将计算清晰度与宽场显微镜的速度、荧光信号灵敏度和易用性相结合，实时解码三维生物学*。    为了帮助您回答重要的科学问题，THUNDER技术消除了使用基于相机的荧光显微镜观察厚样品时产生的焦外模糊现象。THUNDER技术采用了我们全新的光电数字技术--Computational Clearing。因此，可以对多种三维样品（包括模式生物、组织切片和三维细胞培养物）进行高速、高质量成像。请看这些图片，了解THUNDER技术是如何帮助研究人员揭示样品深处最精细的结构细节的。当您看到THUNDER技术实现的无雾图像质量后，请访问我们的产品页面了解更多信息。了解THUNDER技术如何将Computational Clearing与宽场显微镜的速度、荧光信号灵敏度和易用性相结合，从而实时解码三维生物学*。（*符合 ISO/IEC 2382:2015 标准）小鼠--THUNDER技术模式生物成像  在这只 E12-14 小鼠（wt 样本）中，神经丝被染成红色，以评估神经元的生长情况。该小鼠未进行清除。法国 IGBMC 图像中心 Yves Lutz 提供。类器官--THUNDER技术-模式生物成像  直径约 150 µm 的类器官，安装在凹陷载玻片上。使用高分辨率物镜（FluoCombi III）通过THUNDER技术模型生物成像。图片由瑞士徕卡显微系统公司的 Heinrich Bürgers 拍摄。果蝇大脑THUNDER技术- 3D活细胞成像果蝇大脑视频。瑞士伯尔尼细胞生物学研究所 Rohan Chippalkatti 提供。蜜蜂腿 - THUNDER技术-模式生物成像  蜜蜂的腿。图片由德国徕卡显微系统公司的 André Quinkertz 博士拍摄。浮游动物 - THUNDER技术  副纤毛虫是一种单细胞纤毛微生物，常见于池塘等死水中。图片由新加坡徕卡显微系统公司的 Adam Cliffe 拍摄。小鼠肾脏切片 - THUNDER技术-3D组织成像小鼠肾脏切片，含 Alexa Fluor™ 488 WGA、Alexa Fluor™ 568 磷脂色素和 DAPI。样品为美国马萨诸塞州沃尔瑟姆市赛默飞世尔科技公司生产的 FluoCells™ 制备的 3 号载玻片。小鼠肾脏切片 - THUNDER技术-3D组织成像  小鼠肾脏切片，含 Alexa Fluor™ 488 WGA、Alexa Fluor™ 568 磷脂色素和 DAPI。样品为美国马萨诸塞州沃尔瑟姆市赛默飞世尔科技公司生产的 FluoCells™ 制备的 3 号载玻片。平滑肌 - THUNDER技术-模式生物成像  小鼠肺部 300 微米切片中血管周围的平滑肌。1x 物镜。德国吉森大学 Mario Boehm 博士提供原代培养，大鼠THUNDER Imager 3D 细胞培养仪  大鼠原代细胞培养物；Cy5（品红色）：β-III微管蛋白；Rhod（红色）：NG2蛋白，GFP（绿色）：Nestin蛋白；DAPI（蓝色）：细胞核。图片由美国徕卡显微系统公司的 Louise Bertrand 拍摄。小鼠肾脏切片 - THUNDER技术-3D组织成像  小鼠肾脏切片，含 Alexa Fluor™ 488 WGA、Alexa Fluor™ 568 磷脂色素和 DAPI。样品为美国马萨诸塞州沃尔瑟姆市赛默飞世尔科技公司生产的 FluoCells™ 制备的 3 号载玻片。斑马鱼心脏 - THUNDER技术组织成像  斑马鱼心脏，DAPI（细胞核，蓝色）、肌球蛋白（心肌细胞，红色）和 GFP（原始心脏层，绿色）。瑞士弗里堡大学 Anna Jazwinska 提供。斑马鱼胚胎 - THUNDER技术-模式生物成像斑马鱼胚胎 6 dpf，HPCs 稳定表达 mCherry，VEC 稳定表达 GFP。由中国闽南师范大学薛宇博士提供。C2C12 细胞THUNDER Imager 3D活细胞和3D细胞培养仪  C2C12 细胞生长并迁移到 transwell 膜的两侧，然后用层粘蛋白 B（品红色）染色以显示核结构，用 Hoechst（蓝色）染色以显示 DNA，用 γH2AX（黄色）染色以显示 DNA 损伤。使用THUNDER技术3D活细胞和 63X/1.4 油浸物镜对细胞进行成像。上面的图像是 17.47 微米厚 Z 叠的扩展景深投影。左图为原始外荧光数据，右图为经过 LVCC 处理的THUNDER图像。图片由美国加州大学戴维斯分校生物科学院神经生物学、生理学和行为系 Lucas Smith 博士提供。病毒标记神经元 - THUNDER技术-模式生物成像  病毒标记的神经元（红色）和星形胶质细胞（绿色）在人诱导多能干细胞衍生的皮质球体内。THUNDER技术模式生物配有 3.4 倍变焦的 2x 0.15 NA 物镜，用于生成这张 425 µm Z 堆栈（26 个位置），在此作为扩展景深 (EDoF) 投影展示。图片由美国加利福尼亚州 Sergiu Pasca 博士实验室的 Fikri Birey 博士提供。转基因果蝇眼睛感光器THUNDER技术-3D细胞培养转基因果蝇的眼部感光器，其横纹肌上有 EGFP 标记，受犀牛蛋白 1 启动子（ninaE-EGFP）控制。美国加利福尼亚州南旧金山基因泰克公司 Navid Nouri 提供。耳蜗细胞 - THUNDER技术-3D组织成像  孵化后第 7 天的鸡耳蜗细胞。80 微米振镜切片，肌球蛋白 7a - 感觉毛细胞，Sox2 - 支持细胞。图片由美国加利福尼亚州 Amanda Janesick 提供。神经肌肉接头 - THUNDER技术-3D组织成像  通过免疫染色神经丝蛋白和β-Bungarotoxin观察神经肌肉接头。图片由美国加利福尼亚州的 Andrea Yung 提供。海葵息肉（Exaiptasia pallida）THUNDER技术模式生物  海葵息肉（Exaiptasia pallida）在THUNDER技术模式生物下的 RFP 和 GFP 荧光通道。海葵的胃皮细胞中寄生着双鞭毛藻，由于其叶绿素自发荧光，在 RFP 通道中可以看到这些双鞭毛藻。海葵本身在口腔周围和一些触手周围显示绿色荧光带。图片由美国加利福尼亚州 Christian Renicke 提供。小鼠肺 - THUNDER技术组织成像  小鼠肺部，用 FITC、Cy3、Alexa 633 染色，使用 20 倍物镜和扩展景深 (EDOF) 拍摄。图片由美国加利福尼亚州 Ross Metzger 提供。显示淀粉样斑块的海马体THUNDER Imager 3D 细胞培养仪  小鼠海马的纵向脑切片，显示淀粉样蛋白斑块（绿色，用 6E10 抗体染色，抗β淀粉样蛋白标记物；蓝色，DAPI(绿色，用 6E10 抗体染色，抗-β淀粉样蛋白的标记物），周围是小胶质细胞/小噬细胞（红色，用抗-Abi1 抗体染色；蓝色，DAPI）。左图--原始数据与扩展景深投影；右图--大体积Computational Clearing Z 叠加扩展景深投影。图片由美国加利福尼亚州 Mehrdad Shamloo 教授提供。神经嵴（NC）胚胎细胞群THUNDER Imager 3D 细胞培养仪  上图是使用THUNDER技术 3D 细胞培养器，使用 1.3 NA 40x plan apo oil 物镜拍摄的。上图为原始宽场数据。下图是应用徕卡专有的小体积Computational Clearing (SVCC) 技术去除焦外模糊并更好地显示样本内部潜在结构后的结果。图片由美国加利福尼亚州帕萨迪纳市加州理工学院布朗纳实验室 Michael Piacentino 提供。成年小鼠卵巢THUNDER技术 3D 细胞培养仪将成年小鼠卵巢固定并用抗-NOBOX 染色，然后用改良 3DISCO 清除。将卵巢放入一个自制的孔中，孔底铺上盖玻片，然后在THUNDER 3D细胞培养成像系统上用 10X/0.32 物镜进行成像。视频显示了合并的 4 层马赛克、586µm 厚的 Z 叠的三维投影，即原始外荧光图像和 LVCC 后的THUNDER处理图像。视频由美国加州大学旧金山分校 Diana Laird 和 Bikem Soygur 博士提供C.elegans - THUNDER技术模式生物  该菌株MAH215（Chang等人，Elife，2017）是一种双荧光mCherry::GFP::LGG-1蛋白，通过可视化自噬体（APs）以及自溶酶体（ALs）来监测秀丽隐杆线虫的自噬通量。绿色点状物（GFP）是自噬体，而自噬体在酸性环境中会淬灭 GFP，只发出 mCherry 信号。图片由美国宾夕法尼亚州匹兹堡大学 Aditi U. Gurkar 博士提供肾脏切片 - THUNDER技术 3D 组织成像  肾脏，用 DAPI、WGA-FITC 和 Phalloidin-568 染色。z=20微米。图片由德国巴特诺海姆马克斯-普朗克心肺研究所 Kerstin Troidl 博士提供视网膜切片 - THUNDER技术 3D 组织成像  视网膜切片，PECAM-488、AF-555 染色。z=30微米。图片由德国巴特诺海姆马克斯-普朗克心肺研究所 Kerstin Wilhelm 博士提供心脏切片 - THUNDER技术 3D 组织成像  心脏切片 - THUNDER Imager 3D 组织。用 DAPI、αSMA-FITC 和 Vimentin-Cy3 染色的心脏切片。z=40µm。图片由德国巴特诺海姆马克斯-普朗克心肺研究所 André Schneider 博士提供肝脏切片 - THUNDER技术-3D 组织成像  用 DAPI、SERVA、CD31-594 染色的肝脏切片。z=70µm。图片由德国巴特诺海姆马克斯-普朗克心肺研究所 Remy Bonnavion 博士提供脑切片 - THUNDER技术-3D 组织成像  用 DAPI、αGFAP-AF647 染色的脑切片。z=100µm。图片由德国巴特诺海姆马克斯-普朗克心肺研究所 Hong Xu 博士提供小鼠视网膜 - THUNDER技术-3D细胞培养  固定小鼠视网膜并用以下试剂染色：抗 CD31 抗体（绿色）：内皮细胞，IsoB4（红色）：小胶质细胞抗 GFAP 抗体（蓝色）：星形胶质细胞样本由美国南旧金山基因泰克公司杰里米-伯顿（Jeremy Burton）博士和 Jiyeon Lee 博士提供。成像者：Olga Davydenko 博士（徕卡公司）小鼠主动脉 - THUNDER技术-3D组织成像  红线--弹性层，绿色和红色--血管细胞，蓝色--DAPI，图片由美国加利福尼亚州 Ying Wang 提供红线--弹性层，绿色和红色--血管细胞，蓝色--DAPI，用 LAS X 3D Viewer 显示。图片由美国加利福尼亚州 Ying Wang 提供纤维 - THUNDER技术-3D细胞培养  纤维被荧光素标记。目的是研究动态和孔隙。55 幅图像的 Z 叠（130 微米）。图片由美国德克萨斯州休斯顿莱斯大学生物工程系 Mollie Smoak 提供小鼠晶状体切片THUNDER技术-3D细胞培养  本幻灯片是小鼠成人晶状体横切面，显示纤维晶状体细胞组织（绿色，用抗β-catenin 抗体（BDB610153）染色，这是一种膜蛋白）和 Afadin（红色，用抗Afadin（PA1-25076）染色，这是一种肌动蛋白丝结合蛋白，蓝色，Hoechst）。图片由美国俄亥俄州立大学 Plagemen 实验室 Nathalie Houssin 博士提供人肝祖细胞 (HPC)THUNDER技术-3D组织成像人肝祖细胞（HPC）在器官组织肝细胞中的扩增和分化。使用 HC PL Fluotar 40x/0.60 物镜拍摄的 Z 叠片总厚度为 85µm，共 123 个 Z 步。DAPI（白色）：细胞核。Alexa488™（绿色）：上皮细胞粘附分子（EpCAM）。PerCP-Cy5.5（红色）：信号转换器 CD24。PE（蓝色）：原蛋白-1（CD133）。样本由英国诺丁汉大学 E131 Andy Bennett 实验室 Fatima Abukunna 博士提供。小鼠肺 - THUNDER技术-3D细胞培养为研究 I 型肺泡上皮细胞（AT1）生物学而染色的小鼠肺组织。黄色表示 AT1 细胞系痕迹（GFP），洋红色表示前糖化终产物受体（RAGE），青色表示水肿素 5（AQP5），灰色表示细胞核（DAPI）。图片由美国加利福尼亚州 Yana Kazadaeva 提供。果蝇卵泡 - THUNDER技术-3D细胞培养果蝇蓇葖果在THUNDER技术 3D 细胞培养上用 63X/1.4 油浸物镜成像。上面的视频是 27.5 微米厚的 Z 叠的三维最大投影。视频显示了原始外荧光数据和经过 LVCC 处理的THUNDER技术图像。图片由美国加州大学伯克利分校 Mark Khoury 和 David Bilder 提供盐水虾腿 - THUNDER技术-3D细胞培养  使用 Rhod、GFP 和 DAPI 滤光片采集的自发荧光。使用 DMi8、HC PL APO 63x/1.40 Oil Objective 和 DFC9000 GT 摄像机采集图像。图像大小为 2048 x 2048 像素，274 个 Z 截面。图像由美国徕卡显微系统公司的 Louise Bertrand 拍摄。相关产品      THUNDER Imager Model Organism全自动宏观显微成像系统     THUNDER Imager Tissue全景组织显微成像系统                                                                                                    关于徕卡显微系统徕卡显微系统的历史最早可追溯到19世纪，作为德国著名的光学制造企业，徕卡显微成像系统拥有170余年显微镜生产历史，逐步发展成为显微成像系统行业的领先的厂商之一。徕卡显微成像系统一贯注重产品研发和最新技术应用，并保证产品质量一直走在显微镜制造行业的前列。徕卡显微系统始终与科学界保持密切联系，不断推出为客户度身定制的显微解决方案。徕卡显微成像系统主要分为三个业务部门：生命科学与研究显微、工业显微与手术显微部门。徕卡在欧洲、亚洲与北美有7大产品研发中心与6大生产基地，在二十多个国家设有销售及服务分支机构，总部位于德国维兹拉(Wetzlar)。               

                                                               关于徕卡显微系统徕卡显微系统的历史最早可追溯到19世纪，作为德国著名的光学制造企业，徕卡显微成像系统拥有170余年显微镜生产历史，逐步发展成为显微成像系统行业的领先的厂商之一。徕卡显微成像系统一贯注重产品研发和最新技术应用，并保证产品质量一直走在显微镜制造行业的前列。徕卡显微系统始终与科学界保持密切联系，不断推出为客户度身定制的显微解决方案。徕卡显微成像系统主要分为三个业务部门：生命科学与研究显微、工业显微与手术显微部门。徕卡在欧洲、亚洲与北美有7大产品研发中心与6大生产基地，在二十多个国家设有销售及服务分支机构，总部位于德国维兹拉(Wetzlar)。                 

 亲眼看看 M530 OHX 手术显微镜如何帮助可视化不同的结构、纹理和颜色，用于治疗蛛网膜囊肿          Marcos Devanir S. Costa医生是巴西圣保罗联邦大学的神经外科医生。他治疗了一名 18 岁患者，患有 Galassi III 型蛛网膜囊肿，导致多次失去意识。这个病例研究“使用来自徕卡显微镜系统的 M530 OHX 手术显微镜治疗 Galassi III 型蛛网膜囊肿”逐步记录了手术过程，并展示了每个阶段的可视化质量，包括文档中链接的图片和视频。    案例研究概述初始患者表现术前评估治疗决策和外科手术术后评估和影像M530 OHX 手术显微镜对 Galassi III 型蛛网膜囊肿治疗的影响扫码注册以下载案例研究*仅供医疗专业人士下载    英文版相关产品     Leica M530 OHX 神经外科手术显微镜     PROvido 5&8                        点击此处申请样机试用                                                                    关于徕卡显微系统徕卡显微系统的历史最早可追溯到19世纪，作为德国著名的光学制造企业，徕卡显微成像系统拥有170余年显微镜生产历史，逐步发展成为显微成像系统行业的领先的厂商之一。徕卡显微成像系统一贯注重产品研发和最新技术应用，并保证产品质量一直走在显微镜制造行业的前列。徕卡显微系统始终与科学界保持密切联系，不断推出为客户度身定制的显微解决方案。徕卡显微成像系统主要分为三个业务部门：生命科学与研究显微、工业显微与手术显微部门。徕卡在欧洲、亚洲与北美有7大产品研发中心与6大生产基地，在二十多个国家设有销售及服务分支机构，总部位于德国维兹拉(Wetzlar)。             

*来自徕卡显微系统合作伙伴南京顺凌科技有限公司应用工程师周婧的投稿  类器官是目前热门研究领域，它来源于原始组织（患者或动物），与细胞球相比，更能准确地代表其原始组织的结构和代谢；相较于小鼠模型，具有更低成本、并保持生理相关性，能更好地进行3D研究。2022年类器官和类器官芯片被FDA现代化法案2.0批准为临床前动物试验的替代品，展现了非常大的研究前景，近几年越来越多的研究者将类器官作为研究模型。  研究者培养类器官需要每天观察并拍照，了解初始类器官数量、增值速度、形态、微生物污染情况等。但是类器官观察拍照并不容易，相比2D细胞，具有天然的形态复杂性，尺寸较大，有些厚度，需要延时成像，给目前显微镜观察带来很大挑战。类器官技术的鼻祖Hans Clevers，发表在2009年Nature上的世界上第一张成体干细胞来源的类器官图片，是由徕卡显微镜拍摄的。徕卡显微镜不断地技术升级和更新产品，近年推出的MICA智能全场景成像系统，在拍摄类器官上更具优势：    一体化孵育系统：封闭并精准控制的环境舱，无污染风险，短期和长期活细胞观察的稳定培养环境，原位检测类器官生理状态。宽场高分辨率：专利的THUNDER技术去除宽场成像的非焦面模糊信号，XY轴最高136nm分辨率。快速观察生长状态：可无标记成像；可四色同时成像，专利的Floursync光谱拆分技术，快速低光毒性，在活细胞延时成像和3D成像时更具优势。自动对焦锁焦：闭环对焦软件+AFC硬件，保持无焦面漂移。简单智能：一键找样本、一键找焦面、一键优化成像设置，一键切换宽场和共聚焦、水镜自动加水等，人工智能分析图像。高效：从样本到图像仅需10min，更高质量图片助力发高分文章。MICA类器官多模式成像从快速预览，一键切换到高分辨模式类器官成像效果：低倍明场观察类器官生长状态  高倍荧光观察类器官内部结构  MICA共聚焦成像：  样本来源：小鼠肠道类器官来自江苏省人民医院 张慧文类器官拍摄三步走：01样本放入MICA，软件上定义样本后，over view自动找样本和大概焦面。    02自动精细找焦，选择成像模式和质量等级，one touch自动优化。    03设置time T-stack或3D Z-stack或拼图后，点击start拍摄。    相关产品     MICA全场景显微成像分析平台                    点击此处申请样机试用                                                              关于徕卡显微系统徕卡显微系统的历史最早可追溯到19世纪，作为德国著名的光学制造企业，徕卡显微成像系统拥有170余年显微镜生产历史，逐步发展成为显微成像系统行业的领先的厂商之一。徕卡显微成像系统一贯注重产品研发和最新技术应用，并保证产品质量一直走在显微镜制造行业的前列。徕卡显微系统始终与科学界保持密切联系，不断推出为客户度身定制的显微解决方案。徕卡显微成像系统主要分为三个业务部门：生命科学与研究显微、工业显微与手术显微部门。徕卡在欧洲、亚洲与北美有7大产品研发中心与6大生产基地，在二十多个国家设有销售及服务分支机构，总部位于德国维兹拉(Wetzlar)。              

 从高维到低维：Aivia带你轻松驾驭3种数据降维技术数据降维大揭秘：UMAP、t-SNE与PacMAP的终极对决                降维示例          左右滑动查看更多          降维将数据从高维空间转换到低维空间，以简化数据解释。  在Aivia中的应用：通过选择不同的测量方法，帮助用户为不同类别实现清晰的决策边界，这些测量方法可以用于不同的聚类技术。Aivia中的三种降维方法：UMAP – 比t-SNE更快PacMAP – 比UMAP更快，并且更好地保留高维数据的局部和全局结构t-SNE – 保留局部结构关于参数和不同使用示例的详细技术说明，请参见Aivia Wiki。UMAPUMAP（统一流形近似与投影）是一种现代降维技术，主要用于高维数据集的可视化。它的用途与t-SNE相似，但通常速度更快且能够处理更大的数据集。UMAP基于保持数据的拓扑结构的原则，通过利用黎曼几何和代数拓扑来近似数据的底层流形。通过捕捉局部和全局结构，它提供了数据簇和关系的全面视图。UMAP的两个主要步骤        步骤1创建一个高维图。这是一个加权图，其中一个点与其最近的邻居相连。                         降维UMAP图与图例1           降维UMAP图与图例2          降维UMAP图与图例（参数快速探索）3          左右滑动查看更多              步骤2创建一个尽可能类似于高维图的低维或二维图，生成UMAP 1和UMAP 2参数。  1深入了解UMAP理论UMAP的核心工作原理与t-SNE非常相似——两者都使用图布局算法在低维空间中排列数据。UMAP构建数据的高维图表示，然后优化一个低维图，使其在结构上尽可能相似。UMAP通过基于每个点的第n个最近邻的距离来局部选择半径，从而确保局部结构与全局结构的平衡。2如何（误）解读UMAP虽然UMAP相较于t-SNE有许多优势，但它绝不是万能的——解读和理解其结果需要一定的谨慎。需要注意以下几点：超参数非常重要：选择合适的值取决于数据和你的目标。 UMAP图中的簇大小毫无意义：簇之间的相对大小基本上没有意义。簇之间的距离可能毫无意义：尽管UMAP在全局位置上更好地保留了簇的位置，但它们之间的距离并不具有意义。随机噪声不总是看起来随机：特别是在n_neighbors值较低时，可能会观察到虚假的聚类。你可能需要不止一张图：由于UMAP算法是随机的，不同的运行可能产生不同的结果。    优点    保留局部和全局结构：UMAP捕捉数据中的非线性关系，适用于处理复杂数据集。速度和可扩展性：UMAP在计算上更高效，适合处理大数据集。参数调优：UMAP提供了参数调优的灵活性，允许用户在保留局部和全局结构之间进行权衡。    缺点    可解释性：UMAP嵌入可能不如一些其他方法（如PCA）那样具有可解释性。对超参数的敏感性：UMAP的性能可能对超参数选择敏感，找到合适的参数可能需要进行实验。在高维空间中的局限性：UMAP在非常高维的空间中可能表现不佳。计算资源需求：对于极其庞大的数据集,UMAP仍然可能需要大量的计算资源。  图2:对Fashion MNIST数据集应用降维。10类服装物品的28x28图像被编码为784维向量，然后通过UMATt-SNE投影到3维。t-SNE（t-随机邻域嵌入）t-SNE（t-随机邻域嵌入）是一种流行的降维方法，用于高维数据的可视化。t-SNE通过保留数据的局部结构来工作，通常会导致簇的清晰分离。与专注于最大化方差的PCA（主成分分析）不同，t-SNE强调在降维空间中保持相似的距离接近，不相似的距离远离。然而，由于其对局部结构的强调，它有时会夸大簇，并不总是能保留数据的全局结构。此方法计算量大，尤其是对于大型数据集。     优点     1局部结构的保留t-SNE在保留数据的局部结构方面表现出色，使其在识别相似数据点的聚类时非常有效。2灵活性与某些线性方法（如PCA）不同，它可以有效处理非线性数据结构。3可视化特别适用于将高维数据可视化为二维或三维。     缺点     1计算强度该算法在处理大型数据集时可能会非常耗费计算资源。2随机性由于算法的随机性，最终的可视化结果在不同运行之间可能会有所不同，这可能导致不一致性。3超参数敏感性结果可能对困惑度（perplexity）的选择非常敏感。4可解释性t-SNE图中聚类之间的距离并不总是具有有意义的解释。该算法优先保留局部结构而非全局结构。t-SNE可视化中的数据点密度不一定代表原始高维空间中的密度。5仅适用于可视性虽然在可视化方面表现出色，但t-SNE嵌入可能并不总是适合作为其他机器学习算法的输入。PaCMAP（成对控制流形近似）PaCMAP（成对控制流形近似）是一种降维技术，作为t-SNE和UMAP等方法的替代方案被引入。该方法旨在平衡数据中局部和全局结构的保留，解决其他技术中观察到的一些挑战。它引入了成对吸引和排斥项，以在流形学习过程中控制平衡，并以其速度和处理大数据集的能力而著称，同时能够生成可解释的嵌入。     优点     1混合方法PacMAP结合了局部和全局结构保留的优点，旨在从t-SNE（局部）和PCA（全局）等方法中捕捉两者的最佳特性。PacMAP旨在结合t-SNE（局部结构保留）和UMAP/PCA（全局结构保留）的优势。2局部和全局结构保留的灵活性该方法可以根据数据的性质和用户的目标，调整以强调局部或全局结构。3减少拥挤问题该方法旨在缓解t-SNE中常见的“拥挤问题”，这种问题会导致簇被推得过远。4减少随机性与t-SNE的随机性相比，PacMAP在多次运行中提供了更一致的结果。虽然有参数需要调整，但该方法设计得比t-SNE对参数变化更具鲁棒性。     缺点     1复杂性和熟悉度作为一种混合方法，PacMAP可能对熟悉简单、单一目标方法的用户来说更难理解。一些数据分析社区可能对PacMAP不太熟悉，导致在采用或解释时可能面临挑战。由于其较新，可能没有像t-SNE或PCA等长期存在的方法在各种应用中经过广泛验证。2参数敏感性尽管设计得对参数变化更具鲁棒性，但结果仍可能因参数选择而异。根据数据的不同，如果调整不当，可能会有过度强调局部或全局结构的风险。3可解释性与其他降维技术一样，解释降维后的维度仍然可能是不直观的。Aivia赋能数据驱动的空间洞察降维工具大解析  快来申请Aivia14试用吧！  更有免费软件Aivia community等你来探索！                   Aivia14新产品发布会参考文献：1. Becht E, McInnes L, Healy J, Dutertre CA, Kwok IW, Ng LG, Ginhoux F, Newell EW. Dimensionality reduction for visualizing single-cell data using UMAP. Nature biotechnology. 2019 Jan;37(1):38-44.2. Wang Y, Huang H, Rudin C, Shaposhnik Y. Understanding how dimension reduction tools work: an empirical approach to deciphering t-SNE, UMAP, TriMAP, and PaCMAP for data visualization. The Journal of Machine Learning Research. 2021 Jan 1;22(1):9129-201.3. Van der Maaten L, Hinton G. Visualizing data using t-SNE. Journal of machine learning research. 2008 Nov 1;9(11).4. McInnes L, Healy J, Melville J. Umap: Uniform manifold approximation and projection for dimension reduction. arXiv preprint arXiv:1802.03426. 2018 Feb 9.                                                        关于徕卡显微系统徕卡显微系统的历史最早可追溯到19世纪，作为德国著名的光学制造企业，徕卡显微成像系统拥有170余年显微镜生产历史，逐步发展成为显微成像系统行业的领先的厂商之一。徕卡显微成像系统一贯注重产品研发和最新技术应用，并保证产品质量一直走在显微镜制造行业的前列。徕卡显微系统始终与科学界保持密切联系，不断推出为客户度身定制的显微解决方案。徕卡显微成像系统主要分为三个业务部门：生命科学与研究显微、工业显微与手术显微部门。徕卡在欧洲、亚洲与北美有7大产品研发中心与6大生产基地，在二十多个国家设有销售及服务分支机构，总部位于德国维兹拉(Wetzlar)。  

 第十二届半导体设备与核心部件展示会    第十二届（2024年）半导体设备与核心部件展示会（下简称：“CSEAC 2024”），将于2024年9月25日至27日在无锡太湖国际博览中心举办。大会遵循“专业化、高水平、产业化”的办会宗旨，设大型展览、专业论坛、新品发布、对接会等活动，将为行业呈现一场“内容多、看点多、实效多”的盛会。作为设备领域的专业会议，以“设备担重任，创芯闯征程”为主题的CSEAC正当其时。CSEAC 2024 搭建展会平台，助力半导体企业市场拓展与产品推广，促进技术交流、经贸合作，为“中国芯”进程发展注入活力和动力。届时，徕卡显微系统将携带DM8000M产品亮相本次会议，欢迎各位莅临展台参观。            Let's go本届大会，规模空前    CSEAC作为我国半导体行业专注“设备与核心部件”领域的展示会，集企业展示、论坛交流、权威发布于一体，为众多半导体设备/部件企业展示新产品、新发展景象提供良好展示平台，受到与会嘉宾和参展商高度好评。五大展区:规划6个展馆→覆盖晶圆制造设备、核心部件及耗材、封测设备等1000+企事业单位展览面积达60000m2→参展单位、展览面积创历届新高，企业参会热情高涨，数量持续增长中预计吸引行业观众10W+人次→多场同期活动举行，规模盛大，会展集聚效应充分展现会议时间2024年9月25日至27日会议地点无锡太湖国际博览中心徕卡展位展位号：A1-C徕卡展台上将为您演示高端显微镜产品 DM8000                                  左右滑动查看更多          相关产品     DM8000M              点击此处申请样机试用                                                              关于徕卡显微系统徕卡显微系统的历史最早可追溯到19世纪，作为德国著名的光学制造企业，徕卡显微成像系统拥有170余年显微镜生产历史，逐步发展成为显微成像系统行业的领先的厂商之一。徕卡显微成像系统一贯注重产品研发和最新技术应用，并保证产品质量一直走在显微镜制造行业的前列。徕卡显微系统始终与科学界保持密切联系，不断推出为客户度身定制的显微解决方案。徕卡显微成像系统主要分为三个业务部门：生命科学与研究显微、工业显微与手术显微部门。徕卡在欧洲、亚洲与北美有7大产品研发中心与6大生产基地，在二十多个国家设有销售及服务分支机构，总部位于德国维兹拉(Wetzlar)。          

 研究健康和疾病中小胶质细胞表型的新型人脑类器官模型      小胶质细胞是特化的脑驻留免疫细胞，在大脑发育、平衡和疾病中发挥着至关重要的作用。然而，到目前为止，模拟人脑环境与小胶质细胞之间相互作用的能力还非常有限。    关于网络研讨会主要内容     新颖的类器官模型如何使研究进入历史上难以研究的领域不同类型的功能性人类小胶质细胞表型及其对大脑健康的影响模拟人脑环境与小胶质细胞之间相互作用的技术    研究生理和病理条件下的人类小胶质细胞功能表型西蒙-T.-舍费尔教授的研究重点是推进基于干细胞的新型技术，以生成再现人脑结构和功能组织的三维（3D）模型。他的实验室利用这些技术推动人类特定大脑疾病的个性化研究，并确定促进大脑修复的策略。小胶质细胞是驻留在大脑中的特化免疫细胞，在大脑发育、平衡和疾病中发挥着许多关键作用，它们有助于预防阿尔茨海默氏症等疾病。然而，在错误的条件下，它们本身也有可能导致疾病，并与自闭症和精神分裂症等疾病有关。深入了解小胶质细胞在不同条件下的形态和行为，是发现它们在疾病中更多作用的关键。到目前为止，模拟人脑环境与小胶质细胞之间相互作用的能力还非常有限。不过，随着最近塔姆大学令人兴奋的研究成果的问世，这种情况正在发生改变。在这次网络研讨会上，西蒙将以专家的视角介绍一种新型类器官模型如何使他的研究小组能够研究生理和病理条件下的功能性人类小胶质细胞表型--这是为健康和疾病中依赖于人脑环境的小胶质细胞表型建模的下一个关键步骤。类器官技术的应用日益广泛，对生命科学研究产生了深远的影响，使模拟人脑与其微环境之间的相互作用成为可能，而这在以前是很难研究的。观看本网络研讨会，了解类器官模型在推动脑科学发展方面令人兴奋的可能性！    扫码立即观看网络研讨会      即将开始的活动：      相关产品      THUNDER成像系统 Live Cell 和 3D Assay 活细胞培养显微成像系统      STELLARIS 8 Dive多光子共聚焦显微镜           点击此处申请样机试用                                                                    关于徕卡显微系统徕卡显微系统的历史最早可追溯到19世纪，作为德国著名的光学制造企业，徕卡显微成像系统拥有170余年显微镜生产历史，逐步发展成为显微成像系统行业的领先的厂商之一。徕卡显微成像系统一贯注重产品研发和最新技术应用，并保证产品质量一直走在显微镜制造行业的前列。徕卡显微系统始终与科学界保持密切联系，不断推出为客户度身定制的显微解决方案。徕卡显微成像系统主要分为三个业务部门：生命科学与研究显微、工业显微与手术显微部门。徕卡在欧洲、亚洲与北美有7大产品研发中心与6大生产基地，在二十多个国家设有销售及服务分支机构，总部位于德国维兹拉(Wetzlar)。      

 长江流域五省（市）遗传学会2024年学术会议（7.31~8.3）                        左右滑动查看更多        2024年8月2日由湖北省遗传学会携手安徽省遗传学会、湖南省遗传学会、江西省遗传学会及重庆市遗传学会共同举办的“2024年度长江流域遗传学学术交流讨论会”在风景秀丽的湖北省恩施州圆满落下帷幕。此次盛会不仅是一场学术的盛宴，更是遗传学领域同仁间智慧碰撞、合作共进的桥梁。作为本次大会的赞助商之一，我们深感荣幸能够参与其中，共同见证并推动长江流域遗传学事业的蓬勃发展。7月31日，随着来自五省市的遗传学专家、学者及行业精英的陆续抵达，恩施州的山水间仿佛也弥漫着浓厚的学术氛围。大会的开幕式在庄严而热烈的氛围中拉开序幕，各位学会领导及嘉宾的致辞，不仅表达了对遗传学未来发展的美好憧憬，也强调了跨区域合作对于推动学科进步的重要意义。作为赞助商，我们深感责任重大，也更加坚定了支持遗传学研究与交流的决心。华科高分辨快速三维细胞成像系统Leica Thunder Imager培训讲座和上机                        左右滑动查看更多        华中科技大学是国家教育部直属重点综合性大学，是国家“211工程”重点建设和“985工程”建设高校之一，是首批“双一流”建设高校。该校建设有武汉光电国家研究中心、国家脉冲强磁场科学中心、精密重力测量国家重大科技基础设施、国家数字化设计与制造创新中心等“四颗明珠”为代表的一批国家重大科研基地。为了更为显著地提升徕卡显微成像系统在华中科技大学的影响力，武汉贝徕美生物科技有限公司于2024年7月19日，在华中科技大学光电国家研究中心精心组织并开展了一场关于Leica Thunder Imager的培训讲座以及上机实操培训活动。届时，众多老师踊跃参与了此次培训，并且使用了Leica Thunder 3D Assay进行成像操作。此次活动充分彰显了Leica Thunder在成像质量和成像速度方面所具备的显著优势。在成像质量上，Leica Thunder能够捕捉到极其细微的细节，让细胞结构、细胞器等清晰可见；在成像速度方面，它大幅缩短了成像所需的时间，提高了研究工作的效率。这些优势通过此次培训得到了直观而有力的展示，让参与的师生们深刻感受到了Leica Thunder显微成像系统的卓越性能。第五届中国生物传感、生物芯片与纳米生物技术高端论坛（8.17~8.19）                         左右滑动查看更多        8月19日第五届中国生物传感、生物芯片与纳米生物技术高端论坛在美丽的恩施州华龙城大酒店圆满落幕。作为本次论坛的重要赞助商之一，我们深感荣幸能与众多行业内的顶尖学者、专家以及企业界代表共聚一堂，共同探讨生物传感、生物芯片与纳米生物技术的最新进展和发展趋势。本次论坛围绕“前沿交叉技术，促进生命健康”主题，重点关注生物传感新原理新方法、器官芯片与微生理系统、纳米生物学与生物半导体技术等前沿热点，旨在构建一个高度活跃且具有学科交叉特色的科技交流平台，促进我国BBN领域技术的协同创新，推动产、学、研、用等多环节的紧密合作。回顾本次大会，我们为能够参与其中而感到自豪。未来我们也将继续致力于技术创新和服务优化，为推动生物传感、生物芯片与纳米生物技术的进步贡献力量。我们相信，通过不懈的努力和不断的探索，我们将迎来更多令人振奋的突破。在此，衷心感谢第五届中国生物传感、生物芯片与纳米生物技术高端论坛组委会为我们提供这样一个宝贵的交流机会，同时也感谢所有参会者给予的支持与鼓励。我们期待在未来的活动中再次相聚！                            关于徕卡显微系统徕卡显微系统的历史最早可追溯到19世纪，作为德国著名的光学制造企业，徕卡显微成像系统拥有170余年显微镜生产历史，逐步发展成为显微成像系统行业的领先的厂商之一。徕卡显微成像系统一贯注重产品研发和最新技术应用，并保证产品质量一直走在显微镜制造行业的前列。徕卡显微系统始终与科学界保持密切联系，不断推出为客户度身定制的显微解决方案。徕卡显微成像系统主要分为三个业务部门：生命科学与研究显微、工业显微与手术显微部门。徕卡在欧洲、亚洲与北美有7大产品研发中心与6大生产基地，在二十多个国家设有销售及服务分支机构，总部位于德国维兹拉(Wetzlar)。          

 如何利用AI优化 2D 细胞培养的转染效率测量    本文探讨了AI（AI）在优化 2D 细胞培养研究中转染效率测量中的关键作用。对于理解细胞机制而言，精确可靠的 2D 细胞培养转染效率测量至关重要。靶向蛋白的高转染效率对于包括活细胞成像和蛋白纯化在内的实验至关重要。手动估计存在不一致性和不可靠性。借助AI的力量，可以实现高效可靠的转染研究。01利用AI优化转染效率测量AI 算法的战略发展对于精确的转染效率测量至关重要。这些算法可以是预先训练的，具有先前的知识，也可以根据独特的实验条件进行定制训练。应考虑细胞形态、荧光强度和背景噪音等因素，以获得有关细胞动态的见解。02AI与手动评估讨论了展示AI在转染效率测量方面的有效性的案例。使用 Mateo FL 显微镜测量了转染效率。与手动估算相比，AI提高了测量精度并简化了工作流程。03对上游工作流程的影响除了优化转染效率测量外，AI还有助于简化蛋白质纯化、分离和提取、显微镜成像以及流式细胞术的上游工作流程。例如，AI算法可以根据数据预测蛋白质纯化的最佳条件，减少错误。在成像方面，AI实现了图像的自动化分析，加快了有意义信息的提取速度。  U2OS 细胞上有绿色荧光标记物了解 Mateo FL 如何确保转染效率的准确检查扫描二维码下载白皮书            相关产品  Mateo 点击此处申请样机试用                            关于徕卡显微系统徕卡显微系统的历史最早可追溯到19世纪，作为德国著名的光学制造企业，徕卡显微成像系统拥有170余年显微镜生产历史，逐步发展成为显微成像系统行业的领先的厂商之一。徕卡显微成像系统一贯注重产品研发和最新技术应用，并保证产品质量一直走在显微镜制造行业的前列。徕卡显微系统始终与科学界保持密切联系，不断推出为客户度身定制的显微解决方案。徕卡显微成像系统主要分为三个业务部门：生命科学与研究显微、工业显微与手术显微部门。徕卡在欧洲、亚洲与北美有7大产品研发中心与6大生产基地，在二十多个国家设有销售及服务分支机构，总部位于德国维兹拉(Wetzlar)。          

 采访玛尔塔·帕特林尼博士（Dr. Marta Paterlini），探讨使用激光显微切割（LMD）技术研究成人神经发生（adult neurogenesis）及其在空间蛋白质组学和精准医学中的未来潜力。  玛尔塔·帕特林尼博士，卡罗林斯卡学院的高级科学家，分享了她在成人人类神经发生开创性研究中使用激光显微切割（LMD）的经验，并提供了关于LMD在空间蛋白质组学和精准医学中未来应用潜力的个人见解。  关键收获确认成人神经发生存在的突破性实验LMD如何使得在单细胞水平上研究复杂过程成为可能LMD在空间生物学中的未来前景采访总结理解成人人类神经发生发育生物学和再生医学的核心挑战之一是理解细胞的起源，尤其是人脑中新的神经元。几十年来，人们一直认为神经元形成（神经发生）只发生在胚胎阶段，出生后就会停止。然而，越来越多的有力证据，包括来自玛尔塔·帕特林尼博士在乔纳斯·弗里森实验室的研究发现，已经证实了成人人类大脑中存在神经发生——这一过程被称为成人神经发生。成人人类神经发生在海马体中发生，涉及干细胞分裂成神经前体细胞，然后这些神经前体细胞随后发育成神经元。这一发现引发了许多关于神经干细胞/神经前体细胞的身份和它们周转率的问题，其中一些问题玛尔塔的研究组已经能够使用激光显微切割（LMD）来解答。在单细胞水平研究复杂系统当玛尔塔加入乔纳斯·弗里森实验室时，他们的目标是理解从干细胞到成人样本中成熟神经元的亚型分化。当时，单细胞基因组学正逐渐兴起，他们的实验室是首批与其他测序实验室合作采用单细胞技术的实验室之一。由于研究像人脑这样的复杂系统会非常具有挑战性，团队希望测试使用单细胞基因组学流程来定义人类细胞谱系追踪（从干细胞到成熟神经元）的方法，因为已知单个细胞中体细胞变异的分布可以反映系统发育轨迹。该团队意识到，一个重要的原理证明可以是追溯初级成纤维细胞系的分裂。这时，他们转向了徕卡显微系统公司的LMD系统，该系统将在这一研究中发挥重要作用。LMD的关键作用在一项发表于《基因组生物学》（Genome Biology）的显著实验中，成纤维细胞在LMD系统的金属框架上生长。细胞被允许附着，并通过时间延迟成像记录其分裂。通过这种方式，研究团队成功捕获了分裂后的子细胞，并利用LMD技术进行了收集。为了分析这些单细胞的DNA序列数据，研究团队采用了一种他们开发的生物信息学工具，以非监督的方式识别了体细胞中的突变。这一实验展示了将单细胞基因组学与LMD系统相结合的强大功能，这对于构建细胞流程、追踪细胞谱系以及深入了解成人神经发生至关重要。视频：在金属框架上生长的成纤维细胞。这些细胞被允许附着在框架上，并通过延时成像技术记录了它们的分裂过程，之后捕获了分裂出的子细胞，并使用激光显微切割（LMD）技术进行了收集。LMD的当前和未来前景玛尔塔称自己是LMD系统的“忠实粉丝”，尤其对其在单细胞水平上工作的能力印象深刻，这对她的团队在神经发生不同阶段捕获单个细胞至关重要。他们与部门内的其他研究人员共享LMD系统，并近期注意到该系统在蛋白质组学研究中的应用兴趣激增。未来应用：蛋白质组学和空间生物学展望未来，玛尔塔认为LMD系统在蛋白质组学中扮演着重要角色，尤其是与质谱技术结合使用时。她观察到，使用LMD进行蛋白质组学研究也可能是她的团队在定义健康和疾病样本中细胞功能和异质性方面的下一步。这将与他们对精准医学的兴趣和目标保持一致。意识到空间生物学的发展趋势，玛尔塔还评论说，LMD系统将在不断发展的空间蛋白质组学领域中发挥重要作用，为测序提供精确的切片。结 论      //  LMD系统通过实现详细的单细胞分析和促进创新实验，在推动对成人人类神经发生的理解方面发挥了关键作用。随着研究的不断发展，LMD系统在蛋白质组学和空间生物学中的应用有望为精准医学带来进一步的突破。参考文献：1.Joanna Hård, Ezeddin Al Håkim, Marie Kindblom, Åsa K. Björklund, Ilke Demirci, Marta Paterlini, Pedro Reu, Bengt Sennblad, Erik Borgström, Patrik L. Ståhl, Jakob Michaelsson, Jeff E. Mold, Jonas Frisén. Conbase: a software for unsupervised discovery of clonal somatic mutations in single cells through read phasing. Genome Biol 2019 Apr 1;20(1):68. doi: 10.1186/s13059-019-1673-8.相关产品  Leica LMD6 & LMD7激光显微切割系统  AI图像分析软件 Aivia                            关于徕卡显微系统徕卡显微系统的历史最早可追溯到19世纪，作为德国著名的光学制造企业，徕卡显微成像系统拥有170余年显微镜生产历史，逐步发展成为显微成像系统行业的领先的厂商之一。徕卡显微成像系统一贯注重产品研发和最新技术应用，并保证产品质量一直走在显微镜制造行业的前列。徕卡显微系统始终与科学界保持密切联系，不断推出为客户度身定制的显微解决方案。徕卡显微成像系统主要分为三个业务部门：生命科学与研究显微、工业显微与手术显微部门。徕卡在欧洲、亚洲与北美有7大产品研发中心与6大生产基地，在二十多个国家设有销售及服务分支机构，总部位于德国维兹拉(Wetzlar)。          

       STELLARIS 8 Dive多光子共聚焦显微镜                            关于徕卡显微系统徕卡显微系统的历史最早可追溯到19世纪，作为德国著名的光学制造企业，徕卡显微成像系统拥有170余年显微镜生产历史，逐步发展成为显微成像系统行业的领先的厂商之一。徕卡显微成像系统一贯注重产品研发和最新技术应用，并保证产品质量一直走在显微镜制造行业的前列。徕卡显微系统始终与科学界保持密切联系，不断推出为客户度身定制的显微解决方案。徕卡显微成像系统主要分为三个业务部门：生命科学与研究显微、工业显微与手术显微部门。徕卡在欧洲、亚洲与北美有7大产品研发中心与6大生产基地，在二十多个国家设有销售及服务分支机构，总部位于德国维兹拉(Wetzlar)。          

 将计算清晰度与宽场显微镜的速度、荧光信号灵敏度和易用性相结合，实时解码三维生物学*。    为了帮助您回答重要的科学问题，THUNDER技术消除了使用基于相机的荧光显微镜观察厚样品时产生的焦外模糊现象。THUNDER技术采用了我们全新的光电数字技术--Computational Clearing。因此，可以对多种三维样品（包括模式生物、组织切片和三维细胞培养物）进行高速、高质量成像。请看这些图片，了解THUNDER技术是如何帮助研究人员揭示样品深处最精细的结构细节的。当您看到THUNDER技术实现的无雾图像质量后，请访问我们的产品页面了解更多信息。了解THUNDER技术如何将Computational Clearing与宽场显微镜的速度、荧光信号灵敏度和易用性相结合，从而实时解码三维生物学*。（*符合 ISO/IEC 2382:2015 标准）类有机体集群 - THUNDER技术类器官集群，细胞核用 DAPI 染色，细胞质膜用 GFP 染色。图片由奥地利维也纳医科大学癌症研究所 Dana Krauß 提供。颅神经的发育 - THUNDER技术-3D细胞培养这些图像是使用 20 倍的多色散物镜采集的，物镜的数值孔径为 0.75，工作距离接近 700 微米。图像由 32 块拼接而成，成像深度为 672 微米（337 步）。图片由美国华盛顿特区乔治华盛顿大学 Anastas Popratiloff 提供胰岛 - THUNDER技术-3D细胞培养  对离体人类胰岛进行 EDoF 重建，以实验检测单个人类胰岛细胞中促炎细胞因子 IL-17 的表达。图像具有以下标记：胰岛素（AF488；绿色）、胰高血糖素（AF555；红色）和 IL-17（AF647；品红色）以及 Hoechst（细胞核；蓝色）。图片由美国加利福尼亚州拉霍亚免疫学研究所 Matthias Von Herrath 实验室提供小鼠大脑 - THUNDER技术  红色 - AMPK，绿色 - Iba1。图片由美国德克萨斯农工大学的 Maheedhar Kodali 和 Ashok K. Shetty 提供花粉花 - THUNDER技术用 20x/0.8 物镜拍摄，面积为 6mm²，深度为 100μm。15 幅 4 种颜色（DAPI/GFP/TRITC/Cy5）的拼接图像，共计 13020 幅图像。视频由美国徕卡显微系统公司 James Marr 提供C.elegans Gonades - THUNDER技术成年雌雄同体，染色：蓝色 - DAPI（细胞核），绿色 - SP56（精子），红色 - RME-2（卵母细胞），红斑 - PGL-1（RNA + 蛋白颗粒）。图片由德国哈勒马丁路德大学 Christian Eckmann 博士教授提供小鼠主动脉 - THUNDER技术-3D细胞培养RAW 延时摄影 - 在涂有明胶的 1.5 号盖玻片上对培养一周的腹主动脉外植体成像 48 小时。小鼠的基因被编码为平滑肌细胞特异性tttomato。转录事件发生后，平滑肌细胞切除tttomato，并开始表达 eGFP。图片由美国夏洛茨维尔弗吉尼亚大学 Laura S. Shankman 博士提供。小鼠主动脉 - THUNDER技术-3D细胞培养THUNDER延时摄影 - 在涂有明胶的 1.5 号盖玻片室载玻片上对培养一周的腹主动脉外植体成像 48 小时。小鼠的基因被编码为平滑肌细胞特异性tttomato。转录事件发生后，平滑肌细胞切除tttomato，并开始表达 eGFP。图片由美国夏洛茨维尔弗吉尼亚大学 Laura S. Shankman 博士提供。小鼠肌纤维上的肌营养不良蛋白染色THUNDER技术  受感染的 MDCK 上皮细胞 - THUNDER技术  感染鼠伤寒沙门氏菌的 MDCK 上皮细胞显示细菌诱导的广泛肌动蛋白重排（红色）（绿色，纤毛中的 GFAP 蛋白）。物镜：HC PL APO 40x/0.95 DRY。图片由英国布里斯托尔大学 Mark Jepson 博士提供。受狂犬病感染的雪貂脑THUNDER Imager 3D 细胞培养仪  受狂犬病感染的神经元 - 红色，细胞核 - 蓝色。采用 DISCO 方法进行化学清除。物镜：HC PL FLUOTAR L 20x/0.40 DRY，410 µm z-stack。图片由德国里姆斯 Friedrich-Loeffler 研究所 Stefan Finke 博士提供。肺上皮细胞（猪）中的流感THUNDER Imager 3D 细胞培养仪流感病毒 - 红色，纤毛 - 绿色，细胞核 - 蓝色。物镜：HC PL APO 40x/0.95 DRY，35 µm z-stack，最大投影。图片由德国里姆斯 Friedrich-Loeffler 研究所 Stefan Finke 博士提供肺器质体 - THUNDER技术-3D细胞培养从肺泡干细胞和祖细胞中提取的小鼠肺器官组织。20x 空气透过 1 毫米塑料底。样本由德国巴特诺海姆心肺研究 MPI 的 Pumaree Kanrai 博士提供。假小细胞（胰岛β细胞）THUNDER Imager 3D 细胞培养仪生长为假小体（胰岛β细胞）的 MIN6 细胞。DAPI（蓝色）、胰岛素（Alexa488，绿色）、膜受体（Alexa594，红色）、类磷脂质蛋白（Alexa647，白色）。样本由德国巴特诺海姆马克斯-普朗克心肺研究所 Rémy Bonnavion 博士提供。蝗虫神经节 - THUNDER技术-3D组织成像  显示最大投影的蝗虫神经节图像。样本厚度为 110 微米，数据量为 376 MB，使用计算清除功能的采集时间为 3 秒。图片由德国徕卡显微系统公司的 Korinna Schoch 拍摄。HeLa 细胞球THUNDER Imager 3D活细胞和3D细胞培养仪  用 Alexa Fluor 568 磷脂酰蛋白（肌动蛋白）和 YOYO 1 碘化物（细胞核）染色的 HeLa 细胞球。图片由德国徕卡显微系统公司 Jan Schumacher 博士拍摄。斑马鱼THUNDER技术-3D活细胞和3D细胞培养  斑马鱼幼体（受精后 72 小时）。血管用绿色（荧光）表示。样本由德国巴特诺海姆马克斯-普朗克心肺研究所的 Almary Guerra 博士和 Didier Stainier 博士提供。小鼠肾脏切片 - THUNDER技术-3D组织成像  小鼠肾脏切片，含 Alexa Fluor™ 488 WGA、Alexa Fluor™ 568 磷脂色素和 DAPI。样品为美国马萨诸塞州沃尔瑟姆市赛默飞世尔科技公司生产的 FluoCells™ 制备的 3 号载玻片。皮层神经元培养THUNDER技术-3D细胞培养  培养的皮层神经元，其中绿色表示 beta-III-tubulin，蓝色表示细胞核。由 59 个平面组成的图像堆栈体积为 21 µm³。样本由德国马格德堡 FAN GmbH 提供。培养 VERO 细胞THUNDER技术 3D细胞培养仪  用 STAR488 波形蛋白（绿色）、STAR580 Tom20（黄色）和 DAPI（蓝色）染色的培养 VERO 细胞。样本由德国哥廷根 Abberior GmbH 提供。YFP 小鼠脑切片 - THUNDER技术-组织成像  用 GFAP-A647 染色的 YFP 小鼠脑切片。用THUNDER技术组织成像。美国费城宾夕法尼亚大学 Hong Xu 博士提供。果蝇三龄幼虫 - THUNDER技术-组织成像  用 AlexaFluor™647 标记突触后位点、AlexaFluor™555 与类磷脂结合、AlexaFluor™488 标记运动神经元亚群的果蝇三龄幼虫小片。样本由美国马里兰州贝塞斯达 NIH/NIMH 的 Amicia Elliott 博士提供。Cyclops - THUNDER技术-组织成像  Cyclops sp. 显示细胞核（绿色）、乙酰化-微管蛋白（红色）和血清素（青色）。图像堆栈的总体积为 332 微米 x 332 微米 x 84 微米，有三种颜色，每种颜色有 305 个 Z 平面。使用的物镜为 HC PL FLUOTAR 40x/1.30 OIL。样品由罗斯托大学生物学博士 Thomas Frase 提供。Thomas Frase 提供。斑马鱼--THUNDER技术-模式生物成像斑马鱼幼体视频（1x Plan APO 物镜，变焦系数 11:1，18 z 切片堆叠，约 300 µm z 深度），其中绿色（kdrl:GFP）显示血管生成，红色（GATA1:dsRed）显示红细胞和血小板。由德国巴特诺海姆马克斯-普朗克心肺研究所的 Almary Guerra 博士和 Didier Stainier 教授博士提供。相关产品  THUNDER Imager Model Organism全自动宏观显微成像系统  THUNDER Imager Tissue全景组织显微成像系统点击此处申请样机试用                            关于徕卡显微系统徕卡显微系统的历史最早可追溯到19世纪，作为德国著名的光学制造企业，徕卡显微成像系统拥有170余年显微镜生产历史，逐步发展成为显微成像系统行业的领先的厂商之一。徕卡显微成像系统一贯注重产品研发和最新技术应用，并保证产品质量一直走在显微镜制造行业的前列。徕卡显微系统始终与科学界保持密切联系，不断推出为客户度身定制的显微解决方案。徕卡显微成像系统主要分为三个业务部门：生命科学与研究显微、工业显微与手术显微部门。徕卡在欧洲、亚洲与北美有7大产品研发中心与6大生产基地，在二十多个国家设有销售及服务分支机构，总部位于德国维兹拉(Wetzlar)。          

 专家访谈：头戴显示器辅助下的外科手术的好处    在以下视频采访中，瑞士巴塞尔大学医院神经外科副主任Raphael Guzman医生谈到了他在使用 ARveo 增强现实显微镜进行头部手术方面的经验。关于Guzman 医生访谈的内容：No.1数字图像质量与光学图像质量的发展No.2头部手术的人体工程学优势，尤其是在具有挑战性的手术姿势中No.3头部手术对手术室设置和教学的影响No.4数字技术如 IGS 和增强现实的增强连接和集成No.5头部显示屏促进 GLOW AR 成为日常实践的一部分头部手术-神经外科的新时代在这部分采访中，Guzman 医生解释了数字成像质量的进步，如 ARveo 等手术显微镜，为新的手术操作方法铺平了道路。Guzman 表示，今天的头部手术结合了人体工程学优势和出色的图像质量。头部手术在神经血管程序中的人体工程学优势了解头部手术或外显手术为神经外科医生提供的人体工程学优势，特别是在需要复杂手术方法的手术中，例如松果区肿瘤的后颅窝手术。Guzman 医生描述了尖端头部手术技术如何帮助改善这类具有挑战性手术中的人体工程学。在外显手术之前为高效的手术室设置做准备在头顶模式下操作意味着不同的手术室设置。根据 Guzman 医生所说的关键点是提前考虑好显微镜和头顶屏幕与外科医生以及手术室中其他一切的位置关系。在使用头顶技术时，了解手术室的设置过程。将数字技术整合到神经外科手术中的好处ARveo 与其他数字技术（如 IGS，增强现实荧光）的增加连接性为神经血管外科提供了巨大优势。手术室中的整个团队可以体验到以 3D 图像质量增强的血管外科手术。他们可以在大型顶部显示屏上跟随手术过程，实时观察 GLOW800 中的术中血流，看到肿瘤标记，并体验增强的深度感知。GLOW800 成为神经血管外科日常实践的一部分Guzman医生描述了从使用黑白成像滤镜到最新版本 GLOW800 带来的惊人差异的旅程。他表示，头顶可视化受益于新的 4K 3D 屏幕技术，从而实现了更好的 GLOW800 体验。相关产品  ARveo 8点击此处申请样机试用                            关于徕卡显微系统徕卡显微系统的历史最早可追溯到19世纪，作为德国著名的光学制造企业，徕卡显微成像系统拥有170余年显微镜生产历史，逐步发展成为显微成像系统行业的领先的厂商之一。徕卡显微成像系统一贯注重产品研发和最新技术应用，并保证产品质量一直走在显微镜制造行业的前列。徕卡显微系统始终与科学界保持密切联系，不断推出为客户度身定制的显微解决方案。徕卡显微成像系统主要分为三个业务部门：生命科学与研究显微、工业显微与手术显微部门。徕卡在欧洲、亚洲与北美有7大产品研发中心与6大生产基地，在二十多个国家设有销售及服务分支机构，总部位于德国维兹拉(Wetzlar)。     、

   德国徕卡显微系统，作为本行业拥有顶尖技术的显微镜制造企业，我们将竭诚您提供全方位的生产质量控制及检验分析研究的解决方案。欢迎您莅临徕卡展台，我们将为您演示以下徕卡高端显微镜产品：      DM6M      DM8000M      Ivesta 3 格林诺夫体视显微镜      DVM6 / DVM6M      EM TXP精研一体机                            关于徕卡显微系统徕卡显微系统的历史最早可追溯到19世纪，作为德国著名的光学制造企业，徕卡显微成像系统拥有170余年显微镜生产历史，逐步发展成为显微成像系统行业的领先的厂商之一。徕卡显微成像系统一贯注重产品研发和最新技术应用，并保证产品质量一直走在显微镜制造行业的前列。徕卡显微系统始终与科学界保持密切联系，不断推出为客户度身定制的显微解决方案。徕卡显微成像系统主要分为三个业务部门：生命科学与研究显微、工业显微与手术显微部门。徕卡在欧洲、亚洲与北美有7大产品研发中心与6大生产基地，在二十多个国家设有销售及服务分支机构，总部位于德国维兹拉(Wetzlar)。         

 一揭开聚类的神秘面纱      你是否曾好奇，如何将成千上万的细胞数据进行分类，从而揭示细胞之间的潜在关系？这一过程被称为“聚类”。通过聚类，我们可以将结构相似的细胞分到一组，进一步探究它们的共同特征，如共同表达的基因和基因分布。聚类不仅是生物医学研究的重要工具，也是机器学习中的一个关键概念。机器学习分为监督学习和无监督学习，而聚类正是无监督学习的一种。它不需要预先标记数据，而是通过分析数据本身的相似性进行分组，追求类内差异最小化、类间差异最大化的目标。二K-means算法：一种无监督机器学习算法，用于将相似的数据点聚类成组      K-means算法是一种常用的无监督学习算法，专用于将相似的数据点聚类成组。其基本步骤如下：1初始化质心：随机选择K个点作为初始质心。2分配数据点：将每个数据点分配到最近的质心。3更新质心：重新计算每个簇的质心。4迭代：重复分配和更新过程，直到质心不再变化。优缺点：优点：高效处理大规模数据。原理简单，容易实现。缺点：需要预先定义簇的数量K。对初始质心敏感，可能导致局部最优解。对离群值较为敏感。K-means流程示例图1  K-means流程示例图2  三一种用于高维数据的无监督自动聚类方法      PhenoGraph-Leiden算法结合了PhenoGraph和Leiden算法的优势，特别适用于高维数据的聚类。PhenoGraph通过构建k-最近邻图（k-NN图），使用Louvain算法进行模块度优化，识别社区结构。而Leiden算法在Louvain算法基础上进行改进，确保社区分裂和连通性问题得到解决，生成的社区更加一致和连通。以下是每种方法的简要介绍：PhenoGraph  原理：PhenoGraph 是一种基于图论的聚类算法，特别适用于单细胞数据分析。它通过构建 k-最近邻图（k-nearest neighbor graph, k-NN graph）来表示数据，然后使用 Louvain 算法来优化模块度，最终识别出数据中的社区或群体。步骤：1.构建 k-最近邻图：对于每个数据点，找到其 k 个最近邻居，并建立连接。2.权重分配：为图中的每条边分配权重，通常基于欧几里得距离或其他距离度量。3.Louvain 算法：使用 Louvain 算法进行模块度优化，识别出社区结构。Leiden  原理：Leiden 算法是在 Louvain 算法的基础上提出的一种改进，解决了 Louvain 算法的某些局限性，如社区分裂和连通性问题。Leiden 算法通过多阶段优化过程，确保生成的社区更具一致性和连通性。步骤：1.初始阶段：与 Louvain 算法类似，首先进行模块度优化。2.精细化阶段：对初始阶段的社区进行细化，确保每个社区内部的节点是强连通的。3.聚合阶段：将细化后的社区视为新的节点，构建新的图，重复上述过程，直到社区结构稳定。PhenoGraph-Leiden 的步骤PhenoGraph-Leiden 结合了 PhenoGraph 的 k-NN 图构建和 Leiden 算法的社区检测步骤，具体过程如下：1数据预处理：对原始数据进行标准化和降维（如 PCA）处理，减少噪声和维度。2构建 k-NN 图：使用 PhenoGraph 方法构建 k-最近邻图，表示数据点之间的相似性。3Leiden 算法优化：使用 Leiden 算法对 k-NN 图进行社区检测，优化模块度并确保社区连通性和一致性。4结果输出：输出识别出的社区或细胞群体，并进行后续分析和可视化。  优缺点：优点：适用于高维、复杂数据集。无需预先确定簇的数量。对噪声和离群值不敏感，分辨率灵活。缺点：计算量大，需要较高的计算资源。对参数敏感，需要仔细调试。四如何选择合适的聚类算法？        五Aivia软件：多种聚类方法助你一臂之力      Aivia软件内置了四种聚类方法：K-meansPhenoGraph-LeidenObject ClassifierPhenotyper  每种方法都有其独特的优势，根据数据特性和分析目标选择最适合的方法，将大大提升你的研究效率。Media Gallery                                                                                                                    左右滑动查看更多    参考文献：1. MacQueen J. Some methods for classification and analysis of multivariate observations. In Proceedings of the fifth Berkeley symposium on mathematical statistics and probability. 1967 Jun 21 (Vol. 1, No. 14, pp. 281-297).2. Traag VA, Waltman L, Van Eck NJ. From Louvain to Leiden: guaranteeing well-connected communities. Scientific Reports. 2019 Mar 26;9(1):5233.3. Rousseeuw, P. J. (1987). Silhouettes: a graphical aid to the interpretation and validation of cluster analysis. Journal of computational and applied mathematics, 20, 53-65.4. Lenssen, L., & Schubert, E. (2022, September). Clustering by direct optimization of the medoid silhouette. In International Conference on Similarity Search and Applications (pp. 190-204). Cham: Springer International Publishing.这篇文章不仅让你了解了K-means和PhenoGraph-Leiden算法的基本原理和优缺点，更帮助你在实际应用中选择最合适的聚类方法。希望这篇深度解析能为你的研究带来新的启发！欢迎留言分享你的看法和使用经验！快来申请Aivia14试用吧！  更有免费软件Aivia community等你来探索！         Aivia14新产品发布会                            关于徕卡显微系统徕卡显微系统的历史最早可追溯到19世纪，作为德国著名的光学制造企业，徕卡显微成像系统拥有170余年显微镜生产历史，逐步发展成为显微成像系统行业的领先的厂商之一。徕卡显微成像系统一贯注重产品研发和最新技术应用，并保证产品质量一直走在显微镜制造行业的前列。徕卡显微系统始终与科学界保持密切联系，不断推出为客户度身定制的显微解决方案。徕卡显微成像系统主要分为三个业务部门：生命科学与研究显微、工业显微与手术显微部门。徕卡在欧洲、亚洲与北美有7大产品研发中心与6大生产基地，在二十多个国家设有销售及服务分支机构，总部位于德国维兹拉(Wetzlar)。          

     在这篇文章中，您可以了解到如何通过使用EM TIC 3X离子束研磨抛光仪的离子束蚀刻工艺来优化样品的制备质量。EM TIC 3X离子束研磨抛光仪EM TIC 3X是一种非聚焦离子束研磨设备，可用于制备截面和平面样品，用于扫描电子显微镜（SEM）、光学显微镜（LM）、微结构分析（EDS、WDS、Auger、EBSD）和原子力显微镜（AFM）研究中。该仪器配备了三离子束系统，可以在室温或低温下加工绝大多数材料，得到大面积表面。EM TIC 3X是一个模块化系统，可以灵活搭配各种样品台，满足不同的应用需求：标准样品台：制备各种不同尺寸、形状和材料的样品。冷冻样品台：防止对热敏感的样品因过热而损坏。多样品台：至少连续制备三个样品，无需用户干预，保证高水平的样本产量。旋转样品台：用于平面研磨或离子束刻蚀。    图1：EM TIC 3X离子束研磨抛光仪离子束蚀刻工艺离子束蚀刻，又称离子束研磨或离子研磨，是一种为扫描电子显微镜（SEM）应用准备固态样本时最常用的蚀刻工艺。在蚀刻过程中，高能氩离子束会在高真空室中轰击样品。材料的顶层被高能离子去除，呈现出无缺陷的样品表面。离子能量和研磨角度根据不同的应用，可以进行相应的调整。EM TIC 3X也可以通过离子抛光工艺改善样品机械抛光表面质量。样本表面可通过离子研磨工艺进行清洁、抛光并提高其对比度。该技术可用于获得高分辨率的SEM图像，满足各种应用需求（如故障分析），进行表面灵敏分析（如EBSD）。EM TIC 3X独特的三离子束系统工作原理EM TIC 3X的三离子源由三把独立的可控鞍形场离子枪组成，离子能量在1到10keV之间可调。离子源中需要输入工作气体，最好是氩气。然后，向阳极上施加一个高电压（1到10千伏），阴极和韦氏帽接地。由于阳极和阴极之间存在电场，工作气体将被电离（Ar+），等离子体被点燃。带正电的离子将被加速推向阴极，并产生电子，这种轰击会磨损阴极。带负电的电子将被加速推向阳极，与气体原子碰撞并产生离子。受阳极和韦氏帽之间的电场形状（马鞍场）影响，两组离子束将产生，并加速向两个阴极移动。其中一束被（盲）后侧阴极阻挡，而另一束将通过前侧阴极的出口射出，其离子的能量与加速电压相匹配。  图2：EM TIC 3X的三离子束系统  图3：离子源工作原理通过离子束刻蚀制备横截面样品制备扫描电子显微镜（SEM）的样品横截面时，使用一个边缘锋利的挡板遮盖样品，将50–100 µm样品材料暴露在挡板之上。三组离子束在挡板边缘的中心位置相交，轰击露出的部分并将其去除，以此制备一个高质量的样品横截面。该设备离子枪的研磨速度可达每小时300 μm（Si 10 kV, 3.5 mA, 100 μm）。这种独特的技术具备优秀的材料去除率，可制备面积大于4×1 mm的高质量样品横截面。  图4：EM TIC 3X制备横截面样品离子束蚀刻制备平面样品平面研磨（或离子束抛光）中使用的是旋转样品台。由于三组离子束聚焦一点，并且样本可进行横向移动，因此能够制备出直径大于25 mm的均匀、高质量的区域。该制备工艺可用于清洁、抛光或增强机械或化学抛光表面的对比度，去除细小的划痕、研磨材料和涂抹伪影。  图5：EM TIC 3X进行离子束抛光EM TIC 3X离子束研磨抛光仪的抛光样本实例   钢材表面锌镀层：与钢材基底相比，锌镀层相对较软，在机械抛光时会嵌入杂质。离子研磨工艺是一种用于分析镀锌钢上锌层的厚度的技术手段。通过使用EM TIC 3X制备样品，可观察到一个干净的蚀刻表面。锌层没有伪影，晶粒结构以及界面层都清晰可见。  图6：EM TIC 3X制备的钢材表面锌镀层样品，蚀刻表面非常干净。   焊接点：带有焊接点的半导体结构是一种非常柔软的材料，较难通过传统的机械抛光工艺制备样品。离子束研磨是制备这种样品的首选方法。为了避免焊接点中的各个部件收缩，在离子研磨过程中，样品会受液氮保护保持低温。结果显示：样品表面光滑干净，焊接点中的结构细节易于识别。  图7：EM TIC 3X对焊接点进行离子束抛光。结果显示：表面光滑，结构细节易于识别。相关产品  EM TIC 3X三离子束切割仪点击此处申请样机试用                            关于徕卡显微系统徕卡显微系统的历史最早可追溯到19世纪，作为德国著名的光学制造企业，徕卡显微成像系统拥有170余年显微镜生产历史，逐步发展成为显微成像系统行业的领先的厂商之一。徕卡显微成像系统一贯注重产品研发和最新技术应用，并保证产品质量一直走在显微镜制造行业的前列。徕卡显微系统始终与科学界保持密切联系，不断推出为客户度身定制的显微解决方案。徕卡显微成像系统主要分为三个业务部门：生命科学与研究显微、工业显微与手术显微部门。徕卡在欧洲、亚洲与北美有7大产品研发中心与6大生产基地，在二十多个国家设有销售及服务分支机构，总部位于德国维兹拉(Wetzlar)。          

   中华医学会第二十八次全国眼科学术大会    由中华医学会、中华医学会眼科学分会主办，湖北省医学会和湖北省医学会眼科学分会承办的中华医学会第二十八次眼科学术大会（CCOS2024）定于2024年9月4-8日在武汉国际会议中心和武汉国际博览中心举办。本次大会是在我国举行的又一次大型眼科盛会，预计参会的代表将超过一万人。届时将有1000多名国际、国内的著名眼科学专家就眼科发展的新技术、新知识以及新的经验做专题报告。来自全国各地的眼科医师将云集本次盛会，与国内同道交流和分享眼科和视觉科学方面最新的研究成果。徕卡显微系统将携带Enfocus样机亮相次会议，欢迎各位眼科专家莅临展台参观。    会议时间2024年9月4日 - 9月7日会议地点武汉国际会议中心，武汉国际博览中心（湖北省武汉市汉阳区鹦鹉大道619号）徕卡展位展位号：A6038相关产品  EnFocus 术中 OCT 成像系统                            关于徕卡显微系统徕卡显微系统的历史最早可追溯到19世纪，作为德国著名的光学制造企业，徕卡显微成像系统拥有170余年显微镜生产历史，逐步发展成为显微成像系统行业的领先的厂商之一。徕卡显微成像系统一贯注重产品研发和最新技术应用，并保证产品质量一直走在显微镜制造行业的前列。徕卡显微系统始终与科学界保持密切联系，不断推出为客户度身定制的显微解决方案。徕卡显微成像系统主要分为三个业务部门：生命科学与研究显微、工业显微与手术显微部门。徕卡在欧洲、亚洲与北美有7大产品研发中心与6大生产基地，在二十多个国家设有销售及服务分支机构，总部位于德国维兹拉(Wetzlar)。          

 膜片钳技术简介    离子通道的生理学一直是神经科学家感兴趣的一个重要话题。诞生于1970年代的膜片钳技术开启了电生理学家的新时代。它不仅可以对整个细胞进行高分辨率电流记录，还可以对切下的细胞膜片进行高分辨率电流记录。甚至可以研究单通道事件。然而，由于需要复杂且高灵敏的设备，广泛的生物学背景和高水平的实验技能，电生理学仍然是最具挑战性的实验室方法之一。历史背景从18世纪路易吉·伽伐尼（Luigi Galvani）的开创性工作开始，到19世纪埃米尔·杜布瓦-雷蒙德（Emil du Bois-Reymond）、约翰内斯·彼得·穆勒（Johannes Peter Müller）和赫尔曼·冯·亥姆霍兹（Hermann von Helmholtz）的工作，质膜和细胞的兴奋性一直是神经系统研究的主要兴趣[1]。艾伦·劳埃德·霍奇金（Alan Lloyd Hodgkin）和安德鲁·赫胥黎（Andrew Huxley）在1952年使用电压钳技术揭示了动作电位的离子通道事件，并于1963年因其杰出的工作而获得诺贝尔生理学和医学奖[2,3]。那时，电压钳仅能用于相当大的细胞，因为需要锋利的微电极来穿透质膜。在1970年代末，贝尔特·萨克曼（Bert Sakmann）和埃尔文·内尔（Erwin Neher）改进了电压钳技术，并且首次解析了青蛙骨骼肌膜片上的单离子通道电流。他们因此荣膺1991年诺贝尔生理学和医学奖[4,5]。下一个突破则是贝尔特·萨克曼（Bert Sakmann）在1980年发明的高阻封接，极大地提高了信噪比，并允许记录更小的电流[6]。电生理学，最初诞生在特殊的生物物理实验室，现在已经扩展到基础生物学和医学研究领域，并成为研究神经系统中单个细胞或整个细胞网络行为的最重要工具之一。膜片钳技术的一般原理  图1：膜片钳记录的一般原理：含有电解质溶液的玻璃管紧密封接到细胞膜上，从而实现膜片的电隔离。因此流经该膜片中离子通道的电流会流入微电极，然后通过链接到高灵敏度差分放大器的电极进行记录。在电压钳配置中，电流通过负反馈环路注入细胞，以补偿细胞膜电位的变化。记录该电流可以得出有关细胞膜电导性的结论。膜片钳技术可以研究若干，甚至单个离子通道[7]。因此，它引起了兴奋类细胞研究工作的极大兴趣，例如神经元、心肌细胞和肌纤维。[8]单个离子通道每秒可以传导约1000万个离子。不过，电流仅有几皮安。记录这种数量级的电流不仅对研究人员，对于设备而言同样极具挑战。原理是将带有钝端的薄玻璃或石英管密封在膜上（参见图1、2和3）。施加吸力可以产生千兆欧姆级别的高阻抗封接。这种紧密封接可以对膜片进行电隔离，这意味着流过膜片的所有离子都会流入微电极，并借助连接到高灵敏度电子放大器的氯化银线电极（(Ag/AgCl)电极）记录。浴电极用于设置零电平。为了防止细胞膜电位发生变化，放大器会产生类似于流经细胞膜电流的补偿电流，作为负反馈机制（参见图1）。测量细胞的膜电位并将其与指令电位进行比较。如果指令电位和测量值之间存在差异，则会注入电流。该补偿电流将记录下来，并可以得出有关膜电导的结论。膜电位可以独立于离子电流进行操纵，这种能力可以研究膜通道的电流-电压关系。  图2：微电极贴附到培养小鼠海马神经元细胞膜的相差图像。图片来自德国波鸿鲁尔大学的Ainhara Aguado博士提供。膜片钳配置根据研究对象，可以使用不同的配置。在细胞贴附模式下，膜片保持完整（参见图3）。松散贴片是细胞贴附模式的修改版。这种情况下，移液器没有紧密封接在细胞膜上，而是松散地贴附在细胞膜上。该模式通常用于记录神经元细胞中的动作电位。它的优点在于细胞质的成分不受影响。不过，另一方面，细胞内环境无法控制。通过电极微管施加造孔剂（通常为抗生素）会产生穿孔膜片来保证离子连续性，同时细胞内蛋白质不会被电极液洗掉。最常用的膜片钳模式是全细胞模式（参见图3）。要实现这种模式，通过短暂施加强吸力来破坏膜片。微电极内部与细胞质连为一体。该方法用于记录来自整个细胞的电位和电流。对于全细胞测量方式，研究人员有两种配置方式可供选择：电压钳模式，其中电压保持恒定并记录电流，或者电流钳模式，其中电流保持恒定并观察膜电位的变化。此外，也可以仅记录来自小块而不是整个细胞的电流。这增加记录单个离子通道的机会。膜片可以根据微电极内部的两个不同方向确定方位。为实现内面向外的配置，微电极贴附在细胞膜上，并且可以收回以撕下一小片膜（图3）。本例中，细胞膜的胞质表面暴露在外面。这种方法通常用于研究单个通道的活性，优点在于可以调整暴露在细胞内表面的培养基。如果希望研究细胞外诱因（如神经递质）的影响，则应选择外面向外的配置（参见图3）。这种情况下，移液器在全细胞测量配置中收回，导致细胞膜破裂并重组。在该配置中，细胞外表面暴露，因此可以轻松应用细胞外诱因。贴片钳的四种记录方法  图3：贴片钳的四种记录方法。细胞连接。当移液器最接近细胞膜时，施加轻微的吸力以获得移液器和细胞膜之间的紧密密封。全细胞。通过施加另一个短暂但强烈的吸力，细胞膜被破裂，移液管获得进入细胞质的机会。由内向外：在细胞连接模式下，移液器被缩回，贴片与膜的其他部分分离，暴露在空气中。膜的细胞质表面被暴露出来。外侧：在全细胞模式下，移液器被缩回，导致两小块膜重新连接，形成一个小的囊状结构，细胞膜的细胞膜面朝向移液器溶液。源于此。如果你能给我打补丁--什么是补丁夹子技术？要求膜片钳实验适用于培养细胞、急性解离细胞或者急性振动切片，从而研究细胞在其自然环境中的电生理学特性。感兴趣的离子通道也可以在通用细胞系（HEK293、CHO、LNCaP）中分离并异质表达。根据样品不同，需要使用倒置（培养细胞）或者具有稳定平台的正置固定载物台显微镜（切片样品）。如果要研究急性切片中的细胞，建议使用红外DIC（微分干涉对比）显微镜[9]，后者可以更加方便地观察细胞膜。显微镜应放置在防振台上，因为任何移动都可能对微电极和细胞膜之间的封接造成致命影响。需要使用显微操作臂来精确移动微电极。加热并拉长小型玻璃或石英毛细管可以形成极细的微电极管。电极管吸头的直径约为1微米，其中包含的膜片仅含几个（甚至一个）离子通道。微电极管吸头需要在熔融状态进行热抛光，以便在吸头接触到细胞膜后实现高阻抗封接。电极管中含有类似于胞外溶液或细胞质的溶液，具体取决于记录模式。微电极安装在显微操作臂上，可以向细胞膜精准移动。为了检测电流，使用了氯化银线。同样采用氯化银线（作为银/氯化银电极）的浴电极设置为零电流值。带低噪声晶体管的差分放大器连接到计算机，以进行数据采集和数字化，可以采购特定软件来控制该放大器并分析数据。或者，可以使用示波器来监测电流。如有需要，可以为该配置添加灌注系统。特定物质可以通过灌注笔或使用POC（灌注开关）室添加。视频：制备急性脑切片该视频显示使用振动切片机制备小鼠脑切片的过程。视频展示了整个工作流程，从一开始使用立体显微镜进行解剖、嵌入低胶凝温度琼脂糖，到切片。视频：急性脑切片的电生理研究本视频展示了使用固定载物台显微镜对急性脑切片进行电生理测量的工作流程。视频：培养细胞的电生理研究本视频展示了使用倒置显微镜对荧光培养细胞进行电生理学研究的典型工作流程，从准备膜片钳电极开始，到使用显微镜进行实际测量结束。参考文献：1.Areles Molleman, Patch clamping: an introductory guide to patch clamp electrophysiology, John Wiley & Sons Ltd, West Sussex, England, (2003)2.Bertil Hille, Ionic Channels of Excitable Membranes, Sinauer Associates Inc. (2001)参加问卷调研，领取精美小礼品！    8月31日活动截止 小伙伴从速哦届时答题满分的小伙伴会收到我们的小礼品    问卷答案的答案可以在之前的推文内寻找哦~徕卡175周年：徕卡品牌的发展历程，也是显微技术的发展史                                  关于徕卡显微系统徕卡显微系统的历史最早可追溯到19世纪，作为德国著名的光学制造企业，徕卡显微成像系统拥有170余年显微镜生产历史，逐步发展成为显微成像系统行业的领先的厂商之一。徕卡显微成像系统一贯注重产品研发和最新技术应用，并保证产品质量一直走在显微镜制造行业的前列。徕卡显微系统始终与科学界保持密切联系，不断推出为客户度身定制的显微解决方案。徕卡显微成像系统主要分为三个业务部门：生命科学与研究显微、工业显微与手术显微部门。徕卡在欧洲、亚洲与北美有7大产品研发中心与6大生产基地，在二十多个国家设有销售及服务分支机构，总部位于德国维兹拉(Wetzlar)。          

 ★★ ★ ★★    样品处理通常是光片显微镜研究中的一个关键话题。徕卡显微系统的TCS SP8 DLS将光片技术集成到倒置共聚焦平台中，因此可以利用关于样品安装和XY-stage功能的一般原则。本文将描述一组安装框架，这些框架不仅允许准备更多的样品，尤其是在使用诸如BABB（苯甲醇苯甲酸酯）等潜在有害的安装介质时，亦具有广泛的适用性。样品架：这里介绍的样品架是为数字光片（DLS）成像设计的，但同样适用于传统的直立式和倒置式显微镜成像。简介：在使用SP8 DLS模块进行成像时，样品被放置在TwinFlect镜子之间。X方向的移动范围由所使用的TwinFlect镜子的距离（2.5毫米、5毫米或7.8毫米）决定。最大移动范围大约是镜子之间距离的一半。  图 1：由 TwinFlect 镜子定义的 x 方向移动范围。y 方向的移动范围由安装盘的大小决定。Y方向的移动范围则由样品架的形状和大小（如培养皿）决定。对于标准的35毫米培养皿（玻璃底直径20毫米），Y方向的移动范围相对有限，不会接触到皿的边缘：  图 2：使用标准 35 毫米培养皿时 y 方向的受限移动范围。使用矩形24 x 50毫米盖玻片的样品夹时，Y方向的移动范围增加，使得可以使用更大或更长的样品。此外，这种设计还能够增加在一次实验中成像的样品数量，非常适合多位置实验。  图 3：矩形 24 x 50 mm 盖玻片在 y 方向上的行程范围增加。材料与方法安装框架套件（#158007063）包含一个用于24 x 50毫米玻璃盖玻片的样品夹，以及一个用于直径30毫米圆形盖玻片的样品夹。请注意，玻璃盖片不包含在内。  图 4：安装框架套件（样品夹矩形 24 x 50 mm + 直径 30 mm 的圆形样品夹）24 x 50 mm 盖玻片的样品夹仅与以下 z-Galvo 载物台插入件兼容：158004118 可旋转插入件反向158004119 通用插入件封闭样品架/附加玻璃盖片对于在水溶液中的成像，可以使用硅胶（如Elastosil® 43，Wacker）或双组分Twinsil®来附加玻璃盖片。这些样品架也适用于在更具侵蚀性的溶液中成像，例如BABB（苯甲醇/苯甲酸苄酯）。由于BABB可以溶解多种材料，因此需要使用专门类型的硅胶来密封容器，例如Elastosil® E41（Wacker）（与德国维尔茨堡大学鲁道夫·维尔乔中心的尤尔根·皮内克的个人沟通）。1在样品架底部的凹槽内缘涂抹硅胶/双硅胶。2添加一片玻璃盖片，并轻轻按压以确保其均匀贴合，以便在所有点上形成良好的密封。3要检查腔体密封，请在样品架中加入一些蒸馏水，看看是否有泄漏发生。上样在组装好带有相应玻璃盖片的安装框后，您可以选择以下不同的样品安装方式：基于琼脂糖的上样1在盖片表面覆盖一层薄薄的琼脂糖（0.5-1毫米），待其聚合后，形成样品的支撑层。2然后将您的样品悬浮在液体琼脂糖中，放置在支撑层上3将您的样本（理想情况下呈一条直线）对齐以进行成像4从侧面去除多余的琼脂糖以为镜子留出空间。U 型玻璃毛细管按照《科学实验室》文章中描述的协议进行：DLS 样品准备：使用 U 型玻璃毛细管进行样品安装。用于固定清理组织的超级胶水更大的（已透明化的）样本在直接粘贴到玻璃盖玻片上时，可以与样本架一起使用。  图5展示了在标准玻璃底培养皿中安装组织样本的一种简单方法。客户申请 DLS 准备在通过光片显微镜扫描的 ECi 透明化肾脏的一部分中，以实现3D 肾小球的可视化。感谢海德堡大学曼海姆医学院的Norbert Gretz教授。参考文献：1.Huang J, Brenna C, Khan AUM, Daniele C, Rudolf R, Heuveline V, Gretz N , A cationic near infrared fluorescent agent and ethyl-cinnamate tissue clearing protocol for vascular staining and imaging, Sci Rep. 2019 Jan 24;9(1):521相关产品  Viventis LS2 Live 双视野光片荧光显微镜点击此处申请样机试用                            关于徕卡显微系统徕卡显微系统的历史最早可追溯到19世纪，作为德国著名的光学制造企业，徕卡显微成像系统拥有170余年显微镜生产历史，逐步发展成为显微成像系统行业的领先的厂商之一。徕卡显微成像系统一贯注重产品研发和最新技术应用，并保证产品质量一直走在显微镜制造行业的前列。徕卡显微系统始终与科学界保持密切联系，不断推出为客户度身定制的显微解决方案。徕卡显微成像系统主要分为三个业务部门：生命科学与研究显微、工业显微与手术显微部门。徕卡在欧洲、亚洲与北美有7大产品研发中心与6大生产基地，在二十多个国家设有销售及服务分支机构，总部位于德国维兹拉(Wetzlar)。          

 2024 世界动力电池大会将在宜宾国际会展中心举办，大会期间将组织世界动力电池产业链供应链成果展示活动。大会成果展示将全面践行党和国家最新提出的“加快发展新质生产力，扎实推进高质量发展”的相关要求，围绕“新质动力·创绿未来”的大会主题，配合大会各项议程，由政府搭台、产业唱戏，以企业为主体，突出三大融合（全球化产业融合、应用场景融合、跨行业融合），全面展示动力电池、储能、新能源汽车产业链上下游的创新产品和技术成果，助力产业进一步提升全要素生产率，培育发展新质生产力的新动能。  电池的使用范围从便携式电子设备到电动车辆和储能。高效、可靠和安全的高性能电池的经济制造至关重要。对于电池组件而言，由于该行业仍然相对新兴且正在不断发展，因此质量控制（QC）、故障分析（FA）和研发都很重要。电池生产有多个步骤，如电极片制造以及单元组装和精加工，都需要检测和质量控制。在质量控制、 故障分析和研发过程中，需要从样品制备到显微镜目视和化学分析等不同的解决方案。电池生产的步骤是什么？先进的电池生产包括 3 个主要步骤：1电极片制造制备电极片时，将导电添加剂和粘合剂混合，然后用其涂覆电极薄膜，在压延过程中压缩，切割到合适的尺寸（分切），最后干燥以除去残留水分。2电池单元组装其中阳极和阴极根据电池单元设计成形，例如圆柱形、棱柱形或袋状（分离），然后进行堆叠或缠绕、焊接并插入填充有电解质的外壳中。3电池单元后段工序通过充电和放电循环（成形）进行电化学活化，以确保操作性能和稳定性，然后进行脱气、老化和最终测试。    电池电极片显示出一个孔缺陷。使用暗场照明和徕卡复合显微镜采集的图像。电池电极片检测电极片是电池中最小单元的一部分，任何关键缺陷（如杂质、涂层中的气孔和边缘波动）都会严重降低电池性能和可靠性。此类缺陷可能导致短路，并对用户造成安全风险。此外，由于易碎性增加，它们会妨碍处理电极片的能力。因此，在制造过程中对电极片表面和批量均匀性进行在线质量控制和检测非常重要。显微镜检测可用于常规电极片质量检查、扩大生产线，并培训人工智能系统检测缺陷。  测量电池极片中孔缺陷的深度。使用徕卡复合显微镜记录三维图像。电池的毛刺检测毛刺检测很重要，因为在分切和电池组装过程中，电极片边缘产生的毛刺会损坏分离器并造成短路。毛刺也会导致热失控，这种现象发生在充电期间电池的温度控制出现故障时。热失控会导致温度持续升高，这可能导致电池组件分解，最终引发火灾甚至爆炸。高性能显微镜可用于检测装配过程中的毛刺，以最大限度地减少毛刺，帮助防止因热失控和短路而导致电池降解。本次展会，徕卡也将携带DVM6数码显微镜，并且搭载最新一代全自动毛刺分析软件。不仅配备可定制化平台，控制面板支持手动和自动操作，并可实现平台的XYZ三轴移动。内置自动毛刺分析软件，支持自动毛刺分析功能，还可以与徕卡专业拍摄分析软件LAS X搭配使用，对于手动毛刺软件功能可进行1~2个视野的毛刺检测，也可以进行全自动毛刺检测，分析单个毛刺及尺寸以及测量垂直毛刺和平行毛刺。  电池电极片边缘有毛刺（用红色箭头标记）。使用 DVM6 数码显微镜拍摄的图像。相关产品  数码显微镜 DVM6 / DVM6M点击此处申请样机试用                            关于徕卡显微系统徕卡显微系统的历史最早可追溯到19世纪，作为德国著名的光学制造企业，徕卡显微成像系统拥有170余年显微镜生产历史，逐步发展成为显微成像系统行业的领先的厂商之一。徕卡显微成像系统一贯注重产品研发和最新技术应用，并保证产品质量一直走在显微镜制造行业的前列。徕卡显微系统始终与科学界保持密切联系，不断推出为客户度身定制的显微解决方案。徕卡显微成像系统主要分为三个业务部门：生命科学与研究显微、工业显微与手术显微部门。徕卡在欧洲、亚洲与北美有7大产品研发中心与6大生产基地，在二十多个国家设有销售及服务分支机构，总部位于德国维兹拉(Wetzlar)。         

如果您需要查找您的显微镜序列号，请按照以下步骤操作：1. 查找交货单或产品标签：序列号通常可以在随产品发货的交货单上找到。如果您保留了原始工厂包装，产品标签上也会有序列号。2. 复式显微镜序列号位置：正置显微镜：在设备背面的识别标签上找到序列号，它位于型号字段下方的左侧。倒置显微镜：根据显微镜型号，DMi8的识别标签位于设备右侧，而DMi1的标签在背面。序列号则统一位于左侧，模型字段下方。比对显微镜：识别标签在设备支架的前面，序列号在条形码旁边。3. 体视显微镜与数码显微镜序列号位置：EZ-系列：在 EZ 系列上，序列号位于设备下方，紧邻显微镜名称下方的位置。A-, S-系列：您可以在设备的背面找到识别标签（A 系列和 S 系列），位于显微镜名称下方。M-系列：您可以在光学载体的背面找到识别标签，必须拆卸（M205），或者必须拆卸双筒管（例如 M50），序列号位于左侧，产品编号下方。Z-系列：序列号标签通常位于镜头支架旁边，移除光学载体会很有帮助。DMS-系列：序列号位于设备背面的识别标签旁边。DVM6：序列号位于设备背面的产品编号字段下方。4. 数码相机序列号位置：序列号可以在电缆连接旁或产品编号字段下找到。5. 共聚焦显微镜：例如STELLARIS 5、8或SP8，序列号位于设备扫描头的背面，产品编号字段下。6. 医用显微镜：光学载体：在光学载体的底部可以找到识别标签，对于M720型号需拆下后盖或助手管以访问，而M320/M220型号的识别标签位于顶部，需先拆下管子。徕卡地面支架（仅支架）：F12在底座上，F20/F40在柱子上。徕卡地面支架（仅限站立）：在F50和PROvido型号的显微镜上，识别标签均位于摆臂外壳的底部。天花板安装单元：CT20/CT40/C50的识别标签在摆臂外壳底部。Proveo 8 CT42：识别标签在塔单元的右侧。OH4/OH5/OH6/ARveo/ARveo 8：Mitaka支架的右下方，Mitaka SN在左侧门后。Proveo/OHX：识别标签在摆臂外壳底部。如果您在查找过程中有任何疑问，或者需要进一步的帮助，请随时联系我们的客服团队。

 2024年8月8-9日，由丹纳赫生命科学与精科医学联合举办的“类器官培养与成像分析技术高级培训班”在广州国际生物岛丹纳赫中国生命科学平台大湾区总部圆满落下帷幕。本次培训汇聚了来自全国各地的生命科学研究者和行业从业者，从理论到实践全面探讨类器官技术的前沿应用，为参会者提供了深度学习和实践操作的机会。   开班仪式：为期两天的知识盛宴拉开序幕开班仪式上，李宏教授介绍了此次培训班的背景和意义。他指出，类器官技术作为一种创新的体外模型，正在迅速崛起并广泛应用于肿瘤研究、药物筛选和再生医学等领域。这种高度模拟体内组织和器官的技术，不仅提高了科学研究的精度，也推动了个性化医疗的发展。因此，掌握类器官的培养与成像分析技术，已经成为当今生命科学研究者的重要技能。  广州市精科生命科学研究院首席科学家/类器官事业部总监 李宏教授理论知识培训1          类器官技术的发展与应用开场后的首个讲座由精科医学类器官事业部医学部总监郭翠滨带来，讲座题为“类器官技术的发展与应用”。其中她详细阐述了类器官技术如何在肿瘤研究中发挥关键作用，通过多个案例研究，展示了类器官模型在药物筛选、靶向治疗研究中的应用实例。她指出，类器官能够更好地模拟肿瘤微环境，为药物敏感性测试和抗癌药物的开发提供了一个强有力的平台。通过类器官模型，研究者可以更精准地预测药物在人体内的反应，这对于个性化治疗的实施具有重大意义。  精科医学类器官事业部医学部总监  郭翠滨2          类器官培养的观察与检测技术随后，由丹纳赫生命科学旗下美谷分子仪器应用专家侯昊丽主讲“类器官培养的观察与检测技术”，进一步深入探讨了类器官培养与观察分析的细节。她从类器官培养方法的选择、培养条件的优化，到类器官的成像观察及用于药敏分析的相关技术，逐一进行讲解。她还分享了美谷分子仪器提供的前沿分析设备，比如微孔板读板机、高内涵成像分析设备以及自动化类器官培养设备在类器官培养与分析中的相关应用，为参会者提供了宝贵的经验。  美谷分子仪器应用专家  侯昊丽3          类器官鉴定与抗体选择丹纳赫生命科学旗下Abcam中国大客户经理李泰霖博士就“类器官鉴定与抗体选择”进行了深入讲解。他通过详细的方案分析了当前类器官的主要鉴定技术，包括形态学分析、流式细胞术分析、基因测序等。在这些技术应用中，抗体担当了重要的角色，选择合适的抗体可以提高检测的准确性和灵敏性，降低背景带来的假信号。Abcam中国可提供多种抗体以辅助类器官分析研究。此外，李博士进一步介绍了如何使用Abcam的官网检索相关的抗体，以及如何阅读关于抗体的产品参数信息和注意事项。这些经验分享将有助于研究者提高类器官的鉴定分析能力。  Abcam中国大客户经理 李泰霖博士4          类器官在临床和科研上的应用精科医学类器官事业部高级工程师胡琼为我们介绍了类器官技术在临床和科研中的应用。她讲解的内容涵盖了类器官的分类、研究方向、实验流程及其在肿瘤研究、药物筛选、精准医疗等方面的具体应用，并介绍了类器官技术在乳腺癌、胰腺癌等疾病治疗中的临床案例，展示了类器官在新药研发、毒性研究等领域的潜力。  精科医学类器官事业部高级工程师 胡琼5          类器官在病理全流程制片的方法与技巧来自丹纳赫临床诊断旗下徕卡生物系统的应用专家周环则聚焦讲解了类器官的病理制片相关技术，并提供了有价值的经验信息。在类器官的鉴定与分析中，通过病理制片染色是常见的技术方法，而制片的过程中需要注意的地方较多。周环介绍了常见的石蜡包埋样本与冰冻切片样本的制样与切片过程，尤其对类器官的制片方法进行了详细讲解。另一方面，她针对制片过程中常见的问题，比如切片破裂、切片中产生皱纹等现象进行了描述，并提供了相应的解决方法。这些经验都有助于研究者克服制片的困难，同时利用徕卡生物系统提供的先进制片设备，能有效提高制片的效率。  徕卡生物系统应用专家 周环6          类器官共培养技术和应用精科医学类器官事业部实验室总监李婷婷带来了题为“类器官共培养模型研究与应用”的分享：共培养技术是一种基于类器官培养开发的创新生物技术，通过类器官与其他细胞类型一起培养，模拟人体内部环境，以便研究不同细胞类型之间的相互作用，在医学研究中其已经展现了在模拟肿瘤微环境及评估免疫治疗效果方面的潜力。分享从类器官共培养的类型、应用方向及面临的技术挑战等问题进行分析，详细讲解了类器官共培养的培养方式、实验评价及共培养应用方案。  精科医学类器官事业部实验室总监  李婷婷7          类器官深度成像丹纳赫生命科学旗下徕卡显微系统的产品经理南希介绍了最新的光片成像技术。通过利用徕卡Viventis LS2 Live活体光片显微镜，可以对活体的类器官进行多角度、多位置的成像，尽可能地观察类器官的立体结构与细节。同时，利用徕卡STELLARIS共聚焦显微镜，可以进一步对类器官中的细微结构、亚细胞结构进行成像分析。通过精确的成像，研究者可以获得更多的细胞层次信息，从而对类器官的功能性进行更深入的研究。  徕卡显微系统产品经理 南希8          类器官共培养长时程观察技术介绍针对类器官共培养，长时间的拍摄观察能够直观的反映外周细胞与类器官的相互作用及运动轨迹，这种信息将有助于我们从整个类器官的培养过程中分析类器官与共培养细胞的作用机制及作用强度。丹纳赫生命科学旗下徕卡显微系统的产品经理童昕，为我们展示了利用MICA全场景成像分析系统进行类器官共培养的成像方案，及实际的共培养案例。通过进一步地解读这些成像结果，可以让我们对类器官共培养有更为直观的理解。        9          类器官共培养科研案例分享精科医学高级工程师陈雅婷介绍了类器官共培养技术在肿瘤研究中的应用，特别是与免疫细胞共培养以模拟肿瘤微环境的策略。她分享了多个共培养案例，包括骨肉瘤与工程菌、膀胱癌与免疫细胞共培养等，通过这些案例展示了共培养模型在评估癌症免疫治疗、药物筛选和研究肿瘤免疫逃逸机制方面的潜力。此外，她还探讨了共培养模型的局限性，如无法完全复制体内环境等，但其在优化免疫疗法和高通量药物筛选方面具有重要应用价值。  精科医学类器官事业部高级工程师 陈雅婷10          类器官共培养技术中的流式细胞术应用来自丹纳赫生命科学旗下贝克曼库尔特生命科学的应用专家贺姮详细地讲解了流式细胞术的原理，以及在类器官研究中的应用。在类器官培养中，流式细胞术可以实现传统细胞培养过程中需要的分析应用，包括细胞周期、细胞凋亡分析等。同时针对类器官共培养，利用流式细胞术还可以进一步分析类器官的细胞亚型、外周免疫细胞种类等。她还展示了利用贝克曼库尔特的CytoFLEX流式细胞仪进行免疫细胞类器官共培养的分析结果。流式细胞术的应用将有助于研究者从细胞层面进一步分析类器官共培养过程中的细胞反应。  贝克曼库尔特生命科学应用专家 贺姮11          类器官的高级图像数据分析随着人工智能技术的进一步发展和普及，AI图像分析技术逐渐被应用到科研中。来自丹纳赫生命科学旗下徕卡显微系统的产品经理李丹展示了徕卡Aivia图像分析软件在类器官分析方面的应用，包括细胞计数、细胞类群分割、三维图像构建等。在这一环节中，学员们还亲自参与到成像数据的处理与分析中。在讲师的指导下，学员们利用VR设备体验了AI软件的三维图像构建功能，进而实际观察类器官中的每个细胞结构和空间分布。这一环节帮助学员们更好地掌握了数据分析的基本技能，同时也为他们未来的研究提供了实用的工具和方法。  徕卡显微系统产品经理 李丹  学员体验VR细胞观察技术实验操作培训为了加深学员对理论知识的理解，课程还安排了两天的实操环节，实操培训包括：类器官培养、复苏与传代、类器官共培养体系搭建等。讲师们在现场进行演示，并手把手带领学员们进行相关步骤的操作。在实验台前，学员们专注地按照讲师的指示进行每一步操作，沉浸式地学习这些实操技术。实操环节不仅让大家将理论与实践相结合，还为他们未来的实验工作打下了坚实的基础。实验操作现场  通过徕卡显微系统的Ivesta 3格林诺夫体视显微镜观察待收集的组织        精科医学技术员手把手指导学员进行类器官培养的实验操作        现场指导如何分辨类器官以及关键的观察指标        离心分离淋巴细胞用于类器官共培养体系搭建        学习使用徕卡显微系统的MICA全场景成像分析系统进行类器官共培养的长时间观察，以及徕卡Mateo FL进行类器官共培养体系的荧光成像观察        部分学员的类器官共培养体系荧光成像结果，拍摄自徕卡Mateo FL荧光倒置显微镜结语：未来类器官研究的无尽可能培训班的最后，我们为学员们安排了统一的答疑环节，并颁发了结业证书。通过这次培训，学员们不仅掌握了类器官培养与成像分析的关键技术，还拓宽了自己的研究视野，更重要的是结识了许多志同道合的同行朋友。            李宏教授现场答疑和为学员颁发结业证书本次培训班内容紧凑、实用性强，学员们的积极参与和高度评价，充分体现了类器官技术在现代生命科学研究中的重要性和关注度。丹纳赫生命科学与精科生物将继续致力于推动该前沿技术的普及与应用，期待在未来能够为广大科研工作者提供更多的学习与交流机会。相信通过不断的学习与实践，类器官技术将为生命科学的研究与应用带来更加深远的影响。          充实的学习，难忘的相聚        关于丹纳赫生命科学      在丹纳赫，我们汇集科学、技术和运营的能力，让未来科技对今日生活的影响得以加速实现。我们携手全球客户，构建方案，解决他们最为复杂的挑战，将科学的力量变为现实。我们的全球团队正在创造生命科学、医学诊断、生物技术等领域的未来。丹纳赫生命科学平台服务全球领先的生命科学公司，加速突破创新，实现人类更健康的生活。我们与科研、临床及政府机构的科学家们长期保持合作，应用我们在科学和运营领域的所长，助力他们深入理解疾病原理和机制，研发更有效的治疗方法和开发更高效的工作流程。我们齐心协力，加速生命科学对人类生活的积极影响。丹纳赫中国生命科学平台成立于2019年6月1日，旨在扎根中国市场，为中国的用户提供更好的产品和服务，着力于打造全方位的精准医学和生物制药整体化解决方案。平台目前拥有IDT埃德特、Abcam艾博抗、贝克曼库尔特生命科学、美谷分子仪器、IDBS、SCIEX、艾杰尔-飞诺美、徕卡显微系统、Aldevron和颇尔等诸多知名品牌。在精准医学和生物药领域，丹纳赫生命科学基于中国客户的实际需求场景，不断开发及完善相关分析解决方案和工作流程，目前在合成生物学、多组学研究、类器官研究、肿瘤精准诊疗、抗感染检测、母婴保健检测等方面拥有多维度丰富的解决方案，在抗体药物、基因治疗药物、细胞治疗药物、核酸药物、新型疫苗等众多生物药领域拥有从研发到质控分析等全方位成熟且颇具优势的综合方案。关于精科医学      精科医学作为中国类器官技术转化先行者，在类器官培养上积累了丰富的经验，涵盖了肿瘤类器官疾病模型 (乳腺癌、肺癌、胃肠癌、肝癌、膀胱癌、前列腺癌、肾癌、甲状腺癌、卵巢癌、宫颈癌、骨肉瘤以及脑肿瘤等)、非肿瘤类器官疾病模型以及正常组织类器官模型。其中基于活检组织的微量建模培养成功率极高，同时可以实现穿刺标本的“一样两检”(类器官药敏+NGS)。精科拥有自主研发的类器官培养技术和试剂盒，能够有效地延长样本保护期，扩大地域覆盖面。此外精科医学还和多家医院、科研机构和药企开展科研、临床和CRO服务等深度合作。目前精科医学已经在类器官建模方法、类器官鉴定、药物敏感性检测方法、类器官共培养等多个重要技术上实现突破，同时是中国首个乳腺类器官团体标准制定者。    徕卡显微咨询电话：400-877-0075                        关于徕卡显微系统徕卡显微系统的历史最早可追溯到19世纪，作为德国著名的光学制造企业，徕卡显微成像系统拥有170余年显微镜生产历史，逐步发展成为显微成像系统行业的领先的厂商之一。徕卡显微成像系统一贯注重产品研发和最新技术应用，并保证产品质量一直走在显微镜制造行业的前列。徕卡显微系统始终与科学界保持密切联系，不断推出为客户度身定制的显微解决方案。徕卡显微成像系统主要分为三个业务部门：生命科学与研究显微、工业显微与手术显微部门。徕卡在欧洲、亚洲与北美有7大产品研发中心与6大生产基地，在二十多个国家设有销售及服务分支机构，总部位于德国维兹拉(Wetzlar)。         

   徕卡显微系统的 DLS 显微镜系统是一种创新概念，将光片显微技术集成到共聚焦平台中。由于其独特的光学结构，样本可以安装在标准玻璃底培养皿上，与传统的安装程序相比，几乎不需要或只需很少的适应。在这里，我们介绍了一种便捷的方法，能够快速准备样本以进行光片成像。在光片显微镜中，样本准备是至关重要的。理想情况下，样本准备应尽可能简单和快速。DLS 系统的优势在于其支持水平安装并提供了便捷的样本触达。样本准备有两个基本要求：一是样本需要放置在检测物镜的焦平面内（位于 TwinFlect 镜子之间）；二是样本需稍微高于培养皿底部，以确保镜子或光片可以到达样本的远端部分。  图1展示了样本在检测物镜的自由区域中的最佳放置位置定制的 U 型玻璃毛细管，可适用于不同尺寸的 TwinFlect 镜子，有助于用户以直观的方式满足这些样本准备要求。  图2展示了通过使用U型玻璃毛细管实现样本的最佳定位。工作流程视频剪辑将引导您了解使用U型玻璃毛细管进行样本准备的完整工作流程。材料与方法U型毛细管有两种不同的尺寸可供选择：外径：1.5毫米；内径：1.03毫米，长度20毫米（订单号158007061，50根毛细管）→ 适用于TwinFlect 2.5毫米、TwinFlect 5毫米和TwinFlect 7.8毫米。长度为20毫米的U型玻璃毛细管非常适合与直径为35毫米的玻璃底培养皿（如Greiner、ibidi、Matek等）配合使用。相关产品  Viventis LS2 Live 双视野光片荧光显微镜点击此处申请样机试用    徕卡显微咨询电话：400-877-0075                        关于徕卡显微系统徕卡显微系统的历史最早可追溯到19世纪，作为德国著名的光学制造企业，徕卡显微成像系统拥有170余年显微镜生产历史，逐步发展成为显微成像系统行业的领先的厂商之一。徕卡显微成像系统一贯注重产品研发和最新技术应用，并保证产品质量一直走在显微镜制造行业的前列。徕卡显微系统始终与科学界保持密切联系，不断推出为客户度身定制的显微解决方案。徕卡显微成像系统主要分为三个业务部门：生命科学与研究显微、工业显微与手术显微部门。徕卡在欧洲、亚洲与北美有7大产品研发中心与6大生产基地，在二十多个国家设有销售及服务分支机构，总部位于德国维兹拉(Wetzlar)。          

      (图片来自网络）瑞典皇家科学院宣布，将2014年诺贝尔化学奖授予埃里克•白兹格（Eric Betzig）、斯蒂芬•黑尔（Stefan W. Hell）和威廉•莫尔纳（William E. Moerner），以表彰他们为发展超高分辨率荧光显微镜所作的贡献。 获奖理由很长时间以来，人们都认为光学显微技术无法突破一条极限：它永远不可能获得比所用光的半波长更高的分辨率，这被称为“阿贝衍射极限”。然而，2014年诺贝尔化学奖的得主使用荧光分子，巧妙地绕开了这一极限。他们突破性的工作将光学显微技术带到了纳米尺度。成果解析埃里克•白兹格、斯蒂芬•黑尔和威廉•莫尔纳由于超越了0.2微米这个极限而被授予2014年的诺贝尔化学奖。由于他们的贡献，现在通过光学显微镜我们可以观察到纳米世界。此次诺贝尔化学奖授予两项不同的工作。其中一项是斯蒂芬•黑尔在2000年开发的STED显微镜技术。这项技术同时使用两束激光，其中一束激发荧光分子发光，另外一束将除了一个纳米尺寸之外的荧光全部猝灭掉。这样，通过一个纳米一个纳米地扫描样品，我们可以获得分辨率高于阿贝衍射极限的图像。另一项工作来自于埃里克•白兹格和威廉•莫尔纳，他们各自独立地建立了单分子显微镜(single molecule microscopy)的基础。这项成果可以将单个分子的荧光打开或者关掉。科学家们对同一区域反复成像，每次只允许几个分散的分子发光。将这些图像叠加就获得了分辨率达到纳米尺 度的图像。在2006年，埃里克•白兹格首次使用了这种方法。获奖者简介      斯蒂芬•黑尔（StefanW. Hell）：德国人。1962年出生于罗马尼亚的阿拉德（Arad），1990年在德国海德堡大学获得博士学位。现为哥廷根马克斯•普朗克生物物理化学研究所主任，和位于德国海德堡的德国癌症研究中心部门负责人。早在2004年徕卡显微系统就与Stefan Hell合作推出了商业化4Pi超高分辨显微镜，开启了超高分辨产品商业化的先河。2007年,他将STED专利技术授权徕卡研发STED超高分辨显微镜，推向市场后，该系列产品广受好评。      埃里克•白兹格（Eric Betzig）：美国人。1960年生于美国密歇根州安阿伯（Ann Arbor）市，1988年获康奈尔大学博士学位。现为美国弗吉尼亚州阿什伯恩市（Ashburn）霍华德•休斯医学研究所珍莉亚农场研究园区研究组长。      威廉•莫尔纳（William E. Moerner）：美国人。1953年出生于加利福尼亚州的普莱森顿（Pleasanton），1982年在康奈尔大学获博士学位。现为斯坦福大学哈里•莫舍化学教授和应用物理学兼职教授。2014年诺贝尔化学奖获奖者们利用荧光分子为细小的物体“标记”，让它们在显微镜下变得五彩缤纷，轮廓清晰，使科学家能在显微镜下一瞥纳米级别的微小世界。今天，纳米显微技术已经在全球被广泛使用，并且不断在为人类做出新的贡献。  诺贝尔化学奖评选委员会在声明中说，科学家的发现在真正意义上扩大了科学家们的视野，从此以后，科学家们就能在显微镜下看到生物细胞内纳米级别的粒子运动的情况。他们可以看到微小的粒子是如何在神经细胞之间形成突触的，也可以看到那些在帕金森症、阿茨海默症等等疾病的萌发中起到关键作用的微小蛋白质粒子，还能跟踪胚胎分裂时单个蛋白质分子的运动轨迹。参加问卷调研，领取精美小礼品！    8月底活动截止届时答题满分的小伙伴会收到我们的小礼品    问卷答案的答案可以在之前的推文内寻找哦~徕卡175周年：徕卡品牌的发展历程，也是显微技术的发展史          徕卡显微咨询电话：400-877-0075                        关于徕卡显微系统徕卡显微系统的历史最早可追溯到19世纪，作为德国著名的光学制造企业，徕卡显微成像系统拥有170余年显微镜生产历史，逐步发展成为显微成像系统行业的领先的厂商之一。徕卡显微成像系统一贯注重产品研发和最新技术应用，并保证产品质量一直走在显微镜制造行业的前列。徕卡显微系统始终与科学界保持密切联系，不断推出为客户度身定制的显微解决方案。徕卡显微成像系统主要分为三个业务部门：生命科学与研究显微、工业显微与手术显微部门。徕卡在欧洲、亚洲与北美有7大产品研发中心与6大生产基地，在二十多个国家设有销售及服务分支机构，总部位于德国维兹拉(Wetzlar)。          

       本文介绍了一种配备自动化和可重复的 DIC（微分干涉对比）成像的 6 英寸晶圆检测显微镜，无论用户的技能水平如何。制造集成电路（IC）芯片和半导体组件需要进行晶圆检测，以验证是否存在影响性能的缺陷。这种检测通常使用光学显微镜进行质量控制、故障分析和研发。为了有效地可视化晶圆上结构之间的细微高度差异，可以使用 DIC 。在半导体器件生产过程中，晶圆检验对于识别和减少可能影响器件性能的缺陷至关重要。为了提高检验的精确性和效率，光学显微镜方案应结合不同的对比方法，提供关于图案化晶圆上可能存在的任何缺陷的准确可靠信息。其中，在晶圆检验中起重要作用的一种对比方法是微分干涉对比（DIC）。什么是 DIC 以及为什么要使用它？微分干涉对比（DIC） ，也被称为诺马斯基对比，有助于可视化样品表面的高度差异[1,2]。DIC 使用沃拉斯顿棱镜、起偏器和检偏器（参见图1A）。起偏器和检偏器的偏振面相互垂直（交叉于 90° )   。通过棱镜的偏振光被分割成两束具有 90° 偏振差异的广播。在离开棱镜后，这两束光波从样品表面反射，并朝着物镜返回。由于样品表面形态或光学性质的差异，光线可能经历不同的光学路径长度，导致一束光与另一束光相比发生相移。经过物镜棱镜和分析器的再次通过后，光线重新合并成一束，然后它们之间可以发生干涉。DIC 图像显示出强度和颜色的变化，从而呈现出纹理的外观。DIC 使得通常使用明场或暗场等其他类型的照明无法轻易观察到的高度差异变得明显可见。有关 DIC 的更多信息，请参考参考文献1和2。下图是一个使用微分干涉对比（DIC）与明场和暗场照明相比，增强样品表面高度差异的示例（见图1）。DIC 被用来拍摄一 个图案化的晶圆样品。在 DIC 下，特征之间的高度差异更加明显可见。                        图1:用 DIC、明场和暗场照明成像的图案化晶圆样品图像：A) 显微镜光学中的入射光路径用于 DIC 和B) 样品图像；C) 明场的入射光路径和D) 样品图像；以及E) 暗场的入射光路径和F) 样品图像。使用 DIC 时的挑战：DIC 能够让使用者观察到晶圆上结构之间的微小高度差异，但对许多用户来说，使用起来可能相当复杂。正确调整 DIC 棱镜对于实现最佳对比度和准确、可重复的结果至关重要。例如，在 DIC 图像中，样品结构的垂直方向（进入或离开样品的水平面）在很大程度上取决于棱镜对光波的剪切。因此，剪切影响观察到的结构之间的任何高度差异，即图像中的一个结构是否看起来比另一个更高或更低。剪切通常表示为具有正向或负向的偏差（参见下文图2） ，但偏差通常不与实际的高度差异相关。对于大多数光学显微镜，除了起偏器和检偏器的交叉之外，还需要手动调整 DIC 棱镜。然而，用户应该具有高水平的经验才能获得可比较、一致的 DIC 结果。获得具有非常好 DIC 对比度的图像可能需要用户花费大量的时间和精力进行手动调整。  图2:使用 DIC 拍摄的图案化晶圆区域的图像，具有：A) 负偏差，B) 无偏差，和 C) 正偏差。加号和正方形形状的边框在负偏差时看起来像是从表面升起，在正偏差时则 像是陷入表面。自动化和可重复的 DIC 成像的优势对于手动 DIC 操作，显微镜的照明和对比度设置必须始终由用户直接进行调整。图像结果在很大程度上取决于用户的经验和技能水平。然而，通过提供自动化 DIC 操作的显微镜，可以高效地实现用于质量控制（QC）、失效分析和研发（R&D）的晶圆检查工作流程。即使是经验较少的用户也可以轻松地进行可重复的 DIC 成像，只需进行最少的设置更改。只需按下按钮，就可以选择适当的棱镜并调整其位置以实现所需的入射光波的剪切，此外，设置会自动存储并易于调用。当使用 DIC 时，这一特性对于可靠的文档记录也是必不可少的。徕卡的可重复 DIC 解决方案使用 DM6 M 显微镜（参见图3） ，可以快速可靠地检查6英寸晶圆。由于以下特点，它提供了晶圆和半导体组件的自动化和 可重复的 DIC 成像：专为 6 英寸晶圆设计的载物台；优化十字交叉的起偏器和检偏器（称为 ICR 滤光片）；通过棱镜的电动编码定位准确回忆 DIC 设置；由于专用的 DIC 棱镜和 ICR 滤光片，实现均匀的对比度；由于自动化的显微镜操作，正确选择和调整棱镜和 ICR 滤块，使用起来快速且容易。在工作区域节省空间方面还有额外的好处，因为 DM6 M 的占地面积比通常用于晶圆检查的显微镜要小。  图3:使用安装了 6 英寸晶片平台的 DM6 M 显微镜进行晶片检测的示例。图4展示了使用 DM6 M 显微镜和可重复 DIC 技术拍摄的图案化晶圆图像。为了比较的目的，图5也展示了同一晶圆在明场和暗场照明下记录的图像。                图4：使用 DM6 M 显微镜，采用具有负偏移（A和C）和正偏移（B和D）的光波剪切的差分干涉对比（DIC）技术，对图 案化晶圆的不同区域进行成像。                图5: 图4中显示的图案化晶圆的相同区域，但这次是使用DM6 M显微镜在A)明场和B)暗场照明下成像。总结和结论描述了一种带有自动化和可重复的微分干涉对比（DIC）技术的 6 英寸晶圆检查显微镜，即带有晶圆载物台的 DM6 M。在半导体行业中，晶圆检查用于质量控制（QC）、失效分析和研发（R&D） ，通常需要使用各种对比方法的光学显微镜。DIC 技术能够高效地可视化图案化晶圆上结构之间的微小高度差异。即使是经验较少的用户，使用自动化和可重复的 DIC 也能在检查期间高效地进行 DIC 成像。参考文献：1. D. Diez, J. DeRose，《超越明场》章节，《金相学 - 简介：如何揭示金属和合金的微观结构特征》，   Science Lab （2020 年）徕卡显微系统。2. J. DeRose, D.R. Barbero，《使用显微镜对比方法进行快速半导体检测：通过光学显微镜揭示关键细节，在电子行业 中高效可靠地进行半导体质量控制》，  Science Lab（2023 年）徕卡显微系统。《晶圆上的光刻胶残留和有机污染物的可视化》      点击免费下载《6英寸晶圆检测显微镜：可靠观察细微高度差异》      点击免费下载    徕卡显微咨询电话：400-877-0075                        关于徕卡显微系统徕卡显微系统的历史最早可追溯到19世纪，作为德国著名的光学制造企业，徕卡显微成像系统拥有170余年显微镜生产历史，逐步发展成为显微成像系统行业的领先的厂商之一。徕卡显微成像系统一贯注重产品研发和最新技术应用，并保证产品质量一直走在显微镜制造行业的前列。徕卡显微系统始终与科学界保持密切联系，不断推出为客户度身定制的显微解决方案。徕卡显微成像系统主要分为三个业务部门：生命科学与研究显微、工业显微与手术显微部门。徕卡在欧洲、亚洲与北美有7大产品研发中心与6大生产基地，在二十多个国家设有销售及服务分支机构，总部位于德国维兹拉(Wetzlar)。          

       深入了解锂电池系统需要高质量的表面处理，以评估其内部结构和形态。然而，快速简单地制备原始横截面可能由于所涉及材料的性质和电池结构而变得困难。多数材料系统通常使用切割、包埋、研磨、抛光等纯机械方法制备横截面。在这种情况下，单纯的机械制备不足以对电池进行高分辨率的 SEM 分析。具体而言，电池正极的脆性材料在切割时可能会过度碎裂，而较软的材料(例如锂)在抛光时可能会涂抹掉多孔结构和膜结构，导致样品结构模糊、孔隙被覆盖并出现空隙。在这里，我们详细讨论了用于 SEM 分析的锂离子电池制备步骤，以及如何通过宽离子束研磨消除机械制备中的伪影。宽离子束研磨介绍宽离子束研磨利用离子化氩气轰击样品，并从样品中物理溅射原子。在横截面中进行切割(也称为斜面切割)时，如这里所示，碳化钨掩模位于离子束和样品之间，用于定义横截面的位置，并保护样品的前表面。如果操作得当，无论样品材料的性质或成分如何，斜面切割过程都会产生原始横截面。电子显微镜分析用锂电池的分步制备在本应用注意事项中，机械制备和宽离子束研磨相结合，用于制备电池系统的两个组件——锂镍锰钴氧化物/铝 (Li-NMC/Al) 电极和铅 (Pb) 板栅。对于两种样品，机械制备和离子研磨遵循相似的方案。使用徕卡显微系统 EM TXP 靶表面处理系统进行机械制备，这是一种高精度的台式设备，可用于锯、磨、抛光和碾磨样品，并可进行原位样品观察。在徕卡 EM TIC3X 宽离子束研磨系统上进行离子研磨，以获得最终的原始横截面。  图 1：EM TXP 机械制备系统(左)和 EM TIC3X 宽离子束研磨机(右)。制备方案Li-MNC 极片材料和铅栅板这两个样本都使用双组分环氧树脂安装在载玻片之间，然后固定在徕卡 TIC3X 样品架上，再使用 TXP 制备。将样品固定在载玻片之间为样品提供了额外支撑，也不必将样品完全包埋在环氧树脂等其他固定材料中。这也减少了需要削洗和抛光的表面积，并使样品在整个工作流程中都安装在单个样品托上。a机械制备然后将样品安装在 TXP 夹头上，并使用金刚石研磨箔在 TXP 上研磨至 9 微米光洁度。然后将样品倾斜至 60° 角，并使用 400 粒度的碳化硅砂纸在正面载玻片上磨出斜面。这从横截面表面移除了多余的玻璃，减少了离子研磨器工作量，因此加快了离子研磨过程并增加了产量。制备时间大约 20 分钟。b用三离子束研磨仪进行研磨然后将样品托直接安装在 TIC3X 适配器上，用于室温下斜面切割标准阶段中的离子研磨。每个样品在 8 kV 下研磨。Li-MNC 电极的研磨时间是 3 小时，铅栅板是 6 小时。样品尺寸不同导致研磨时间有差异。扫描电镜分析图 1 和 2 展示了 Li-MNC 电极样品的SEM图像。图 1 显示了该样品完整的层级堆叠，包括用于安装样品的两片玻璃和电极的氧化物/金属夹层结构。图 2 显示了感兴趣的样品材料更高倍数的放大图像。这些图像中样品光滑无缺的表面体现出卓越的制备品质。这些结果可用于确定电极材料中的颗粒尺寸和分布。此外，可以对整个电极样品以及各层进行精确的厚度测定。同样令人感兴趣的是结构中央位于多孔膜和金属膜之间的界面。这些图像显示了金属膜如何与多孔层的纹理保持一致(用红色箭头表示)，如果结构中存在分层，也可以从这些图像中看出。  图 2：Li-NMC 电极完整样品的 SEM 图像展示了位于结构中央的两个多孔层和金属膜。  图 3：Li-MNC 电极结构更高放大倍数的 SEM 图像。适用于多色报告线成像的显微技术图 3 显示了铅栅板样品的 SEM 图像。从这些图像中可以观察到高质量的横截面。样品表面处于原始状态，铅栅板的颗粒结构清晰可见，没有任何额外的蚀刻。从这个样品中，可以分析粒度和定位，虽然没有在该样品上拍摄到，但是这种处理质量通常适合于电子背散射衍射 (EBSD) 分析。在这些图像中，我们可以清楚地看到粒度变化很大的区域——有些区域的晶粒相当粗，有些区域的晶粒结构非常细。晶界也很容易看到。  图 4：铅栅板样品的低倍放大(左)和高倍放大(右) SEM 图像。样品由东宾夕法尼亚制造公司提供。样本制备和图像由 JH 技术公司的 Jerome Pons 提供。相关产品  EM TIC 3X三离子束切割仪点击此处申请样机试用    徕卡显微咨询电话：400-877-0075                        关于徕卡显微系统徕卡显微系统的历史最早可追溯到19世纪，作为德国著名的光学制造企业，徕卡显微成像系统拥有170余年显微镜生产历史，逐步发展成为显微成像系统行业的领先的厂商之一。徕卡显微成像系统一贯注重产品研发和最新技术应用，并保证产品质量一直走在显微镜制造行业的前列。徕卡显微系统始终与科学界保持密切联系，不断推出为客户度身定制的显微解决方案。徕卡显微成像系统主要分为三个业务部门：生命科学与研究显微、工业显微与手术显微部门。徕卡在欧洲、亚洲与北美有7大产品研发中心与6大生产基地，在二十多个国家设有销售及服务分支机构，总部位于德国维兹拉(Wetzlar)。                      

       本文解释了如何利用人工智能（AI）进行高效、精确的 2D 细胞培养汇合度评估。准确评估细胞培养的汇合度，即表面积覆盖的百分比，对于可靠的细胞研究至关重要。传统方法使用视觉检查或简单算法，使结果不客观和精确，尤其是对于用于药物发现、组织工程和再生医学的复杂细胞系。利用自动化图像分析和深度学习算法的方法提供更好的精度，并可以增强实验结果。传统与 AI 汇合度评估方法通过人工主观经验评估进行汇合度评估存在显著局限性。这种劣势在处理细胞形态复杂、细胞边界不清晰以及实验环境多变的情况下尤为明显。人工评估容易受到主观性误差的影响，因此存在不一致结果的严重风险。这种显著局限性可能影响汇合度测量的精度和可靠性。因此，需要采用 AI 技术，如自动图像分析和深度学习，提供先进解决方案，使汇合度评估变得高效且可重复，尤其是在处理动态和多样化的细胞环境时。AI 汇合度测量的优势基于 AI 的汇合度评估提供以下优势：01由于先进模型如卷积神经网络（CNN），能够适应多样化的细胞形态；02在处理复杂和多样化细胞系时具有实验灵活性；03对变化的实验条件动态响应，使研究人员能够更细致地了解动态细胞环境中的汇合度；04用于复杂和拥挤培养物的边缘检测，使细胞边界能够清晰识别；05优于人工评估的稳健可靠分析。AI 的额外好处与使用人工评估相比，高效确定汇合度并节省宝贵时间；即使对于独特或复杂的细胞系，也能进行准确的汇合度分析；由于标准化的汇合度测量，增加了再现性和一致的结果；优化的实验条件用于细胞培养，在充实分析期间提供实时反馈。下面显示了使用 Mateo FL 显微镜进行的手动和基于 AI 的细胞汇合度测量。汇合度数值来自对细胞培养传统相差显微图像的手动评估（左）和AI辅助分析（右）。  图 1：细胞培养传统相位对比图像手动评估的汇合度数值（左）和AI辅助分析（右）。了解Mateo FL如何通过 AI 辅助的汇合度测量消除主观猜测引起的误差扫描二维码下载白皮书        中文版    相关产品  Mateo FL 数字显微镜    徕卡显微咨询电话：400-630-7761                        关于徕卡显微系统徕卡显微系统的历史最早可追溯到19世纪，作为德国著名的光学制造企业，徕卡显微成像系统拥有170余年显微镜生产历史，逐步发展成为显微成像系统行业的领先的厂商之一。徕卡显微成像系统一贯注重产品研发和最新技术应用，并保证产品质量一直走在显微镜制造行业的前列。徕卡显微系统始终与科学界保持密切联系，不断推出为客户度身定制的显微解决方案。徕卡显微成像系统主要分为三个业务部门：生命科学与研究显微、工业显微与手术显微部门。徕卡在欧洲、亚洲与北美有7大产品研发中心与6大生产基地，在二十多个国家设有销售及服务分支机构，总部位于德国维兹拉(Wetzlar)。                

 类器官是由来源于健康个体或患者的多能干细胞或成体干细胞培育而成的三维立体微型结构，通过将3D器官型系统培养与微流控技术相结合，产生“器官芯片”。这些芯片模型在可控的干细胞微环境中，能够模拟更为复杂的器官结构和功能，从而促进了类器官的发展和成熟[1]。相比传统的二维培养模型，类器官代表着一种能够概括整个生物体生理过程的创新技术，具有更接近生理细胞组成和行为、更稳定的基因组、更适合于生物转染和高通量筛选等优势。与动物模型相比，类器官模型的操作更简单，还能用于研究疾病发生和发展等机理。类器官技术提供了模拟由诱导突变引起的人类遗传疾病的理想模型。通过使用CRISPR/Cas9等基因编辑技术，可以研究某些和遗传缺陷相关的疾病。此外，为高通量药物发现提供潜在的研究工具，实现准确的毒性测试和临床前研究。因此在疾病模型构建、神经退行性疾病研究、癌症研究、毒性研究等领域均有着广泛的应用。    疾病模型构建类器官可以在器官水平上模拟疾病病理学特征，并为后续的转化研究提供有效的疾病模型。例如，通过建立患者胃肠道肿瘤的类器官库，使用从穿刺活检组织中解离的细胞，悬浮于基质胶中培养产生患者来源的类器官，与原始体内肿瘤显示出高度的基因型和表型相似性[2]。神经退行性疾病研究通过构建基底干细胞衍生的嗅觉上皮类器官作为阿尔茨海默病的研究模型，采用多模态时空监测技术，将阻抗生物传感器和实时成像相结合，记录类器官组织的生长发展及阿尔茨海默病的发展进程。利于深入探索神经退行性疾病的发展机制，并助力开发新的治疗方法[3]。 癌症机制探索通过将肿瘤组织来源的癌症类器官与微流控设备相结合，“癌症芯片”可以模拟重建肿瘤及其微环境，有助于更好地了解其在体内的行为，改善药物疗效的临床前评估。通过构建微流控肿瘤-血管界面模型，可以进一步研究肿瘤组织与其他器官之间的相互作用。例如，构建模拟肿瘤和血管之间的3D界面模型，以研究肿瘤细胞侵入血管的过程；使用实时成像跟踪不同隔室之间的相互作用，发现巨噬细胞介导的血管损伤促进了肿瘤细胞的侵入[4]。毒性研究类器官和器官芯片被广泛应用于毒性研究，以提高药物研发的效率，减少对动物的依赖，同时提高药物的安全性和有效性。器官芯片通过构建体内细胞和器官的关键生物学特征，重现更具生理学特性、更加接近于人体的微环境。例如，通过构建肝脏类器官芯片用于毒性研究：模拟肝脏的代谢、解毒和药物代谢功能，评估化合物对肝脏的毒性[5]。 未来展望类器官是在细胞和分子水平上对人体组织和器官进行模拟的强大工具，被认为是个性化医学中的替身。类器官的应用可为疾病模型构建、神经退行性疾病研究、癌症研究、毒性研究等方面提供很好的辅助，对于精准医疗与转化医学研究是有价值的研究材料与资源。在丹纳赫，我们汇集科学、技术和运营的能力，让未来科技对今日生活的影响得以加速实现。丹纳赫生命科学提供类器官研究多维的综合解决方案，旗下运营公司的先进设备助力类器官和器官芯片的研究开发。        CellXpress.ai体外模型智能化工厂赋能类器官研究和应用以标准化、自动化、智能化为导向，通过整合液体工作站、显微镜、培养箱等全套设备，利用人工智能辅助监测、培养、成像和调度，提高类器官等细胞模型培养的一致性、稳定性和规模，使检测更加可靠和可重现。►人工智能软件辅助培养，真正无人值守，提高培养一致性►内置标准化实验方案，提高标准化和培养成功率►统一直观的软件界面，使用方便，节省培训时间►高度灵活，便于接入其他上下游设备►全自动工作流程，提高效率，减少人工误差应用方向：生物医学基础科学研究（发育机制、疾病发生发展机制、罕见病模型构建、传染病、基因编辑等），肿瘤类器官药敏检测，新药研发（模型构建、药效、毒性评估、适应症拓展等），再生医学以及类器官样本库构建。    美谷分子仪器的CellXpress.ai体外模型智能化工厂        MICA多模态显微成像中枢助力更好地了解分子或细胞级别的时空过程结合了密闭箱式培养环境中的宽场和共聚焦成像，使得科研人员能够深入、长时间持续观察复杂的细胞与细胞间的相互作用。适用于多种需求的类器官成像研究，助力揭示生物样本的细微结构和复杂的生物过程。►快速设置、简易成像，对实验新手友好，可在MICA系统中直接培养并观察细胞►宽场、共聚焦、LIGHTNING检测模式快速切换，满足不同检测精细度及应用目的需要►多荧光指标同时检测，无延迟的成像效果    徕卡显微系统的MICA多模态显微成像中枢        CytoFLEX流式细胞仪用于类器官表型、细胞构成及质控分析在类器官研究中广泛应用于细胞表型、构成及质控分析，为细胞亚型的精确鉴定及细胞功能和状态的综合分析提供有利支撑。►出色的灵敏度和分辨率让细胞分群更清晰►优异的线性度实现更准确的自动补偿调节和补偿库功能►简单直观的软件操作帮助初学者快速掌握和使用►最高至6激光21色和通道灵活升级，满足常规流式检测需求    贝克曼库尔特生命科学的CytoFLEX LX流式细胞分析仪参考文献1. Yan HHN, Chan AS, Lai FP, Leung SY. Organoid cultures for cancer modeling. Cell Stem Cell. 2023, 30(7): 917. 2. Sun WJ, Luo ZM, Lee JM, et al. Organ-on-a-Chip for Cancer and Immune Organs Modeling. Advanced healthcare materials. 2019, 8: 1801363.3. Liu MX, Jiang N, Qin CL, et al. Multimodal spatiotemporal monitoring of basal stem cell-derived organoids reveals progression of olfactory dysfunction in Alzheimer's disease. Biosens Bioelectron. 2024, 246: 115832.4. Zervantonakis IK, Hughes-Alford SK, Charest JL, etal. Three-dimensional microfluidic model for tumor cell intravasation and endothelial barrier function. Proc Natl Acad Sci U S A. 2012, 109: 13515.5. Messelmani T, Morisseau L, Sakai Y, etal. Liver organ-on-chip models for toxicity studies and risk assessment. Lab Chip. 2022, 22: 2423.                      关于徕卡显微系统徕卡显微系统的历史最早可追溯到19世纪，作为德国著名的光学制造企业，徕卡显微成像系统拥有170余年显微镜生产历史，逐步发展成为显微成像系统行业的领先的厂商之一。徕卡显微成像系统一贯注重产品研发和最新技术应用，并保证产品质量一直走在显微镜制造行业的前列。徕卡显微系统始终与科学界保持密切联系，不断推出为客户度身定制的显微解决方案。徕卡显微成像系统主要分为三个业务部门：生命科学与研究显微、工业显微与手术显微部门。徕卡在欧洲、亚洲与北美有7大产品研发中心与6大生产基地，在二十多个国家设有销售及服务分支机构，总部位于德国维兹拉(Wetzlar)。       

                                    关于徕卡显微系统徕卡显微系统的历史最早可追溯到19世纪，作为德国著名的光学制造企业，徕卡显微成像系统拥有170余年显微镜生产历史，逐步发展成为显微成像系统行业的领先的厂商之一。徕卡显微成像系统一贯注重产品研发和最新技术应用，并保证产品质量一直走在显微镜制造行业的前列。徕卡显微系统始终与科学界保持密切联系，不断推出为客户度身定制的显微解决方案。徕卡显微成像系统主要分为三个业务部门：生命科学与研究显微、工业显微与手术显微部门。徕卡在欧洲、亚洲与北美有7大产品研发中心与6大生产基地，在二十多个国家设有销售及服务分支机构，总部位于德国维兹拉(Wetzlar)。               

 荧光显微镜先驱Johan Sebastiaan Ploem    自上世纪中叶以来，荧光显微镜发展成为一种生物科学工具，对我们了解生命产生了最大的影响。在荧光分子的帮助下观察细胞和蛋白质是当今几乎所有生命科学学科的标准方法。这种广泛的应用可以追溯到一些研究人员的技术工作，他们希望改进和简化荧光显微镜下的劳动。荷兰医生约翰-塞巴斯蒂安-普洛姆（Johann Sebastiaan Ploem）就是其中的一位参与者。外荧光显微镜约翰-塞巴斯蒂安-普洛姆（Johann Sebastiaan Ploem）于 1927 年出生在苏门答腊岛的泽兰托（Sawahlunto），是一名荷兰煤矿工程师的儿子。幼年时，他随父母回到荷兰，并在那里将绘画作为自己的爱好之一。高中毕业后，他发现了另一个令人着迷的色彩领域，我们稍后会了解到。Ploem 决定学习医学，并在乌得勒支、哈佛和阿姆斯特丹接受教育。随后，他开始了学术生涯，曾在迈阿密大学和阿姆斯特丹大学工作，后晋升为荷兰莱顿大学医学系教授。在研究活动中，他发现荧光显微镜是一种强大的工具。20 世纪 60 年代，一种特殊的标本照明方式开始流行，事实上，早在 1925 年，对丝虫自发荧光事件感兴趣的 Policard 和 Paillot 就已经知道并描述了这种照明方式（Policard 和 Paillot，1925 年）。一些研究人员重新启动了这两位法国科学家的项目，将荧光照明和样品检测放在显微镜的同一侧。这种利用入射光的原理被称为 "Epi-Illumination"，与透射显微镜形成鲜明对比。在荧光显微镜中使用这种技术的一大好处是可以避免检测光源发出的发射光（图 1）。另一个优点是机械性更强：在透射照明中，聚光器和物镜有两个独立的光轴，必须仔细对准。而在外延照明中，物镜既是聚光器，又是集光物镜。这样就可以避免对准问题。  图 1：外延照明在荧光显微镜中的优势：在透射照明的情况下（左图），光源和图像检测位于物镜的两侧。在这种设置下，一个明显的限制就是无法检测到激发光（浅蓝色）。相比之下，Epi-Illumination（右图）使用物镜进行照明和图像检测。对于荧光显微镜来说，这意味着用户不会受到激发光的照射。二向色分光镜早在几年前，前苏联的两位研究人员就为荧光外延照明显微镜提供了非常重要的投入。Brumberg 和 Krylova 开发了一种所谓的二向色分光器，用于入射光的紫外激发（Brumberg 和 Krylova，1952 年）。二向色材料能够让特定波长范围的光通过，而其他波长的光则被反射（图 2）。这一原理对于荧光外延照明是不可或缺的，因为激发光必须以某种方式融合到显微镜的光路中（图 3）。更确切地说，二向色分光镜无法穿透光源发出的所需激发光的波长，只能将激发光反射到样品上。样品发出的荧光反过来又可以通过二向色分光器到达检测端。  图 2：透射图说明了二向色分光镜的功能。波长较短的光（蓝色箭头）会被反射，而波长较长的光（红色箭头）则可以通过滤光器。  图 3：荧光外延照明需要一个二向色镜（灰色），它能够将激发光（蓝色）反射到试样上，并将发射光（绿色）传递到检测端。激发光的波长可通过相应的滤光片（橙色）进行预选。朝向检测侧的滤光片（紫色）只允许荧光团的波长通过，并排除激发光的残余杂散光。遗憾的是，由于铁幕之间缺乏信息交流，Ploem 并不知道俄罗斯的发展情况。尽管如此，他还是自己开始使用二向色分光镜。针对 Ploem 的特殊情况，他与著名的特种玻璃生产商肖特公司（美因茨）共同开发了一种可反射蓝光和绿光的分光镜（Ploem，1965 年）。之后，他用 Leitz 公司提供的中性分光镜改装了一台 "Opak" 外延照明器，通过引入一个带有四个不同二向色分光镜的滑块，他可以在紫外线、紫光、蓝光和绿光之间非常快速、方便地改变激发光的波长（Ploem，1967 年）（图 4）。  图 4：荧光多波长外延照明器，带有四个安装在滑块中的二向色分光镜，用于紫外、紫光、蓝光和绿光的入射照明。由阿姆斯特丹大学制造（Ploem，1965 年）。荧光滤光器立方体开发二向色分光镜以产生不同波长的激发光具有重要的优势。当时，紫外光谱（约 100 nm - 380 nm）的激发光非常普遍，但却有一个恼人的副作用：自发荧光。很多组织物质都会被紫外线激发，从而产生微弱的背景光（图 5）。通过将二向色镜的反射波长调整到绿色或蓝色范围，Ploem 能够达到当时非常常用的两种荧光染料 FITC（494 纳米）和 TRITC（541 纳米）的激发最大值，而不会产生自发荧光。FITC（异硫氰酸荧光素）和 TRITC（四甲基罗丹明-5（和 6）-异硫氰酸酯）可与抗体耦合，目前仍用于免疫荧光显微镜。通过在较小范围内达到其激发最大值，组织标本的对比度得到了显著增强（图 5）。使用 Ploem 的二向色分光器产生的激发光束能有效地与 FITC 的激发最大值相匹配，即使是发射光谱很差的光源也能使用。  图 5：左图：用宽波段紫外激发光照射标记有免疫标记（FITC）的组织细胞。注意带有蓝色自发荧光的组织结构。右图 使用窄波段蓝光（490 纳米）外延照明，对相同的组织和相同的 FITC 标记进行免疫染色。注意图像对比度的增加（Ploem，1967 年）。有鉴于此，现在可以利用外延照明的优势，使用普通的高压汞弧光灯提供蓝光和绿光的窄带激发。这一改进满足了生命科学和医学领域对荧光显微镜的需求。根据 Ploem 的发明，Leitz 设计出了一种新型多波长荧光外延照明器，它带有四个旋转式二向色分光镜，可在紫外、紫光、蓝光和绿光范围内激发标本，这就是 Leitz PLOEMOPAK。莱茨员工卡夫（W. Kraft）取得了更大的成就，他将二向色分光器与适当的激发和发射滤光器组合在一个工件上，即所谓的滤光器立方体或滤光器块（卡夫，1969 年和卡夫，1972 年）（图 6）。他的研究成果是设计出了一种外延照明器，该照明器带有多组四个这样的滤光器立方体，如今几乎所有的多波长荧光显微镜都是以这些滤光器立方体为基础的。  图 6：左：1970 年左右，Leitz 员工 W. Kraft 将激发滤光片（橙色）、二色分光镜（灰色）和发射滤光片（紫色）集成在一个工件上 - 滤光片立方体。中间：滤光器立方体的工程图。右图 在现代显微镜中，荧光滤光片立方体可以很方便地点入和点出。研究人员甚至可以根据自己的需要，用不同的滤光片和二向色分光器改装一个立方体。总 结有了 Ploem 及其同代人和后继者建立起来的技术基础，我们今天就可以通过将适当的滤光器立方体放入外延照明器（图 7），观察到无数不同的荧光团。研究人员甚至可以根据自己的需要定制激发和发射参数。由于现代研究显微镜的自动化，在实验过程中切换滤光器立方体只需点击一下按钮。科学家们可以在一瞬间切换不同的荧光团，从而观察到即使是活体标本也被荧光标记为不同的荧光团。    图 7：荧光显微镜的演变。左图：透射光荧光显微镜的基本问题是检测激发光。中图 这就是人们利用外延照明并将光源移到显微镜检测侧的原因。这种方法需要二向色分光镜。右图 将激发滤光片、发射滤光片和二向色分光器放在一个区块中，可以快速切换不同的区块，专用于某些荧光团。参考文献：1.Brumberg, E. M., Krylova, T. N.: O fluoreschentnykh mikroskopopak. Zh. obshch. biol. 14, 461, 1953.2.Ploem, J. S.: Die Möglichkeit der Auflichtfluoreszenzmethoden bei Untersuchungen von Zellen in Durchströmungskammern und Leightonröhren. Xth Symposium d. Gesellschaft f. Histochemie, 1965. Acta Histochem. Suppl. 7, 339–343, 1967.3.Ploem, J. S.: The use of a vertical illuminator with interchangeable dichroic mirrors for Fluorescence microscopy with incident light. Zeitschr. f. wiss. Mikroskopie 68, 129–142, 1967.4.Kraft, W.: Die Technologie des Fluoreszenzopak, Leitz Mitt. Wiss. u. Techn. IV/6, 239–242, 1969.5.Kraft, W.: Fluorescence Microscopy and Instrument Requirements. Leitz Mitt. Wiss. u. Techn. V/7, 193–206, 1972.6.Policard, A., Paillot, A.: Etude de la sécrétion de la soie à I'aide des rayons ultraviolets filtrés (lumière de Wood). Comptes Rendus de l'Académie des Sciences Paris 181, 378–380, 1925.参加问卷调研，领取精美小礼品！    8月底活动截止届时答题满分的小伙伴会收到我们的小礼品    问卷答案的答案可以在之前的推文内寻找哦~      徕卡175周年：徕卡品牌的发展历程，也是显微技术的发展史                    相关产品      DMi8 S 高速成像平台 倒置显微镜成像解决方案      STELLARIS共聚焦显微镜平台      正置双目生物显微镜 徕卡DM4 B & 徕卡DM6 B    徕卡显微咨询电话：400-877-0075                                 关于徕卡显微系统徕卡显微系统的历史最早可追溯到19世纪，作为德国著名的光学制造企业，徕卡显微成像系统拥有170余年显微镜生产历史，逐步发展成为显微成像系统行业的领先的厂商之一。徕卡显微成像系统一贯注重产品研发和最新技术应用，并保证产品质量一直走在显微镜制造行业的前列。徕卡显微系统始终与科学界保持密切联系，不断推出为客户度身定制的显微解决方案。徕卡显微成像系统主要分为三个业务部门：生命科学与研究显微、工业显微与手术显微部门。徕卡在欧洲、亚洲与北美有7大产品研发中心与6大生产基地，在二十多个国家设有销售及服务分支机构，总部位于德国维兹拉(Wetzlar)。