浙江孚夏改版FKC-2型浮游菌采样器

浮游菌检测标准操作规程SOP

目   的：建立洁净（区）室浮游菌检测标准操作规程。 范   围：适用于洁净（区）室浮游菌监测。 责   任：QC人员负责实施，QA人员负责监督。 内   容： 1取样前准备工作： 1.1 依据检测区域的取样点数，按照《培养基配制、灭菌标准操作程序》制备适量的营养琼脂培养基。 1.2 在超净工作台内，以无菌操作法将配制好的营养琼脂培养基以每皿约15ml的装量分装，待培养基凝固后移出洁净区。 1.3 将制备的营养琼脂平皿倒置于隔水式恒温水浴培养箱内于30～35℃培养48小时。取出逐个检查，确认无菌落数后即可使用。 1.4采样：将上述制备好的营养琼脂平皿交与QA人员取样。

沉降菌和浮游菌采样器，我该选哪个？

沉降菌和浮游菌监测作为洁净环境（特别是药企）日常生产过程中微生物监测的两种方式，一直在被大家广泛使用。 那它们究竟有什么区别呢？让我们一起来了解吧！ 行业标准要求 GMP对于制药行业内测试方法需要参照ISO的测试方法，而ISO14698-1微生物污染控制法规提到微生物监测需要评估收集效率，高收集效率的采样方法和采样设备可以得到更有代表性的数据。对于生物负载环境低的环境，如A、B级环境，应当更多地采用主动采样的浮游菌采样器，而不是被动采样的沉降菌方法。ISO14698-1 附录中对于微生物采样器的收集效率提出了进行收集效率评估的指导意见。 现行2003版的ISO14698对于收集效率分为物理收集效率和生物收集效率，其中物理收集效率更在意的是采样方法是否有能力收集到空气的携菌粒子，而生物收集效率更在意的是采样器或者采样方法是否能在收集到的同时保证该携菌粒子的存活率。 厂家有义务和有责任提供基于以上两种收集效率的验证文件。如果厂家无法提供，制药企业需要开发相关的方法验证证明其使用方法的收集效率。通常认为，以上两种收集效率要达到一定的灵敏度以上方可使用。 沉降菌的采样效率 解决了上述微生物采样器的采样效率验证，我们又回到了沉降菌的采样效率评估。这是业内的痛点，因为我们都知道沉降菌的采样方法属于被动采样方式，回收率相当低，无法进行方法验证。基于地心引力的自然被动采样方式，能够得到12微米粒径的活性粒子沉降到9cm的采样平皿上的收集效率为0.106CFU/h，沉降到14cm的采样平皿上的收集效率为0.256CFU/h。对于1微米粒径的活性粒子沉降到9cm的采样器皿上的收集效率为0.008CFU/h 。如果A级区最大浓度限度为1CFU/m3, 那么一个9cm平皿需要暴露于A级区采样1250小时（相当于52天），才能在低生物污染负载环境检测到一个有意义的数据（一个CFU）。 科学家得到结论：沉降菌“是一种太不灵敏的采样方法”，以及“沉降菌更好的反映了携菌粒子的沉积效果，仅在较大平皿采样（如14cm）或者多个采样平皿采集时灵敏些”。科学家发现主动采样方法采集1微米的粒子的收集效率比9cm的被动采集的沉降菌方法的效率高2250倍。对于A级区层流环境的微生物采样，建议采用更加灵敏的采样方法。沉降菌等采样方法对于相对微生物负载量较高的非无菌工艺的C，D级环境，可以作为一个微生物采样的补充，配合浮游菌采样方法可以一起使用。对于A，B级环境，浮游菌采样方法作为更高效的采样方法更适合。 日常监测中的风险 在我们平常的工作中，往往会面临两难的局面。相关监管部门对于微生物和风险的要求重视程度达到前所未有的高度；但他们又认为采用不恰当的采样方法会对生产环境带来负面影响。之前，很多企业由于无法找到一个合适的微生物方法，担心浮游菌采样方法的平皿频繁更换会对制药环境带来污染，因此决定不进行主动微生物（浮游菌）监测。 随着现代制药工业发展，我们已经认识到了需要提升我们对于微生物采样方法的风险评估和风险识别。沉降菌方法可能会对于环境造成污染，我们知道沉降菌表面有大量的营养水分，在10微米至20微米之间，当沉降菌暴露在关键生产的A级环境中，这些营养水分很可能会被吹到无菌表面，药瓶容器内，药液当中，造成污染和交叉污染。浮游菌采样由于培养基比较容易干燥，现代的采样流速设计为低流速采样，可以尽量的延长浮游菌采样的覆盖生产的时间，无需频繁进行平皿更换。通常会考虑到A级层流环境的气流保护的目的，我们对浮游菌采样也要进行等动力采样设计，确保采样器上方的空气呈现等速采样，不会对现场造成污染。传统方法把采样器放入A级，由于采样器内部的线路板电气部件无法进行彻底的灭菌，通常企业采样VHP或者酒精消毒采样器表面，无法到达彻底的灭菌的效果。 WHO无菌工艺控制要求中建议制药企业应当采用分体式的微生物采样方法，即把采样头和采样器进行分离，采样头放入A级并可提前进行高温或者化学灭菌，而采样器放在B级背景环境进行操作。这样可以规避采样器无法彻底灭菌对于A级区的影响。 现在的浮游菌采样器的内置软件可设置对所有的采样过程进行监控，并生成不可更改的监测记录，方便进行追踪。而沉降菌的采样更依赖于纸质记录管理，流转中的管理风险较大。 结论 综上而述，经过效率验证的浮游菌采样方法对比沉降菌采样方法的收集效率更为高效，适合用于关键的，生物负载低的无菌生产环境。沉降菌采样方法可作为一种生产过程中浮游菌采样的补充方法，可用于相对不关键，生物负载高的非无菌环境，使用时需要避免放置位置不当或者操作错误而造成的污染风险。 无论采用何种方法，都应当基于生产工艺的风险评估来确定位置，采样频率，采样覆盖时间以及采样流速等。沉降菌和浮游菌作为制药生产过程中的监测方法，我们应当基于风险评估来选择和考虑采用哪一种方法。现代的无菌制药控制对于关键区微生物采样更倾向于主动采样方式（浮游菌），而不是低灵敏度的被动采样方法（沉降菌），需要重视采样方法对于生产环境的影响，提高无菌工艺控制水平和基于风险评估的科学方法。

浮游微生物采样器产品特点

1)自动流量补偿：内置实时流量监测传感器，全自动流量补偿，避免因培养皿倾注培养基高低引起的流量偏差。(HKM-ⅡB型) 　　2)等速采样设计：采集口风速与洁净室内风速基本一致，能更准确地反映洁净室内的微生物浓度。优化了撞击速度，使假阳性结果得到控制，从而保证了微生物采集效率; 　　3)操作界面友好直观：全中文显示菜单，大屏幕LCD显示采样量(0.01-6.0m3)、设置采样地点代码、采样延迟时间、屏幕背光时间、语言(中、英文)、日期，轻触式键盘及简单易懂的操作界面; 　　4)高效开放性系统：无需购买特殊的试纸平板或滤纸； 　　5)采样方向可调：采样头可从水平到直立90度调整，满足多角度取样，也可安装三角架在不同环境下使用(三脚架支撑模块为选配件); 　　6)多孔采样头：采样时有效减少了尘菌重叠的可能，降低了微生物计数误差。通过Feller校验，开孔数量越多，则平皿上的菌落数越接近于实际空气中的含菌量; 　　7)强可追溯性：每次采样运行后都自动生成唯一的记录储存在采样器，最多可储存8000页数据，可快速查询采样记录：时间、地点、采样量等参数。HKM-ⅡA型采样器还可以用数据线连接到电脑，通过HKM采样器软件允许数据下载到电脑上，用于报告和采样分析; 　　8)超长使用时间：可连续使用约长达15小时，大容量、可充电聚合物锂电池，无容量记忆效应、安全、耐用; 　　9)95%的采样效率：跟据ISO14698-1附录B和附录C，建立一个物理采样效率实验，对于直径从0.8到19.0微米粒子的物理采样效率可达95%以上。

浮游微生物采样器产品特点

1)自动流量补偿：内置实时流量监测传感器，全自动流量补偿，避免因培养皿倾注培养基高低引起的流量偏差。(HKM-ⅡB型) 　　2)等速采样设计：采集口风速与洁净室内风速基本一致，能更准确地反映洁净室内的微生物浓度。优化了撞击速度，使假阳性结果得到控制，从而保证了微生物采集效率; 　　3)操作界面友好直观：全中文显示菜单，大屏幕LCD显示采样量(0.01-6.0m3)、设置采样地点代码、采样延迟时间、屏幕背光时间、语言(中、英文)、日期，轻触式键盘及简单易懂的操作界面; 　　4)高效开放性系统：无需购买特殊的试纸平板或滤纸； 　　5)采样方向可调：采样头可从水平到直立90度调整，满足多角度取样，也可安装三角架在不同环境下使用(三脚架支撑模块为选配件); 　　6)多孔采样头：采样时有效减少了尘菌重叠的可能，降低了微生物计数误差。通过Feller校验，开孔数量越多，则平皿上的菌落数越接近于实际空气中的含菌量; 　　7)强可追溯性：每次采样运行后都自动生成唯一的记录储存在采样器，最多可储存8000页数据，可快速查询采样记录：时间、地点、采样量等参数。HKM-ⅡA型采样器还可以用数据线连接到电脑，通过HKM采样器软件允许数据下载到电脑上，用于报告和采样分析; 　　8)超长使用时间：可连续使用约长达15小时，大容量、可充电聚合物锂电池，无容量记忆效应、安全、耐用; 　　9)95%的采样效率：跟据ISO14698-1附录B和附录C，建立一个物理采样效率实验，对于直径从0.8到19.0微米粒子的物理采样效率可达95%以上。