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如何使用ELSD克服制备色谱中的局限性

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分享: 2020/06/05 16:08:21

距离Pure快速纯化系统发布已有一年有余点此查看去年发布会。在这一年里,我们的Pure系统进入了许多高校实验室纯化了多种有价值的天然产物,进入了国家级的研究所帮助分离了多糖和酯类化合物,进入了企业有效地提高了有机合成的效率。随着客户数量不断地提升,客户领域不断地扩大,我们发现一个有意思的现象——除了流速、压力、灵活性等等优点,客户对Pure系统印象最深的便是这个神奇的检测器:


蒸发光散射检测器(Evaporative Light-scattering Detector),又称ELSD。

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在色谱纯化的过程中,我们常常因为技术原因而局限了方法的开发。随着时间的推进,当技术发展到足以克服其中一些局限时,我们可以使用许多原先无法用的方法,ELSD就是一个很好的例子。配备了ELSD的快速纯化系统能够检测到许多“困难”的样品,例如碳水化合物,脂质,精油,聚合物和天然产物。由于紫外检测器的局限性,这些样品不能有效地被检测和收集。


从檀香提取物中分离α-檀香醇与β-檀香醇可以很好地说明这一点(点此查看檀香提取物应用)。在此应用中紫外无法检测到所有的化合物,而有了ELSD的加持,研究人员可以轻松分辨檀香中大部分的化合物。

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除此之外,ELSD更是由于检测原理的优势,可以还原混合样品的实际质量比,让我们来结合以下案例来看一下:

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图1:相同混合样品在UV和ELSD下的检测对比图

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图2:混合样品实际质量与UV/ELSD峰高的对比表

可以看到,在方法与样品都完全一致时,ELSD不仅在峰面积上更加还原样品的实际质量比,在可见性上也适应于弱紫外吸收的样品(Peak 1/Peak 2)。而这一切的优势,都是源于其独特的检测原理。


那么相比于单独的紫外检测器,ELSD如何在色谱运行中检测出更多类型的化合物并且还原出其实际质量比的呢?

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含有待测分析物的柱洗脱液与气流(氮气或空气)混合形成液滴分散液,从而被雾化。

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液滴分散液中的流动相在漂移管内被蒸发。

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分散液中残留的干燥分析物颗粒穿过检测器中的激光。激光被颗粒散射并且由光电二极管捕获。激光散射的量与目标化合物的质量有关。

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  • ELSD可检测任何不挥发的化合物,而与它的性质无关。因此与仅使用UV检测器相比,该检测器可以帮助您看到更多的物质。


  • ELSD产生的响应高度几乎与目标化合物的质量相同,UV检测器响应在很大程度上取决于消光系数。在大多数情况下,这些系数不能反映样品中化合物的实际质量比。


  • 随着溶剂在ELSD检测器中蒸发,几乎不会产生梯度导致的基线漂移,进而我们可以使用紫外截止波长与设置的检测波长冲突的溶剂。


  • ELSD简化了馏分收集,若您的化合物无紫外吸收,则不需要收集所有物质,并且在下游处理过程中需要处理的馏分更少。


综上所述,即使在存在紫外线可见化合物的情况下,ELSD对于标准应用也是非常有益的。因为ELSD响应可以更好地反映样品中化合物的实际质量比。而对于存在非发色化合物且对紫外线仅产生轻微或没有响应的“困难”样品,ELSD尤其有用,其检测样品中所有非挥发性分子的工作原理可以有效克服制备过程中遇到的各种局限。


那么ELSD就那么完美无缺了吗?其实不然,下一篇文章我们将会给大家介绍传统制备ELSD本身的局限性,以及步琦Pure是如何通过技术革新完善新一代的制备ELSD,使其趋向于完美。


看到这里,不知道大家是否领略到了ELSD的魅力呢?如果感兴趣的话请点击此处了解更多关于内置ELSD型制备色谱的详情吧!


[来源:瑞士步琦有限公司 BUCHI Labortechnik AG]

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