哈维氏弧菌核酸检测试剂盒（PCR-荧光探针法）

以下是PCR检测试剂盒的订购信息：

产品运输：低温运输

产品保存：-20℃保存

产品有效期：一年

储存条件：-20℃避光保存，避免反复冻融。

运输：低温、避光，快递免费送货上门。

使用及效果：

PCR反应特点

(1) 特异性强

PCR反应的特异性决定因素为：

①引物与模板DNA特异正确的结合；

②碱基配对原则；

③Taq DNA聚合酶合成反应的忠实性；

④靶基因的特异性与保守性。

组成及试剂配制:

1、酶标板：一块（96孔）

2、 标准品（冻干品）： 2瓶，请临用前15分钟内配制。每瓶以样品稀释液稀释至0.5ml，盖好后室温静置大约10分钟，同时反复颠倒/搓动以助溶解，其浓度为200 U/L，然后做系列倍比稀释（注：不要直接在板中进行倍比稀释），分别配制成200 U/L，100 U/L，50 U/L，25 U/L，12.5 U/L，6.25 U/L，3.12 U/L，样品稀释液直接作为空白孔 0 U/L。如配制100 U/L标准品：取0.3ml （不要少于0.3ml ）200 U/L的上述标准品加入含有0.3ml样品稀释液的Eppendorf管中，混匀即可，其余浓度以此类推。

3、 样品稀释液：1×20ml。

4、 检测稀释液A：1×10ml。

5、 检测稀释液B：1×10ml。

哈维氏弧菌核酸检测试剂盒（PCR-荧光探针法）其中引物与模板的正确结合是关键。引物与模板的结合及引物链的延伸是遵循碱基配对原则的。聚合酶合成反应的忠实性及Taq DNA聚合酶耐高温性，使反应中模板与引物的结合(复性)可以在较高的温度下进行，结合的特异性大大增加，被扩增的靶基因片段也就能保持很高的正确度。再通过选择特异性和保守性高的靶基因区，其特异性程度就更高。

(2) 灵敏度高

PCR产物的生成量是以指数方式增加的，能将皮克(pg=10-12g)量级的起始待测模板扩增到微克(ug=10-6g)水平。能从100万个细胞中检出一个靶细胞；在病毒的检测中，PCR的灵敏度可达3个RFU(空斑形成单位)；在细菌学中zui小检出率为3个细菌。

(3) 简便、快速

PCR反应用耐高温的Taq DNA聚合酶，一次性地将反应液加好后，即在DNA扩增液和水浴锅上进行变性-退火-延伸反应，一般在2～4 小时完成扩增反应。扩增产物一般用电泳分析，不一定要用同位素，无放射性污染、易推广。

(4) 对标本的纯度要求低

不需要分离病毒或细菌及培养细胞，DNA 粗制品及总RNA均可作为扩增模板。可直接用临床标本如血液、体腔液、洗嗽液、毛发、细胞、活PCR技术概论。

分析标准品1g1gSP葡聚糖凝胶C-50LOX-4高纯，98%分析标准品1gEBV-Ab

分析标准品25g100g葡聚糖凝胶QAE-A25dr70高纯，98%分析标准品25gNADHD

分析标准品5g25g葡聚糖凝胶QAE-A50Cluster of differentiation 56高纯，98%分析标准品5gapo-C1

分析标准品100g5gDEAE葡聚糖凝胶A-255-Hydroxytryptamine Receptor 2AAR，98%分析标准品100gCD1a

分析标准品25g250mgDEAE葡聚糖凝胶A-50transglutaminaseAR，98%分析标准品25gCD11C

分析标准品，用于药物分析500g100g酸葡聚糖Casein KappaCP分析标准品，用于药物分析500g3-HK

分析标准品100g25g酸葡聚糖Casein AlphaBR分析标准品100gaconitase

分析标准品500g500g酸葡聚糖Casein BetaBR分析标准品500gSOCS3

分析标准品,≥90% (HPLC)5g1g酸葡聚糖Phospholipase A2, Group XAR，98%分析标准品,≥90% (HPLC)5gHDAC6

分析标准品1g25mg酸葡聚糖Mannose Associated Serine Protease 3BR，98%分析标准品1gGPX4

哈维氏弧菌核酸检测试剂盒（PCR-荧光探针法）98%500ml5g叠氮钠溶液(NaN3,1%)T-2 ToxinAR，99%98%500mlFIB

98%500g10g叠氮钠溶液(NaN3,10%)tuberculosisinterferonγreleaseassaysAR，98%98%500gNADPH

97%500g1g二甲苯青FF溶液(1%)hydroxyl lysine pyridine moietyAR，99%97%500gACAT

97%500g100g二甲苯青FF溶液(2.5%)BK virus IgM antibotyAR，95%97%500gMPTP

97%500g25g甘氨酸缓冲液(0.05mol/L,pH8.6-10.6)Phospholipase Cε1CP，17-18%97%500gMSRA

95%500g5g甘氨酸缓冲液(0.05mol/L,pH2.2-3.6)CD2 Associated ProteinAR，92%95%500gAC

95%250g1g甘油溶液(10%)Transient Receptor Potential Cation Channel Subfamily C, Member 6LR95%250gAMPK

95%100g5g甘油溶液(10%,无菌)PheomelaninAR95%100gADA

97%500g1ml甘油溶液(100%,无菌)gamma glutamyl transpeptidase 2AR，99%97%500gAMP

97%250g1g琥珀酸钠溶液(0.1mol/L)eumelaninCP，97%97%250gNT
PCR反应五要素： 

哈维氏弧菌核酸检测试剂盒（PCR-荧光探针法）参加PCR反应的物质主要有五种即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+

引物： 引物是PCR特异性反应的关键，PCR 产物的特异性取决于引物与模板DNA互补的程度。理论上，只要知道任何一段模板DNA序列，就能按其设计互补的寡核苷酸链做引物，利用PCR就可将模板DNA在体外大量扩增。

设计引物应遵循以下原则：

①引物长度： 15-30bp，常用为20bp左右。

②引物扩增跨度： 以200-500bp为宜，特定条件下可扩增长至10kb的片段。

③引物碱基：G+C含量以40-60%为宜，G+C太少扩增效果不佳，G+C过多易出现非特异条带。ATGC好随机分布，避免5个以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。

④避免引物内部出现二级结构，避免两条引物间互补，特别是3’端的互补，否则会形成引物二聚体，产生非特异的扩增条带。

⑤引物3’端的碱基，特别是zui末及倒数第二个碱基，应严格要求配对，以避免因末端碱基不配对而导致PCR失败。

⑥引物中有或能加上合适的酶切位点，被扩增的靶序列zui有适宜的酶切位点，这对酶切分析或分子克隆很有好处。

⑦引物的特异性：引物应与核酸序列数据库的其它序列无明显同源性。