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人凝血酶原(PT)检测试剂盒

人凝血酶原(PT)检测试剂盒

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品牌:DRG

供货周期: 现货

货号:hz-EL-H1792c

规格:96t/48t

人凝血酶原(PT)检测试剂盒操作步骤

方法一 用于检测未知抗原的双抗体夹心法:

 1. 包被:用0.05M PH9.牰碳酸盐包被缓冲液将抗体稀释至蛋白质含量为110μgml。在每个聚苯乙烯板的反应孔中加0.1ml4℃过夜。次日,弃去孔内溶液,用洗涤缓冲液洗3次,每次3分钟。(简称洗涤,下同)

 2. 加样:加一定稀释的待检样品0.1ml于上述已包被之反应孔中,置37℃孵育1小时。然后洗涤。(同时做空白孔,阴性对照孔及阳性对照孔)

 3. 加酶标抗体:于各反应孔中,加入新鲜稀释的酶标抗体(经滴定后的稀释度)0.1ml37℃孵育0.51小时,洗涤。

 4. 加底物液显色:于各反应孔中加入临时配制的TMB底物溶液0.1ml371030分钟。

 5. 终止反应:于各反应孔中加入2M硫酸0.05ml

 6. 结果判定:可于白色背景上,直接用肉眼观察结果:反应孔内颜色越深,阳性程度越强,阴性反应为无色或极浅,依据所呈颜色的深浅,以“+”、“-”号表示。也可测O·D值:在人凝血酶原(PT)检测试剂盒检测仪上,于450nm(若以ABTS显色,则410nm)处,以空白对照孔调零后测各孔O·D值,若大于规定的阴性对照OD值的2.1倍,即为阳性。

方法二 用于检测未知抗体的间接法:

   用包被缓冲液将已知抗原稀释至110μgml

   每孔加0.1ml4℃过夜。次日洗涤3次。

              ↓

   加一定稀释的待检样品(未知抗体)0.1ml于上述已包被之反应孔

   ,37℃孵育1小时,洗涤。(同时做空白、阴性及阳性孔对照)

              ↓

   于反应孔中,加入新鲜稀释的酶标第二抗体(抗抗体)0.1ml

   37℃孵育30-60分钟,洗涤,最后一遍用DDW洗涤。

              ↓

人凝血酶原(PT)检测试剂盒其余步骤同“双抗体夹心法”的456

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