ICP-AES
硒是人体生命活动中必需的微量元素之一,近年来受到人们的广泛关注。它具有使人体抗衰老、预防癌变、保护与修复营养细胞、解毒排毒、提高免疫力等多种生理功能。缺硒会引起克山病、大骨节病及免疫功能障碍等多种疾病。
硒对人体的重要性已十分明确, 有研究表明人体内硒水平的高低和生物活性不仅取决于摄入的总硒量,还与硒的化学形态密切相关。有机形态的硒,如硒蛋白、硒代氨基酸、硒多肽、硒多糖等,在机体内才能转变为生理活性物质,为人体所吸收利用。
目前,国内外有关富硒农产品与食品的研究并不多见,对有益硒形态的检测与分析更是涉及甚少,但是有关补硒的保健品不少,盲目宣传效果,导致消费者难以识别产品优劣。
因此开展对富硒农产品中有益硒形态分析技术研究十分必要,帮助人们合理明智的选择健康的富硒产品, 评价其营养价值,探索科学补硒,保障人体健康具有重要的现实意义。
近年来随着检测联用技术的发展,高效液相色谱-电感耦合等离子体质谱(HPLC-ICP-MS)联用技术因其分离能力强、灵敏度高、分析速度快等优点被广泛应用于硒形态研究,PerkinElmer公司也在此领域进行了大米中硒形态检测的实验。
1、样品前处理方法:
将大米样品仔细研磨,过100目筛。准确称取1g左右样品于15mL离心管中,加入2mg/mL的蛋白酶K溶液10mL,于37℃下超声提取5小时,然后以6000 r/ min 离心5 min,取上清液,过0.22μm滤膜后上机测定。同时做酶解空白。
2、仪器:
PerkinElmer HPLC; NexION 350 ICP-MS;碰撞反应气:高纯甲烷。
3、四种常见硒形态色谱标准图谱:
注:依次为硒代胱氨酸,亚硒酸,硒代蛋氨酸,硒酸
4、经酶解后,富硒大米中硒形态色谱图:
注:图中亚硒酸和硒酸来自蛋白酶带来的本底
5、富硒大米中硒形态结果:
样品名称 | 硒代胱氨酸(μg/kg) | 亚硒酸(μg/kg) | 硒代蛋氨酸(μg/kg) | 硒酸(μg/kg) | 硒形态总量(μg/kg) | 总硒含量(μg/kg) | 提取率 |
大米结果-1 | 12.6 | ND* | 67.6 | ND | 81.6 | 91.1 | 89.6% |
大米结果-2 | 12.5 | ND | 70.5 | ND | |||
大米平均含量 | 12.6 | ND | 69.1 | ND |
注:ND代表扣除酶本底后样品中亚硒酸和硒酸含量低于检出限
6、结论及展望
本研究采用HPLC-ICP-MS联用技术测定了大米中硒含量,并分析了硒在大米中主要的赋存形态。结果表明,该富硒大米中的总硒含量为91.1μg/kg,达到40μg/kg~300μg/kg的富硒标准(GB/T 22499-2008 富硒稻谷),而且硒主要以有机硒形态存在。
未来的研究一方面会集中于多种硒形态含量检测方法的完善和开发,另一方面针对不同硒形态的生理学功能的研究。
[来源:珀金埃尔默企业管理(上海)有限公司]
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