HALO-2.7 Phenyl-Hexyl 色谱柱技术特性

　　HALO Phenyl-Hexyl 色谱柱的苯基官能团，可以提供额外的分离机制，在分离混合物中含有芳香族化合物的分离很有效果。当HALO C18、C8色谱柱未提供充分的分离时，HALO Phenyl-Hexyl色谱柱是很明智的选择。HALO Phenyl-Hexyl的键合相与HALO 键合相是由超纯试剂、“B型”硅胶、密集键合技术以及完全的封端形成了一种对极性化合物显示出出色的峰形的碱性去活固定相。

　　分离机理

　　HALO Phenyl-Hexyl能够通过多种机理保留分析物。其中包括：分析物的离域电子重叠部分和固定相的苯基之间的π–π相互作用；以及分析物在流动相与疏水性的苯基-己基键合相之间的分配。HALO Phenyl-Hexyl键合相结构详见图1。

图1 HALO Phenyl-Hexyl键合相结构

　　苯基基团由己基链键合到硅胶表面

　　乙腈倾向于减少芳香烃、可极化分析物和苯基固定相之间的π-π相互作用，但甲醇会增大那些相互作用并增加保留改变选择性。这并不意味着乙腈不能应用于苯基键合相，或者认为乙腈是不可能提供一个可接受的分离效果，但甲醇可以在苯基相上给出额外的选择性的。 图2、3是HALO Phenyl-Hexyl高速度、高分度分离的例子。

图2 芳香族化合物快速分离

　　色谱条件：

　　色谱柱：4.6×50 mm HALO Phenyl-Hexyl(2.7 μm)

　　流动相：75/25 MeOH/H2O

　　流速：1.8 mL/min

　　压力：220 bar

　　温度：35 ℃

　　检测：UV at 254 nm

　　样品：

　　1. 尿嘧啶

　　2. 苯甲醇

　　3. 桂皮醇

　　4. 4-溴乙酰苯胺

　　5. 硝基苯

　　6. 尼泊金丁酯

　　7. 氯苯

　　8. 乙基苯

　　9. 萘

　　10. 正乙酰苯

　　11. 联苯

HALO Phenyl-Hexyl色谱柱可以在1 min多一点的时间内分离复杂化合物。

图3  快速分离抗凝剂

　　色谱条件：

　　色谱柱：4.6×50 mm HALO Phenyl-Hexyl(2.7 μm)

　　流动相：77/23 MeOH/H2O

　　流速：1.8 mL/min

　　压力：200 bar

　　温度：40℃

　　检测：UV at 254 nm

　　样品：

　　1. 尿嘧啶

　　2. 苯甲酰胺

　　3. 卞腈

　　4. 尼泊金丙酯

　　5. 苯甲酸卞酯

　　6. 邻苯二甲酸二乙酯

　　7. 甲苯

　　8. 1-氯-4-硝基苯

　　9. 邻苯二甲酸二丙酯

　　10. 丙基苯

　　11. 丁基苯

　　12. 联苯

　　13. 苊

　　14. 菲

　　I. 未知杂质

图4  HALO Phenyl-Hexyl色谱柱72秒内分离六种抗凝剂

　　色谱条件：

　　色谱柱：4.6×50 mm HALO Phenyl-Hexyl(2.7 μm)

　　流动相：20% ACN/20% MeOH/60% 0.1% Formic Acid (pH=2.6)

　　温度：45 ℃

　　流速：2.0 mL/min

　　压力：215 bar

　　检测：UV at 254 nm

　　样品：

　　1.尿嘧啶

　　2.4-羟基香豆素

　　3.香豆素

　　4.6-氯-4-羟基香豆素

　　5.杀鼠灵

　　6.杀鼠迷

　　7.氯灭鼠灵

　　HALO色谱柱技术咨询：

　　通微苏州分公司-苏州环球色谱有限责任公司 李静博士

　　江苏省苏州高新区滨河路1326号125 邮编: 215011

　　电话：0512-68054587、68312081-8022

　　E-mail: info@unimicrotech.com.cn　　

　　附录：HALO色谱柱及熔融核(核-壳)技术简介

　　熔融核技术是由杰克柯克兰(J.J.Kirkland)所发明的。柯克兰教授被公认为是HPLC的创建者之一，并且他的研究和贡献是被色谱界人士广泛认同的。他发表了超过150份主要研究文献和6本书籍。柯克兰博士还拥有30项专利，并且在色谱领域已经获得了很多著名奖项。

　　HALO柱填料不是按照常规方式制作的。相反,HALO UHPLC所填充的填料是利用Fused-core(熔融核/核壳)技术制备出来的，可以实现超快速色谱分离，同时避免了UHPLC的一些不足之处。

HALO 熔融核颗粒

　　Fused-core 填料技术是由 Jack Kirkland 发明的，该类填料最初是为了使得UHPLC色谱柱比常规2μm填料UHPLC色谱柱更坚固可靠。正如它的名字一样，Fused-core 即是将多孔硅胶壳熔融到实心硅胶颗粒表面。

　　HALO色谱柱所产生的反压明显低于UHPLC色谱柱。这样的低反压可以使仪器承受压力降低，使操作起来更为方便。正是HALO柱适度的反压使得他们能用于常规的HPLC仪器却实现近似UHPLC的性能。此外，HALO色谱柱所用的筛板的孔径要远远大于UHPLC色谱柱(2 μm vs 0.5 μm)。这个更大的孔隙柱入口筛板减少了UHPLC柱入口筛板的堵塞问题。事实上,HALO柱的入口筛板不会比常规的填充5μm颗粒的柱子上的筛板小，不可思议吧。

　　“熔融核硅胶柱能减少扩散质路径，允许使用更短的柱子和较高的流速以达到明显的快速高分辨率分离。”

　　——Analytical chemistry，2007年8月