2020/03/17 11:52
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产品配置单:
流式颗粒成像分析系统FlowCam®8100
型号: FlowCam®8100
产地: 美国
品牌: FlowCam
¥70万 - 100万
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颗粒成像法+光阻法分析系统 FlowCam® + LO
型号: FlowCam + LO
产地: 美国
品牌: FlowCam
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纳米流式颗粒成像分析系统 FlowCam® Nano
型号: FlowCam® Nano
产地: 美国
品牌: FlowCam
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方案详情:
FlowCam具备高灵敏度,高质量的颗粒图像,精确的浓度检测和直测粒径等性能,从一次实验结果中就能够获得“颗粒有多少”,“颗粒有多大”,“颗粒是什么”等信息。
目的:研究建立抗程序性死亡受体配体 1(programmed cell death protein ligand 1,PD-L1)单抗的质量控制方法。
方法:利用成像毛细管等电聚焦电泳(imaging capillary isoelectric focusing electrophoresis,iCIEF)、肽图对抗 PD-L1 单抗进行鉴别;利用还原 / 非还原十二烷基磺酸钠毛细管电泳 (capillary electrophoresis-sodium dodecyl sulfonate,CE-SDS)、分子排阻高效液相色谱(size exclusion-high performance liquid chromatography,SEC-HPLC)、离子交换高效液相色谱(ion exchange-high performance liquid chromatography,IEC-HPLC)对抗 PD-L1 单抗的纯度进行控制;利用细胞结合抑制法和转基因细胞法测定抗 PD-L1 单抗的活性;利用光阻法和液流成像分析法对不溶性微粒进行检测和分析。
结果:抗 PD-L1 单抗的 iCIEF 检测结果具有特征性主峰,肽图检测具有相应特征峰,起到很好的鉴别作用。还原 CE-SDS 的轻链与重链峰面积之和的百分比为(98.37±0.21)%,非还原 CE-SDS 主峰峰面积百分比为(96.33±0.15)%;SEC-HPLC 单体的峰面积百分比为(99.43±0.02)%;IEC-HPLC 酸性区峰面积百分比、主峰峰面积百分比、碱性区峰面积百分比分别为(13.63±0.40)%、(80.00±0.36)%、(6.37±0.15)%。细胞结合抑制法与转基因细胞法的活性检测均呈现剂量反应曲线,反映抗 PD-L1 单抗剂量依赖性地阻断程序性死亡受体 1(programmed cell death protein 1,PD-1)与 PD-L1 的结合及后续的生物学效应。光阻法检测≥ 10 μm 及≥ 25 μm 的不溶性微粒数分别为(1.33±0.58)粒·mL -1 和(0.00±0.00)粒·mL -1 ;液流成像分析法检测 2~10 μm、≥ 10 μm及≥ 25 μm 的微粒数分别为(1 243.67±242)粒·mL -1 、(45.67±16.07)粒·mL -1 和(10.00±5.00)粒·mL -1 ,其中,蛋白聚体占 87.45%,非蛋白聚体占 12.55%。
图 1 抗 PD-L1 单抗参比品(A)与样品(B)的 iCIEF 代表图谱
图 2 抗 PD-L1 单抗参比品(A)与样品(B)的肽图代表图谱
讨论:研究建立了抗 PD-L1 单抗的多种质控方法,为国内抗 PD-L1 单抗的质量检测提供了参考依据。
郭莎,王开芹等,抗 PD-L1 单抗的质量控制研究,药物分析杂志,2019,39(1):13-22
Fluid Imaging Technologies(FlowCam)公司成立于1999年美国缅因州斯卡伯勒市,其研发并生产的FlowCam系列仪器是将流式细胞法组合到数字成像显微镜中,基于图像分析法的流式动态成像颗粒分析仪,它使颗粒分析变得更快,更简单。具有革新意义的FlowCam系列仪器被广泛应用于研发和质量控制,应用涉及全球多个领域。
流式颗粒成像分析系统FlowCam®8000系列具有以下优点。
1.测量粒度和颗粒形状-对每个颗粒成像后都可以获得30多种形态学测量结果。
2.快速提供具有统计意义的结果-用户可在过程种观察到每分钟数以万计的颗粒。
3.提供卓越的成像质量和基于成像法的测量参数-可以看到快速和准确的,可由定量数据证明的检测测量结果。
4.自动化的,可建模的,具有统计学意义的 - 基于自动识别统计软件 - 可将不同的颗粒进行分门别类,从而节省时间。
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