酱油中黄曲霉毒素B1的测定解决方案

• 黄曲霉毒素B1免疫亲和柱3ml-20支/盒，300ng（货号：HC-QHZ-0001）

• 甲醇（Merck，色谱纯）、乙腈（Merck，色谱纯）、超纯水

1. 取50mL离心管，称取5g酱油待测样品

2. 样品中加入乙腈定容至25mL ，涡旋震荡10min，离心机4000rpm离心5min

3. 移取上清液2mL至新的50mL离心管，加入 AFB1 标准品5ng ，混匀

4. 用PBS溶液定容至25mL，混匀，备用

1. 免疫亲和柱在室温下，回温半小时，将步骤4中25mL溶液加入免疫亲和柱。注：免疫亲和柱中原PBS溶液不用提前排出
   

2. 样液全部通过免疫亲和柱后，加入10mL超纯水淋洗

3. 淋洗液全部通过免疫亲和柱后，压入2-3mL气体，排干残留溶液

4. 向免疫亲和柱中加入1mL甲醇洗脱目标物至5mL离心管

5. 洗脱完成后压入2-3mL气体，全部排出洗脱液，涡旋震荡混匀

6. 洗脱液过0.22μm滤膜后直接上机检测

• 色谱柱：C18（柱长100mm，柱内径：2.1mm；填料粒径1.7μm）

• 流速：0.300mL/min

• 流动相：A相：5mmol/L乙酸铵溶液；B相：甲醇：乙腈=1:1

• 柱温：40℃

• 进样体积：10μL

• 梯度洗脱：32%B(0min~0.5min)，45%B(3min~4min)，100% B(4.2min~4.8min)

• 32%B(5.0min~7.0min)

配制浓度为1.0ng/mL、2.0ng/mL、5.0ng/mL、10.0ng/mL的标准溶液，按照上述样品制备步骤进行前处理后，经GC/MSMS上机分析，得到黄曲霉毒素B1的工作曲线。

图3 黄曲霉毒素B1标准曲线

本文参考GB5009.22-2016《食品中黄曲霉毒素B族和G族的测定》，采用免疫亲和柱净化，高效液相色谱质谱检测，建立了酱油样品基质中黄曲霉毒素B1高灵敏度的前处理和分析方法，得到黄曲霉毒素B1的加标回收率在94.39%-101.07%之间，RSD值小于5%，可满足快速、准确的检测需求。

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全自动液体处理工作站

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全自动样品净化浓缩仪

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