10天的批次实验。重复的生物反应器1和2的pH为7.1，生物反应器3和4的pH为7.3，其余保持一致。样本经过处理和过滤，用于分析细胞培养基反应液的游离氨基酸浓度。REBEL的培养基分析试剂盒（908 Devices）提供了BGE溶液和稀释液，还有预制好的标准品。样品用稀释液稀释100倍。所有的浓度数据以.csv文件形式输出。而BioAccord RDa（Waters）的LC-MS方法是基于Waters的应用指南调整的，以适应Accuilty Patrols作为LC系统的特定设置。氨基酸细胞培养标准品（Waters）根据说明书新鲜制备，每个氨基酸的6点校准曲线为5uM-0.5uM，除了2.5uM-0.25uM的胱氨酸。新鲜制备样品，并用0.1%甲酸以1:500稀释。用UNIFI（Waters）处理获得的LC-MS数据，以创建标准曲线，识别和量化氨基酸浓度。所有样品（REBEL和BioAccord RDa）均进行三次重复。结论我们的初步RDa LC-MS方法表明，REBEL细胞培养基分析仪收集的数据与CHO细胞培养生物反应器具有可比性。目前，基于REBEL的实验结果，我们正在优化RDa LC-MS方法，使用8点校准曲线（范围0.1-30uM），以捕捉所有氨基酸浓度。一旦使用最终确定的RDa LC-MS方法对所有样本进行分析，将进行进一步的方法比较和统计分析。我们将评估零假设的方法，即用REBEL进行的测量与用RDa LC-MS进行的测量不同，然后寻找基于数据的证据，证明测量是相同的。如果数据支持否定零假设，那么我们可以得出结论，这些仪器在每次比较的代谢物测量中都具有同等的性能。未来的研究将进一步测试REBEL评估代谢对产品质量影响的能力，例如温度变化对代谢产物利用的影响及其对微生物反应器中聚糖谱的影响。由于细胞代谢可以在代谢产物的利用和浓度方面产生共线性，我们将使用多变量数据分析（MVDA）来评估细胞代谢及其对聚糖谱的影响。REBEL的易用性和快速分析的优势允许更大的样本通量，同时保留与传统LC-MS方法相似的数据质量，以快速推进我们对关键质量属性的影响的理解，从而提高关键工艺参数的理解。

2024年6月19-21日，“第二十二届世界制药原料中国展”（CPHI China 2024）将继续携手“第十七届世界制药机械、包装设备与材料中国展”（PMEC China 2024），以3,500余家国内外展商、21万平方米超大展示面积再度亮相上海新国际博览中心。展会将继续深耕制药产业链，聚合产业上下游能量。秉承以加快我国医药工业质量变革、效率变革和动力变革为己任，不断助力中国医药企业加速融入全球医药创新链、产业链、供应链，为构建国内国际双循环相互促进的新发展格局提供有力支撑。欢迎莅临汉尧展位W5D16此次展会，上海汉尧作为行业内专业的实验室仪器、设备及消耗品综合服务商将携通用仪器与设备（白小白洗瓶机，氮气发生器，卡尔费休水分测定仪及电位滴定仪，RMS监测系统）、合成反应与制备纯化设备（Advion Interchim Scientific品牌puriflash XS 520和expression® CMS，伊睦EFNT合成工作站）、生物相关产品（908devices，GETINGE，gelomics）、多样的液相色谱耗材（如YMC色谱柱，埃赛力达（原“贺利氏特种光源“）氘灯、空心阴极灯等特种光源，色谱先生鬼峰捕集小柱，DWK试剂瓶，管线接头组件，单向阀及汉尧其他配件和耗材等）亮相现场，诚邀您莅临现场，欢度这场制药人的盛宴！下期我们将详细为您介绍本次展会将展出展品，敬请关注。

Fmoc-L-异亮氨酸是一种Nα-9-芴甲氧羰基-氨基酸。9-芴甲氧羰基是肽合成中的一个重要氨基保护基。因为它是碱敏感保护基，且对脱去常用保护基采用条件是稳定的，因此它在多肽合成中有其独到作用。上海汉尧实验室（上海星瀚耀生物医药科技有限公司）选用YMC CHIRAL ART Cellulose–SC, 250*4.6mm，5um，P/N: KSC99S05-2546WT色谱柱对Fmoc-DL-异亮氨酸化合物进行分离实验，检测分离效果满足需求。样品信息中文名：Fmoc-D-异亮氨酸中文名：Fmoc-L-异亮氨酸英文名：Fmoc-D-Ile-OH英文名：Fmoc-L-Ile-OHCAS:   143688-83-9CAS:   71989-23-6色谱条件色谱柱：YMC CHIRAL ART Cellulose-SC, 250*4.6mm，5um，P/N: KSC99S05-2546WT;流动相A：0.1%TFA流动相B：ACN检测波长：254nm;柱  温：35℃;流  速：1.2ml/min进样浓度：1.0mg/ml稀释剂：50%ACN进样量：10μL运行时间：30min洗脱梯度：T(min)MP-A%MP-B%0.0703025.0455525.1703030.07030实验谱图和数据样品检测谱图检测数据

对于许多适应症，细胞疗法是一种越来越可行的治疗选择，尤其是对于已经用尽传统治疗方法的患者。大量的临床活动和几种自体、患者特异性疗法的批准增加了行业需求，也突显了生产工作流程中的瓶颈。必须解决这些瓶颈，以提高生产效率、安全性以及及时向患者交付。在自体环境中，每个患者的健康状况和人口统计数据转化为一个独特的细胞群体，这给随后的细胞治疗生产过程带来了可变性。因为存在这种可变性，这意味着过程控制在确保药品一致性方面的重要性。一个重点领域是过程分析技术（PAT），这对于在整个生产过程和QC检测中提供关键质量属性（CQA）信息至关重要。实时过程反馈对于加强过程监控以确保生产成功至关重要，但关键过程反馈往往因检测时间过长而延迟。在最近的一次美国基因+细胞治疗学会（ASGCT）在线会议上，Bristol Myers Squibb的Rich Rogers概述了基于质谱的过程分析策略，以支持细胞治疗过程的开发和优化。Rogers概述了PAT的分析需求和仪器要求，以及基于MS的PAT如何有望成为一种强大的技术，以克服当前分析工具所面临的许多挑战。CAR-T疗法的属性监测Rogers首先概述了BMS用于开发其基于自体慢病毒的CAR-T平台的平台。在生产自体CAR-T疗法时，这一过程始于使用白血病细胞采集患者的细胞。一旦收获了单核细胞，在细胞疗法可以重新应用到患者体内之前，需要采取许多步骤来分离、激活、改造和扩增T细胞。目前，BMS使用PAT来监测细胞增殖（即活率、细胞密度），并在每个阶段使用流式细胞法来进行T细胞和杂质分析（即污染细胞类型的存在）。虽然这些工具的数据是足够的，但有机会对细胞健康和代谢状态进行更深入的监测还是有必要的，因为这很可能会影响最终产品的疗效。实施PAT的可能性是无限的，适用于生产过程的各个方面。PAT可用于确定工艺杠杆，以确保产品的一致性，并提高上游（即温度、pH、葡萄糖、氨基酸、细胞活率和代谢物）和下游（即工艺相关杂质）的生产成功率，以及量化最终产品中的CQA（即纯度、效力、安全性和CAR频率）。Rogers概述了使仪器适用于过程PAT的一些关键功能：•仪器占地面积：生产洁净间通常空间有限，因此需要考虑仪器尺寸•资本投资：与研发仪器不同的成本考虑•生物测定的数量：可以进行多属性测试的仪器是首选•低体积样品要求：尤其是在生产过程中，通常无法采集大体积样品进行过程中检测•运行分析的时间：从采样到得到数据的时间应该很快；检测时间对于提供相关过程反馈至关重要•技术专业知识要求低：操作过程中仪表所需的培训应较低，且无需专家参与•数据速度：尽可能短/接近实时，对生产过程产生最大效益基于质谱的PAT策略Rogers详细介绍了BMS为过程分析开发的基于MS的非目标和目标PAT策略。MS是一种公认的技术，用于在单克隆抗体等大分子治疗中生成稳健且可重复的数据。然而，将这一策略应用于涉及数千种蛋白质的细胞治疗会带来需要解决的障碍。一个障碍是作为CAR-T疗法基础的细胞的复杂性。大分子治疗只需要纯化单克隆抗体，而细胞治疗可能需要考虑数千种蛋白质。因此，传统的大分子MAM（Multiple Attribute Methodology）方法不能直接应用于细胞治疗。基于蛋白质组学的PATRogers还描述了BMS使用的基于MS的细胞表面蛋白质组学方案，该方案在整个生产阶段对T细胞进行非靶向细胞表面分析。细胞表面蛋白用生物素标记，然后进行细胞裂解、标记的链霉亲和素富集、酶促消化和MS分析。这种非靶向方法是有利的，因为它不需要特异性靶向细胞表面蛋白的试剂（与流式细胞法方法不同），这提供了T细胞表面蛋白组成的无偏见的全局视图。过程残留和分泌蛋白监测是另一个正在开发多属性靶向蛋白质组学方法来取代ELISA的领域，ELISA受到开发靶向特异性检测试剂的需要的限制。这种MS方法是高度敏感的，因此允许同时对数百个蛋白质靶标进行多重定量。从色谱分离、片段化和Orbitrap MS分析中选择靶向肽，提供了过程残留物和T细胞分泌蛋白的定量检测。在总结这些蛋白质组学方法时，Rogers评论道，虽然他们对结果的准确性感到鼓舞，但这种方法仍需要努力，以满足他在演讲早些时候概述的PAT要求。MS仪器占地面积大，成本高，人员培训广泛，需要提高数据传输速度，以便在生产运行期间实时向实验人员提供及时的信息。基于靶向代谢组学的PAT在演讲的后半部分，Rogers使用REBEL分析仪（908 Devices）专注于基于代谢组学的靶向PAT。该台式设备通过采集来自生物反应器的培养基反应液来对T细胞进行在线代谢分析。细胞分泌和代谢产物分析可以提供关于细胞健康和效力的有价值的信息。BMS计划在过程开发的每个阶段利用REBEL分析仪来实施代谢组学的研究。这包括慢病毒载体的组建以及T细胞增殖过程本身，其中REBEL分析仪已被用于提供关于T细胞健康和代谢状态的有价值的信息。REBEL分析仪满足PAT的所有要求：•占地面积小（微波炉大小），成本合理•同时监测30多种分析物•只需要10μl样品体积•移液技能是唯一的技术要求•所需培训最少•检测时间快-大约~7分钟/样本•快速获取数据：集成软件执行分析并自动生成报告，该报告可以导出为与LIMS、PIMS兼容的CSV或PDF文件在方法和仪器评估过程中，使用REBEL对同一生物反应器运行的三个单独样品进行5次重复，以证明高重复再现性，如下图1所示。在结束演讲时，Rogers强调了PAT对提高细胞疗法的工艺理解和生产成功的重要性。对PAT和创新技术的投资正在推动当前方法的通量和准确性极限，Rogers表示，他认为基于MS的方法在靶向和非靶向蛋白质组学和代谢组学表征方面都有很大的机会。在整个细胞治疗制造过程中提供对T细胞的广谱、全局评估。在研讨会的下一次演讲中，908 Devices的产品经理Kerin Gregory分享了如何使用REBEL分析仪通过对细胞培养基（即氨基酸、维生素、生物胺）的快速成分检测来实现及时和有用的过程分析。细胞培养基为离体培养的细胞提供关键营养，并对细胞生长、生产力和后续治疗的功能有直接影响。深入的培养基分析可以帮助深入了解营养的消耗，以促进培养基优化工作，从而提高CQA。营养成分分析和培养基优化特别是对于病毒载体的生产，满足临床和商业目标的需求需要提高病毒滴度。因为克隆差异会影响宿主细胞（即HEK293）的代谢，培养基/反应液成分分析可以更好地了解宿主细胞的需求，并为优化培养基以提高病毒滴度提供了机会。虽然市场上有许多商业培养基配方，但相对浓度和组成成分可能差异很大，如下图2所示，这些不同的培养基选择可能对病毒载体的滴度和完整性产生重要影响。REBEL也可用于监测所选配方中的批次差异，以确保一致性和重复性。此外，研究表明，T细胞培养基需要几种关键氨基酸来调节体外激活和扩增，它们在CAR-T细胞的代谢准备状态和引入体内肿瘤微环境后的抗肿瘤功效中发挥作用。这强调了细胞培养基成分对细胞生长、代谢和生产力的深远影响。血清置换Gregory补充道，由于两个原因，细胞治疗行业已经从含血清的培养基配方转向无血清：1）血清存在批次间的差异；2）除了在临床应用中的免疫原性风险之外，血清还具有潜在的被外来成分污染的风险。化学限定培养基（CDM）的开发代表了一个领域，在这个领域，REBEL可以用来表征成分，用于培养基的的配方工作。REBEL的动态范围为5-100μM，可准确检测低浓度的氨基酸和其他营养物质。与其他定量方法不同，分析不受血清蛋白存在的影响。

5月16至5月18日，第二十三届中国生物制品大会（CBioPC2024）在广州举办。各级政府部门、监管机构、行业协会、国内外生物医药领域与科研院所的专家学者、企业代表共8000余人出席会议。上海汉尧携908 Devices、GETINGE品牌产品亮相，展示了新的产品和服务，并与各方深入交流。此次大会为参与者提供了一个良好的平台，旨在推动生物医药领域的技术创新与合作发展，而上海汉尧则借此机会寻求更广泛的合作机会，共同推动行业的持续进步。展品介绍Applikon Biobundle是一个完整的生物反应器系统，配备了所有必要的组件，可以做到“开箱即用”。该系统包含完整的硅胶管、样品瓶和“入门工具包”所包含备件。针对细胞培养和微生物发酵均有相应的配置解决方案，该装置易于安装、学习和操作。

908 Devices是用于化学和生化分析的专用手持式和台式设备的先驱，与医疗技术公司 Terumo Blood and Cell Technologies （Terumo BCT） 宣布合作，对 Terumo BCT 的 Quantum Flex 中的关键工艺参数进行在线监测细胞扩增系统。两家公司的自动化技术的结合将通过提供对细胞疗法研发和生产中最大组成部分之一的监测和控制，帮助推进挽救生命的细胞和基因疗法的开发。细胞和基因治疗研发人员越来越多地寻求自动化来提高制造效率、简化工作流程并降低成本。但如今的质量控制要求研发人员在洁净室里花费数小时执行手动操作，且操作过程中不出现错误或污染，而不是仅在出现问题时才做出响应。908 Devices 正在将其在线葡萄糖和乳酸分析仪 MAVEN（图1） 引入 Terumo BCT 的 Quantum Flex，为细胞和基因治疗开发客户提供在线监测和控制细胞培养物中关键工艺参数的能力，而无需进入洁净室并执行手动采样。这有助于降低污染风险，节省操作员时间并提高他们对过程的理解。MAVEN能在线监测生物反应器中葡萄糖和乳酸的浓度，采用透析膜和生物（酶）传感器的技术原理，其中选择性透析膜在确保罐内无菌环境与非严格无菌的运输缓冲液体系不交叉的情况下实现只透过葡萄糖和乳酸小分子，通过缓冲液的运输到达测量单元，达到不采样分析的效果。而另一个技术核心，测量单元，使用的生物（酶）传感器对分析物具有高度特异性，低浓度下依旧可以保持有效的测量精度。图1：Maven“我们很自豪能与领先的细胞治疗技术创新者合作，以满足生物制药工艺集成的next level，”908 Devices首席执行官兼联合创始人Kevin J. Knopp说，“我们致力于提供设备，使科学家能够获得降低成本和加速进展的见解。”Terumo Blood and Cell Technologies是一家致力于医疗技术产品服务的公司，专注于血液成分、治疗性单采与细胞治疗技术领域的全球综合方案提供商，拥有QUANTUM FLEX细胞扩增系统、FINIA 灌装和完成系统、TSCD -Q无菌接管机等细胞治疗自动化生产设备。Terumo BCT 的 Quantum Flex 细胞扩增系统（图2）是一种紧凑且自动化的系统，旨在满足细胞治疗开发人员从工艺开发到临床生产的整个商业化过程的需求。Quantum Flex 有助于降低污染风险，并实现可重复性和可扩展的工艺规模。它与一系列悬浮细胞、贴壁细胞、病毒载体和外泌体相容。图2：Quantum Flex 细胞扩增系统Terumo BCT 细胞治疗技术全球商业主管 Kathie Schneider 表示：“将我们的 Quantum Flex 平台与 908 Devices 的在线监测相结合，将帮助细胞基因治疗减少耗时的手动步骤，从而减少生产成本和风险。我们将继续与行业专家合作，进一步提高我们的整体解决方案，以解决行业挑战。”

上海汉尧实验室（上海星瀚耀生物医药科技有限公司）选用YMC-PFP（4.6×250mm，5μm), P/N: TPF12S05-2546PTH色谱柱对邻甲基苯酰基氯、间甲基苯酰基氯、对甲基苯酰基氯三种化合物进行分离实验，检测分离效果是否满足需求。方法来源：实验室自研                                      色谱条件色谱柱：YMC- PFP （4.6×250mm，5μm), P/N: TPF12S05-2546PTH;流动相: 流动相A: 0.1% TFA,             流动相B: 甲醇;洗脱梯度：T(min)A%B%08020508020检测波长：230 nm; 柱温：45℃;流速：2.0mL/min;进样浓度： 0.5mg/ml;稀释剂：甲醇;进样量：5μL;运行时间：40min。谱图和数据1. 样品检测谱图2. 样品检测数据NO.峰名称保留时间(min)拖尾因子分离度USP1邻甲基苯酰基氯38.3341.05-2间甲基苯酰基氯40.8641.052.043对甲基苯酰基氯43.2111.051.78结论选用YMC- PFP （4.6×250mm，5μm), P/N: TPF12S05-2546PTH；对邻、间、对甲基苯酰基氯进行分离，分离度满足检测需要。

　  为进一步提升实验室安全管理能力和风险防范水平，增强实验人员安全意识，提高面对实验过程中突发情况的应急处理能力，2024年5月11日上海汉尧实验室（上海星瀚耀生物医药科技有限公司）开展为期一天的实验室安全检查、培训和演练活动。 此次培训活动特邀实验室安全培训讲师屈文军主讲，屈文军老师对重点实验室现场采取“边检查、边讲解”、“边发现安全隐患、边提供整改方案”等一对一的实验室安全辅导。针对实验室安全检查过程中发现的安全隐患，进行归类汇总，帮助实验室安全管理人员、安全员等熟悉本实验室安全隐患现状和分布，提升相关人员实验室安全隐患识别能力，进一步统一相关人员在实验室安全隐患判别标准上的认识。对于我们做的比较好的方面，屈老师也给予肯定和表扬，让实验室有了优秀学习案例。在培训理论会上，屈文军老师首先向大家介绍了实验室安全事故典型案例，让大家深刻认识到学习安全知识、增强安全意识、掌握安全技能的重要性。随后，通过演示与互动，向大家展示了实验室安全防护用品正确选型与穿脱。理论课程结束后，公司进行了消防演练，实验室和办公室人员都积极参与，熟悉安全出口，疏散逃生路线，屈老师带大家学习灭火器使用及灭火技巧，现场每位同事都体验了不同灭火器的使用。为提高培训演练效果，让在场每位人员听得懂、看得清、学得会和有参与感，屈老师安排实验人员进行化学品意外泄露应急演练，一边讲解一边示范，指导如何应对实验意外的发生，体验防护品的穿脱和应急喷淋洗眼装置的使用，让实验人员有机会近距离参与，感受全过程。经过一天的理论和实操培训，系统的学习实验室安全知识及应急演练，使大家了解了化学安全事件应急处置流程，熟悉了实验室安全事件处置技术要求，掌握实验室的灭火技能，进一步提升了实验室人员的安全责任意识，规范了实验安全行为，深化了对安全知识的理解，提高了现场应急处置能力，为实验室工作的安全和顺利开展提供有力保障。

约90%通过临床前模型评估的药物在进入人体试验后却失败了，究其原因，传统的模型很难真实地模拟人体的生理结构和功能，导致药物安全性、有效性及毒性评估的准确度大大降低。器官芯片（OoC，Organ-on-a-Chip）技术作为一种先进的体外模拟人体器官功能的技术，是适用于生物医学研究的微型生理模型工具，可用于单个器官和多个器官的病理生理学研究，此外美国FDA现代化法案2.0规定，除了动物实验外，器官芯片和微生理系统等5种方法也可用于IND申报。这意味着利用该技术，研究人员可以更快地筛选出更有效的候选药物进入临床试验。在过去的二十年里，尽管OoC技术不断发展，但人体是一个高度复杂的有机体，由各个器官组成，OoC在重现体内微环境和结构方面仍然存在挑战。除了器官细胞的培养需要从2D转变成3D，为进一步增强OoC的生理相关性，多细胞球体（例如，肿瘤球体和类器官）的培养也是必要的。但是传统  OoC  制造涉及使用  PDMS  软光刻，使用基于  PDMS  的设备可能并不适合毒理学和药物筛选研究，且这种方法一方面不方便修改，缺乏在动态细胞培养上的适应性，另一方面制造周期也很长，降低了其可制造性。本项研究旨在开发一种高度适应性的  OoC  制造系统 ，可根据感兴趣的组织模型的要求，采用灵活的设计快速制造  OoC。该系统是通过使用两个主要组件：(1)  可定制的微流体室和  (2)  数字光掩模显示器。立体光刻技术被用来光图案水凝胶，直接在腔室中用于制造内部微流体通道架构。微流体室的可定制性使我们能够控制微流体室的关键参数OoC，包括入口和出口的数量、高度、形状和室的尺寸。我们的方法使用了通过Xurography定制的预定义微流体室和由数字光掩模光图案化的充满细胞的微流体通道；从设计到原型的整个周期在两小时内完成。我们方法的多功能性为OoC的制造提供了以前无法实现的关键特征，包括微通道高度的逐渐变化，以及通道设计的实时修改以捕获活组织（例如，球状体）。动态光掩模  OoC  制造系统示意图： (A)  (i) 聚合物盖玻片的组装和Xurography  后使用双面胶带（紫色）形成预定义的微流体室；  (ii) 将由可光交联的水凝胶LunaGelTM（澳大利亚Gelomics公司）组成的前体溶液（橙色）注入微流体室； (iii)  使用数字光掩模对腔室中的微流体通道进行光图案化；(iv)  从微流体室中排出未固化的前体，微流体芯片形成；(v) 通过连接由激光切割  PMMA  制成的介质储存器来设置灌注系统（绿色）用于重力驱动灌注或硅胶管（蓝色）用于泵辅助灌注。(B) 该示意图显示了红色发光二极管（LED）、预定义的微流控室、液晶显示器（LCD）、xy级和显微镜光刻仪器的位置。(C) 光测量仪器上的掩模对齐模式示意图，其中(1)红色LED用于照亮预定义的微流控腔室的边界，(2)可视化和 (3) 在xy级的帮助下将数字光掩模与腔室对齐。(D) 光交联模式示意图，其中(1)蓝色LED被重新定位以取代显微镜的位置，(2)开启前驱体溶液的光交联。(E) 照片显示了所开发的光度测量仪器的整体结构。 (F) 突出显示微流控室精确定位的微调阶段（棕色）。(G) 突出显示蓝色  LED（蓝色）和显微镜（粉色）在  LCD  下方的位置。(H) 显示了光测量仪器的控制盒，其中控制按钮和操纵杆的位置。文章总结：本文介绍了  OoC  的优点和目前涉及的一些限制发展的问题，为了解决这些限制，我们开发了一个高度动态的系统，该系统可以满足特定器官组织微环境的各种设计要求，同时将设计到原型的周期保持在两小时内。在这项工作中，我们使用内部的  OoC 光交联仪器由改良的液晶显示屏  (LCD)  组成，可正常作为数字光掩模显示器。数字光掩模显示器允许实时观察  OoC 制造，实时修改光掩模以适应形状和尺寸的变化，活体组织（例如，球体和类器官）被捕获在装置中。通过这个系统，我们开发了用于制造  OoC  的简单工作流程，具有以下主要功能：(1)  轻松定制微流控芯片架构（即入口和出口设计、装置高度和内部通道架构）以缩短设计到原型周期；（2）在  OoC  期间修改通道设计，以适应不同形状和尺寸的活组织。我们展示了成功使用我们的系统制造  OoC  上的组织内皮化，其中功能性内皮屏障在充满细胞的水凝胶周围进行了演示。我们开发的系统将有助于加速创新 更多与生理相关的  OoC  设备，以满足科学界和制药业两个领域对  OoC  技术不断增长的需求。Gelomics水凝胶的介绍Gelomics公司坐落于澳大利亚，在生物材料供应方面有自然条件、技术、质量、环保和安全性等方面的优势。经过多年的研发，gelomics提供了即用型、批间稳定的无需“冰上操作”的产品方案LunaGelTM——一款甲基丙烯酸化明胶水凝胶，具有光敏性和温敏性，可通过光照调节胶体硬度，可应用于3D细胞培养、类器官、生物打印、动物实验、血管生成、细胞侵袭等。以实惠的价格提供高质量产品服务，助力生物医学的研究和发展。文献来源： https://doi.org/10.1101/2023.11.22.568385

由中国疫苗行业协会、中华预防医学会生物制品分会、中国医药生物技术协会疫苗专业委员会、中国微生物学会生物制品专业委员会共同主办的“第二十三届中国生物制品大会(CBioPC)”于2024年5月16日-18日在广州召开，上海汉尧应邀参会，携带GETINGE和908 Devices品牌亮相S17展位，欢迎莅临交流。展品介绍908 Devices是用于化学和生物分子分析的微流控芯片的先驱，于2022年收购德国酶膜传感器专家Trace公司，新增了产品线，对生物反应器中葡萄糖和乳酸浓度进行实时在线监测并辅助反馈补料整个过程不损耗样品体积。Applikon Biobundle 是一个完整的生物反应器系统，配备了所有必要的组件，可以做到“开箱即用”。该系统包含完整的硅胶管、样品瓶和“入门工具包”所包含备件。针对细胞培养和微生物发酵均有相应的配置解决方案，该装置易于安装、学习和操作。

由中国生化制药工业协会多肽分会承办的“2024中国多肽药物创新大会”于2024年4月19-20日在成都顺利举办。大会打造以产业为支撑，多学科交叉融合、创新驱动发展的交流合作模式，为我国多肽创新药物的发展出谋划策。上海汉尧仪器设备有限公司一直专注于为中国的生物制药/食品/化工实验室行业用户提供高品质的产品和技术服务，受邀参加本次大会，携带多样的液相色谱耗材，如YMC色谱柱，埃赛力达（原“贺利氏特种光源“）氘灯、空心阴极灯等特种光源，色谱先生鬼峰捕集小柱，DWK试剂瓶，管线接头组件，单向阀及汉尧其他配件和耗材等一系列产品亮相此次盛会。展品介绍Advion成立于1993年，总部位于美国纽约；Interchim成立于1970年，总部位于法国蒙吕松。2019年，合并成立Advion Interchim Scientific。AIS致力于分离鉴定、纯化制备技术的开发应用，Interchim puriFlash®纯化制备系统实现智能纯化，多种检测方式可供选择，色谱柱齐全，性能优越。Advion expression® CMS有机质谱系统拥有独特的专利技术，兼顾灵活性、易用性、可靠性，可快速准确提供高质量数据。白小白实验室清洗机采用低压高循环喷淋方式对实验室的各类玻璃、塑料或橡胶材质器皿进行全流程的自动化清洗，可针对不同清洗需求，优化六大清洗要素，通过定制化的精准清洗流程实现器皿的ppb分析级洁净度，集清洗、消毒、烘干、检测、存放功能于一体，解放双手，便捷高效。ELGA拥有80多年研发纯水系统方面的经验，是水纯化系统工程、服务和支持方面的专家。致力于研究、产品和解决方案创新设计，并与先进实验室仪器公司密切合作，针对具体应用定制和开发水纯化系统。UPLC / HPLC 配件及耗材全覆盖

近日，由南京江北新区生命健康产业发展管理办公室、中国微生物学会指导，华东理工大学、生物经纬、佰傲谷BioValley等主办的2024第二届合成生物学产业博览会（SBC2024）在南京扬子江国际会议中心圆满落幕。展品介绍Applikon Biobundle 是一个完整的生物反应器系统，配备了所有必要的组件，可以做到“开箱即用”。该系统包含完整的硅胶管、样品瓶和“入门工具包”所包含备件。针对细胞培养和微生物发酵均有相应的配置解决方案，该装置易于安装、学习和操作。908 Devices是用于化学和生物分子分析的微流控芯片的先驱，于2022年收购德国知名酶膜传感器专家Trace公司，新增了产品线，对生物反应器中葡萄糖和乳酸浓度进行实时在线监测并辅助反馈补料整个过程不损耗样品体积。随着2024第二届合成生物学产业博览会的圆满结束，我们有理由相信，合成生物学的未来将更加光明，上海汉尧将继续努力，为人类的健康和可持续发展贡献更多力量。