人未磷酸化类胰岛素生长因子结合蛋白-1ELISA试剂盒说明书

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    中文名：人未磷酸化类胰岛素生长因子结合蛋白-1ELISA试剂盒

    别名：人未磷酸化类胰岛素生长因子结合蛋白-1ELISA Kit

    供应商：上海远慕

    规格：48t/96t

    保存：2-8℃

    有效期：6个月

    试剂盒成分：酶标板，试剂，标准品

    测试种属：犬、大小鼠、人、豚鼠、兔子、牛羊、猪、鸡鸭ELISA试剂盒等种属。

    检测目的：用于测定血清，血浆及相关液体等样本。例如适合检测包括血清、血浆、尿液、胸腹水、灌洗液、脑脊液、细胞培养上清、组织匀浆等标本。

    用途：科研实验专用，不用于临床诊断。

    人未磷酸化类胰岛素生长因子结合蛋白-1ELISA试剂盒说明书

    人未磷酸化类胰岛素生长因子结合蛋白-1ELISA试剂盒说明书 本试剂盒组织结构：

    1、 血清：操作过程中避免任何细胞刺激。使用不含热原和内毒素的试管。收集血液后，1000×g离心23分钟将血红细胞迅速小心地分离。

    2、 血浆：EDTA、柠檬酸盐、肝素血浆可用于检测。1000×g离心60分钟去除颗粒。

    3、 细胞上清液：1000×g离心32分钟去除颗粒和聚合物。

    4、 组织匀浆：将组织加入适量生理盐水捣碎。1000×g离心33分钟，取上清液。

    5、 保存：如果样品不立即使用，应将其分成小部分-70℃保存，避免反复冷冻。尽可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量颗粒，检测前先离心或过滤。不要在37℃或更高的温度加热解冻。应在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。

    人未磷酸化类胰岛素生长因子结合蛋白-1ELISA试剂盒说明书 本试剂盒注意事项：

    1.试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用，酶标包被板开封后如未用完，板条应装入密封袋中保存。

    2.浓洗涤液可能会有结晶析出，稀释时可在水浴中加温助溶，洗涤时不影响结果。

    3.各步加样均应使用加样器，并经常校对其准确性，以避免试验误差。一次加样时间最好控制在5分钟内，如标本数量多，推荐使用排枪加样。

    4.请每次测定的同时做标准曲线，最好做复孔。如标本中待测物质含量过高（样本OD值大于标准品孔第一孔的OD值），请先用样品稀释液稀释一定倍数（n倍）后再测定，计算时请最后乘以总稀释倍数（×n×5）。

    5.封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。

    6.底物请避光保存。

    7.严格按照说明书的操作进行，试验结果判定必须以酶标仪读数为准。

    8.所有样品，洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。

    9.本试剂不同批号组分不得混用。

    10. 如与英文说明书有异，以英文说明书为准。

    人未磷酸化类胰岛素生长因子结合蛋白-1ELISA试剂盒组成及试剂配制：

    1、酶联板（Assay plate ）：一块（96孔或者48孔）。

    2、标准品（Standard）：2瓶（冻干品）。

    3、样品稀释液（Sample Diluent）：1×20ml/瓶。

    4、生物素标记抗体稀释液（Biotin-antibody Diluent）：1×10ml/瓶。

    5、辣根过氧化物酶标记亲和素稀释液 （HRP-avidin Diluent）：1×10ml/瓶。

    6、生物素标记抗体（Biotin-antibody）：1×120μl/瓶（1：100）

    7、辣根过氧化物酶标记亲和素（HRP-avidin）：1×120μl/瓶（1：100）

    8、底物溶液（TMB Substrate）：1×10ml/瓶。

    9、浓洗涤液（Wash Buffer）：1×20ml/瓶，使用时每瓶用蒸馏水稀释25倍。

    10、终止液（Stop Solution）：1×10ml/瓶（2N H2SO4）。

    人未磷酸化类胰岛素生长因子结合蛋白-1ELISA检测试剂盒样本储存：

    收集标本前必须清楚要检测的成份是否足够稳定。对收集后当天进行检测的标本，储存在4℃备用，如有特殊原因需要周期收集标本，将标本及时分装后放在-20℃或-70℃条件下保存。避免反复冻融。标本2-8℃可保存48小时，-20℃可保存1个月。-70℃可保存6个月。部分激素类标本需添加抑肽酶。

    人未磷酸化类胰岛素生长因子结合蛋白-1ELISA检测试剂盒使用方法：

    1.加样：分别设空白孔、标准孔、待测样品孔。空白孔加样品稀释液100μl，余孔分别加标准品或待测样品100μl，注意不要有气泡，加样时将样品加于酶标板底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀。给酶标板覆膜，37℃孵育2小时。为保证实验结果有效性，每次实验请使用新的标准品溶液。

    2.弃去液体，甩干，每个孔中加入Detection Ab工作液 100μl（在使用前15分钟内配制），酶标板加上覆膜，37℃温育1小时。

    3.弃去孔内液体，甩干，洗板 3次，每次浸泡1-2分钟，大约350μl /每孔，甩干并在吸水纸上轻拍将孔内液体拍干。

    4.每孔加HRP Conjugate工作液（临用前15分钟内配制）100μl，加上覆膜，37℃温育1小时。

    5.弃去孔内液体，甩干，洗板5次，方法同步骤3。

    6.每孔加底物溶液100μl，酶标板加上覆膜37℃避光孵育15分钟左右（根据实际显况酌情缩短或延长，但不可超过30分钟。当标准孔出现明显梯度时，即可终止）。

    7.每孔加终止液50μl，终止反应，此时蓝色立转黄色。终止液的加入顺序应尽量与底物液的加入顺序相同。

    8.立即用酶标仪在450nm波长测量各孔的光密度（OD值）。应提前打开酶标仪电源，预热仪器，设置好检测程序。

    9.实验完毕后将未用完的试剂按规定的保存温度放回冰箱保存至有效期结束。

    人未磷酸化类胰岛素生长因子结合蛋白-1ELISA试剂盒说明书

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