小鼠L苯丙氨酸解氨酶(PAL)ELISA试剂盒操作说明书

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   小鼠L苯丙氨酸解氨酶(PAL)ELISA试剂盒操作说明书产品简介：

    中文名： 小鼠L苯丙氨酸解氨酶(PAL)ELISA试剂盒

    别名：小鼠苯丙氨酸（LPA）ELISA Kit

    供应商：上海远慕

    规格：48t/96t

    保存：2-8℃低温保存

    有效期：6个月

    用途：仅限科研实验，不作临床使用。

    特异性：本试剂盒可同时检测天然或重组的，且与其他相关蛋白无交叉反应。

    预期应用：ELISA法定量测定血清、血浆、细胞培养上清或其它相关生物液体中的含量。

    ELISA方法被广泛应用于各种抗原和抗体测定。但ELISA测定中影响因素较多，而且其操作中有一定的技术要求，在检测过程中除正常反应外，有时常见到一些错误的结果。

    引起ELISA测定错误结果的原因主要有：

    ①标本因素；

    ②试剂因素；

    ③操作因素。

    产品特点：

    专一性强：抗原与抗体的免疫反应是专一反应，而免疫酶技术以免疫反应为基础，所检测的对象是抗原（或抗体），使用的抗体除标记了酶以外，与普通抗体的免疫反应特性并无多大差别。

    灵敏度高：由于抗体联结上了酶，因此，借助于酶与底物的显色反应，显示抗原与抗体的结合，大大提高了检测的灵敏性，使检测水平接近放射免疫测定法。

    样品易保存：经过酶反应显示的有色产物大多比较稳定，因此有利于样品的保存。

    小鼠L苯丙氨酸（LPA）elisa试剂盒操作说明书组织结构：

    1、 血清：操作过程中避免任何细胞刺激。使用不含热原和内毒素的试管。收集血液后，1000×g离心35分钟将血红细胞迅速小心地分离。

    2、 血浆：EDTA、柠檬酸盐、肝素血浆可用于检测。1000×g离心60分钟去除颗粒。

    3、 细胞上清液：1000×g离心32分钟去除颗粒和聚合物。

    4、 组织匀浆：将组织加入适量生理盐水捣碎。1000×g离心33分钟，取上清液。

    5、 保存：如果样品不立即使用，应将其分成小部分-70℃保存，避免反复冷冻。尽可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量颗粒，检测前先离心或过滤。不要在37℃或更高的温度加热解冻。应在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。

    小鼠L苯丙氨酸（LPA）elisa试剂盒操作说明书 ELISA试剂盒包含以下各组分：

    （1）结合物及标本的稀释液；

    （2）洗涤液，在板式ELISA中，常用的稀释液为含0.05%吐温20磷酸缓冲盐水；

    （3）酶标记的抗原或抗体（结合物）；

    （4）酶的底物；

    （5）阴性对照品和阳性对照品（定性测定中），ELISA试剂盒参考标准品和控制血清（定量测定中）；

    （6）已包被抗原或抗体的固相载体（免疫吸附剂）；

    小鼠L苯丙氨酸（LPA）ELISA试剂盒操作流程：

    标准品的稀释：本试剂盒提供原倍标准品一支，依次进行稀释数倍。

    加样：分别设空白孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同）、标准孔、待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样50μl，待测样品孔中先加样品稀释液40μl，然后再加待测样品10μl（样品最终稀释度为5倍）。加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀。

    温育：用封板膜封板后置37℃温育30分钟。

    配液：将30倍（48T 的20 倍）浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用

    洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置30秒后弃去，如此重复5次，拍干。

    加酶：每孔加入酶标试剂50μl，空白孔除外。

    温育：操作同3。

    洗涤：操作同5。

    显色：每孔先加入显色剂A50μl，再加入显色剂B50μl，轻轻震荡混匀，37℃避光显色10分钟。

    终止：每孔加终止液50μl，终止反应（此时蓝色立转黄色）。

    测定：以空白空调零，450nm波长依序测量各孔的吸光度（OD值）。 测定应在加终止液后15分钟以内进行。

    注意事项：

    小鼠苯丙氨酸（LPA）ELISA试剂盒注意事项：

    1.实验中不用的板条应立即放回包装袋中，密封保存，以免变质。

    2.试剂应按标签说明书储存，使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃，不可保存。

    3.使用一次性的吸头以免交叉污染，吸取终止液和底物A、B液时，避免使用带金属部分的加样器。

    4.不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。保质前使用。

    5.洗涤酶标板时应充分拍干，不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。

    6.使用干净的塑料容器配置洗涤液。使用前充分混匀试剂盒里的各种成份及样品。

    7.加入试剂的顺序应一致，以保证所有反应板孔温育的时间一样。

    8.按照说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。

    9.底物A应挥发，避免长时间打开盖子。底物B对光敏感，避免长时间暴露于光下。避免用手接触，有毒。实验完成后应立即读取OD值。

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